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Ensayo de Seliwanoff:

Soluciones patrón de carbohidratos: FRUCTUOSA Y GLUCOSA.


Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 2 ml del reactivo
de Seliwanoff, caliente en baño maría a ebullición por dos minutos. La formación de una
coloración roja es prueba positiva para cetosas.

Ensayo de Lugol
Soluciones patrón de carbohidratos: ALMIDÓN Y GLICÓGENO.
Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 0.2 ml de Lugol,
mezcle y observe la formación de los colores rojo para glicógeno, azul-violeta para almidón como
pruebas positivas.

PRUEBA DE FHELING
La prueba del fheling se basa en determinar si el azúcar posee poder reductor ya que los azúcares reductores tienen
una coloración rojiza debido al oxido cuproso que es forma por oxidación del azúcar por medio del catión Cu 2+.
Los azúcares utilizados son la glucosa, fructosa, xilosa y sacarosa.
El reactivo está formado por dos soluciones llamadas A y B. La primera es una solución de sulfato cúprico; la
segunda, de hidróxido de sodio y una sal orgánica llamada tartrato de sodio y potasio (sal de Seignette). Cuando se
mezclan cantidades iguales de ambas soluciones, aparece un color azul intenso por la formación de un complejo
formado entre el ion cúprico y el tartrato. Agregando un aldehído y calentando suavemente, el color azul
desaparece y aparece un precipitado rojo de óxido cuproso (Cu2O).

Prueba de Fehling: los reactivos de Fehling, Tollons y Benedict, son agentes oxidantes
moderados, oxidando a los grupos aldehídos al mismo tiempo que estos se reducen.

A 1 ml de la muestra dada se adiciona 2 gotas del reactivo de Fehling, el cual consiste


de dos partes: una parte esta constituida por una solución de Sulfato Cúprico, y la otra
por Hidróxido de sodio y Tartrato de Sodio Potasio (Sal de Rochelle). Al mezclar
cantidades iguales de estas dos soluciones, se forma un complejo soluble de Tartrato
Cúprico, de color oscuro, el cual proporciona una pequeña concentración de iones
Cúprico (Brewster, 1977). La presencia de carbohidratos reductores queda evidenciada,
ya que el grupo aldehído reduce la solución de Fehling y forman un precipitado rojo
ladrillo de Óxido Cuproso.

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El Hidróxido de Sodio y el Tartrato que contiene el reactivo de Fehling, son empleados,


ya que actúan como agentes quelantes, para que el ion cuproso no se precipite como
Hidróxido Cúprico e interfiera con la reacción.

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El Tartrato no puede formar complejos con el ión cuproso, de manera que la reducción
del ion cuproso a cúprico, al reaccionar con los carbohidrados, provoca la formación de
un precipitado rojo ladrillo, proveniente del óxido cuproso, cuando la reacción es
positiva. Pero, las Cetosas también dan positiva a la reacción de Fehling, ya que en
condiciones básicas se tautomerizan a aldosas, debido a un equilibrio ceto-enolico,
catalizado por el medio básico y la adicción de energía, en este caso representados por
el Hidróxido de Sodio y el calentamiento. En el caso de la fructosa, esta se isomeriza a
Glucosa y Manosa (Velázquez, 2008).

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