DETERMINACIÓN DE 5-HIDROXIMETILFURFURAL (HMF) La determinación de 5-Hidroximetilfurfural se realizó mediante el método de espectrofotometría UV El método de determinación es el siguiente: 1) Preparación de las soluciones

: Se deben preparar las siguientes soluciones: y y y Solución de ferrocianuro de potasio al 15%. (Carrez I) Solución de acetato de zinc al 30%. (Carrez II) Solución de bisulfito de sodio al 0.2%.

2) Determinación de HMF en la muestra y y y Pesar aproximadamente 5 g de muestra por duplicado en vasos de precipitados de 50 ml. Agregar 25 ml de agua destilada a cada vaso, agitando para lograr la total disolución de la muestra. Añadir a cada vaso 0.50 ml de solución de Carrez I, mezclar y agregar 0.50 ml de solución Carrez II. (Estas soluciones sirven como aclarantes para eliminar la turbidez). y y Transferir cada mezcla a un matraz aforado de 50 ml, y aforar con agua destilada. Agitar y filtrar al vacío el contenido del matraz. Los 10 primeros ml del filtrado son eliminados, y el resto se colecta en un nuevo vaso de precipitados limpio. y y y Colocar 5 ml de cada filtrado en 2 tubos de ensayo. A uno de los tubos se le denominará blanco y el otro será la muestra. Agregar 5 ml de solución de bisulfito de sodio al tubo que se lo denominó blanco y al otro tubo de ensayo agregar 5 ml de agua destilada. Leer las absorbancias de cada muestra (con su propio blanco), en el espectrofotómetro a 284 nm y a 336 nm, correspondientes a las longitudes de onda de luz UV. y Calcular la cantidad de HMF de la muestra sustituyendo los datos en la siguiente ecuación.  

Donde: A284: Absorbancia de la muestra leída a 284 nm de longitud de onda. A336: Absorbancia de la muestra leída a 336 nm de longitud de onda. mmuestra: Porción ensayada de la muestra.

.14. 10: Factor para obtener los resultados en mg HMF/Kg muestra .97: Factor que toma en cuenta el peso molecular y la absortividdad molar del HMF. 5: Porción de ensayo nominal.

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