ESCUELA PREPARATORIA FEDERAL POR COOPERACIÓN SOR JUANA INÉS DE LA CRUZ CLAVE EMS-2/44 LABORATORIO DE BIOLOGÍA II Nombre del

alumno: ______________________________________Grupo:__________ Fecha: ________________Número de mesa_______________ PRÁCTICA NÚMERO 2 SANGRE PARTE I Punción capilar. Elementos formes. Técnica de Coloración de Wright. Cuenta diferencial de leucocitos. OBJETIVOS.

 Que el alumno aprenda a hacer un extendido sanguíneo utilizando sangre periférica con
la técnica de: Obtención de sangre por punción capilar.

 El alumno aplicará la técnica de coloración de Wright para observar la morfología de
los elementos formes de la sangre en un extendido sanguíneo.

 Que el alumno conozca y diferencie la morfología de los elementos formes de la sangre
periférica en el extendido sanguíneo.  El alumno realizará la cuenta diferencial de leucocitos, identificando los diferentes tipos en sangre periférica humana. JUSTIFICIÓN. Un análisis diferencial de los leucocitos o cálculo porcentual puede ser de gran utilidad para descubrir infecciones enmascaradas de tipo subagudo o crónico que generalmente no ocasiona un aumento del recuento de glóbulos blancos total. MARCO TEÓRICO. La sangre ha sido considerada por muchos autores como un tejido líquido. Es un líquido de color rojo escarlata si esta en las arterias y rojo oscuro si está en las venas, que cuando se extrae de los vasos donde circula normalmente, coagula espontáneamente. Su pH es ligeramente alcalino (pH 7.4) que representa cerca del 7 % del peso corporal. El volumen total de sangre del adulto promedio es de cerca de 5 litros, circula por todo el cuerpo dentro de los vasos sanguíneos. La sangre es un tejido conectivo especializado compuesto por elementos figurados, eritrocitos, leucocitos y plaquetas, que se encuentran suspendidos en un componente líquido, llamado plasma. Los eritrocitos (glóbulos rojos), son células desprovistas de núcleo, flexibles, de color amarillo, discoidales de contorna circular, que vistos de perfil son bicóncavos. Miden 7.2 micras de diámetro y 1.5 micras de espesor en borde. Los glóbulos blancos o leucocitos, se han denominado así por carecer de color propio, están provistos de núcleo y citoplasma.

. 1.Puncionar la piel del borde lateral del lóbulo de la oreja con una lanceta desechable estéril con un movimiento rápido de suficiente profundidad como para producir la salida de la sangre. Lancetas estériles y desechables*. 3. esto se evita dando masaje a la piel hasta que esté rosada y caliente antes de efectuar la punción. justo ala izquierda de la gota de sangre y deslizarlo hasta el borde de la gota.Deslizar el portaobjetos con que se hace el extendido hacia la izquierda. La piel fría y cianótica es una fuente de errores pues da cifras altas falsas de glóbulos rojos y blancos. Este ángulo oscilará entre 30 y 45°. TÉCNICA PARA OBTENCIÓN DE EXTENDIDO DE SANGRE. En esta práctica efectuaremos la punción en el lóbulo de la oreja. 2.Limpiar perfectamente la piel del lóbulo de la oreja con una torunda empapada en alcohol.4 TÉCNICA DE OBTENCIÓN DE SANGRE POR PUNCIÓN CAPILAR.Colocar en la superficie de un portaobjetos desengrasado. obtendremos un extendido de ésta que teñiremos con la técnica de coloración Wright.. El movimiento tiene que ser rápido pero uniforme... Para estudiar la morfología de los elementos formes de la sangre.Sostener el portaobjetos con que se hará el extendido. dependiendo de la lentitud o rapidez del movimiento y también del ángulo entre los dos portaobjetos. Esta se extiende por capilaridad a lo ancho del portaobjetos. no es conveniente presionar con fuerza porque esta se diluirá con líquidos titulares (de la piel).. 3. El extendido será grueso o fino. sin ralladuras y con bordes uniformes.Desechar las dos primeras gotas de sangre. puede presionarse ligeramente a cierta distancia de la herida para obtener algunas gotas de sangre. . Un buen extendido será liso.. 1. Papel seda Portaobjetos Puentes para coloración Microscopio óptico * Material que deberán traer los alumnos DESARROLLO. 2. Torundas de algodón Aceite de inmersión Colorante de Wright Buffer de fosfatos pH 6. La región a puncionar no debe encontrarse cianótica ni edematosa ya que es esencial que la sangre pueda fluir libremente para obtener resultados reproducibles que se puedan comparar con los de la sangre venosa. homogéneo. cerca del extremo del lado derecho una gota de sangre.MATERIAL.

.Lavar el colorante una vez transcurrido el tiempo de coloración. 5. 3.Una vez que se ha lavado perfectamente el extendido. Mezclar ambas soluciones sobre el extendido soplando sobre el portaobjetos.Cubrir el extendido por completo.. 1. pues de lo contrario. 4. la película de colorante tenderá a precipitarse sobre el portaobjetos siendo muy difícil su eliminación posterior. para que se fije el extendido.Colocar la película de sangre secada al aire con el lado del extendido hacia arriba sobre un puente o soporte de coloración. usa colores y ponle nombres a cada estructura de la célula. 2.... RESULTADOS. Emplear de preferencia extendidos de sangre fresca. se coloca sobre uno de sus bordes en posición vertical para que se seque. Se formará una película verde de aspecto metálico.TÉCNICA DE COLORACIÓN DE WRIGHT. por flotación. El lavado debe realizarse con agua. . 1. No olvides ponerle su nombre a cada uno. agregando el agua cuando el portaobjetos todavía está en posición horizontal.Colocar el mismo número de gotas que se emplearon de colorante de solución amortiguadora o de agua para diluir el colorante. dejar actuar durante 5 a 7 min. esto es.. Se deja actuar el colorante que en este momento ya se encuentra disociado durante 10 min. Ya seco observar al microscopio con objetivo de inmersión. con un número conocido de gotas de colorante.Realiza un esquema de cada uno de los elementos formes observados al microscópico.

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