Enzimas y Cinética

enzimática
Inmovilización
Inmovilización de enzimas

• Proceso en el cual se confina o localiza a una

enzima ( también pueden ser células) en una
región definida del espacio para dar lugar a
formas insolubles que retienen su actividad
catalítica las cuales pueden ser reutilizadas
repetidamente.
• Cualquier proceso biotecnológico, si usa organismos
completos, extractos o enzimas purificadas debe competir con
al fermentación o con la síntesis química.
 BIOTRANSFORMACION

CELULAS ENZIMAS

Células suspendidas Suspendidas o

INMOVILIZADAS INMOVILIZADAS
en crecimiento en solución

Usamos células inmovilizadas cuando se

necesita de muchas enzimas y también
Las enzimas inmovilizadas presentan
la renovación del cofactor.
menores barreras difusionales que las
•La célula completa es menos lábil
las células (no hay que atravesar pared
que la enzima.
celular)
•Las células inmovilizadas permiten una
Reacciones específicas.
carga alta del soporte, las enzimas no.
 Ventajas del empleo de Enzimas Inmovilizadas

• Se puede separar y reutilizar la enzima o microorganismo

o bien en un proceso continuo mejora la economía.

• Mejora la estabilidad.

• Las fermentaciones batch se pueden reemplazar por

reacciones continuas
 Desventajas de usar Inmovilización

• La alteración de la conformación de la enzima respecto

de su estado nativo.

• La gran heterogeneidad del sistema enzima-soporte

donde pueden existir distintas fracciones de proteínas
inmovilizadas con un diferente número de uniones al
soporte.

• Siempre suele haber una pérdida de actividad de la

enzima durante la movilización.

• El biocatalizador es más caro que la enzima nativa.

 Tipos de inmovilización
Atrapamiento en
Esferas de geles
matrices

Retención Física
Micro- encapsulación
Inclusión en
Membranas
Reactores de Membranas

Adsorción
Unión a Soportes

Unión Covalente
Unión Química

Reticulado o cross-linking
Atrapamiento en Matrices

Consiste en la retención física de la enzima en las cavidades

interiores de una matriz sólida porosa constituida generalmente
por prepolímeros entrecruzables

Polímeros del tipo poliacrilamida, colágeno, alginato, carraginato o

resinas de poliuretano
Inclusión en membranas

Microencapsulación:

Las enzimas están rodeadas de membranas semipermeables

que permiten el paso de moléculas de sustrato y producto, pero
no de enzima
Inclusión en membranas

Reactores de membrana
Estos reactores emplean membranas permeables al producto final,
permeables o no al sustrato inicial y obviamente impermeables a la
enzima.

Adsorción de la enzima
sobre la membrana que
formará el reactor
Adsorción en soportes sólidos. se utilizan resinas
de intercambio iónico: aniónico como DEAE
(dietilamino-etil celulosa) o DEAE-sefadex;
catiónico como CMC (carboximetilcelulosa).

Unión covalente a soporte. (ej: soportes de vidrio

poroso, cerámica, arena, celulosa polímeros
sintéticos): Debe primero activarse el soporte y a
continuación una reacción de acoplamiento
específica