CALDO DE NITRATOS

Introdução:
Existem bactérias que têm a capacidade, através de processos anaeróbios, de
reduzir nitratos a nitritos (equação 1). Alguns desses microrganismos têm ainda
capacidade enzimática para reduzir os nitritos a amónia ou a azoto molecular
(equação 2). Estas características podem ser usadas na sua identificação.

Equação 1: NO3- NO2-

Equação 2: NO2- NH3+ ou N2

Finalidade:
O caldo de nitratos é uma prova bioquímica diferencial que tem como objectivo
identificar se um organismo é capaz de reduzir nitratos (NO3-) a nitritos (NO2-)

Composição:
Nitrato de potássio (KNO3) (1g/L), extracto de carne (3g/L), peptona (4g/L),
peptona proteose (1g/L)
 PROCEDIMENTO
Passo 1:
1

Adição de 2 reagentes (NI e

NII): ác. sulfanílico e α-
naftilamina (10 gotas de
cada)

Após incubação
(24 a 48h a 37º C)

Passo 2:

Adição um pequena quantidade

de zinco em pó* (10 mg)

3
 CALDO DE NITRATOS
Interpretação de resultados:
• Se o caldo de nitrato mudar para a cor vermelha após Passo 1
a adição dos reagentes (caso 1), a bactéria tem a 1
capacidade de reduzir os nitratos a nitritos (reacção
positiva);
• Se, após a adição de zinco (passo 2), o tubo de
ensaio se tornar vermelho (caso 2), significa que o tipo
de bactéria presente não consegue reduzir os nitratos
(reacção negativa);
• Se, após a adição de zinco (passo 2), o tubo de
ensaio mantiver a cor (caso 3), significa que a bactéria
reduziu os nitratos a nitritos e posteriormente a amónia
Passo 2 3 2
ou a azoto (reacção positiva).

Exemplo de bactérias Redução de nitratos

Streptoccocus pneumoniae Positivo (após adição de zinco) – tubo 3

Escherichia coli Positivo (após adição de NI e NII) – tubo 1

Staphylococcus epidermidis Positivo (após adição de NI e NII) – tubo 1

Pseudomonas aeruginosa Negativo – tubo 3

Sérgio Filipe Félix Teixeira nº090101080, 2º ano P1