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La VSG mide es la caída libre de los glóbulos rojos en una columna vertical por el tiempo de
una hora ¿por qué una hora? porque en una hora es cuando se cumplen las tres fases de la
VSG, va a depender de varios factores: factores técnicos, factores globulares y factores
plasmáticos.
Los factores globulares: son aquellos que están relacionados con los glóbulos rojos
como tamaño, cantidad, forma.
Los factores plasmáticos: son aquellos que están relacionados con la composición
del plasma que pueden disminuir el potencial zeta entre un glóbulo rojo y otro, esas
son proteínas generalmente de fase aguda que tienen carga positiva y van a ser que
los glóbulos rojos se acerquen más trayendo como consecuencia que esta prueba
este alargada esas proteínas de fase aguda son sustancias que son liberadas cuando
hay un proceso infeccioso o inflamatorio como es el fibrinógeno la globulina entre
otras proteínas.
Ustedes también decían que se tomaba un tubo tapa morada y realizaba en una pipeta de
Westergren con citrato de sodio. Si ustedes toman la muestra en un tubo tapa morada que
contiene EDTA y colocan la muestra en un tubo que tiene citrato de sodio están utilizando
dos anticoagulantes diferentes por lo tanto tampoco esto es viable.
Si usted toma la muestra para VSG con EDTA pudiera hacer diluciones con solución salina
fisiológica pero no con citrato de sodio ¿qué es lo que pasa? que hay algunos métodos
automatizados que recomiendan para utilizar en la prueba VSG directamente un tubo de
citrato de sodio y con ese tubo montar la prueba ok no se si me explico.
También hablan ustedes de un método DISP el método, el método no hay DISP porque si
ustedes leen la pipeta que trae de la casa comercial DISP esa pipeta dice Westergren, el
método sigue siendo Westergren, lo que pasa es que la casa comercial es DISP ella tiene
diferencias en cuanto al diámetro interno de la pipeta o sea el diámetro interno de la pipeta
de Westergrendifiere a la casa comercial DISP porqué es allí donde se recomienda hacer
una dilución de una parte de solución salina y cuatro partes de sangre para corregir ese
defecto o esa diferencia del diámetro interno de la pipeta.
En conclusión los autores actualmente refieren que la lectura debe hacerce solamente a 1
hora porque se conoce que ya la segunda hora los glóbulos rojos siguen cayendo pero ya las
fases por su peso, pero ya las fases donde se está determinando el cómo está afectado el
potencial Z, culmina justamente cuando pasan 60 minutos.
Otra cosa que les quería decir en relación a esta prueba es que algunos médicos no solicitan
el índice de katz, ese índice de katz ya está en desuso desde hace algún tiempo, sin embargo
hay médicos que persisten en solicitarlo cuando nos piden el índice de katz y tenemos que
hacerlo si se lee en la primera hora, la segunda hora para calcular ese índice de katz pero
se sabe que no tienen ninguna utilidad clínica.
La fórmula para usar para determinar el índice katz es la primera hora más la segunda
entre dos todo esto dividido entre dos.
Índice de Katz (mm)= VSG 1hora + (VSG 2hora/2)
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Una de sus compañeras también hacía referencia en cuánto a esta prueba que la VSG es
afectada por el hematócrito realmente por el hematócrito como tal no es afectada.
Sino que es afectada por la cantidad de glóbulos rojos es decir por los factores globulares si
el paciente tiene un hematócrito muy elevado porque tiene demasiada cantidad de glóbulos
rojos tiene una poliglobulia su VSG va a estar francamente disminuida porque por mucho
rectantes de fase aguda que exista la cantidad de glóbulos rojos es tan grande que ella no
disminuye casi nada.
Otra cosa que les quería contar en cuanto a esta prueba es que ustedes hablaban de los
métodos automatizados es verdad hoy en día hay muchos métodos automatizados para la
VSG pero esta prueba tiene la dificultat para ser automatizada que no puede ser controlada
no hay muestras controles que nos indiquen que los equipos están funcionando de manera
correcta ¿por qué pasa esto? porque esta prueba la muestra para la determinación de VSG
es viable solamente durante cuatro horas,es decir que después de tomar la muestra ella
debe ser procesada antes de que se cumplan las cuatro horas porque pierde el efecto de los
factores plasmáticos,entonces para poder realizar esta prueba en un equipo automatizado
obligatoriamente debe ser controlada debe tener muestras control según la organización
panamericana de la salud utilizando muestras de pacientes con un hematócrito por encima
de 40 se puede de alguna forma controlar los equipos automatizados, pero si nosotros
tenemos un laboratorio y nos ofrece un equipo automatizado tenemos que tener certeza de
cómo vamos a hacer el control de estos equipos para poder realizar la prueba porque hasta
donde se no se puede realizar equipos automatizados porque faltan muestras controles a
diferencia de la hematología automatizada aquí sí existen controles para ello.
¿ Por qué se dice que la VSG tiene poco valor por si sola al momento de realizar un
diagnóstico?
RETICULOCITOS
En cuanto a los retículocitos quiero aclarar que en anemias como tal en general no se da
por disminución de eritrocitos, las anemias se da por disminución de la cantidad de
hemoglobina que tiene el paciente si ustedes detallan en una anemia microcítica
hipocrómica ella cursa con eritrocitosis esos pacientes generalmente tienen más de cinco
millones de eritrocitos. con cifras hemoglobinas bajas por lo tanto esto tiene que hacerlos a
ustedes entender creer aprender y no olvidar de que las anemias no siempre va a existir
disminución en la cantidad de eritrocitos ¿ cómo se realiza el recuento del reticulocito?
cómo le expliqué ayer con el recuento indirecto de plaquetas se hace una preparación hay
dos técnicas difundidas.
La primera es que hacemos un extendido con el azul brillante de cresil una vez que se
seque colocamos una gota de sangre muy pequeña, colocamos una laminilla cubreobjeto
hacemos un poquito de presión y luego llevamos estos a objetivos de inmersión de 100X y
vamos contando 10 campos microscópicos tomando en cuenta cuántos reticulocitos hay en
cada campo si hay 1 en el primero y 3 en el segundo, 2 en el tercero y así sucesivamente.
Y en total se dice que si en 10 campos que hay 1000 glóbulos rojos tanto en tanto en 100
glóbulos rojos que vi tantos reticulocitos cuantos tengo en porcentaje eso se los expliqué
ayer cuando le hablaba del recuento indirecto de plaquetas se hace muy similar con los
reticulocitos. Es importante tener claro que para la interpretación de los resultado de los
reticulocito si el IPR tengo que tener certeza si el paciente tiene o no tiene anemia porque
un paciente por ejemplo con 13 de hemoglobina y voy a tener unos reticulocitos en 0.8%
o un IPR <2 eso no quiere decir que ese paciente tenga una médula ósea este aplásica o
Hipoplásica o hipoproliferativa o arregenerativa sencillamente que ese paciente como no
tiene anemia no tienen necesidad de aumentar la producción y la liberación del
reticulocitos a sangre periférica, entonces deben estar muy claros que para interpretar los
reticulocitos el IPR siempre tienen que tener la cifra de hemoglobina para saber si hay o no
hay anemia por eso que este valor es necesario calcularlo con el porcentaje de hematócrito
por lo tanto la interpretación de los resultados para los reticulocitos no se puede hacer de
forma aislada sin considerar el valor de hemoglobina y por esa es la razón por la cual se
utiliza el hematócrito en la formula de IPR.
DREPANOCITOS
En cuanto a la drepanocitosis hay varias pruebas que nos pueden ayudar en primer lugar
está:
Es decir que si yo monto una prueba con reactivo metabisulfito de sodio hoy lunes para 2
pacientes y me quedan 4cc de metabisulfito de sodio y el martes no me llega y el miércoles
me llegan 5 no tiene sentido que utilice el mismo metabisulfito de sodio porque ya el poder
reductor terminó, entonces es importante que ustedes tengan claro que el poder reductor
del metabisulfito de sodio tiene una vida media corta de 24 horas, también es importante
que tengan claro que cuando ustedes están haciendo la prueba de falciformación no están
haciendo descripción de morfología eritrocitaria porque algunas veces ustedes cuando
estan observando la prueba metabisulfito de sodio empiezan a querer describir la
morfología de esos glóbulos rojos y esos glóbulos rojos para ser descritos es necesario
tinciones de tipo Romanowsky, esa prueba se reporta positiva o negativa y se reporta 30
minutos negativa ,24 horas negativo, es decir nosotros tenemos que informarle al médico
en cuanto tiempo la vimos lo ideal es 30 minutos y 24 horas pero si no por lo menos los 30
minutos esa prueba al ser positiva no me está diferenciando si el paciente tiene anemia
drepanocítica o rasgo drepanocítico solamente me está diciendo que hay células
falciformes al ponerse en contacto con el metabisulfito de sodio.
Hay otra prueba que es la prueba de solubilidad que se hace con ditionito de sodio
donde este reactivo se pone en contacto con la muestra de sangre y al termino de
media hora se evalúa la turbidez que tiene esta muestra también se va a reportar
positivo o negativo y no diferencia entre el rasgo drepanocítico y anemia
drepanocítica por lo tanto ninguna de estas dos pruebas son pruebas diagnósticas
son pruebas que nos van afirmar si hay presencia de células falciformes o de
turbidez dependiendo del reactivo que estemos utilizando.
Otro aspecto importante es que tengan claro que la prueba para confirmar si hay anemia
drepanocítica o rasgo drepanocítico es la prueba de electroforesis de hemoglobina que
consiste en que vamos a preparar un hemolizado de la muestra de sangre hemolizada
porque vamos a romper los glóbulos rojos y ese hemolizado lo vamos a colocar en una
placa de gel de agarosa o gel de celulosa a ph alcalino de 8.5 y se va aplicar una corriente
eléctrica en base a eso las cadenas de globina según su composición van a viajar hacia o se
van a mover hacia el cátodo o hacia el ánodo posteriormente de aplicar esa corriente
eléctrica este gel va a ser coloreado para poder visualizar esas bandas cadenas de globina y
luego se va a preparar para hacer una determinación espectrofotométrica para poder
determinar la concentración de hemoglobina de las cadenas de globina que tiene ese
paciente.
Nota:Toda prueba de lab debe tener algún tipo de control, si estoy haciendo la prueba de
falciformacion se recomienda tener muestras positivas para tener certeza de que el
reactivo está bien preparado y está cumpliendo su función reductora
Pregunta
¿En caso de una prueba de metabisulfito de sodio positiva en un px ya con más de 10años
de edad y sin evidencia de anemia, aún es necesario hacer electroforesis? O el médico
puede confirmar el rasgo drepanocitico?
R = No se puede afirmar que sea rasgo sin electroforesis, sin embargo por la clínica que
describes en un alto porcentaje debe ser rasgo. Hay quien dice por ejemplo que si la prueba
de falciformacion es positiva en menos de media hora el paciente tiene la anemia y si es en
más tiempo es el rasgo pero no hay literatura científica que avale esto, y nosotros así
debemos entenderlo.
LEUCOCITOS
En cuanto a los leucocitos son los mismos glóbulos blancos nosotros hacemos en la
determinación manual en el laboratorio con un líquido de dilución que se denomina líquido
de turk, ese liquido de turk que está compuesto (bueno ya ustedes saben cómo está
compuesto) � esta dilución se puede hacer bien sea con pipetas de glóbulos blancos o con
pipeta automáticas lo importante es tener claro que dilución estamos haciendo,
recomiendo una dilución 1/20, pero si el paciente tiene una leucopenia se puede disminuir
la dilución a 1/10 o si tiene una leucocitosis importante se puede hacer la dilución 1/100
utilizando una pipeta de glóbulos rojos o la misma pipeta automática.
Preguntas
NOTA
En cuanto a los leucocitos tienen claro que deben tener una dilución recomendable es 1/20
y eso va a ser contado en la cámara de neubauer ( la cámara neubauer ustedes ya saben
cuál es su descripción porque la vieron en fisiología y en los seminarios lo hicieron muy
bien) y se va a contar los cuatro cuadrados de las esquinas para efectos de la práctica
cuando nosotros hacíamos practica en el laboratorio de hematología yo veía que ustedes
llegaban con el problema de que dibujaban la cámara y iban anotando si vieron el primer
cuadrito superior izquierdo tres leucocitos colocaban 3 leucocitos, que en el de al lado
veían 2 colocaban 2 yo le recomendaba siempre que se olvidaran de que eso es pues como
cuando uno está en preescolar y está trabajando con plastilina y tiene que seguir ciertos
pasos pero ya que a nivel del séptimo semestre y con viendo la asignatura hematología
ustedes tenían que contar completo sus cuatro cuadrados en su mente, cuatro, cinco, seis,
siete, ocho, nueve digo porque primero por agilidad, por rapidez, por seguridad, por
dominio pero que también era importante que ustedes fuesen llevando una relación que si
ustedes llegaban más contaban el primer cuadrado 35 leucocitos posiblemente el segundo
iba a contar 32 en el tercero 36 en el cuarto 38 y aproximadamente ya ustedes podían
imaginarse que ese paciente iba a tener entre 100 a 110 leucocitos en los cuatro cuadrados
y al multiplicar ese paciente iba a tener entre cinco a seis mil leucocitos por milímetro
cúbico que les quiero decir con esto que ustedes tienen que ir mentalmente desarrollando
las destrezas que en el momento que Dios mediante ustedes puedan ir a pasantía y lo
mandan a hacer un recuento manual ustedes tengan la agilidad de contar completamente
los cuatro cuadrados de una vez multiplicar por el factor total que tienen que saber cómo
se calcula okey que el día de mañana yo le puedo colocar por ejemplo en el examen cambiar
todo o sea en vez de decirle que contaron en cuatro cuadrados decirle que contaron en
ocho y si contaron en ocho ya el factor total se va cambiar porque el factor del factor
volumen es diferente y les puedo cambiar la dilución a 1/10 o 1/100 y eso obviamente
ustedes no tienen que aprenderse para mañana que son 50 el valor por el cual van a
multiplicar los leucocitos y no tienen que saber hacer los cálculos porque en función de eso
me van a expresar un resultado espero que no tengan problemas con eso mañana.
LEUCEMIAS
En cuanto a Leucemia ustedes ya vieron la clase las tinciones citoquímicas no tiene mayor
complejidad ahí lo importante es que ustedes desarrollen la habilidad la curiosidad de
buscar imágenes a través de internet para ustedes poder evidenciar o identificar y ir
desarrollando su ojo microscopista para poder identificar cuándo existen alteraciones
morfológicas en la célula es decir busquen lo que es un promielocito como son estas
granulaciones primarias como es
FRAGILIDAD OSMÓTICA
En cuanto a este tema solo quiero preguntar ¿Porque se usa el tubo con NaCL2 cómo blanco?
Y decirles que NO es prueba diagnóstica de talasemias, solo que se sabe que la curva tiene
un comportamiento diferente en pacientes con talasemias por la gran cantidad de líquido
que puede entrar al eritrocito.
R= Se utiliza el tubo de NaCl como blanco por que en el normalmente no hay hemolisis.
AUTOMATIZACIÓN
En cuanto al tema automatización pues ya para cerrar a pesar de que no es tema no está, no
forma parte del programa de la asignatura pero siempre he creído que es necesario que
usted se preparen en relación a ese tema es importante tener claro que los equipos
automatizados para hematología hay dos tipos de equipo actualmente:
20 Ft son contadas como plaquetas ok yo tengo glóbulo rojo muy grandes mayores a 80 Ft
por ejemplo entonces voy a tener un pico una elevación del histograma este hacia la
derecha si los glóbulos rojos o muy pequeños entonces voy a tener un pico hacia la
izquierda ok y si tengo una dualidad, una heterogeneidad glóbulos rojos es decir grandes y
pequeños puedo tener dos picos uno a la izquierda uno la derecha o puedo tener un pico
bien con una base de la curva bien ancha en la amplitud de distribución eritrocitaria bien
ancha que me está indicando que hay heterogeneidad si por ejemplo los glóbulos rojos se
rompen de manera prematura o en el sistema sanguíneo al momento de tomar la muestra
entonces esos restos de glóbulos rojos van a estar contados en el límite entre lo cómo así
que fueran plaqueta pero que son glóbulos rojos iba a estar ahí como una dualidad que
amerita que se ha visualizado microscópicamente el frotis de sangre de ese paciente de
igual manera como les estoy diciendo cómo son contados en el mismo baño donde son
contadas las plaquetas si hay plaquetas muy grandes macroplaquetas esas plaquetas
pueden ser contadas como sí que fuesen glóbulos rojos y puede afectar también el
histograma viendose una elevación iniciándose el histograma de glóbulos rojos ante estas
alarmas esta muestra tiene que ser visualizada microscópicamente para ver qué es lo que
puede estar pasando allí ok la plaqueta van a ser contadas y si miden menos de 20 Ft van a
ir directamente como si fuesen plaqueta ahí no tiene nada que ver el de tres subpoblacione
ni cinco subpoblaciones porque tanto el equipo de cinco como de tres me va a contar
igualito los glóbulos rojos y las plaquetas en el mismo baño y la va a discriminar por el
tamaño en función poniendo límite 20 Ft ahora bien cuando hablamos de 3 subpoblaciones
o 5 subpoblaciones se refiere exclusivamente a los leucocitos el de 3 subpoblaciones por
impedancia me discrimina los leucocitos pequeños, leucocitos medianos y leucocitos
grandes los leucocitos pequeños los espresa como linfocitos, los grandes los expresa como
neutrófilos y los medianos no se sabe lo que es, porque pueden ser basófilos pueden ser
eosinófilo pueden ser o sea no hay una precisión en la fórmula leucocitaria entonces el
equipo de 3 subpoblaciones leucocitarias nunca sustituye el frotis de sangre periférica si
usted está trabajando en un laboratorio donde hay un equipo de 3 subpoblaciones
leucocitaria si llegan 100 hematologías usted tiene que hacer 100 frotis no puede guiarse
por las lecturas porcentuales que le da al equipo porque él no tiene ninguna forma de
terminar con claridad si hay una Eosinofilia, si hay una basofilia si hay una monocitosis y a
veces los linfocitos grandes los puede contar como células medianas entonces no hay una
exactitud y precisión en cuanto a la fórmula leucocitaria se refiere estamos claros ¿es
similar? si puede ser similar al paciente la realidad del paciente siempre y cuando el
paciente sea hematológicamente normal ¿pero los pacientes porque van a un laboratorio?
hoy en día el paciente que acude al laboratorio clínico acude porque tiene enfermedad,
porque tiene una dolencia por lo tanto esos pacientes tenemos la obligación de hacerle la
fórmula leucocitaria, y estamos trabajando con un equipo de 3 subpoblaciones ahora bien
el equipo de 5 subpoblaciones leucocitarias ustedes lo van a identificar porque le genera
un diagrama de dispersión como lo explicó Pedro en la exposición donde se observan esos
puntitos de colores que cada color le va a identificar un tipo de célula y el equipo le genera
alarma dependiendo de la célula de la normalidad que esté presente ese
equipo cuando se está utilizando en un laboratorio si sustituye la fórmula leucocitaria con
excepciones ok con excepciones, entonces ese equipo de 5 subpoblaciones leucocitarias no
se basa solamente en el principio de impedancia a diferencia de los de 3 sino que combina
el principio de impedancia con algún otro principio adicional¿ como cual? como luz láser
multiangular, como citoquímica, como VSS que es volumen conductividad y dispersión es
decir combina impedancia con otros principios para poder identificar si son basófilos por
ejemplo los basófilos son células que son muy muy complejas porque tienen muchas
granulaciones que el haz de luz en el momento que atraviesa se dispersa choca y se
dispersa más entonces esto ayuda a que se identifiquen se estas células incluso a veces nos
pueden decir si hay linfocitos atípicos linfocitos, si atípico porque los linfocitos reactivos
difícilmente nos puede indicar entonces cuando solo debemos ver un frotis de sangre
periférica en un equipo de 5 subpoblaciones en el 25% de nuestras muestras, es decir que
si yo trabajo en un laboratorio que hay son 100 hematologías 25% de ellas yo tengo que
ver el frotis al azar porque debo corroborar que el equipo esté funcionando bien
obviamente estos equipos deben ser controlados con sus muestras controles comerciales
ok que otras en qué otros casos buenos el instituto estandarización dice que todo paciente
oncológico debe ser visualizado sufro de sangre periférica todo niño menor de 5 años debe
ser visualizado su frotis de sangre periférica, todo adulto mayor a 60 años debe ser
visualizado su frotis tiene sangre y todo aquel paciente que genere alarma a su muestra
cuando es procesado en estos equipos debe ser visualizado su frotis de sangre periférica
recuerden que hay hallazgos hematológicos que están relacionados con alteraciones o con
fisiopatologías muy específicas que no son detectados en estos equipos los cuerpos de
DHÖLE, vacualización citoplasmática, granulaciones tóxicas bastones de auer o sea el
equipo no te dice hay un anillo de cabo y el anillo de cabo es característico de tal patología,
por lo tanto si usted tiene unos índices eritrocitaria elevado tienes que ver el frotis porque
sería anillos de cabos, si hay hipersegmentados entonces eso puede ayudar a un
diagnóstico de una anemia megaloblástica.
Las cubetas deben ser tan claras o transparentes como sea posible, sin impurezas que
puedan afectar a una lectura espectroscópica. Al igual que un tubo de ensayo, una celda
puede estar abierta a la atmósfera por la parte superior o tener una tapa para sellarla.
También se puede utilizar Parafilm para sellarla
Hematocrito
Por que el niño al nacer tiene un hematocrito más elevado: al momento del nacimiento
el recién nacido presenta un hematocrito elevado debido que hay una elevación de la
eritropoyetina y este eleva l producción de glóbulos rojo
R: NO
PORQUE? La muestra al presentar lipemia esta no se le aplica una dilución ya que tiene
acumulo de partículas de lipoproteínas y seguirá interfiriendo, arrojara resultados
erróneos.
la lipemia se define como la turbidez en las muestras de suero o plasma, producida por
acumulación de partículas de lipoproteínas, especialmente las de densidad muy baja (VLDL)
y los quilomicrones que son ricos en triglicéridos
Por qué se dice que la VSG tiene poco valor por si sola al momento de realizar un
diagnóstico?
Porque ser una prueba inespecífica, es decir muchos factores (globulares, técnicos,
plasmaticos y hasta fisiológicos) la pueden alterar, por lo que es necesario acompañarla de
otras pruebas como una proteína c reactiva, hematología entre otros que si nos indican que
exista un proceso infeccioso o inflamatorio
Corrección de hemolisis
Proponemos que la ecuación matemática puede ser de utilidad para la corrección de los
valores de K, AST y LDH en el laboratorio clínico, y el rango de hemólisis susceptible de
corrección es dependiente del analito analizado.
No se puede afirmar que sea rasgo sin electroforesis, sin embargo por la clínica que
describes en un alto porcentaje debe ser rasgo. Hay quien dice por ejemplo que si la prueba
de falciformacion es positiva en menos de media hora el paciente tiene la anemia y si es en
más tiempo es el rasgo pero no hay literatura científica que avale esto, y nosotros así
debemos entenderlo