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COMENTARIO DE MÉTODOS COMENTARIO DE MÉTODOS


Transcripción 2: 3, 103-108; Mayo / junio de 2011; © 2011 Landes Bioscience

Inhibir la transcripción eucariota


¿Qué compuesto elegir? ¿Cómo evaluar su actividad?

Olivier Bensaude
IBENS; UMR CNRS 8197; UA INSERM 1024; París, Francia

T Esta revisión analiza en primer lugar las


formas en que podemos evaluar la inhibición
de la transcripción, describir los cambios en la
son cuestiones clave. ¿Cómo podemos detectar si un
nuevo compuesto inhibe la transcripción? Esta
revisión se ocupará en primer lugar de las cuestiones
estructura nuclear debidos a la inhibición de la generales de cómo evaluar la inhibición de la
transcripción e informar sobre genes que, transcripción, describir los cambios en la estructura
paradójicamente, son estimulados por la nuclear debidos a la inhibición de la transcripción e
inhibición de la transcripción. A continuación, se informar sobre genes que, paradójicamente, son
resumen las características y mecanismos de los estimulados por la inhibición de la transcripción. A
inhibidores de uso común:α-amanitina es continuación, nos centraremos en compuestos
altamente selectiva para RNAP II y RNAP III pero ampliamente utilizados (α-amanitina, actinomicina D,
su acción es lenta, la actinomicina D es rápida pero DRB, flavopiridol) y triptolida, un nuevo compuesto
su selectividad es pobre, los inhibidores de CDK9 que parece muy prometedor.
como DRB y flavopiridol son rápidos y reversibles
pero muchos genes escapan a la inhibición de la Evaluación de la inhibición de la transcripción
transcripción. Los nuevos compuestos, como la
triptolida, son rápidos y selectivos y pueden ¿Cómo podemos determinar si un compuesto
detener por completo la transcripción al inhibe la transcripción? Cuantificación de3La
desencadenar una rápida degradación de RNAP II. incorporación de H-uridina al ARN es el método
más antiguo. 3La H-uridina penetra rápidamente
en las células, se metaboliza y se incorpora a las
Introducción transcripciones de ARN nacientes.3La acumulación
de H-ARN resulta de la síntesis y degradación de
Muchos fármacos contra el cáncer inhiben la ARN competitivo. Por tanto, se recomienda un
transcripción y la mayoría de los inhibidores de la tiempo de marcaje corto (una fracción de hora
transcripción tienen propiedades farmacológicas para las células de mamíferos) para favorecer la
útiles. Muchos experimentos requieren la inhibición síntesis sobre la degradación. Sin embargo, este
de la transcripción. En la levadura, las mutaciones método no distingue entre polimerasas. Da un
termosensibles en las subunidades de la ARN peso máximo a la actividad de RNAP I ya que los
polimerasa (RNAP) proporcionan herramientas rRNA representan el 60-70% de la masa total del
valiosas. Se ha caracterizado una mutación transcrito.
termosensible en la subunidad más grande de RNAP La investigación de los niveles de ARN mediante
Palabras clave: ARN polimerasa, II de mamíferos, Rpb1.1 Sin embargo, la transcripción transferencia Northern, RT-Q-PCR, matrices de genes
transcripción, amanitina, actinomicina, se mantiene durante al menos un día a una en chips de ADN o secuenciación masiva proporciona
DRB, flavopiridol, triptolida, CDK9, temperatura no permisiva, lo que es un inconveniente información sobre transcripciones específicas. Se
TFIIH, Rpb1 importante. Por lo tanto, generalmente se prefiere la puede seguir el efecto de los fármacos en los ARN de

Enviado: 12/04/11 "genética química" o la "biología química". Entre los vida corta utilizando ARN con vidas medias largas
diversos medicamentos disponibles para inhibir la como la actina o el ARNr como controles de
Aceptado: 28/04/11
transcripción, ¿cómo elegir cuál usar? Cada uno tiene referencia. Sin embargo, se debe tener en cuenta que
DOI: 10.4161 / trns.2.3.16172 sus ventajas e inconvenientes (tabla 1). Selectividad, la inhibición de la transcripción puede mejorar la

* Correspondencia a: Olivier Bensaude; eficiencia, rapidez de acción y reversibilidad estabilidad de algunos ARNm, como los de genes
Correo electrónico: bensaude@biologie.ens.fr inducibles por daños en el ADN (gadd),

www.landesbioscience.com Transcripción 103


Tabla 1. Descripción general de los inhibidores de la transcripción ampliamente utilizados

Actinomicina D α-amanitina DRB Flavopiridol Triptolida

> 0,01 µgml-1 para genes de


clase I
Concentración > 2 µgml-1 100 µMETRO > 0,5 µMETRO 1 µMETRO
> 1 µgml-1 para genes de
clase II

Solución madre en DMSO acuoso DMSO acuoso DMSO


Objetivo Intercalación de ADN RNAPII >> RNAPIII CDK9 en P-TEFb CDK9 en P-TEFb XPB en TFIIH

RNAP II elonga- RNAP II elonga-


Polimerasa de ARN Síntesis de ARN Inhibición de la iniciación
rRNA inhibido ción inhibida, ARNr
alargamiento inhibido inhibido de RNAP I y RNAP II
procesamiento deficiente procesamiento deficiente

Otro objetivo potencial:


ADN rico en GC RNAPII y RNAPIII
Selectividad objetivo Otras quinasas inhibidas Otras quinasas inhibidas Policistina-2 cálcica
secuencias solo objetivos conocidos
canal
Inhibición Clase I >> Clase II >> Clase II >> Clase III Transcripción de clase II Transcripción de clase II, Clase II y Clase I
Selectividad Transcripción de Clase III transcripción Procesamiento de clase I Procesamiento de clase I transcripción

Consecuencia en Proteosoma
Hiperfosforo CTD CTD serina 2 defos- CTD serina 2 defos-
Polimerasa de ARN Degradación de RNAPII RNAPII dependiente
ylación forilación forilación
II degradación

Reversibilidad Débil No sí ? No
Índice Rápido, minutos Lento, horas Rápido, minutos Rápido, minutos Rápido, minutos

y conducen a su acumulación cuando se durante la inhibición global de la transcripción. o defectos en la función de procesamiento del
emplean inhibidores en concentraciones Como primer ejemplo, la transcripción ARNr como desencadenantes de ese proceso.20,28
moderadas.2-5 Pero los ARN inestables como c- impulsada por el VIH-LTR se ve reforzada por Una detención en el ensamblaje de ribosomas
fos no parecen verse afectados.6 la amanitina y la actinomicina.11,12 El VIH-LTR libera subunidades de proteínas ribosómicas
La hibridación fluorescente in situ (FISH) es "silencioso" impulsa un inicio de transcripción como RPL26. Éstos atrapan las ligasas de
una forma directa de observar la transcripción de eficiente que aborta después de 60-80 ubiquitina E3 Hdm2 (humano) o mdm2 (murino).
genes específicos.7 Aunque se pueden detectar y nucleótidos porque el reclutamiento de P-TEFb La competencia con la unión de p53 a Hdm2 /
contar moléculas de ARN individuales, este al promotor es deficiente y no puede oponerse mdm2, evita así su degradación.29,30 Además, el
método es bastante complicado de configurar.8 a los NELF para promover un alargamiento RPL26 disponible activa la traducción del ARNm
Una alternativa más fácil, aunque requiere mucho productivo de la transcripción. Los de p53. De hecho, la traducción eficiente del
tiempo, es la inmunoprecipitación de cromatina tratamientos con amanitina y actinomicina ARNm de p53 se basa en la unión de RPL26 a una
(DNA ChIP) utilizando anticuerpos anti-polimerasa mejoran la actividad de P-TEFb y liberan el interacción independiente de cap y poli (A)
(se recomiendan la subunidad Rpb3 o el dominio bloqueo de la elongación de la transcripción. independiente entre su 5 'y 3'
N-terminal de Rpb1). La distribución de moléculas Este efecto podría ser consecuencia de una UTR.31,32
de RNAP en un gen determinado por Q-PCR regulación del circuito de retroalimentación
refleja aproximadamente su transcripción. Sin que conduce a la hiperactivación de P-TEFb. Cambios en la capacidad de extracción
embargo, la elección de controles adecuados para 13,14 Tras la detención de la transcripción, se de componentes nucleares
evaluar la eficacia de la inmunoprecipitación en liberan ribonucleoproteínas nucleares
diferentes muestras es una gran dificultad. heterogéneas (hnRNP) que acompañan a la La inhibición de la transcripción se acompaña
transcripción naciente.15 Algunos de ellos (tipos de cambios notables en las propiedades
Definitivamente, el procedimiento cuantitativo hnRNP A, K, Q y R) luego atrapan el ARN 7SK bioquímicas de las proteínas nucleares como
más sencillo consiste en controlar un gen indicador que ya no está disponible para unirse a la las histonas y las hnRNP. La ubiquitinación de
inducible como la luciferasa. Los promotores proteína HEXIM1 e inactivar P-TEFb.16-18 la histona H2B y la fosforilación de la histona
inducibles por tetraciclina son particularmente Una inhibición general de la transcripción da H1b disminuyen en las células tratadas con
convenientes ya que responden fuerte y muy como resultado la acumulación de p53, que activa actinomicina D o DRB.33,34 Los hnRNP que
rápidamente, en unas pocas horas, pero requieren el la transcripción de genes diana de p53, como p21. acompañan al ARN premensajero son más
uso de líneas celulares modificadas genéticamente.9,10 CIP y Hdm2,19-21 y promueve la translocación de p53 fáciles de extraer de los núcleos de las células
hacia las mitocondrias que conduce a la tratadas con inhibidores de la transcripción
La transcripción de un subconjunto apoptosis.22 Después del tratamiento con génica de clase II.18,35,36 Por el contrario, la
de genes se mejora tras la inhibición flavopiridol, DRB, amanitina o actinomicina, las extracción eficaz de las subunidades del factor
global de la transcripción proteínas como p53 se acumulan debido a un de elongación de la transcripción positiva (P-
circuito de retroalimentación que implica una TEFb) (CDK9 y / o Ciclina Ts) del material
Debido a los bucles de retroalimentación, se produce una síntesis mejorada.23 y estabilidad proteica.24-27 nuclear es más difícil y requiere un aumento
transcripción mejorada de un pequeño conjunto de genes. Inhibición de la síntesis de ARNr de la fuerza iónica del tampón de extracción.37

104 Transcripción Volumen 2 Número 3


Los cambios en las propiedades de P-TEFb y hnRNP están Todos estos cambios son fácilmente Los alelos de Rpb1 resistentes a amanitina
vinculados por un bucle de retroalimentación que observables bajo el microscopio y podrían servir pueden usarse como genes de selección eficaces
involucra el ARNnn de 7SK.13,14 como indicadores confiables de inhibición de la y convenientes para obtener transformantes de
transcripción. El ensamblaje de PSF en los DNC es células estables. Son particularmente
Cambios en la estructura nuclear probablemente la indicación más confiable de convenientes para obtener células que expresan
inhibición de la transcripción. subunidades Rpb1 etiquetadas que reemplazan la
La inhibición de la transcripción da como resultado endógena dirigida a la degradación por α-
cambios importantes en las estructuras nucleares. El α-RNA polimerasas II y III amanitina. La baja concentración a utilizar (2 μg /
nucleolo se reorganiza tras la inhibición de la inhibidoras de amanitina ml con células humanas) la convierte en una
transcripción. Concentraciones bajas de actinomicina opción relativamente económica.
D, que inhibe principalmente el RNAP I (es decir, la La α-amanitina es un péptido cíclico aislado de los hongos Amanita y responsable de
transcripción del ARNr), da como resultado la su extrema toxicidad. La amanitina se une con alta especificidad
TFIIH inhibidor y dealta afinidaden(K =
triptólido
segregación del centro fibrilar, el centro fibrilar denso 3-4 nM) cerca del sitio catalítico activo de RNAP II.43
elAtrapa una
inicio de la conformación
transcripción de la
y los componentes granulares del nucleolo.38 El enzima que previene la incorporación de nucleótidos y la translocación del transcrito.
bloqueo de la transcripción del ARNr (por oxaliplatino, 44,45 RNAP II tiene propiedades farmacológicas Laque incluyen
triptolida es unla triepóxido
polimerasa demás
diterpeno
I
doxorrubicina, mitoxantrona o metotrexato) o los sensible.46,47 RNAP antiinflamatorio, inmunomodula-III
extraído dees la cien
planta.veces menos sensible
Tripterygium wilfordii,
primeros pasos de procesamiento del ARNr (por que utilizado en la medicina tradicional china.
camptotecina o inhibidores de CDK9 como Tiene múltiples interesantes
flavopiridol o roscovitina) causa desintegración
nucleolar, mientras que el bloqueo de los pasos
tardíos del procesamiento del ARNr (por 5- actividades antiproliferativas y proapoptóticas
fluorouracilo, MG132 homoharringtonina) dejan los RNAP II. Sin embargo, la expresión (revisadas en la ref. 56). La triptolida inhibe la
nucleolos intactos.39 Las condiciones que inhiben la reducida de varios genes de clase III en transcripción a concentraciones
RNAP II (5 μg / ml de actinomicina D, DRB o presencia de amanitina podría atribuirse submicromolares.57 La mayoría de sus efectos
amanitina) dan como resultado la agregación de a su regulación por RNAP II.48,49 RNAP I es farmacológicos propuestos se relacionan con
varias proteínas del nucleoplasma en los casquetes insensible a la amanitina. la disminución de la expresión génica.56 y, por
nucleolares (para una descripción extensa de los La α-amanitina es activa en células vivas de tanto, podría atribuirse a la inhibición de la
efectos de la actinomicina en los casquetes plantas, nematodos, insectos y mamíferos. Las transcripción. La triptolida se une a la
nucleolares, ver ref. células de levadura son insensibles a la amanitina subunidad XPB de TFIIH.58 La actividad helicasa
40). Se distinguen dos tapas distintas, las tapas debido a una absorción deficiente del fármaco; sin dependiente de ATP de XPB es necesaria para
nucleolares oscuras (DNC) y las tapas embargo, elS. cerevisiae La enzima es muy el primer paso en la transcripción para abrir el
nucleolares claras (LNC). La fibrillarina podría susceptible. El polipéptido transportador de ADN de doble hebra y crear una "burbuja de
usarse como marcador de LNC. El factor de aniones orgánicos (OATP3) se ha identificado transcripción". La triptolida inhibe la actividad
empalme asociado al PTB (PSF) es como el transportador de captación de amanitina ATPasa de XPB, por lo que evita la formación
principalmente nucleoplasmático. Su en las células hepáticas humanas.50 de la "burbuja de transcripción" y, por lo tanto,
ensamblaje en DNC es espectacular y podría La captación de amanitina es lenta (varias el inicio de la transcripción. El tratamiento con
usarse como un indicador práctico de la horas). Es inusual observar efectos a corto triptolida es irreversible ya que se une
inhibición de la transcripción. La inhibición de plazo. Debe usarse en concentraciones mucho covalentemente a XPB e induce una rápida
RNAP III con altas concentraciones de más altas con células vivas (al menos 2 μg / ml) degradación dependiente del proteasoma de
amanitina promueve la reorganización de un que in vitro. El oleato de metil-amanitina, un RNAPII.58,59 Además, la transcripción del gen de
compartimento perinucleolar (PNC) distinto derivado químicamente modificado, permea clase I también se basa en TFIIH y es inhibida
del LNC y los PNC.41 Esta estructura está mejor y se puede utilizar en concentraciones por triptolida. Este inhibidor es activo a
enriquecida en proteína de unión a pistas de más bajas (0,010-0,1 μg / ml con células concentraciones muy bajas (IC = 109 nM para
50
polipirimidina (PTB) y varios ARN de clase III. humanas). la inhibición de la síntesis de ARN en células
Después de la inhibición de RNAP III, el PNC se La amanitina es un inhibidor irreversible HeLa). Se requiere menos de una hora para
fragmenta en una estructura punteada que porque desencadena la degradación de Rpb1, la inhibir la transcripción en células HeLa a una
forma una roseta con una estructura hueca. subunidad más grande de RNAP II.51 La α- concentración de 10 μM (Nguyen VT y
Los snRNP de empalme generalmente seamanitina
colocalizan con p80
promueve coilin en cuerpos
la poliubiquitinación de enrollados; pero,
Bensaude O, en lasno
datos células
publicados). Es muy
tratadas con inhibidores, los grupos de coilinRpb1
alrededor del nucleolo
en un extracto en las LNC
nuclear preparado y lasdesnRNP
a partir se agregan
específico, aunque entambién
distintas
podría unirse a la
motas nucleoplasmáticas.42 U1 snRNP sufre la re-localización
células detenidas en más espectacular;
fase S. selaagrupa
52,53 Sin embargo, vía alrededorun
policistina-2, decanal
los nucléolos
de calcio.60
en los DNC. afectando el desempeño de la enzima, derivados
de la proteasa aún noasegeneralizar.
ha identificado en células La triptolida se disuelve mal en agua, pero se
vivas. han desarrollado derivados solubles en agua
Se han aislado varias mutaciones prometedores.56 Debido a su selectividad y su
en Rpb1 que confieren resistencia acción muy rápida, esperamos el uso de
α-amanitina.54,55 A pesar de levemente triptolida o su hidrosoluble.

www.landesbioscience.com Transcripción 105


DRB y flavopiridol — quinasa Las eficiencias de varios inhibidores en un panel de A pesar del problema de la selectividad y las
Inhibidores que impiden la entrada quinasas se pueden encontrar en la referencia 72-74. limitaciones debido a su escasa solubilidad, DRB
en elongación de la transcripción Muchos estudios antiguos utilizaron DRB como sigue siendo un inhibidor muy popular. Sus
inhibidor de la caseína quinasa 2 o H-8 como principales ventajas son el uso común, la rapidez
Se requiere CDK9 para una expresión génica inhibidor de la PKA, y a menudo se extrajeron de acción y la reversibilidad.
eficiente de clase I y clase II. La transcripción es un conclusiones incorrectas. Estos compuestos se dirigen El flavopiridol se está volviendo popular
proceso de varios pasos, los RNAP se unen al ADN, el eficazmente a CDK9 y, por tanto, actúan como ahora porque es el inhibidor de CDK9
dsDNA se abre para formar una llamada "burbuja de inhibidores generales de la transcripción como DRB o conocido más eficaz.83 Su constante de
transcripción" y se inicia la transcripción. Para la flavopiridol. Se han diseñado nuevas pruebas de inhibición
I
(K = 3 nM) es varios órdenes de
mayoría de los genes de clase II, los factores de detección para proporcionar inhibidores más magnitud menor que la constante de unión
elongación negativos (NELF) y Spt5, también conocido selectivos que podrían convertirse en agentes de ATP (K = 36 μM). Se ha resuelto la
metro

como factor inductor de sensibilidad DRB (DSIF), farmacológicos útiles.75 estructura cristalina de CDK9 complejado
provocan pausas en RNAP II. Hay que mencionar la exquisita con flavopiridol.84 Está enterrado en el ATP.
poco después de la iniciación y prevenir el sitio de unión del método "químico-genético" selectivo después de inducir un alargamiento
estructural productivo de la transcripción desarrollado por Shokat y compañeros de trabajo.76 cambio en la quinasa. Sin embargo, también
ción.61 Se requiere la fosforilación de estos El sitio de unión de ATP de la quinasa que se va a inhibe de manera bastante eficiente (10 veces
factores mediante el factor de elongación de investigar se agranda mediante la sustitución de menos) el ciclo celular CDK1 y CDK4.74 así como
transcripción positiva (P-TEFb) para superar el un voluminoso residuo de aminoácido CDK8, la quinasa mediadora.85 Sus principales
obstáculo. CDK9 es la subunidad quinasa de P- seleccionado a partir de datos cristalográficos. La ventajas residen en su solubilidad en agua y su
TEFb. Por tanto, cualquier inhibidor de CDK9 quinasa modificada se vuelve altamente eficiencia a concentraciones submicromolares
evitará la transcripción productiva de la mayoría susceptible al naftil-ATP, que es demasiado (IC = 100-300 nM)50en células vivas.
de los genes. En general, la fosforilación de la grande para entrar en el sitio de unión del ATP e
serina 2 en las repeticiones CTD del heptapéptido inhibir cualquier quinasa natural. Este método se
de RNAP II disminuye fácilmente en las células ha utilizado con éxito con CDK de transcripción.77 Actinomicina D: intercaladores de ADN
expuestas a los inhibidores de CDK9.64,65 Se Sin embargo, requiere una estrategia de reemplazo Bloqueando la progresión
requiere la fosforilación de la serina 2 del CTD de genes que sea relativamente fácil de configurar en de ARN polimerasas
para el procesamiento previo al ARNm (empalme, organismos simples como la levadura, pero bastante
terminación y poliadenilación). Por lo tanto, el difícil en los mamíferos. Muchos intercaladores de ADN inhiben la
empalme se ve afectado.66 La transcripción de DRB (5,6-Dicloro-1-beta-Ribo- transcripción. Pero no todos lo hacen. Por
genes que codifican histonas cortas sin intrón y furanosil bencimidazol) se ha utilizado ejemplo, Hoechst 33,342 se intercala en el ADN
ARNrn <u> no se ve afectada por la inhibición de ampliamente como inhibidor de la transcripción. nuclear de las células vivas, pero no afecta su
CDK9.62,63 En cambio, el procesamiento del Se informó inicialmente que este compuesto transcripción de manera significativa.6 El
extremo 3 'de los genes que codifican histonas o inhibía la síntesis de ARN heterogéneo nuclear bromuro de etidio afecta la transcripción
ARNnn U se ve afectado.62,63 Los inhibidores de (ARNh).78,79 Rápidamente pareció causar una mitocondrial pero no nuclear.86
CDK9 también afectan un paso temprano en el terminación "prematura" de la cadena. CDK9 fue La actinomicina D o la dactinomicina es
procesamiento del ARNr (gen de clase I), lo que identificado como su principal objetivo.80 probablemente el inhibidor de la transcripción
altera la biogénesis del ribosoma.39 Sin embargo, también inhibe CDK7, la subunidad más popular. Comprende dos péptidos cíclicos
Muchos compuestos con posibles aplicaciones farmacológicas
quinasa inhiben
de TFIIH, con una eficiencia.
eficacia 72 El
3 veces menor. unidos entre sí por un derivado de fenoxazina. Se
"DSIF" mencionado anteriormente oCDK9. Varios inhibidores de CDK9 se encuentran aísla de la bacteria Streptomyces. La actinomicina
actualmente en ensayo clínico en quimioterapia,67 El
enfactor
particular contra
inductor la leucemiadelinfocítica
de sensibilidad DRB se D es también uno de los medicamentos de
crónica.68 Algunos de estos inhibidores de CDK9 serefiere
utilizan ocasionalmente
a DRB. como
Se ha resuelto inhibidores de
la estructura quimioterapia más antiguos, comúnmente
la transcripción (p. Ej., Roscovitina, también conocida comode
cristalina selicilib —La isoquinolina
CDK937complejado con DRB.81 Los utilizado para tratar el cáncer trofoblástico
sulfonamida (H-8),69 y SNS-302).70 Sin embargo, DRB y flavopiridol
átomos de cloro son los más
forman populares
enlaces paracon
de halógeno uso gestacional, el cáncer de testículo, el tumor de
en biología molecular / celular (ver más abajo). una región de bisagra característica de CDK9 Wilm, el rabdomiosacoma y el sarcoma de Ewing.
cerca del sitio de unión de ATP. La transcripción de las tres polimerasas
DRB debe usarse en concentraciones cercanas eucariotas se ve afectada. Sin embargo, la
a su solubilidad máxima (100 μM). Se transcripción de genes de clase I es, con mucho,
recomiendan las soluciones madre en DMSO y la la más sensible (0,05 μg / ml) seguida de la
homogeneización rápida en medios calientes. La transcripción de genes de clase II (0,5 μg / ml) y la
transcripción de RNAPII se detiene minutos clase III (alrededor de 5 μg / ml). La longitud de la
Todos los inhibidores de CDK9 compiten con después de la adición de DRB al medio de cultivo. unidad de transcripción y la composición de su
ATP por el sitio activo de la quinasa. Dada su La transcripción eficiente se reanuda en minutos secuencia de ADN son determinantes.87 La
conservación, la selectividad de los inhibidores de cuando el medio se reemplaza por medio fresco actinomicina se intercala preferentemente en
proteína quinasa es un tema importante que ha para eliminar el fármaco. Esta propiedad se ha secuencias ricas en GC y estabiliza los complejos
sido ampliamente discutido por Knight y Shokat.71 utilizado recientemente para medir las tasas de covalentes de ADN de topoisomerasa-I que
Comparación entre inhibición transcripción.82 previenen la progresión de la ARN polimerasa.88

106 Transcripción Volumen 2 Número 3


La actinomicina D genera roturas de doble para la lectura crítica del manuscrito. El 18. Barrandon C, Bonnet F, Nguyen VT, Labas V,
Bensaude O. La disociación dependiente de la
cadena en el ADN e induce la síntesis de autor recibió el apoyo de una beca de la transcripción del ARN de P-TEFb.HEXIM1.7SK se basa
moléculas de γ-histona H2AX que se Ligue Nationale contre le Cancer n ° en la formación de complejos de ARN de hnRNP.7SK.
Mol Cell Biol 2007; 27: 6996-7006.
acumulan en focos.89 La transcripción se RS10 / 75-15.
19. Gomes NP, Bjerke G, Llorente B, Szostek SA, Emerson
recupera ligeramente cuando la BM, Espinosa JM. Requisito genético específico para
actinomicina D se elimina del medio de Referencias la actividad de P-TEFb y la fosforilación de la ARN
1. Sugaya K, Sasanuma S, Cook PR, Mita K. Una mutación en la polimerasa II dentro del programa transcripcional de
cultivo, pero se requieren varias horas.90,91 p53. Genes Dev 2006; 20: 601-12.
subunidad más grande (catalítica) de la ARN polimerasa II
La actinomicina promueve la acumulación de y su relación con la detención del ciclo celular en la fase G 20. Choong ML, Yang H, Lee MA, Lane DP. Activación específica

RNAPII fosforilada por CTD11 probablemente (1). Gene 2001; 274: 77-81. de la vía p53 por actinomicina D en dosis bajas: una nueva
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debido a una actividad mejorada de P-TEFb.92 2810-8.
confiere estabilidad del ARN mensajero preferencial y
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3. Lam LT, Pickeral OK, Peng AC, Rosenwald A, Hurt EM, Giltnane JM,
22. Galluzzi L, Morselli E, Kepp O, Vitale I, Pinti M,
fármaco anticanceroso ampliamente utilizado. Kroemer G. Enlaces mitocondriales de p53. Señal
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Reticula el ADN bloqueando así la progresión de redox antioxidante 2011; En prensa.
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nucleótidos. La trabectedina o Yondalis (ET-743) dañan el ADN afectan de manera diferencial la retroalimentación de la
Estudio de genes con expresión alterada en ratones
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se desarrolla como un nuevo fármaco contra el envenenados con alfa-amanitina y evaluación de los
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