UNIVERSIDAD
INVESTIGACIÓN ORIGINAL
Preservación de eritrocitos y cambios físicos ocurridos durante el
almacenamiento
Oscar Andrés Peñuela B, Adriana Urbina B. Internos Especiales en Investigación Fisiología del Eritrocito Humano, Unidad de
Fisiología. Luis Fernando Palomino Q, MD. Profesor Asistente Unidad de Fisiología. Departamento de Ciencias Fisiológicas,
Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia.
RESUMEN
La preservación de sangre y de sus derivados ha sido una
constante en el desarrollo de los bancos de sangre modernos.
Los dos métodos actualmente utilizados son la fase líquida y
la criopreservación. Se revisaron las generalidades de cada
uno de ellos, así como los cambios físicos ocurridos a los
eritrocito s durante su almacenamiento.
Palabras clave: Eritrocitos, almacenamiento,
criopreservación, cambios físicos.
PRESERVATION OF ERITROCITOS AND
HAPPENED CAMBIOS FISICOS DURING THE
STORAGE
Blood and blood components preservation have been keys in
the modern blood banks development. There are two methods
used actually for preserving: liquid and frozen preservation.
We carried out a revision about them and some physical
changes during red blood cells storage.
Key words: Erythrocytes, storage, ¡rozen preservation,
physical changes.
INTRODUCCIÓN
Hasta 1616, fecha en la que W. Harvey propuso el concepto
de la circulación de la sangre, la transfusión carecía de
fundamento. Cuando se aceptó que la sangre circulaba y que
el espacio intravascular podía rellenarse con líquidos
introducidos desde el exterior, la idea de transfusión logró
arraigarse. El primer procedimiento se llevó a cabo en 1667
NACIONAL
DE COLOMBIA
Revista Facultadde
Medicina 2003; 51(4):190 - 197
(1); los progresos fueron lentos por la complejidad de este
enfoque, en particular la incompatibilidad entre las especies.
A principios del siglo XX la transfusión como medida
terapéutica seguía siendo laboriosa y riesgosa, pero durante y
después de la II Guerra Mundial los avances técnicos
permitieron la expansión rápida del almacenamiento y la
administración de sangre.
El hecho más importante fue el reconocimiento de las
diferencias genéticas entre los individuos, planteado por
Landsteiner a partir de 1901. El desarrollo de los
anticoagulantes, los conservadores y la esterilización,
posibilitó la recolección y la preservación de la sangre para
ser utilizada más tarde. El empleo más reciente de los
hemoderivados amplió el campo de aplicación limitado a la
restauración de la volemia, al reemplazo de la mayoría de las
células y muchas proteínas plasmáticas. Los adelantos
continúan en especial en lo que se refiere a la utilización más
eficiente de los componentes y fracciones de la sangre, la
seguridad y la compatibilidad inmunológica entre el dador y
el receptor para poder transfundir a todos los pacientes (2).
Cuando el eritrocito pierde el núcleo y los ribosomas ya no
pueden sintetizar proteínas. Al desaparecer las mitocondrias
debe depender de la glucólisis anaeróbica para el suministro
de energía. En el hombre, debe sobrevivir 4 meses y superar
muchos kilómetros de viaje peligroso con un equipo de
mantenimiento limitado. No obstante, conserva una capacidad
de reparación considerable. Puede preservar los niveles
efectivos de adenosintrifosfato (ATP), nicotinamida-adenina
dinucleótido (NAD) y las formas reducidas del NAD (NADH)
y el NAD fosfato (NADPH), además de la composición iónica.
También reduce la metahemoglobina y el glutatión oxidado,
genera glutatión y sella la membrana si se lesiona. A pesar de
PEÑUELA O, URBINA A, PALOMINO L
estas y otras propiedades, llega un momento en que ya no
puede sostener su existencia (3). Al parecer, la "lesión de
almacenamiento" del eritrocito funciona como un fenómeno
de todo o nada, de manera que hay células que sobreviven
más de 24 horas y otras que no lo hacen (4).
ALMACENAMIENTO DE SANGRE Y SUS
DERIVADOS
Para ser usados en un receptor, los eritrocito s transfundidos
deben sobrevivir en la circulación y ser capaces de transportar
eficientemente el oxígeno a los tejidos. La viabilidad de los
eritrocito s está definida como su capacidad para circular por
24 horas después de la reinfusión; su funcionalidad está
definida como su capacidad para liberar oxígeno a los tejidos
de una forma normal. La preservación ideal de eritrocitos
debería ser una que permita su almacenamiento por un tiempo
ilimitado sin alterar su viabilidad o su función; es claro que
este ideal no ha sido logrado todavía (5).
Preservación líquida
La hemoterapia sólo adquirió valor práctico con el
advenimiento de los anticoagulantes capaces de preservar la
viabilidad eritrocitaria. Antes de la 11Guerra Mundial la sangre
se conservaba en citrato de sodio y dextrosa (6), y los glóbulos
rojos permanecían viables durante 1 semana a falta de purinas
y de energía. El primero de los anticoagulantes efectivos fue
el ácido-citrato-dextrosa (ACD), descrito en 1943 (7) que
contenía glucosa como fuente energética y permitía el
almacenamiento durante 21 días.
Finch y cols (4) reconocieron que los eritrocito s que habían
perdido sus compuestos de fosfato orgánico, particularmente
ATP, no sobrevivían bien durante el almac~namiento.
Inicialmente adicionaron adenosina como sustrato para la
síntesis de ATP. Observaron que la adenina se deaminaba
rápidamente a inosina y su atención se centró entonces, en
este compuesto (8). Estudios posteriores (9) establecieron que,
sí bien la adición de inosina mejoraba la concentración de
ATP, no mejoraba los demás parámetros tenidos en cuenta
para evaluar el deterioro de la célula durante el
almacenamiento.
Posteriormente, Nakao y cols demostraron la estrecha relación
entre los niveles de ATPy el mantenimiento de la forma normal
del eritrocito (10). De la misma forma, demostraron la
existencia de un mecanismo intracelular de síntesis y
regeneración de ATP a partir de inosina y adenina (11).
Además, evidenciaron que la viabilidad e integridad de los
glóbulos rojos dependía de los niveles de ATP (12). Luego
Simon y cols comprobaron que la suplementación del ACD
con pequeñas cantidades de adenina mejoraba la preservación
y viabilidad de los eritrocitos, y que este efecto era superior al
de la inosina (13). Estos estudios llevaron a la aplicación de
los conservadores con adenina actuales.
El descubrimiento en 1967 del papel del2,3-DPG en la curva
de disociación del oxígeno de la hemoglobina por Chanutin y
Cumish (14) y por Benesch y Benesch (15), centró la atención
en este compuesto. El citrato-fosfato-dextrosa (CPD) es el
ACD con el agregado bifosfato de sodio (NaH2PO4H20).
Fue descrito por Gibson y cols (16) quienes demostraron que
las concentraciones de fosfato y 2,3-difosfoglicerato (2,3-
DPG) de los eritrocito s eran más altas, la hemólisis menor y
la viabilidad después de las primeras 24 horas de la transfusión
mayor comparada con el almacenamiento en ACD al cabo de
28 días. Wood y cols (17) utilizaron una solución CPD
enriquecida con adenina y ascorbato con una prolongación en
los niveles de 2,3-DPG y ATP y sin evidencia de toxicidad. El
CPDA-l (adenina, dextrosa, fosfato, citrato), el anticoagulante
conservador estándar en este momento, permite almacenar los
concentrados de glóbulos durante 35 días (18). Las soluciones
en evaluación actual son el CPDA-2 y el CPDA-3, con más
adenina y glucosa que el CPDA-l (19).
Los nuevos esfuerzos para mantener el 2,3-DPG en altos
niveles, llevaron al desarrollo de una nueva generación de
sustancias: las soluciones aditivas. El primer grupo de
soluciones fue desarrollado por Wood y Beutler (20), quienes
luego diseñarían una solución aditiva basada en bicarbonato
denominada BAGPM (21) (bicarbonato-adenina-glucosa-
fosfato-manitol). El manitol se requería para prevenir la
hemólisis excesiva de los eritrocito s privados de plasma a
través de un efecto osmótico al controlar su volumen (22).
Solamente varios años después, cuando Hogman (23) introdujo
una solución aditiva simple, SAG (salina-adenina-glucosa) y
subsecuentemente SAGMAN (SAG más manitol), las
soluciones aditivas se usaron clínicamente a gran escala. El
efecto sobre el receptor de la disminución en los niveles de
2,3,-DPG durante el almacenamiento es aún controvertido.
Históricamente se ha considerado que el nivel de ATP es un
indicador de viabilidad; sin embargo, aunque los eritrocitos
con muy bajos niveles de ATP no pueden fosforilar glucosa y
mueren, altos niveles de ATP no aseguran su sobrevida durante
el almacenamiento (5).
Dentro de las soluciones aditivas utilizadas actualmente se
encuentran AS-l (Adsol@), AS-3 (Nutricel@) y AS-5
(Optisol@), que permiten el adecuado almacenamiento de los
eritrocito s durante 42 días (24). Recientemente han aparecido
publicaciones que describen el uso de soluciones aditivas
experimentales. Tal es el caso de la solución EAS-6l (25)
con la cual se logró un período de almacenamiento de 9
semanas. Otra de las soluciones aditivas experimentales es
EAS-64 (26), con la que se alcanzó un período de
almacenamiento de 10 semanas. Los parámetros medidos al
final del almacenamiento fueron mejores en comparación con
 PRESERV ACION ERITROCITOS y CAMBIOS FÍSICOS OCURRIDOS DURANTE EL ALMACENAMIENTO

los resultados obtenidos en eritrocito s almacenados en AS-l del pH Yen una pérdida más acelerada de 2,3-difosfoglicerato
durante 6 semanas. Finalmente, con la solución EAS-76 se (2,3-DPG) y ATP,quizá debido al aumento en la concentración
alcanzó un período de almacenamiento de 11 semanas de lactato y la disminución del bicarbonato plasmático (5,
cumpliendo con los criterios de hemólisis <1% y viabilidad 31). Adicionalmente publicaciones recientes han demostrado
>75 % exigidos por la Administración de Drogas y Alimentos que la hemólisis de los eritrocito s almacenados en la solución
de los Estados Unidos (FDA, por su siglas en inglés) (27). aditiva AS-5 y expuestos a una temperatura de 25° durante 24
Además de estas soluciones, que han sido diseñadas para horas es inferior al 1%; la viabilidad de los eritrocitos
preservar eritrocitos que han sido recientemente recolectados, almacenados en estas condiciones al cabo de 30 días se
se han diseñado soluciones para restaurar los niveles correlaciona con la obtenida en las unidades almacenadas
~
depletados de ATP y 2,3-DPG de células que han sido convencionalmente 42 días después de su recolección debido
almacenadas por varias semanas. Estas soluciones a la reducción en la concentración de ATP eritrocitario (32).
rejuvenecedoras no son ampliamente usadas por su alto costo
de producción (28, 29). Eritrocitos congelados
Los eritrocitos se pueden conservar a través de su congelación.
Las tablas 1y 2 demuestran algunas de las alteraciones físicas
Esta práctica ha existido por más de 50 años (33), sin embargo,
y bioquímicas ocurridas a los eritrocito s durante el
almacenamiento estándar. no es utilizada comúnmente porque su técnica es dispendiosa,
costosa y con un potencial riesgoso de contaminación
AUMENTO DISMINUCiÓN bacteriana. En los diferentes métodos utilizados para
criopreservar los glóbulos rojos se emplean agentes protectores
Lactato ATP
como el glicerol. Cuando no se añaden dichos agentes se
Piruvato 2,3, DPG
producen alteraciones por dos mecanismos. Durante el
enfriamiento lento se destacan los efectos osmóticos vinculados
Amonio Potasio Intracelular con el congelamiento del agua extracelular, que precede al
del agua intracelular. De esta forma, la concentración de
Sodio intracelular pH
solutos extracelulares aumenta y crea un gradiente osmótico
Vesículas membranosas a través de la membrana que deshidrata a la célula, cuando el
enfriamiento es rápido se forma hielo en y alrededor de las
Hemoglobina plasmática células que se destruyen. El glicerol ingresa a la célula
Tabla No.1. Cambios ocurridos durante el protegiéndola en virtud de sus propiedades coligantes o
almacenamiento de eritrocitos fijadoras de agua. La cantidad de hielo es menor y el nivel de
solutos se reduce (3). ~

El método que usa glicerol al 40% (p/v) con almacenamiento

índices Día O Día 7 Día 14 Día 21 Día 28 Día 35 Día 42
congelado a -80°C, aunque requiere lavado después del
pH (370) 7.00 6.86 6.69 6.55 . 6.43 3.34 congelarniento, es el método más aceptado. Los eritrocitos
ATP' 4.69 4.97 4.83 4.50 3.75 3.47 3.24 congelados así toleran amplias fluctuaciones de la temperatura
DPG' 10.88 8.16 1.96 0.87 0.65 0.54 0.65 sin deterioro, con la ventaja que no se requiere nitrógeno
Sodio" 152 135 131 124 126 123
líquido para lograr -80°C,usándose, en su lugar, congeladores
convencionales (34). La sangre es recolectada en bolsas
Potasio" 1.6 17 27 34 44 46
plásticas primarias de cloruro de polivinilo (PVC) de 800 mL
Glucosa 780 724 697 660 617 604 -
en CPD o CPDA-l con un sistema cuádruple de bolsas de
Hemólisis
0.02 0.06 0.11 0.14 0.20 0.16 0.24 recolección (35). El congelamiento de los eritrocito s se puede
%
realizar al cabo de 5 días o al final del tiempo máximo de
* mmoUg Hb ** meq/L +mg/dL almacenamiento, el cual depende de la solución preservativa
Tabla No. 2. Características de los eritrocitos en AS-I (Adsol @)
(CPD por 7-21 días o en CPDA-1 por 7-35 días). A su vez,
durante 42 días de almacenamiento antes de ser congelados los eritrocitos pueden ser rejuvenecidos
con una solución que contiene piruvato, inosina, fosfato y
La temperatura aceptada y en la cual la sangre es almacenada adenina (Rejuvesol@), con lo cual se incrementan los niveles
es de 4°C :t2°c. Otras temperaturas han sido estudiadas (30). de 2,3-DPG y de ATP hasta un 150% de lo normal (34).
Las temperaturas bajas proporcionan alguna mejoría de la Algunos estudios han demostrado resultados satisfactorios con :"
integridad bioquímica de la sangre almacenada, pero se eritrocito s congelados con 40% (p/v) al-80°C durante 21 años
incrementa el riesgo de congelarniento. Las temperaturas altas (36). El método para lavar los eritrocitos congelados con
son indeseables ya que la tasa metabólica de los eritrocitos glicerol 40% (p/v) utiliza una solución del cloruro de sodio
almacenados se incrementa, resultando en una caída mayor (NaCl), glucosa y fosfato (37).
192
PEÑUELA o, URBINA A, PALOMINO L
La FDA pennite almacenar los eritrocitos congelados con
glicerol al 40% (p/v) a -80°C hasta 10 años luego de su
recolección y requiere que las células descongeladas y
desgliceroladas sean almacenadas a 4°C por no más .de 24
horas porque las técnicas de congelamiento utilizan sistemas
abiertos con un potencial riesgo de contaminación
bacteriológica. Sin embargo, recientemente algunos estudios
(38) han mostrado que es posible mantener los eritrocitos
después del lavado almacenados a 4°C en solución AS-3
(Nutricell@) durante 15 días y utilizando sistemas cerrados
de congelamiento, conservando una calidad aceptable
detenninada por los parárnetros actualmente admitidos para
medir el deterioro metabólico de los eritrocito s almacenados.
Los eritrocito s humanos congelados con glicerol al 20% o al
40% tienen tasas de recuperación de. al menos 85%, valores
de sobrevida postransfusión de 85% después del lavado y
almacenamiento a 4°C por 24 horas, función transportadora
de 02 normal, hemólisis mínima y no hay evidencia de
contaminación (39).
La posibilidad de almacenar eritrocito s durante mucho tiempo
pennite a los bancos de sangre asegurar el normal suministro
en épocas de escasez o emergencia. También es útil congelar
eritrocitos con antígenos seleccionados para pacientes con tipos
sanguíneos inusuales o múltiples anticuerpos. Además, el
transporte de sangre congelada es relativamente sencillo a
cualquier parte. Si bien, la reducción de las células blancas
reduce la inmunogenicidad, la transmisión de citomegalovirus
y el riesgo de enfermedad injerto contra huésped (40); el
congelamiento no inactiva los virus de la hepatitis B, C y el
VIH (41). Otros estudios (42, 43) discuten la aplicabilidad de
la radiación gama sobre eritrocito s con el objeto de prevenir
la enfennedad injerto versus húesped.
CAMBIOS FÍSICOS
Durante el almacenamiento los eritrocito s sufren una serie de
cambios en sus propiedades físicas que conllevan a alteraciones
en su forma y función (44).
Aparición de formas anómalas y cambios en el volúmen
celular
El volumen de los eritrocitos durante el almacenamiento
cambia relativamente poco; su forma en cambio, sí tiene
importantes modificaciones y pasa de ser un discocito a ser
un equinocito o esferoequinocito. La transfonnación discocito-
equinocito ocurre cuando el ATP intracelular se agota (lO), el
contenido de calcio se eleva (45) y se exponen las células a
pH alto. También hay conversión discocito-equinocito cuando
los eritrocitos son incubados en plasma a 37°C durante 24
horas o es adicionado ácido oléico o lisolecitina al plasma
fresco (46). Las células crenadas entonces aparecen en minutos
Rey Fac Med Uniy Nac Colomb.2003 VoL 51 W4
con 10 a 30 espículas de longitud regular e igualmente
distribuidas sobre la superficie. Se ha sugerido, pero no
comprobado, que el mecanismo está relacionado con la
lisolecitina y la enzima lecitina-colesterol acil-transferasa (L-
CAT) (46). La depleción de ATP provoca conversión reversible
de los eritrocito s en esfero-equinocitos espiculados; la
restauración del ATP revierte el proceso (lO). De otra parte,
la transfonnación en discocitos-estomatocitos se produce por
disminución del pH, exposición a agentes químicos,
particulannente compuestos detergentes catiónicos, y aniones
no penetrantes (47). Las células pierden la indentación de un
lado y la depresión opuesta se acentúa. Como en los frotis
fijados parece tener una boca o "estoma" en vez de un área
redondeada de palidez central, se los llama estomatocitos. Más
tarde se convierten en esferoestomatocitos y finalmente, en
esferocitos con un hilio pequeño en el sitio del estoma previo.
Estas células carecen de las espículas delicadas que
caracterizan al estadio terminal del esferocítico prelítico
derivado de la discocitosis-equinocitosis (3).
Se ha establecido que el discocito nonnal representa una fonna
óptima para la circulación in vitro, ya que la transformación
a estomatocito podría alterar el paso a través de la
microcirculación (por disminución de la filtrabilidad celular),
y la transfonnación a equinocito podría alterar el flujo en los
grandes vasos (por aumento de la viscosidad sanguínea) (48).
El almacenamiento de sangre reduce la defonnabilidad del
eritrocito por alteraciones en su morfología y aumenta su
agregabilidad en virtud de la disminución del contenido de
ácido siálico en la superficie, lo cual puede contribuir a
desórdenes importantes en el flujo sanguíneo, especialmente
en pacientes con riesgo microcirculatorio (49).
Hemólisis
La hemólisis de las células ocurre gradualmente durante el
almacenamiento. Ocurre mucho más rápido cuando éstas son
almacenadas en soluciones aditivas que en su propio plasma
(5). En las soluciones aditivas, el manitol tiene un importante
efecto en la prevención de la hemólisis y es unifonnemente
adicionado a estas soluciones por esta razón. Aunque
inicialmente se pensaba que funcionaba como un sustituto
osmóticamente activo de las proteínas plasmáticas, evitando
que las células sobrepasaran su "volumen hemolítico crítico"
éste no es aparentemente su efecto principal. Cómo funciona
el manitol es aún desconocido (50). Al parecer, el equilibrio
osmótico celular depende de otros factores tales como la
depleción del anión poli valen te 2,3-DPG durante el
almacenamiento y su reemplazo por otros aniones que ejercen
un importante efecto osmótico por unidad de carga negativa,
la parálisis que sufre la bomba Na+/K+ por la temperatura de
almacenamiento y la caída progresiva del pH que afecta el
movimiento de iones y lleva a un paulatino encogimiento
celular.
PRESERVACIÓN ERITROCITOS y CAMBIOS FÍSICOS OCURRIDOS DURANTE EL ALMACENAMIENTO

Fragilidad osmótica del volumen celular (59). Diversas interacciones entre

transportadores de cationes median la deshidratación de las
La fragilidad osmótica del eritrocito es la susceptibilidad que
células falciformes, incluyendo 1) un incremento no selectivo
éste tiene de hemolisarse cuando es suspendido en un medio
de la permeabilidad a cationes relacionado con alteraciones a
hipotónico. La fragilidad osmótica de los eritrocito s se
nivel de la membrana; 2) un canal de potasio dependiente de
incrementadurante el almacenamiento (51). Dicho incremento
está relacionado con los cambios en la osmolaridad interna de Ca++ (Gardos), y 3) el cotransportador KCl. Los dos últimos,
vías normales en células eritroides inmaduras pero hiperactivos
las células almacenadas. El principal factor que contribuye en las células fa1ciformes. La formación de las células ID
con este cambio es la acumulación de lactato dentro de los
ocurre principalmente a través del cotransportador KCl.
eritrocitos. La segunda causa del incremento de la osmolaridad
Inhibidores del cotransportador en eritrocitos humanos como
interna de los eritrocitos almacenados es probablemente el
el NO3-, el DIOA y el ácido okadaico inhiben fuertemente la
reemplazo del polianión 2,3-DPG por Cl-, que ejerce
formación de células ID (60). También ocurre formación de
aproximadamente 3.7 veces más efecto osmótico (52).Ya que
células ID en eritrocitos con rasgo falciforme (células AS),
la membrana es poco permeable al lactato, suspender los
con otras hemoglobinopatías (enfermedad SC y enfermedad
eritrocitos en soluciones salinas provoca el influjo de agua a
D) e incluso en eritrocitos normales durante el almacenamiento
la célula por el efecto osmótico de este soluto (53). Sin
bajo condiciones de banco de sangre (61). En general, las
embargo, si los eritrocito s son equilibrados en una solución células falciforme s tienen anormalidades severas en su
salina isotónica, su fragilidad osmótica es cercana a la normal,
membrana en virtud de la alta oxidación de sus componentes.
aún después de un tiempo prolongado de almacenamiento (5).
Generan aproximadamente dos veces la cantidad de especies
Hay sin embargo, alguna pérdida de lípidos de membrana
de oxígeno reactivas que los eritrocitos control. La razón de
representada por una "cola frágil" en la curva de fragilidad este incremento es el resultado de la autoxidación acelerada
osmótica. Dicha población no recupera su fragilidad osmótica
de la HbS a metahemoglobina, una conversión que causa
normal a pesar de ser resuspendidos en solución isotónica. Al
liberación de Hem (62). Los niveles de glutatión reducido están
parecer existe una muy pequeña correlación entre el tamaño
disminuidos en un 20% en los eritrocitos SS, comparados con
de dicha cola y la viabilidad postransfusional (52). Durante
el almacenamiento los eritrocitos se hacen menos deformables reticulocitos control, y son bajos en los eritrocitos SS de alta
densidad comparados con los eritrocito s SS de baja densidad.
(54). Esta disminución, demostrada por ectacitometría, se ha
Los niveles disminuidos de glutatión reducido se relacionan .",
asociado con la pérdida de lípidos de membrana (55). Sin
con una menor actividad de glutatión reductasa, una mayor
embargo, la deformabilidad in vitro, aunque se correlaciona,
actividad de glutatión peroxidasa, e inhibición de la vía de las
no tiene el suficiente valor predictivo para predecir la
pentosas fosfato en los eritrocitos SS. De esta forma, las células
viabilidad in vivo de los eritrocito s (5). ;¡
falciforme s tienen incrementadas las especies reactivas del
Formación de células densas oxígeno y niveles disminuidos de GSH para protegerse contra
el daño oxidativo. Esta combinación es probablemente
Tradicionalmente se ha definido a las células densas como
responsable de la oxidación de los grupos tiol de muchas
células fa1ciformes (hemoglobina S) deshidratadas, rígidas y
proteínas. Experimentalmente se ha mostrado que la N-
con una vida media reducida. La deshidratación de las células
acetilcisteína (NAC) puede bloquear la formación de células
fa1ciformes homocigotas (SS) implica un incremento en la
densas in vitro (63). Ya que las células densas constituyen el
concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM).
mayor porcentaje de drepanocitos, la NAC también disminuye
Las células SS densas son reológicamente incompetentes y la formación de estos. La reducción de los drepanocitos
contribuyen directamente a la vasoc1usión. También los relacionada con la NAC se acompaña de un incremento en los
eritrocito s normales pueden perder progresivamente su tioles de la B-actina. Por lo tanto existen dos posibles
deformabilidad durante el almacenamiento, como bien se ha
mecanismos por los cuales la NAC bloquea la formación de
demostrado por ectacitometría (54), y podrían llegar a producir células densas y falciformes: los canales de K+ y la B-actina.
vasoc1usión, entre otros factores, por un incremento en la
adherencia de la endotelio (56, 57). Las células SS son
FICHA TÉCNICA
heterogéneas con respecto al grado de deshidratación, edad,
niveles de hemoglobina F (HbF), y propiedades en el transporte
de iones. Algunas células de densidad intermedia (ID) son Se realizó una búsqueda computadorizada de artículos sin
discocitos densos, mientras que las células hiperdensas (HD) límite de idioma ni fecha de publicación en las bases de datos
PubMedQuery, PubMedCentral e Infotrieve de MEDLINE, ..,.
son en la mayoría tanto de las células fa1ciformes, como de
los discocitos muy densos (58). Los eritrocito s AA, CC y SS además en las bases de datos en CD Medical-Journals y
exhiben diferentes volúmenes corpusculares, lo cual lleva a Medical-Library, con límites de fechas 1994 a 1999 y 1986 a
pensar que la estructura de la hemoglobina afecta la regulación 1999 respectivamente. Las palabras clave fueron: "red blood

194
 PEÑUELA o, URBINA A, PALOMINO L
cells", "preservation", "blood bank", "transfusion", excluyendo
las palabras "leukocyte" y "platelets". Se obtuvieron 388
resultados. El proceso de selección de los artículos fue según
la pertinencia del título de cada registro para resolver el
objetivo general de la revisión. Luego de los artículos
seleccionados, se procedió a obtener algunas de las referencias
'- REFERENCIAS
l. Farr AD. The first bullan transfusion. Med Hist
1980;24:143.
2. Lyons AS, Petrucelli RJ. Medicine: An illustrated History.
New York. Harry N. Abrams Inc., Publishers. 1987: 589.
3. Lee R, Bithell T, Foerster J. Wintrobe. Hematología
Clínica. 9a ed. Buenos Aires Editorial Intermédica. 1994:
168.
4. Gabrio BW, Stevens AR, Finch CA. Erythrocyte
preservation. The reversibility of the storage lesionoJ Clin
Invest 1954;33:252.
5. Beutler E. Liquid Preservation of Red Cells. En: Rossi E,
Simon T, Moss G, Gould S. PrincipIes of Transfusion
Medicine. 2a ed. Baltimore. Williams and Wilkins. 1996:
'" 51.
6. Robertson OH. Transfusion with preserved red blood cells.
BMJ 1918;1:691.
. properties of blood stored in anticoagulant CPDA-l
7. Loutit JF, Mollison PL. Advantages of a disodium-citrate-
glocuse mixture as a blood preservative. BMJ 1943;2:744.
8. Gabrio BW, Donohue DM, Huennkens FM, Finch CA.
Erythrocyte preservation. Acid-citrate-dextrose- inosine
(ACDI) as a preservative for blood during storage at 4°c.
J Clin Invest 1956;35:657.
9. Lange RD, Crosby WH, Donohue DM, Finch CA,
Gibson JG, McManus TJ, et al. Efect of inosine on red
cell preservation. J Clin Invest 1958;37:1485.
10. Nakao M, Nakao T, Yamazoe S. Adenosine triphospate
and maintenance of shape of the bullan red cells. Nature
1960;187:945.
11. Nakao M, Motegi T, Nakao T, Yamazoe S. A positive
feedback mechanism of adenosine triphosphate sythesis
in erythrocytes. Nature 1961;191:283.
,. 12. Nakao K, Wada T, Kamiyama T, Nakao M, Nagano
K. A direct relationship between adenosine triphosphate
level and in vivo viability of erythrocytes. Nature
"- 1962;194:877.
Rev Fac Med Univ Nac Colomb.2003 Vol. 51 N°4
citadas en dichos artículos y que también resultaban
pertinentes. Para la evaluación de la validez se tuvo en cuenta
que todos los trabajos experimentales fueran llevados a cabo
en sangre humana y que su metodología fuera adecuada para
alcanzar el objetivo que plantean y además, permitiera llegar
a las conclusiones propuestas.
BIBLIOGRÁFICAS
13. Simon ER, Chapman RG, Finch CA. Adenine in red
cell preservation. J Clin Invest 1962;41:351.
14. Chanutin A, Curnish RR. Effect of organic and inorganic
phosphates on the oxygen equilibrium of human
erythrocytes. Arch Biochem Biophys 1967;121:96.
15. Benesch R, Benesch RE. The effect of organic and
inorganic phosphates from the bullan erythrocyte on the
allosteric properties ofhemoglobin. Biochem Biophys Res
Commun 1967;26:162.
16.Gibson JG, Rees SB, McManus TJ, Scheitlin WA. A
citrate-phosphate-dextrose solution for the preservation of
bullan blood. Am J Clin PatholI957;28:569.
17.Wood LA, Beutler E. The effct of ascorbate on the
maintenance of 2,3-diphosphoglycerate (2,3-DPG) in
stored red cells. Br J HaematolI973;25:611.
18.Moore GL, Peck CC, Sohmer PR, Zuck TF. Some
solution. A brief summary. Transfusion 1981;21: 135.
19.Valeri CR, Valeri DA, Gray A, Melaragno A, Dennis
RD, Emerson CP. Vaibility and function of red blood
cell concentrates stored at 4°C for 35 days in CPDA-l,
CPDA-2, or CPDA-3. Transfusion 1982;22:210.
20.Wood L, Beutler E. Storage of RBC in artificial media.
Clin Res 1970;18:134.
21.Beutler E, Wood LA. Preservation of red cell 2,3-DPG
and viability in bicarbonate-containing medium: the effect
ofblood-bag permeability. J Lab Clin Med 1972;80:723.
22.BeutIer E. Red cell suspensions. N Engl J Med
1979;300:983-985.
23.Hogman CF, Hedlund K, Zetterson H. Clinical usefulnes
of red cells preserved in protein-poor mediums. N Engl J
Med 1978;299:1377.
24.Hess J, Hill H, Oliver C, et al. The effects of phosphate,
pH, and AS volume on RBCs stored in saline-adenine-
glucose-mannitol solutions. Transfusion 2000;40: 1000.
195
 PRESERVACIÓN ERITROCITOS y CAMBIOS FÍSICOS OCURRIDOS
25. Hess JR, Rugg N, Knapp AD, Gormas JF, Silverstein
EB, Greenwalt TJ. Successfu1 storage of RBCs for 9
weeks in a new additive solution. Transfusion
2000;40: 1007-1011.
26. Hess JR, Rugg N, Knapp AD, Gormas JF, Silverstein
EB, Greenwalt TJ. Successfu1 storage of RBCs for 10
weeks in a new additive solution. Transfusion
2000;40: 1012-1016.
27.Hess J, Rugg N, Gormas J, et al. RBC storage for 11
weeks. Transfusion 2001;41:15861590.
28.Valeri CR, Zaroulis CG. Rejuvenation and freezing of
outdated stored bullan red cells. N Eng1 J Med
1972;287: 1307.
29.Brecher ME, Zylstra-Halling VW, Pineda AA.
Rejunation of erythrocytes preserved with AS-l and AS-
3. Am J Clin Patho11991;96:767.
30. Hughes-Jones Nc. Storage of red cells at temperatures
between + 10°C and -20°c. Br J Haemato11958;4:249.
31. Hogman CF, Knutson F, LoofH. Storage of whole b100d
before separation: the effect of temperature on red cell 2,3
DPG and the accumu1ation of 1actate. Transfusion
1999;39:492.
32. Reid TJ, Babcock JG, Derse-Anthony CP, Hill HR,
Lippert LE, Hess JR. The viabi1ity of auto10gous bullan
red cells stored in a additive solution 5 and exposed to
25°C for 24 hours. Transfusion 1999;39:991.
33. Smith AV. Prevention of haemo1isis during freezinf and
thawing ofred b100d cells. Lancet 1950;2:910.
34. Valeri CR. Frozen Red Blood Cells. En: Rossi E, Simon
T, Moss G, Gou1d S. PrincipIes of transfusion medicine.
2a ed. Ba1timore. Williams and Wi1kins. 1996:61.
35. Valeri CR, Valeri DA, Gray A, Melaragno AJ,
Vecchione JJ, Dennis RC, et al. Cryopreserved red b100d
cells for pediatric transfusion. Frozen storage of small
aliquos in po1yviny1 ch10ride (PVC) p1astic bags.
Transfusion 1981;21:527.
36. Va1eri CR, Pivacek LE, Gray AD, Cassidy GP, Leavy
ME, Dennis RC, et al. The safety and therapeutic
effectiveness ofhuman red cells stored at -80°C for as long
as 21 years. Transfusion 1989;29:429.
37. Va1eri c.R, Valeri A, Anastasi J, Vecchione J, Dennis
R.C, Emerson CP. Freezing in the primary
po1yviny1ch10ridep1asticcollection bag: a new system for
preparing and freezing nonrejuvenated and rejuvenated red
b100d cells. Transfusion 1981;21:138.
DURANTE EL ALMACENAMIENTO
38. Valeri C, Ragno G, Pivacek L, O'Neil EM. In vivo
surviva1 of apheresis RBCs, frozen with 40-percent (wtJ
vol) glycero1, deg1ycero1izedin the ACP 215, and stored
at4°C in AS-3 forup to 21 days. Transfusion 2001;41:928.
39. Valeri CR, Ragno G, Pivacek LE, Srey R, Hess J,
Lippert L, et al. A multicenter study of in vitro and in
vivo va1ues in bullan RBCs frozen with 40-percent (wtJ
vol) glycero1 and stored after deg1ycero1izationfor 15 days
at 4°C in AS-3: assessment ofRBC processing in the ACP
215. Transfusion 2001;41:933.
40. Alder SP. Prevention of transfusion-associated
cytomega10virus infection in very 10w-birthweight infants
using frozen b100d and donors seronegative for
cytomegalovirus. Transfusion 1984;24:333.
41. Haugen RK. Hepatitis after the transfusion offrozen red
cells and washed red cells. N Eng1 J Med 1979;301:393.
42. Davey RJ, McCoy NC, Yu M, Sullivan JA, Piegel DM,
Leitman SF. The effect of prestorage irradiation on
posttransfusionred cell survival. Transfusion 1992;32:525.
43. Valeri R, Pivacek L, Cassidy G, Ragno G. In vitro and
in vivo measurements of gamma-radiated, frozen,
glycero1ized RBCs. Transfusion 2001;41:545.
44. Clark M. Senescence of red b100d cells: progre s and
prob1ems. Physio1 Rev 1988;68:503.
45. Shiga T, Sekiya M, Maeda N, Kon K, Okazaki M.
Cell age dependent changes in deformabi1ity and ca1cium
accumu1ation of bullan erythrocytes. Biochim Biophys
Acta 1985;814:289.
46. Brecher G, Bessis M. Present status of spicu1ed red cells
and their re1ationship to the discocyte-echinocyte
transformation: a critica1 review. B100d 1972;40:333.
47. Weed RI, Bessis M. The discocyte-stomatocyte
equilibrium of normal and patho10gic red cells. B100d
1973;41:471.
48. Reinhart WH, Chien S. Red cell rheo10gyin stomatocyte-
echinocite transformation: roles of cell geometry and cell
shape. Blood 1986;67:1110.
49. Hovav T, Yedgar S, Manny N, Barshtein G. Alteration
of red cell aggregabi1ity and shape during b100d storage.
Transfusion 1999;39:277.
50. Beutler E, Kuhl W. Volumen control of erythrocytes
during storage: the ro1e of mannitol. Transfusion
1988;28:353.
51. Rapoport S. Dimensional, osmotic and chemica1 changes
of erythrocytes in stored blood. Blood preserved in sodium
citrate, neutral and acid citrate-g1ucose (ACD) mixtures.
J C1in Invest 1947;26:591.
PEÑUELA o, URBINA A, PALOMINO L
52. Beutler E, West C. Storage of red cen concentrates in
CPD-A2for42 and49 days. JLab ClinMed 1983;102:53.
53. Beutler E, Kuhl W, West C. The osmotic fragility of
erythrocytes after prolonged liquid storage and after
reinfusion. Blood 1982;59: 1141.
54. Card RT, Mohandas N, Mollison PL. Relation ship of
post-transfusion viability to deformability of stored red
censo Br J MaematolI983;53:237.
55. Haradin AR, Weed RI, Reed CF. Changes in physical
properties of stored erytrhocytes. Relationship to survival
in vivo. Transfusion 1969;9:229.
56. Barabino G, McIntire L, Eskin S, et al. Endothelial cen
interactions with sickle Gen, sickel trait, mechanicany
injured, and normal erythrocytes under controned flow.
Blood 1987;70:152
57. Bunn F. Pathogenesis and treatment of sickle cen disease.
N Engl J Med 1997;337:762
58. Kaul D, Fabry M, Windisch P, Baez S, Nagel R.
Erythrocyte in sickle cen anemia are heterogeneous in their
rheological and hemodynamic characteristics. J Clin Invest
1983;72:22.
Rey Fac Med Uniy Nac Co1omb 2003 Vol 51 N°4
59. Canessa M, Romero J, Lawrence C, et al. Rate of
activation and deactivation of KCl cotransport by changes
in cen volume in hemoglobin SS, CC and AA red censo J
Membr BiolI994;142: 349.
60. Schwartz RS, Musto S, Fabry ME, Nagel RL. Two
distinct pathways the formation of ontermediate density
GenSand hyperdense GenSfrom normal density sickle red
blood censo Blood 1998;92:4844-4855.
61. Olivieri O, De Franceschi L, De Gironcoli M, Girelli
D, Corrocher R. Potassium loss and cenular dehydration
of stored erythrocytes fonowing incubation in autologous
plasma: role of the KCl cotransport system. Vox Sang
1993;65: 95.
62. Sheng K, Shariff M, Hebbel R. Comparative oxidation
ofhemoglobins A and S. Blood 1998;91:3467.
63. Gibson X, Shartava A, Mcintyre J, et al. The efficacy
of reducing agents or antioxidants in reducing the formation
of dense GenS and irreversibly sickled GenS in vitro. Blood
1998;1:4373.