INTRODUCCIÓN AL DISEÑO DE

REACTORES BIOLÓGICOS

Dr. Gerardo Saucedo Castañeda

saucedo@xanum.uam.mx
Planta Piloto de Fermentación en Medio
Sólido, PP4
 REACTORES BIOLÓGICOS
Concepto
Es un tanque o recipiente que mantiene un ambiente biológicamente adecuado, y
en el cual se lleva a cabo un proceso unitario en el que se involucran fenómenos
de biotransformación asociados a transferencia de momentum, calor y masa.
Su diseño debe asegurar un ambiente uniforme y adecuado para la reproducción
y actividad de los microorganismos
Su escala está sujeta a su aplicación: a nivel laboratorio,
planta piloto e industrial.
 REACTORES BIOLÓGICOS
Función
• Mantener las células uniformemente
distribuidas en todo el volumen del cultivo a
fin de prevenir la sedimentación o la flotación.
• Mantener constante la temperatura.
• Minimizar los gradientes de concentración de
nutrientes.
• Suministrar oxígeno a una velocidad tal, que
satisfaga el consumo.
• El diseño debe ser tal que permita mantener
el cultivo puro sin contaminantes.
 BIOPROCESOS
Esquema de un bioproceso

Proceso Biológico
Materias Tratamiento Procesos de
o Bioquímico con Productos
primas físico separación
reacción

Materias
imagen Productos
primas

Salida = ƒ (Entrada, Modelo de contacto y cinética de

reacción enzimática o microbiana)
¿En dónde encontramos Bioprocesos o
sus productos?
Sectores:
• Farmacéutico
• Alimentario
• Cervecería
• Fermentaciones
• Cosméticos
• Agropecuario y agrícola
• Biocombustibles
• Tratamiento de aguas residuales
• Tratamiento de residuos sólidos
• Tratamiento de gases contaminantes
• Salid pública
• ¿En las posadas?
REVISIÓN DE CONCEPTOS
FUNDAMENTALES
 TASA DE REACCIÓN
¿Qué es una tasa?
Es el cambio de variables en función del tiempo.
• La tasa de reacción es una propiedad intensiva, definida en
cada punto de la mezcla reaccionante, por lo que cambia
con la posición, de acuerdo a cambios de concentración y
temperatura principalmente.
• Considerando la reacción general:
S 
 P
k
• La velocidad o tasa de reacción en una aproximación de
estado cuasi-estacionario, se define como:
Donde:
S = Concentración molar del
dS dP sustrato, mol L-1
    rS  rP P = Concentración molar del
dt dt producto, mol L-1
t = Tiempo
 TASA DE REACCIÓN
• En estudios cinéticos experimentales se busca
tener reactores bien agitados, sin problemas de
mezclado, de tal forma que se elimine la
dependencia de la tasa de reacción con el
volumen del reactor.
• Un tipo de experimento para medir reacciones
enzimáticas es medir la velocidad inicial de
reacción de tal forma que:
 dS  dP 
      rS  rP

 dt t 0 dt t 0
Donde: t = t0, S = S0, P = 0 @ t = 0
 Diferencia entre catalizadores
biológicos y químicos
• Existe una gran similitud entre las reacciones
catalíticas químicas y las enzimáticas bioquímicas y
una metodología en común, pero existen diferencias:

BIOLÓGICOS QUÍMICOS

 Reacciones bajo condiciones  Requieren temperatura y

suaves, temperaturas menores a presión elevada, pH extremo para
100ºC, presión atmosférica y pH ser eficaces.
casi neutro.
 Casi siempre se obtienen
 Raramente generan productos productos colaterales.
indeseables, por su alta
especificidad.
 Fenómenos de Desactivación en catálisis
enzimática y química
Fenómenos de pérdida de actividad catalítica, y sus causas, en enzimas y catalizadores químicos

FENÓMENO CAUSA
Catalizador químico
Inhibición por producto (reversible) El producto acumulado ocupa sitios activos.

Envenenamiento (irreversible) Algunos sitios activos reaccionaron con sustancias que dan
lugar a un sitio inactivo.
Sinterización (irreversible) Una gran área del catalizador pierde superficie activa
disminuyendo el número de sitios activos por volumen de
catalizador.

Catalizador enzimático o microbiano

Inhibición por producto (reversible) El producto acumulado ocupa sitios activos.

Envenenamiento (irreversible) Algunos sitios activos reaccionaron con sustancias que dan
lugar a un sitio inactivo.
Desnaturalización (irreversible o reversible) La conformación molecular de la enzima cambia ocultando o
inactivando sitios activos.
 CLASIFICACIÓN DE LAS REACCIONES
Reacciones No catalizadas Reacciones catalizadas
REACCIONES Reacciones en fase gaseosa Muchas reacciones en fase
HOMOGÉNEAS líquida
Combustión de gas
Reacciones en sistemas
Pseudo homogéneas o
coloidales, microbianos y
pseudo heterogéneas
enzimáticas, tratamiento
de agua
Combustión de gasolina, Hidrogenación aceites
REACCIONES diesel, carbón
Cracking de petróleo
HETEROGÉNEAS
Fermentación sólida
 COMPARACION DE LAS TASAS DE REACCIÓN

• Velocidad de las reacciones

moles que desaparecende S
rS 
m 3 de objeto* s
Realizar ejemplo 1.1 y 1.2
Levenspiel 3ª ed. 2006
Ejemplo 1.1 Levenspiel
Ejemplo 1.2 Levenspiel
 TASA DE REACCIÓN
dS dP
 rS  rP   
dt dt
• Reacciones heterogéneas y homogéneas
Temperatura, pH, Concentración, Inhibidores,
rS  rP  f  
transferencia de calor y masa 
• El cambio de densidad (ρ) debida a las presiones
parciales es muy importante

aA  bB  rR  sS
• Para la mayoría de los procesos biológicos la
densidad es constante.
 EXPRESIONES DE TASA DE REACCIÓN
• Tasa de desaparición del sustrato S o aparición del producto P

Para establecer la equivalencia de las tasas de

dS dP
rS  rP   dN
dt dt reacción, despejamos :
dt
1 dN 1 moles dN
ri    ri *V  rii * w  riii * s  riv *Vr
V dt volumen tiempo dt

Donde: 
1 dN 1 moles
rii   V: Volumen de reacción
w dt 
peso del catalizador tiempo
s: superficie
w: peso del catalizador
1 dN 1 moles Vr: Volumen del reactor
riii  
s dt superficie tiempo

1 dN 1 moles
riv  
Vr dt volumen del reactor tiempo
 REACCIONES ELEMENTALES
En el equilibrio la reacción directa es
A R S Reacciones en serie igual a la reacción reversa.

 ra  0
R Reacciones simultáneas MUY IMPORTANTE:
A (Del tipo competitivo) La constante de afinidad en
S bioprocesos, kS, está definida como el
inverso (Reac/Prod o (k2/k1) de la
A R Reacciones simultáneas constante de equilibrio Keq.
A S (Éstas suceden en paralelo)
Entonces la constante de Equilibrio es
la relación de productos y reactivos
(Prod/Reac) o la relación de
k1 constantes de Formación entre la de
A  B R  S Reacciones reversibles
k2 Disociación de los reactivos (k1/k2).
 ra  k1CaCb  k2CrCs k1CaCb  k2CrCs

k1 CrCs
 Keq  
k 2 Ca Cb
 ORDEN DE REACCIÓN
r  kCa Cb a b

a y b son los exponentes a la cual están elevadas las concentraciones.

Tasa de reacción de A es de orden a con respecto a la concentración de Ca.
Tasa de reacción de B es de orden b con respecto a la concentración de Cb.
Orden Global de la Reacción: G = a + b ... + z

Cuáles son las unidades del constante de reacción k?

¿Serán las mismas para las tres órdenes de reacción?
mol 1 mol Generalización del orden de reacción (n):
ra  k Ca orden1 
' 1

Vt t V n 1
1  V  1 mol  1n

k      
2
mol 1 V mol
ra  k ''Ca 2 orden 2  
Vt t mol V 2
t mol  t  V 
mol 1 V 2 mol 3
ra  k Ca orden 3 
''' 3

Vt t mol2 V 3
ANÁLISIS DE TASAS DE
REACCIÓN
 Los 3 tipos de reactores ideales
• Reactor por lote • Reactor de • Reactor continuo
o intermitente flujo pistón de flujo mezclado

imagen

Salida = ƒ (Entrada, Modelo de contacto y la cinética

de reacción enzimática/microbiana)
 Conceptos importantes para las
reacciones
• NS0 = número de moles iniciales
• NS = número de moles
• XS = Conversión, fracción de reactante transformado

Expresada en términos de moles Xs Expresada en términos de concentraciones Xs resulta:

resulta: CS 0  CS CS
XS  1
CS 0 CS 0
NS0  NS NS
XS  1 dCS  CS0dXS
NS0 NS 0
Cambio de volumen con el avance de la reacción.
V = V0 ( 1 + εs XS )
0 ≤ XS ≤ 1  Vo = volumen inicial
εs Xs = factor de volumen entre el V0 y el V en función de XS
0 ( significa que nada ha reaccionado). XS:
avance de La reacción
1 ( significa que todo se ha transformado). Para la mayoría de la reacciones biológicas en medio acuoso
t ½ = tiempo para consumir el 50% del la densidad (ρ) es constante por lo que el volumen es
reactante Cs. constante.
En el tratamiento biológico de gases podría haber cambio de
volumen.
 Reacción de cero orden
Para reacciones de orden 0
dCS
 k
dt
CS 0  CS   kt
 t
CS 0  CS 
k



 Reacción de primer orden
• Expresando en términos de conversión, XS:
CS 0  CS
S 
 P
k
XS  CS  CS0 1 X S 
CS 0
dCS
 kCS dCS  CS0dXS
dt
CS t • Sustituyendo y rearreglando la expresión:

 C  k  dt 
dCS
CS 0 1
Ln  kt Ln  kt
CS 0 1  X S  1  X S 
CS 0 S 0
Rearreglando la 
expresión: CS 0 1
Ln  Ln  kt
CS 0 t
1  X S 
  k  dt
dCS CS
CS  
CS 0
Integrando se llega a:
CS 0 
Ln  kt
CS
 Reacción de segundo orden
A  B C
dCA dCB
rA    kCA CB
dt dt
El consumo de A es en las mismas proporciones que el consumo de B.
Se llega a:
CA 0 X A  CA  CA 0  CB 0 X B  CB  CB 0 
a)

dX A
 kCA 0 (1  X A )CB 0 (1  X B )
CA  CA 0 1  X A  CB  CB 0 1  X B 
CA 0
dt Integrando:
En todo momento se cumple que: 1  X B   M  X A 
Ln   Ln   (CB 0  CA 0 )kt
CA0 XA  CB 0 XB 1  X A  M(1  X A ) 

Sustituyendo -dCA por CA0dXA en la siguiente expresión:
dX A
CA 0  kCA 0 (1  X A )CB 0 (1  X B ) 
dt C
Considerando que @ t=0: M 
B0
CA 0
CA 0 X A
Sustituyendo XB: X B 
CB 0

 Reacción de segundo orden bimolecular
S  S P
dS dP
 kCS  kCS 0 1  X S 
2
rS  rP    2 2

dt dt
dCS
rS    kCS2
dt

Integrando de CS0 a CS:

1 1 1 XS
   kt
CS CS 0 CS 0 1  X S 
 Tasas de reacción de orden n, para n≠1
dCS
rS    kCSn
dt
• La forma general de integración es:

CS 1n
C 1n
 (n 1)kt
 S0
• Válida sólo cuando n≠1
• Si CS = 0 (cuando se agota el sustrato) entonces:
1n
C
 t S
(1  n)k
Primer orden reversible
 • Nomenclatura
dCX dCC dX
Biomasa: CX  CC  X Crecimiento microbiano:  
dt dt dt

dCS dCA dS
Sustrato: CS  CA  S Consumo de sustrato:   
dt dt dt

dCP dCR dP
Producto: CP  CR  P Formación de producto:  
dt dt dt
 Modelos de DRB para una sola reacción
Densidad constante
Reactor intermitente o flujo pistón Reactor de tanque agitado
n=0 k CA 0  CA k CA 0  CA
  XA   XA
-rA = k CA 0 CA 0 CA 0 CA 0
n=1 CA 0 1 CA 0  CA XA
k  ln  ln k  
-rA = kCA CA 1  XA CA 1  XA
n = 2 C  CA X A  (C  C ) XA
kCA 0  A0  k  A 0 2 A 
-rA = kCA2 CA 1  XA CA CA 0 (1  X A ) 2
Cualquier
nn  
1n
(CA 0  CA )
n 1CAn 10 kt   A  1  1  X
C XA
A
1n
1 k  
-rA = kCA  A 0 
C CA n CA 0 n 1 (1  X A ) n
n = 1 


1
 C  C  CAe 
k1  1  Ae ln A 0 
 Ae 
 X Ae 
 k1 
CA 0  CA CA 0  CAe   X A X Ae
A 
 R X ln
2
 CA 0  CA  CAe  X Ae  X A  CA 0 CA 0  CAe  X Ae  X A
CR0 = 0 
(CA 0  CA )
  CA 0  0
 CA 0 dCA X A dX CA 0 X A
Ecuación de   

r r
A

velocidad general CA rA r
A Af Af
REALIZAR EJERCICIOS Omnilibro
Levenspiel
Cap 1. A6, A7, A8, A9
Cap2 . A1, A2, A3, A5, A6, A13.
Encontrar la expresión de
velocidad de:
B14B19
 CONTRIBUCIONES CLAVES A LA CINÉTICA
DE REACCIONES ENZIMÁTICAS

Isotermas de Langmuir
Irving Langmuir
 CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN

Leonor Michaelis Maud Menten George Edward Briggs

• El modelo de Michaelis-Menten (1913) es

un caso hipotético de reacciones catalizadas
por enzimas.
• Posteriormente profundizado por George
Edward Briggs y John Burdon Sanderson
Haldane (1925).

John Burdon Sanderson Haldane

Publicaciones emblemáticas
 • Para concentración de
sustrato alta, la tasa de
reacción es
independiente de la
concentración de
sustrato; tasa de
reacción de Orden Cero.
• Para concentración de
sustrato baja, la tasa de
reacción es de Primer
Orden, con respecto a la
concentración de
sustrato.
El proceso se ve afectado en todo momento por la concentración
total de enzima. Una expresión que describe este proceso es:
kC E 0CS vmaxCS
 rs  r p  
K M  CS K M  CS
 • Los mecanismos elementales se pueden explicar
tomando en consideración:

S  E 

k S  E 
P  E
k1 k3
2

CS CE CX CP CE
• De donde:
 CET  CE  CX
 • El avance de la reacción se puede caracterizar
considerando la formación y desaparición del
sustrato, el complejo enzima-sustrato y el
producto. De manera que se pueden escribir, para
la tasa de reacción, las siguientes ecuaciones.

 ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
k
• Los términos k3CE 0 y se definen como r
2
max
k1 kCE 0CS
y K S, respectivamente. La ecuación rs  rp 
K M  CS
se escribe: r max C S
rs  rp  
 K S  CS

Que es la ecuación 
de Michaelis-Menten.
• El término K S resulta de una condición de
equilibrio
 rápido.
• K M proviene de considerar un estado
pseudoestacionario, utilizándose ambas de forma

indistinta.
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
• Gráfico de la ecuación de Michaelis-Menten
 CONCEPTOS IMPORTANTES DE LA
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
• La velocidad de reacción se acerca asintóticamente, hacia
un valor máximo rmax
• La mitad del valor de rmax se alcanza a una concentración
de sustrato conocida como la constante de Michaelis, ya
sea KM o KS según el caso.
• Este parámetro se considera como una medida de la
afinidad de la enzima por el sustrato, a menor valor de KM
mayor afinidad.
• La tasa de reacción se puede aproximar a rmax cuando se
tienen concentraciones de sustrato mucho mayores a KM , y
se tiene una cinética de orden cero con respecto al
sustrato.
• A concentración de sustrato más bajas que KM se tiene una
cinética de primer orden, con respecto al sustrato, y la
gráfica de la tasa de reacción es una línea recta en esa
zona.
 TASA ESPECÍFICA DE
CRECIMIENTO MICROBIANO
La tasa específica de crecimiento (μ) es una velocidad a la
cual se duplica una población microbiana en un tiempo
determinado.
• Es una tasa específica porque se define por unidad de
biomasa.
• μ representa el estado fisiológico del
cultivo microbiano.
• Depende de la concentración del
nutriente limitante.
• La ecuación de Monod describe la
relación entre la velocidad específica de
crecimiento, μ, y la concentración del
nutriente limitante, S, en un cultivo
microbiano.
TASA ESPECÍFICA DE CRECIMIENTO
• El modelo de Monod expresa:
dX max S
 k K a  K b
dt KS  S
• La ecuación b está representada en la siguiente figura en
donde μ se grafica como función de la concentración del
sustrato. El valor de KS se obtiene cuando μ = 0.5 μ max.


Las condiciones ambientales

tienen una gran influencia en el
crecimiento microbiano, de
manera que:
μ = f ( T, pH, naturaleza y
composición de nutrientes,
fuerza iónica, etc.)
 Otros modelos propuestos para crecimiento
microbiano…
S
Inhibición por sustrato   max
S 2 Ki  S  KS
S 1
Inhibición por producto   max
S  K S 1 P K i
S  P 
o   max 1  
S  K S  Pmax 
NOMBRE EXPRESIÓN CINÉTICA

Tessier   max 1 eS K S


 Sn
Moser   max n
S  KS
Villadsen et al 2011

S
Contois    max
S  KS X
  S
max ; S  2K S
Blackman    2K S
  ; S  2K S
 max
Ley logística  X 
  max 1  
 K X 
 Otros modelos propuestos para
crecimiento microbiano…

Villadsen et al 2011
 CONDICONES DE CULTIVO PARA LA
ECUACION DE MONOD
• Inoculo viable
• Nutriente limitante bien definido
• Medio de cultivo balanceado
• Ausencia de condiciones adversas (Temperatura, pH,
inhibidores, entre otros).

La tasa de crecimiento (μ) depende de la máxima que

puede alcanzar el microorganismo, de la concentración de
sustrato y de un valor KS que representa la concentración
de sustrato a la que se alcanza una tasa de crecimiento
igual a la mitad de la máxima.
TASA ESPECÍFICA DE CRECIMIENTO
• Constantes de saturación (KS) para diferentes sustratos y
microorganismos
 TIEMPO DE DUPLICACIÓN
• El tiempo de duplicación (td) es el período que requieren las
células de una población microbiana para crecer, dividirse, y dar
lugar a dos nuevas células por cada una de las que existían
anteriormente.
• El tiempo de duplicación varía dependiendo de la especie
microbiana y de las condiciones de crecimiento de la población.
• El tiempo de duplicación es, aproximadamente, el mismo para
todas las células de una determinada población.
• td no cambia hasta que se agotan los nutrientes o comienzan a
acumularse los productos metabólicos tóxicos.
 TIEMPO DE DUPLICACIÓN
• Si se integra la ecuación (a) entre los límites siguientes:

 
dX
dt K c 
X2 td

X1 dt 0

• Donde:
X2  2X1
 td = tiempo de duplicación
• Se obtiene que:
ln2
td  K d 
 
• La ecuación 3 es de gran importancia biológica pues si se
tabulan los tiempos de duplicación máxima para bacterias,
levaduras, mohos y protozoarios, se observa que estos
tiempos
 se agrupan, siendo las bacterias las que tienen un td
menor y los protozoarios mucho mayor.
 TIEMPO DE DUPLICACIÓN
• Distribución de los tiempos máximos de duplicación para microorganismos

• Efecto de la temperatura en el crecimiento

• Ejemplos de tiempo de duplicación
 CRECIMIENTO CELULAR POR
LA RESPIRACION
• La función logística, curva logística o curva en forma de S es
una función matemática que aparece en diversos modelos
de crecimiento de poblaciones; incluye la fase de
adaptación, exponencial, crecimiento acelerado y
estacionario.
• Está ecuación es usada para estimar el crecimiento
microbiano.

dX  X 
 X 1  
dt  X max 

X max
X
X  X  
1  e xpt 
max 0

 X 0  
 ECUACIÓN DE GOMPERTZ PARA
ESTIMAR CRECIMIENTO
• En FMS es mas fácil medir la respiración que la biomasa.

dX X max 
 kXLn  
dt  X 
X X maxexpbexpkt
t 0;X 0  X max b
Zwietering et al 1990, 1992
 ECUACIÓN DE GOMPERTZ PARA
MODELAR EL CRECIMIENTO MICROBIANO
• Gráfico del modelo de Gompertz
 Efecto de las características del
crecimiento microbiano en el DRB
5

1/ rp = 1/dP, 1/rX = 1/dX,

4

1/-rs = -1/dS
2

0
0 5 10 15 20 25 30
P dP So-Sf=P

1.8
35 18

1/ rp = 1/dP, 1/rX = 1/dX,

1.6
30 16
Consumo de S (g/l)

1.4
Formacion X o P ,

14

1/-rs = -1/dS
25
dP, dX , -dS

1.2
12
20 1.0 10
dP
0.8 8
15
0.6 6
10
0.4 4
5 0.2 2
0 0.0 0
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h) Tiempo
So-Sf = P
EFECTO SIMULTÁNEO DE PH Y
TEMPERATURA SOBRE LA
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Y
MICROBIANA
 EFECTO DEL pH
• La mayoría de las enzimas poseen un pH característico
al cual su actividad es máxima.
• Por encima o por debajo del pH óptimo la actividad
disminuye.
• La relación entre el pH y la actividad de cualquier
enzima depende del comportamiento acido-base de la
enzima y del sustrato, así como de muchos otros
factores.
• La forma de la curva de actividad-pH varía con la
concentración de sustrato, ya que el valor de KM de
muchas enzimas varía con el pH.
 ACTIVIDAD DE ENZIMAS CON RESPECTO AL pH
• ¿Cómo podemos simular este comportamiento?
 MODELOS QUE DESCRIBEN
EL EFECTO DEL pH
• Modelos clásicos basados en de reacciones ácido-base
Henderson-Hasselback pH = pK + log [ácido/base]
• Modelo de Michaelis – Menten del pH. Se pueden obtener
formas útiles para representar los efectos del pH en la
actividad catalítica de la enzima usando el siguiente modelo
del estado de ionización del sitio activo:

• En estas reacciones ácido-base, E− denota la forma activa

de la enzima, mientras que E y E= son formas inactivas
obtenidas por protonación y desprotonación del sitio activo
de la enzima, respectivamente.
• k1 y k2 son las constantes de equilibrio de las reacciones.
 EFECTO DEL pH EN LA ECUACIÓN DE
MICHAELIS MENTEN
• La protonación y desprotonación son procesos muy
rápidos comparados con la mayoría de las reacciones
en solución, por lo tanto, puede asumirse que la
fracción de la enzima en el estado iónico activo es Y-
siempre que la enzima este actuando como catalizador.
• Consecuentemente. La influencia en la velocidad
máxima de reacción Vmax se puede obtener al
multiplicar la concentración de enzima total ET por la
fracción de la forma activa de la enzima Y−:
v k cat E T Y  CS
 kcat ETY  
CS
rs  v  max
K S  CS

K S  CS
v
max
 • Después de escribir las relaciones de equilibrio para las dos reacciones:
EK
E  E  H E  E  H E   1
H
E H  E H   E K 2 EK1K 2
K1  K2  E  
E E H H 
 2

• La enzima total presente está dada, por:

E TOTAL  E  E   E 

• La fracción para cada tipo de enzima esta dado por :
 
E E E
Y Y  Y 
E  E  E E  E  E E  E  E
 Y
1
Y 
1
Y 
1
K KK
1 1  1 22 1
H  K2
  H 
H 
 2

H H   K1 H 1 
K 2 K1K 2
• Donde pK1 y pK2 es definido como:
1
-logK1; -logK2 pH(óptimo)  pK1  pK2 
 2
 EFECTO DEL pH
CS v k cat E T Y  CS Y   1
rs  v   max
H  K2
K S  CS K S  CS 1  
K1 H
v max  kcat ETY  
pK1 = 4 y pK2 = 7 pK1 = 4.5 y pK2 = 5.5

Efecto del pH y pK en la forma activa E Efecto del pH y pK en la forma activa E

1.2000  1.2

1.0000 1
Y, Y`, Y``

0.8000 Y Y, Y`,Y`` 0.8 Y

0.6000 Y´´´ 0.6 Y`

0.4000 Y` 0.4 Y``

0.2000 0.2

0.0000 0
0 2 4 6 8 10 0 2 4 6 8 10

pH pH
 Tarea especial I

Hacer gráfica para pK1 = 4 y pK2 = 7

Hacer gráfica para pK1 = 4.5 y pK2 = 5.5

2<pH<9, ΔpH = 0.2 unidades

 EFECTO DE LA TEMPERATURA
• La velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas se
incrementan en general con la temperatura, dentro del
intervalo donde la enzima es estable y permanece
totalmente activa.
• Las enzimas, al ser proteínas, se desnaturalizan por la
acción del calor y se inactivan cuando la elevación de la
temperatura sobrepasa un cierto punto.
• La temperatura óptima de una enzima es el resultado de
dos procesos:
1) El incremento habitual de la velocidad de reacción con la
temperatura.
2) El incremento de la velocidad de desnaturalización
térmica de la enzima al sobrepasar un temperatura crítica.
 Para describir el efecto de la temperatura sobre la cinética
enzimática se recurre a la ecuación de Arrhenius:
E A 
v  max  kcat  Aexp
max
 RT 

Donde:
EA= energía de activación A= Factor frecuencia
R= Constante de los gases 1.987 cal/mol K; 8.314J/mol K
T=
Temperatura en K E A 
Lnv  Lnk  Lnmax  LnA  
 RT 



 APLICACIÓN DE LA ECUACIÓN DE
ARRHENIUS EN 2 PUNTOS
E A  E A 
kcat 2  Aexp  kcat1  Aexp  T2  T1
RT2   RT1 
Tomando logaritmos y dividiendo la segunda expresión entre la primera se llega:
k2 E A 1 1 
Ln     Cal 
k1 R T2 T1  E A  
mol 
Q10
RT2T1 k 2  Difusión 6,000 1.4
EA  Ln 
T2  T1 k1  Procesos biológicos 12, 600 2
Químicos  50, 000 15.5
Ln Q10 
RT2T1
EA 
10
¿Qué información adicional podemos obtener? 
La estimación de Q10 ¿puede dar indicios de limitaciones de transferencia de
masa?
 REALIZAR EJERCICIOS Cap. 1
OMNILIBRO Levenspiel
B10, B11, B12, B13, B16, B18, B19,
B21, B22
 EFECTO DE LA TEMPERATURA
¿Cómo podemos simular este comportamiento?
• Esener y Roels desarrollaron una ecuación basada
en una reacción reversible de la forme activa e
inactiva de la enzima en función de la temperatura
E activa ↔ E inactiva
 E A1 
A * exp 
 RT 

 E A 2 
1 Bexp 
 RT 

A * expE A1 RT 
max 
1 BexpE A 2RT 
A = 2.694E+11 h-1
Aplicación a la FMS B = 1.300E+47
de yuca por A. niger EA1 = 70,225 J/g mol
EA2 = 283,356 J/g mol
 Tarea especial II

Hacer gráfica del efecto de temperatura

sobre 
22< T <47, ΔT = 0.5 unidades

Datos de Aplicación a la FMS

de yuca por A. niger
 ¿SE PODRÁ SIMULAR EL EFECTO SIMULTÁNEO
DE LA TEMPERATURA Y DEL PH ?
• Recordemos lo que ya sabemos

rs  v 
v C
max S

k cat E T Y 
CS
K S  CS K S  CS

• Efecto del pH
0.35
1
Y  0.30
H  K2 0.25 0.30-
1  0.35
K1 H  0.20 0.25-
0.30
0.15 0.20-
• Efecto de la temperatura 0.10
0.25
0.15-

A * expE A1 RT 
0.20
0.05 0.10-
max  0.15

Seri…
0.00
1 BexpE A 2 RT 

Seri…
15.00

Seri…
Seri…
21.50

Seri…
28.00

Seri…
Seri…
34.50

Seri…
41.00
47.50
 Tarea especial III
Hacer la gráfica 3D de efecto
combinado de pH y temperatura.
Temperatura de 15 a 50 ºC; ΔT = 0.5
pH de 2 a 9; ΔpH = 0.1
Suma 0.2 unidades a la calificación
final.
CONCEPTOS IMPORTANTES
PARA REACTORES DE FLUJO
CONTINUO
 CULTIVO CONTINUO
Un cultivo continuo es un sistema abierto con volumen
constante, al que continuamente se añade medio fresco de un
reservorio y al que se le retira medio usado que contiene
microorganismos y sustancias de desecho a una velocidad
constante.
• Por lo tanto el medio se renueva y su composición no cambia
a lo largo del tiempo, lo que permite mantener el crecimiento
microbiano de la población de forma indefinida, una vez
alcanzado el estado de equilibrio.
• Existen dos formas básicas de cultivo continuo: el cultivo de
flujo tapón y el reactor continuo de tanque agitado o
quimiostato.
• Todas las teorías de cultivo continuo se basan en el modelo de
Monod.
 CULTIVO CONTINUO
• Flujo tapón
En este tipo de fermentación continua la solución de
cultivo fluye a través de un reactor tubular sin mezclado.
La composición de la solución de nutrientes, el número
de células, la transferencia de masa (suministro de O2) y
la productividad varían en distintas posiciones dentro
del sistema.
A la entrada del reactor las células deben añadirse
continuamente junto con la solución de nutrientes.

• Quimiostato
Un quimiostato consiste en un tanque
agitado con una suspensión de biomasa
perfectamente mezclada y homogénea, a
la que se alimenta con medio fresco a una
tasa constante; el caldo de fermentación
es extraído a la misma velocidad de modo
que el volumen permanece constante.
VENTAJAS DEL CULTIVO CONTINUO
• La velocidad específica de crecimiento μ puede
establecerse (dentro de los límites del microorganismo)
de acuerdo con las necesidades de la experiencia. Se
puede seleccionar un estado de actividad metabólico
particular de acuerdo a las condiciones de operación
del reactor.
• Se pueden obtener células en un estado definido
independientemente del tiempo.
• Con equipo de laboratorio se puede producir,
comparativamente grandes cantidades de material
celular definido.
 TIEMPO DE RETENCIÓN HIDRÁULICA
• En el quimiostato idealmente el mezclado debe
ser perfecto, es decir que cuando una gota del
medio entre al reactor instantáneamente deberá
quedar uniformemente distribuida en el cultivo.
• Esto significa, en la práctica, que el tiempo
requerido para mezclar un pequeño volumen del
medio con el cultivo será también pequeño
comparado con el tiempo de retención.
• Tiempo de retención hidráulico (TRH): es el
tiempo que tarda en renovarse todo el volumen
del reactor.
Volumen V
TRH  
Flujo F
 TASA DE DILUCIÓN
• En cultivo continuo se denomina Tasa de dilución
(D) a la entrada del medio a una concentración S0
y a un flujo volumétrico constante, F, divida por el
volumen del cultivo (células, medio, gas).

Flujo F
D 
Volumen V
• La tasa de dilución representa la tasa de flujo por
unidad de volumen.

 RELACIÓN TRH, D y μ
• El tiempo de retención hidráulico es inversamente
proporcional con la tasa de dilución por lo que:

1 1
TRH  
D 

D
 Conceptos importantes para las
reacciones
• NS0 = número de moles iniciales
• NS = número de moles
• XS = Conversión, fracción de reactante transformado

Expresada en términos de moles Xs Expresada en términos de concentraciones Xs resulta:

resulta: CS 0  CS CS
XS  1
CS 0 CS 0
NS0  NS NS
XS  1 dCS  CS0dXS
NS0 NS 0
Cambio de volumen con el avance de la reacción.
V = V0 ( 1 + εs XS )
0 ≤ XS ≤ 1  Vo = volumen inicial
εs Xs = factor de volumen entre el V0 y el V en función de XS
0 ( significa que nada ha reaccionado). XS:
avance de La reacción
1 ( significa que todo se ha transformado). Para la mayoría de la reacciones biológicas en medio acuoso
t ½ = tiempo para consumir el 50% del la densidad (ρ) es constante por lo que el volumen es
reactante Cs. constante.
En el tratamiento biológico de gases podría haber cambio de
volumen.
 Conceptos importantes para los
reactores de flujo
• Flujo de moles de S la unidad de tiempo (FS,FS0)
moles de S alimentados V VCS 0
FS   
t v0 FS 0
• Flujo volumétrico por unidad de tiempo (vf, v0)

m 3 de fluidoque entran al reactor VC S 0 m 3 moles m 3

v   t
t FSO moles t
• CS0 = concentración de S en la alimentación


Tiempo de Residencia Hidraúlica.
V
  t  Indica el tiempo promedio que
permanece un elemento de volumen
v0 (gotita) en el reactor.
Fin capítulo 1