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Práctica 7

MICROBIOLOGÍA
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TABLA DE CONTENIDO
REVISIÓN DE CONCEPTOS PREVIOS A LA ACTIVIDAD EXPERIMENTAL.................. 4
Conceptos .................................................................................................................... 4
Clasificación general de los hongos........................................................................... 5
Esquema de los diferentes componentes de un hongo ............................................ 8
FUNDAMENTOS DE LA PRÁCTICA ................................................................................ 9
DESARROLLO EXPERIMENTAL ................................................................................... 11
Material y reactivos por equipo de laboratorio ........................................................ 11
Materiales ................................................................................................................. 11
Reactivos .................................................................................................................. 13
Equipo ...................................................................................................................... 15
DIAGRAMA DE BLOQUES SECUENCIA EXPERIMENTAL .......................................... 16
Observación de morfología fúngica.......................................................................... 16
En fresco .................................................................................................................. 16
Preparación en cinta adhesiva .................................................................................. 17
CUESTIONARIO ............................................................................................................. 18
RESULTADOS ................................................................................................................ 21
BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................... 22

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OBJETIVO
Realizar preparaciones en fresco y en cinta adhesiva de distintas especies de
mohos.
Observar la morfología de los hongos y distinguir hifas septadas y no septadas,
tipos de esporas y estructuras que las originan

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REVISIÓN DE CONCEPTOS PREVIOS A LA ACTIVIDAD EXPERIMENTAL
Conceptos
Hongo

Los microbiólogos emplean el término hongo (del latín fungus, seta) para incluir organismos
eucariotas, portadores de esporas con nutrición por absorción, carentes de clorofila, que se
reproducen de forma sexual y asexual.

Micelio

Una seta es solamente el aparato reproductor del hongo y la parte visible del mismo. La
parte invisible se encuentra bajo tierra y es el micelio. El micelio está formado por filamentos
o hifas, siendo el conjunto de estas hifas el micelio. El micelio es el aparato vegetativo del
hongo y, en consecuencia, es en realidad lo que hace crecer, reproducir y morir al hongo

Hifa septada

Son las unidades estructurales de la mayoría de los hongos, sobre todos los filamentos.
Presentan tabiques transversales en forma de número regular, con un poro de
comunicación en el centro, son las hifas septadas.

Hifa no septada

A diferencia de las hifas septadas las hifas cenocíticas o aseptadas no se encuentran


tabicadas. En estos casos los núcleos se distribuyen en la totalidad del filamento
citoplasmático.

Heterotrófico

Los hongos son heterótrofos, al igual que los animales obtienen nutrientes del medio, a
partir de materia ya elaborada por otros organismos. Sin embargo, los hongos no ingieren
la materia orgánica y la digieren internamente como los animales. Se han definido a los
hongos como heterótrofos por absorción

Reproducción sexual

La reproducción sexual es el proceso de crear un nuevo organismo descendiente a partir


de la combinación de material genético de dos organismos con material genético similar,
comenzando con un proceso que se denomina meiosis, que es un tipo especializado
de división celular; el cual se produce en organismos eucariotas. Los gametos son los dos

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tipos de células especiales, uno más gigante, el femenino, y otro más diminuto,
el masculino. La fusión de estas dos células se llama fecundación y esta crea un cigoto,
que incluye material de los dos gametos en un proceso que se llama recombinación
genética donde el material genético, el ADN, se conjuga para que las secuencias de
los cromosomas homólogos se alineen. A continuación, se producen otras dos divisiones
celulares más, para producir cuatro células hijas con la mitad de cromosomas de cada una
de las dos células del padre, y el mismo número que tienen los padres, aunque puede
ocurrir la auto-fertilización.

Reproducción asexual

La reproducción asexual es una forma de reproducción de un ser vivo en la cual, a partir


de una célula o un grupo de células, se desarrolla por procesos mitóticos un individuo
completo, genéticamente idéntico al primero. Se lleva a cabo mediante un solo progenitor
y sin la intervención de los núcleos de las células sexuales o gametos.

Clasificación general de los hongos


Una levadura es un hongo unicelular con un único núcleo que se reproduce de forma
asexual por gemación y división transversal o por reproducción sexual a través de la
formación de esporas. Cada yema que se separa puede crecer y convertirse en una nueva
levadura, y algunas se agrupan par formar colonias. En general, las levaduras tienen un
tamaño mayor que las bacterias, varían mucho de tamaño, y suelen ser esféricas u ovoides.
No tienen flagelos, pero poseen la mayoría de los restantes orgánulos eucariotas.

Un moho consiste en filamentos largos, a modo de hilos de células ramificados llamados


hifas (del griego hyphe, red) cuyo conjunto forma un micelio, masa enredada o agregado
análogo a un tejido. En algunos hongos, el protoplasma fluye a lo largo de las hifas, sin
tabiques transversales que lo interrumpan. Estas hifas se conocen como cenocíticas. Las
hifas de otros hongos poseen tabiques transversales llamados septos, con un poro único
o múltiples poros, que permiten el flujo de citoplasma. Estas hifas se denominan septadas.
(Prescott, Harley, & Klein, 2002)

Los hongos se clasifican en:

Phylum chytridiomycota (quitridios)

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Los quitridios son uno de los grupos más primitivos, pues los primeros reconocibles
aparecieron hace más de 500 millones de años, lo que correspondía al período
precámbrico.

Son hongos unicelulares en su mayoría, principalmente acuáticos con pocas especies en


tierra; algunos son parásitos o saprofitos. Poseen quitina y pared celular de glucano y su
reproducción es principalmente asexual por medio de esporas móviles o zoosporas.

Tiene dos clases: Quitridiomicetos y Monoblepharidomycetes.

Phylum zygomycota (mohos de pan)

Se conocen aproximadamente 1,060 especies de zigomicetos y los mohos que crecen


sobre frutas, verduras y panes son los más representativos. La mayoría viven del material
orgánico en descomposición, pero unos cuantos son parásitos, particularmente de insectos.
Su reproducción es generalmente asexual y producen esporangiosporas, pero la
reproducción sexual es posible en condiciones desfavorables.

Este tipo de hongos pueden crecer en diversos entornos. La mayoría de ellos son
mesofílicos; es decir, que crecen entre 10 y 40 °C con una temperatura óptima de 20 a 35
°C). Otros son termofílicos, lo que significa que crecen a temperaturas mínimas de 20 °C y
máximas de hasta 60 °C. Solo algunos tipos crecen a grados bajo cero.

De igual forma, ciertos zigomicetos, específicamente algunas especies del orden


Mucorales, crecen en condiciones anaeróbicas, es decir, son capaces de vivir o
desarrollarse en un medio sin oxígeno. Pero la mayoría necesita condiciones aeróbicas.

Phylum ascomycota (levaduras y hongos de saco)

Los ascomicetos pertenecen al filo más grande de hongos, con más de 64,000 especies y
se caracterizan por la formación de un ascus, que es una estructura similar a un saco que
contiene ascosporas haploides. De ahí su nombre “hongos de saco”.

Su reproducción asexual es por fisión y su reproducción sexual es por diversos medios que
dan como resultado la producción de ascosporas.

Algunas levaduras benefician al humano en la elaboración de cerveza, en la fermentación


de vino y como trufas. Otras se requieren para la fermentación del arroz para la producción
de sake.

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Sin embargo, también se conocen por parasitar plantas y animales, incluido el hombre. Un
ejemplo de ello es la neumonía micótica, una infección en los pulmones que puede ser
mortal en sistemas inmunes debilitados.

Phylum basidiomycota (hogos superiores)

Junto con Ascomycota, constituye el subreino Dikarya. Generalmente son parásitos de


plantas e insectos. Son hongos filamentosos compuestos de hifas y tienen micelio de dos
tipos: primarios que consisten en células uninucleadas, y secundarios que consisten en
células dicarióticas.En este grupo también se incluye a los hongos de plataforma, que
crecen aferrados a la corteza de los árboles.

También se identifican dos grupos convencionales que no se reconocen como grupos


taxonómicos formales: Deuteromycota (hongos imperfectos) y los líquenes.

Los líquenes son organismos que surgen de la simbiosis entre un hongo, y un alga o una
cianobacteria, y, por lo tanto, ha sido difícil clasificarlos. (BioEnciclopedia, 2015)

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Esquema de los diferentes componentes de un hongo

Láminas (micología)
Píleo (Sombrero)
Son las estructuras laminares
Nombre técnico que se le da al
existentes bajo el sombrero de
sombrero de un basidiocarpo o
algunas setas, cuya función es
ascocarpo (cuerpo fructífero del
actuar como himenóforos en el
hongo), que sustenta una
cuerpo fructífero del hongo. Es
superficie donde se alojan las
la estructura más frecuente
esporas, el himenio.
pero no exclusiva, en los
agáricos.

Himenio
Capa fértil de un cuerpo
fructífero donde se
encuentren las ascosporas
Volva (micología) o basidiósporas
Es el termino usado para
describir una estructura en
forma de copa localizada en
la base de los cuerpos
fructíferos de algunos
hongos

Anillo (micología)
Es la estructura anular que
se puede encontrar a veces
en el estipe de algunos
hongos. El anillo representa
Estirpe (micología) el resto que queda del velo
Hace referencia al pie que parcial, después de haberse
sustenta el píleo o sombrero roto para exponer las
del cuerpo fructífero de un láminas u otro tipo de
Basiomycota superficie expositora de las
esporas.
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FUNDAMENTOS DE LA PRÁCTICA
El reino de los hongos está conformado por organismos eucariotas, heterótrofos que
poseen diversidad de estructuras, funciones, formas de crecimiento y estilos de vida; sus
más de 1.5 millones de miembros impactan de forma positiva o negativa a todas las formas
de vida existentes y, por lo tanto, a todos los ecosistemas. Los hongos son organismos que
presentan cualidades únicas entre todos los seres vivientes. Estas capacidades generan
un impacto perjudicial o benéfico en la actividad humana debido a su utilización en varios
puntos importantes en la historia. Estos organismos son empleados en la elaboración de
alimentos o en la producción de antibióticos. Sin embargo, han ocasionado enfermedades
en plantas y animales, constituyendo un reto constante en las áreas de investigación,
diagnóstico, tratamiento y control. Es por todo esto que los hongos han actuado un papel
importante en la obra teatral del desarrollo y la prosperidad humana. (Moreno, 2016)

El verdadero cuerpo del hongo, conocido como micelio, está compuesto por largos
filamentos denominados hifas. Si miramos al microscopio el sustrato sobre el que crecen
(como la tierra o la madera), encontraremos que está invadido por las hifas. Lo que
comúnmente se llama “hongo”, son los cuerpos fructíferos de los mismos, encargados de
producir las esporas cuya función es la reproducción sexual. Las estructuras encargadas
de producir las esporas no están distribuidas por todo el cuerpo fructífero, sino que se
organizan en una superficie del mismo (himenio) y la zona donde se encuentra el himenio
sumado a otros elementos se denomina himenóforo, otras especies pueden dar una masa
de esporas (gleba) como ocurre en los hongos de tipo gasteroide y en ese caso no es
posible diferenciar un himenóforo en cuerpos fructíferos maduros. (Kuhar, Castiglia, &
Papinutti, 2013)

Finalmente tenemos que aclarar que a pesar de que muchos de los hongos que crecen en
la naturaleza son comestibles también existen muchos otros tóxicos e incluso mortales y a
veces pueden crecer en zonas próximas o incluso mezclados. Dado que la determinación
de un hongo puede ser complicada, es preferible que sea realizada por un micólogo
profesional y desaconsejamos fuertemente la recolección de hongos silvestres para su
consumo. (Kuhar, Castiglia, & Papinutti, 2013)

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Cultivos

La siembra microbiológica es necesaria para lograr la identificación de especie de los


diversos hongos comprometidos en infecciones fúngicas y permite además realizar estudio
de susceptibilidad en caso de ser necesario. En general, si no hay suficiente material para
realizar el examen directo y el cultivo, este último tiene prioridad por su mayor sensibilidad.

Hemocultivos: durante el último tiempo se ha desarrollado una gran variedad de sistemas


automatizados de hemocultivos, los cuales en su botella estándar utilizan medios
enriquecidos para cultivar un sinnúmero de microorganismos incluyendo los hongos; logra
incluso superar métodos considerados de elección, como por ejemplo el hemocultivo por
lisis centrifugación. El desarrollo reciente de botellas especiales para el cultivo de hongos
en los sistemas automatizados conteniendo antibacterianos y agentes lisantes, no ha
mejorado la recuperación respecto a las botellas estándares. El hallazgo de un hongo en
sangre certifica el diagnóstico de una micosis invasora; sin embargo, el hemocultivo
presenta una baja sensibilidad y se sabe que su positividad no supera el 50% en pacientes
con candidiasis invasora comprobada por autopsia. En el caso de los hongos filamentosos,
aun cuando ellos estén invadiendo tejido, escasamente se encontrarán en sangre.

Cultivos en medio sólido: se pueden utilizar medios no inhibitorios como agar Sabouraud
o agar cerebro-corazón para muestras provenientes de sitios estériles y medios inhibitorios
que, por contener antimicrobianos, evitan un crecimiento bacteriano excesivo para
muestras provenientes de sitios no estériles. En estas muestras en que el cultivo es mixto,
está demostrado que la siembra en medios corrientes deja de recuperar hasta 50% de los
cultivos positivos para hongos. (GUZMÁN, 2004)

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DESARROLLO EXPERIMENTAL
Material y reactivos por equipo de laboratorio
Materiales

Portaobjetos. El Cubreobjetos. Por su


portaobjetos y el parte, el cubreobjetos es
cubreobjetos. Los una placa en forma
portaobjetos son finas cuadrada o rectangular
láminas de vidrio sobre muy delgada (y
las cuales se colocan transparente, dado que
las muestras o normalmente es de
preparaciones que cristal o de un plástico
posteriormente se especializado), que se
pretenden analizar y coloca sobre la muestra
observar con un y el portaobjeto. Sirve
microscopio. Sirve para para fijar la muestra y
fijar la muestra y evitar evitar que se mueva
que se mueva fuera del fuera del alcance de
alcance de nuestra nuestra observación.
observación.
Vasos pp 100ml. Probetas 100ml.

Espátulas. Mecheros.

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Asas bacteriológicas. Pipetas Pasteur.

Bulbos para pipeta Agujas de disección.


Pasteur. El bulbo es Las agujas de disección
muy útil para pipetas se utilizan para sujetar
serológicas o Pasteur tejidos o pequeñas
ya que ayuda a la estructuras durante un
succión del líquido y breve período de
evitar accidentes ya que tiempo.
el líquido no es tocado
ni con la boca al aspirar,
ni con las manos al
verter el líquido

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Reactivos

KOH.n Se agrega un Azul. La solución de azul


líquido que contiene el de lactofenol es una
químico hidróxido de solución de tinción lista
potasio (KOH). Luego se para usar para la tinción
examina el portaobjetos de hongos en
bajo el microscopio. El bacteriología con
KOH ayuda a disolver muestras de origen
mucho del material humano. El material se
celular. Esto hace más tiñe en un solo paso con
fácil detectar si hay solución de azul de
hongos. lactofenol.
Lactofenol Azul de Alcohol.
algodón. La solución de
azul de lactofenol es una
solución de tinción lista
para usar para la tinción
de hongos en
bacteriología con
muestras de origen
humano. El material se
tiñe en un solo paso con
solución de azul de
lactofenol. Los hongos
aparecen de color azul
oscuro.
Safranina. La tinción de Agua.
safranina O es de
contraste, ya que se usa
para diferenciar una
estructura celular
previamente teñida con
otro colorante. Se utiliza
en distintas técnicas
histológicas que
detectan células
enterocromafines del
tracto gastrointestinal, el
protoplasma y núcleo de
microorganismos
patógenos.

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Diurex. Esta técnica a
menudo rompe las
débiles estructuras
fructificantes de los
hongos filamentosos,
haciendo difícil observar
las características de
esporulación. Este
método de preparación
es útil ya que se
conserva las
características de
agrupamiento de las
esporas de algunos
hongos más delicados.

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Equipo

Microscopio (6). Balanza analítica.

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DIAGRAMA DE BLOQUES SECUENCIA EXPERIMENTAL
Observación de morfología fúngica
En fresco

EN FRESCO

En un portaobjetos colocar una gota


de KOH al 25%.

Tomar una muestra del hongo a


observar.

Colocar la muestra sobre la gota de


KOH al 25 % y distribuir.

Colocar una gota de azul de


lactofenol y/o azul de algodón sobre
la muestra.

Poner un cubreobjetos sobre la


muestra teñida.

Observar al microscopio en objetivo


de 10X y40X

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Preparación en cinta adhesiva

PREPARACIÓN EN
CINTA ADHESIVA

Colocar sobre un portaobjetos una gota


de solución de azul de lactofenol y/o azul
de algodón. Cortar un segmento de cinta
adhesiva de 2cm. aproximadamente

Tocar con el lado adhesivo de la cinta la


superficie de la fruta o el pan
enmohecido o el borde de una colonia
de hongo de un cultivo. En la zona
central de una colonia puede haber una
concentración de esporas excesiva

Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del


portaobjetos. Observar al microscopio
en objetivo de 10X y40X.

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CUESTIONARIO
1. Define qué es un hongo

Son organismos eucariotas y presentan en común con las plantas la posesión de una pared
celular de vacuolas llenas de jugo celular y de una corriente plasmática bien observable,
así como incapacidad de moverse. No presentan pigmento fotosintético algunos son C-
heterótrofos (quimiorganoheterótrofos). Crecen en condiciones aeróbicas y obtienen la
energía por oxidación de materia orgánica. Si se comparan con las plantas diferenciales en
raíz, tallo y hojas (cormo) los hongos se presentan sólo un grado muy bajo de diferenciación
y en ellos casi no se da la división del trabajo. (Schlegel & Zaborosch, 1997)

2. Explica la importancia de los hongos en la naturaleza.

Los hongos tienen una importancia ecológica vital. Ellos son descomponedores de la
materia orgánica. Al igual que las bacterias, insectos y gusanos reciclan nutrientes en la
naturaleza y liberan estas sustancias que van a emplear otros organismos.

Hay hongos asociados a insectos que ayudan a que éstos consigan un alimento de mayor
calidad. Así pasa con Termitomyces, que ayuda a las termitas subsaharianas a alimentarse
con los azúcares que metaboliza cuando devora los restos vegetales que le facilitan los
insectos. Pero también hay hongos que parasitan a los insectos, y nos ayudan a reducir
ciertas plagas. Uno de los grupos de hongos especializados en vivir de forma parásita de
los insectos son los pertenecientes al género Cordiceps.

Otros hongos ejercen un papel parasitario de las plantas y son causantes de gran cantidad
de enfermedades en ejemplares débiles. Pero también hay géneros especializados en
parasitar a otros hongos, como es el caso de Trichoderma que está siendo muy útil en la
lucha biológica para combatir a otros hongos como Verticillium, Septoria, etc. (Alcántara,
2010)

3. Menciona 5 ejemplos de hongos comestibles y 5 hongos degradadores

Hongos comestibles (UNIVERSAL, 2019)

 Seta ostra rosada.


 Boletus Edulis.
 Huitlacoche

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 Trufa
 Morilla

Hongos degradadores (Agrología, 2016)

 Cienos (mixomicetos). Physarum


 Flagelos (oomicetos). Pythium
 Hongos de azúcar (zigomicetos). Rhizopus nigricans
 Hongos más complejos (ascomicetos, basidiomicetos). Saccharomyces
 Hongos imperfectos (deuteromicetos). Penicillium, Fusarium, Asergillus o
Trichoderma
 Micelios estériles. Rhizoctonia.

4. Dibuja un hongo microscópico y uno macroscópico y anótales sus partes que


lo componen

Hongo microscópico Anamorfo: Aspergillus nidulans

1. Cédula pedea
2. Conidióforo
3. Vesícula
4. Métula
5. Fiálide
6. Conidios

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Hongo macroscópico Cuacicitlal o amanita

1. Píleo (sombrero)
2. Laminilla
2 3. Lamina
3 4. Himeno
4 5. Anillo
6. Estirpe (pie pedúnculo)
1 5 7. Volva
6 8. Micelio (hifas)

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5. Explica la importancia de los hongos en el área farmacéutica

Los organismos fúngicos sintetizan una amplia gama de metabolitos secundarios de gran
importancia económica, comercial y biotecnológica, como los antibióticos ciclosporinas,
ácidos mevínicos, alcaloides y estatinas, entre otros. De todos ellos, la biosíntesis de
antibióticos principalmente β-lactámicos ha tenido mayor atención en el campo bioquímico,
genético e industrial, así como los mayores rendimientos de producción, principalmente en
géneros Aspergillus, Penicillium y Acremonium. Las investigaciones realizadas alrededor
del mundo consideran a los hongos como unidades biológicas eficientes de síntesis, en
donde para incrementar la producción de un determinado metabolito hay que intervenir, no
sólo en la ruta de biosíntesis, sino también sobre vías de secreción, transporte, regulación
genética, etc., los cuales indirectamente pudieran ejercer un efecto en la primera, dando
lugar a rendimientos adecuados del compuesto de interés. (Sanchez & Mosqueda, 2013)

20
RESULTADOS

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BIBLIOGRAFÍA
Agrología. (12 de Febrero de 2016). Hongos. Obtenido de Agrología, Importancia del
suelo : https://agrologia.wordpress.com/2016/02/12/hongos/
Alcántara, M. R. (02 de Septiembre de 2010). La importancia de los hongos. Revista el
ecologista(66). Obtenido de https://www.ecologistasenaccion.org/19972/la-
importancia-de-los-hongos/
BioEnciclopedia. (2015). TIPOS Y CLASIFICACIÓN DE LOS HONGOS. Obtenido de
BioEnciclopedia : https://www.bioenciclopedia.com/tipos-y-clasificacion-de-los-
hongos/
GUZMÁN, A. M. (2004). Importancia del laboratorio en el diagnóstico de la micosis
invasoras. Scielo: Revista chilena de infectología, 21(1), 39-47.
Kuhar, F., C. V., & P. L. (2013). Reino Fungi: morfologías y estructura ed los hongos.
Revista Boletín Biológica(28), 11- 15.
Moreno, J. A. (01 de Septiembre de 2016). LOS HONGOS: HÉROES Y VILLANOS DE LA
PROSPERIDAD HUMANA. rdu revista digital universitaria UNAM, 17(9), 2-6.
Obtenido de http://www.revista.unam.mx/vol.17/num9/art69/art69.pdf
Prescott, L., H. J., & K. D. (2002). Microbiología (5ed ed.). España: McGRAW-HILL
INTERAMERICA.
Sanchez, A. d., & M. O. (12 de Agosto de 2013). Una mirada a los organismos fúngicos:
Fábricas versátiles de diversos metabolitos secundarios de interés biotecnológico.
Revista Química Viva(2), 65-87. Obtenido de
https://www.redalyc.org/pdf/863/86328550002.pdf
Schlegel, H. G., & Z. C. (1997). MICROBIOLOGÍA GENERAL . Plató, 26 - 08006
Barcelona: EDICIONES OMEGA S.A.
UNIVERSAL, E. (20 de Julio de 2019). Hongos comestibles que debes de conocer. EL
UNIVERSAL DIARIO DE MÉXICO, págs. 9.-10.

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