Métodos de extracción para la determinación de alcaloides: Morfina, Codeína, cocaína y

cafeína.

El método más común de extracción de la droga de la muestra era la extracción líquido-líquido. Sin
embargo, en años recientes, particularmente como el ensayo de drogas se hizo más común en
lugares de trabajo y en áreas atléticas, se comenzó a usar la extracción en fase sólida (solid-phase
extraction: SPE). En 1991 se examinaron varios laboratorios de ensayos de drogas certificados por
el Departmento de Salud y Servicios Humanos de EE.UU. y se encontró que hasta un 50% de todas
las extracciones hechas se basaban en la aplicación de la extracción en fase sólida.

Cocaína

La cocaína es un estimulante altamente adictivo presente en la naturaleza como un alcaloide de la

planta de coca (Erythroxylon coca o Erythroxylon novogranatense). Tradicionalmente, las hojas de
coca se mastican o se toman como infusión a modo de té. En los primeros años del siglo XX se
utilizaba cocaína purificada en la mayoría de los tónicos y elixires preparados para tratar una amplia
variedad de enfermedades.

Muestras

La muestra utilizada mayormente es la de orina, realizando una micción única cercana al momento
de consumo recolectando aproximadamente 20 ml de orina.

Reacciones generales de precipitacion

Las reacciones del color se deben a compuestos que tienen una estructura química concreta. El
color obtenido en un determinado ensayo puede variar en función de las condiciones en que se
realiza, la cantidad de sustancia empleada y la presencia de material extraño en la muestra. Los
reactivos que vayan a utilizarse en ensayos del color deberán comprobarse con sustancias conocidas
en el momento de su preparación. Debe realizarse un primer ensayo de prueba para evitar falsos
resultados positivos.

Hay que subrayar que en los ensayos del color los resultados positivos no son más que indicios de la
posible presencia de cocaína. Los ensayos del color utilizados para determinar la cocaína son
especialmente propensos a dar falsos positivos. Muchos otros materiales, a menudo inocuo y no
sometido a fiscalización con arreglo a la legislación nacional o a los tratados internacionales,
pueden dar colores similares con los reactivos del ensayo. Cierto número de esas otras sustancias
son o bien drogas sujetas a fiscalización y que suelen presentarse en forma de polvo blanco (por
ejemplo, la metacualona), o bien los anestésicos sintéticos locales con que frecuentemente se
sustituye a la cocaína en el tráfico ilícito. Los analistas deben confirmar esos resultados mediante el
empleo de otras técnicas.

El ensayo del color que se describe a continuación es conocido como ensayo de Scott (una
modificación del ensayo del tiocianato de cobalto).

1. Reactivo 1: Disolver 1,0 g de tiocianato de cobalto en 50 ml de ácido acético al 10%

(vol/vol), y añadir 50 ml de glicerina
2. Reactivo 2: Ácido clorhídrico (concentrado)
 3. Reactivo 3: Cloroformo

Método

Etapa 1: Colocar una pequeña cantidad (no más de 1 mg) del material sospechoso en un tubo de
ensayo. Añadir cinco gotas del reactivo 1 y agitar el tubo de ensayo durante diez segundos. La
cocaína y sustancias conexas producen un precipitado azul y una solución azul.

Etapa 2: Añadir una gota del reactivo 2 y agitar la mezcla durante algunos segundos. La solución
azul debería volverse rosa. Si el color azul no varía, añádase otra gota. Si el color sigue sin alterarse,
repetir el ensayo con una muestra más pequeña de material sospechoso.

Etapa 3: Añadir cinco gotas del reactivo 3 y agitar. Si hay cocaína presente, la capa inferior de
cloroformo se volverá de un intenso color azul, mientras que la capa superior adquirirá una
tonalidad rosa.

Resultados

Para considerar que un ensayo para la determinación de cocaína ha dado un resultado positivo es
necesario que se haya obtenido un resultado positivo en cada una de las etapas. Son pocas las
drogas, sujetas o no a fiscalización, que producen una secuencia de color similar.

Cromatografía en capa delgada (TLC)

La TLC es una técnica utilizada habitualmente para la separación e identificación de drogas

fabricadas ilícitamente. Se trata de una técnica económica, rápida, sensible (solo se requieren
cantidades inferiores al miligramo de la sustancia objeto de análisis), flexible en la selección de las
fases estacionaria y móvil y aplicable a una amplia variedad de sustancias, en forma de sal o de
base, desde los materiales más polares a los no polares.

Espectrofotometría L.U.V

La cocaína en medio acuoso ácido presenta dos máximos a 233 nm y 275 nm.

Codeína

La codeína es un analgésico narcótico obtenido del opio o por metilación de la morfina. La codeína
es metabolizada por O-demetilación y N-demetilación para dar morfina y norcodeína,
respectivamente, y por conjugación forma glucurónidos y sulfatos de ambas drogas y metabolitos.
La dosis fatal estimada de codeína en un adulto es 800 mg. Sin embargo la codeína es mucho menos
tóxica que la morfina y la muerte por codeína es rara.

Reacciones de color

Muestras: orina, contenido estomacal, restos de la escena.

Reactivos
  Liebermann
 Mandelin
 Marquis

Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en baño maría durante 3 min.

Resultados:

Colores observados frente a los reactivos de:

 Liebermann: negro
 Mandelin: verde
 Marquis: violeta

Cromatografía en capa delgada

La codeína se puede detectar en cromatografía en capa delgada, utilizando como fase móvil los
sistemas: CA; CC; CE y CAE.

Revelado

 Solución ácida iodoplatínica: positivo

 Dragendorff: positivo
 Marquis: violeta

Barrido al UV

En medio acuoso ácido la codeína presenta un máximo a 285 nm.

Cafeína

La cafeína es un alcaloide que está presente en el té, café, bebidas cola y otras bebidas. Una taza de
té o café contiene aproximadamente 100 mg de la droga. La cafeína es una sustancia con
propiedades estimulantes de SNC. Es también usado en el tratamiento del apnea neonatal. Las
reacciones metabólicas incluyen N-demetilación y oxidación a derivados del ácido úrico.
Aproximadamente el 85% de una dosis oral es excretada sin cambios en la orina. La cafeína es un
metabolito importante de la teofilina cuando los neonatos son tratados con esta última sustancia y
en adultos con hábitos de drogas del grupo de las xantinas.

Cromatografía en capa delgada

La cafeína se puede identificar por cromatografía en capa delgada, utilizando como fase móvil los
sistemas: CA; CB; CC; CD; CE.

Revelado

 Dragendorff: positivo
 Solución ácida iodoplatínica: positivo
Barrido al UV

Se puede obtener un espectro característico en medio ácido (figura 5.14) con máximo de absorción
a 273 nm.

Morfina

La morfina es el principal alcaloide del opio y es un potente analgésico narcótico. La acetilmorfina

(heroína, 3,6-O-diacetilmorfina) tiene dos a tres veces la potencia de la morfina y se obtiene
tratando la morfina (u opio en el caso de preparaciones ilícitas) con anhídrido acético. La
diamorfina se hidroliza rápidamente in vivo a 6-acetilmorfina y luego a morfina. La morfina es
también un metabolito de la codeína. Se metabolizan el 5% de la dosis de morfina a normorfina,
siendo la conjugación con el ácido glucurónico su vía mas importante. El producto principal es
morfina-3-glucurónido, pero también se forma la morfina-6-glucurónido. La morfina libre se
excreta en la orina en un 10% de la dosis, mientras que la morfina-3- glucurónido en un 75%. La
dosis fatal mínima estimada de morfina o diamorfina en un adulto no adicto a estos compuestos es
de 100-200 mg.

Reacciones de color

Muestras: orina, residuos de la escena.

Reactivos

 Cloruro férrico
 Liebermann
 Mandelín
 Marquis

Procedimiento: Agregar la solución del reactivo a la muestra o a una solución etanólica de la

muestra.

Resultados

 Cloruro férrico: azul

 Liebermann: negro
 Mandelín: azul-gris
 Marquis: violeta

Cromatografía en capa delgada

La morfina puede ser investigada por cromatografia en capa delgada en un extracto de orina,
contenido estomacal o residuos de la escena a pH 8,5-9. Como la mayor parte de morfina o
diamorfina se excreta como glucurónidos, si se hidroliza la orina puede aumentar la sensibilidad del
procedimiento. La morfina se puede identificar por cromatografía en capa delgada utilizando como
fase móvil los sistemas: CA, y CAE.

Revelador
  Dragendorff: positivo
 Solución de iodoplatínico acidificada: positivo
 Marquis: violeta

Barrido al UV

En medio acuoso ácido la morfina presenta máximos a 285, y en medio alcalino a 298 nm.