ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL Y MEDIOS DE CULTIVO

OBJETIVO

Al finalizar este ejercicio el alumno será capaz de:

 Explicar el concepto de esterilización y su utilidad en microbiología.
 Preparar correctamente el material que se someterá a esterilización.
 Aplicar algunas metodologías para esterilizar material y medios de cultivo.
 Comprobar la efectividad del proceso de esterilización.
 Explicar el concepto de medio de cultivo en microbiología.
 Eliminar adecuadamente los desechos biológicos.

MATERIAL:

Por grupo:

 Papel estraza
 Bolsas de plástico
 Autoclave
 Mecheros Bunsen
 Rejilla de metal
 Guantes de asbesto
 Bata de laboratorio

PREPARACIÓN DEL MATERIAL

1. Determinar qué material debe ser esterilizado, marcando el material de vidrio para
su posterior lavado.
2. Envolver las cajas Petri con papel aluminio en paquetes de 4.
3. Los tubos Vacutainer también deben ser envueltos en papel aluminio.
4. Introducirlos en las bolsas de plástico y sellarlas herméticamente.

PREPARACIÓN DEL AUTOCLAVE

1. Montar el equipo para esterilizar de acuerdo al Esquema 1.
2. Introducir dentro del autoclave la rejilla de metal.
3. Adicionar agua.
4. Introducir dentro del autoclave las bolsas con las cajas Petri.
5. Cerrar el autoclave con su tapa asegurándose que sea herméticamente para evitar
accidentes.
6. Colocar la válvula de seguridad
7. Encender los mecheros y ubicarlos bajo la autoclave
8. Cuando el manómetro marque 121ºC (15 lb), retirar y apagar 3 mecheros.

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 9. Vigilar que durante 20 minutos se mantenga constante la temperatura y presión
colocando el mechero encendido las veces que sea necesario.
10. Es necesario cronometrar la hora en que inicia el conteo de los 20 minutos para
una adecuada esterilización.
11. Después de 20 minutos a 121ºC, apagar los mecheros y esperar a que la
temperatura descienda.
12. Llenar la bitácora

DESECHO DEL MATERIAL BIOLÓGICO

1. Quitar la tapa de la autoclave con mucho cuidado utilizando para esto los guantes
de asbesto.
2. Sacar las bolsas de plástico y desecharlas en los contenedores de basura.
3. En el caso de las cajas Petri de vidrio, o los matraces Erlenmeyer conteniendo
caldos de cultivo, desechar el material biológico en bolsas de plástico y lavar el
material como se realiza normalmente. Es importante NO desechar el agar en los
fregaderos porque pueden obstruirse.
4. La bolsa de plástico conteniendo el material biológico esterilizado, se desecha en
contenedores de basura.

MEDIDAS DE SEGURIDAD

 Usar bata de laboratorio

 Asegurarse de cerrar herméticamente la tapa.
 Usar guantes de asbesto para abrir el autoclave y manipular los desechos.
 Vigilar que no sobrepase 121ºC.
 Cerrar las llaves de gas al finalizar la práctica.

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 Olla esterilizadora

Tripié
Mecheros Bunsen

Esquema 1. Montaje del equipo de esterilización.

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FECHA USUARIO CANTIDAD / DESCRIPCIÓN HORA TIEMPO A TIEMPO OBSERVACIONES
PESO (gr) INICIO 121ºC FINAL

ESTERILIZACIÓN DE DESECHOS
FECHA: ____________________ SEMESTRE: AGOSTO-DICIEMBRE
2019

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