Fijación de nitrógeno

La fijación de nitrógeno
(N2) es un proceso que
llevan a cabo algunos
microorganismos
procariotes, esta habilidad
da la ventaja de no
depender de otras
especies disponibles de
nitrógeno.

Fijación asimbionte.

Fijación simbionte.
 Fijadores de Nitrógeno
Quimiorganótrofos Dominio Bacteria: Azotobacter,
Azomonas, Klebsiella*, Mycobacterium
Aerobios de flavum, Azospirillum lipoferum, C.
freundii, Methylomonas, etc.
vida libre /
La mayoría de las Cianobacterias.
Anaerobios Fotótrofos
Alcaligenes, algunas especies de
facultativos Quimiolitótrofos Thiobacillus, Streptomyces
thermoautotrophicus.

BioN-Plus is a Nitrogen fixing Heterocistos. Microorganismos en la rizosfera.

bio-fertilizer. Azospirillum sp. Anabaena sp.
 Fijadores de Nitrógeno
Quimiorganótrofos Dominio Bacteria: Clostridium spp,
Desulfovibrio, Desulfotomaculum.
Anaerobios
Fotótrofos Dominio bacteria: Chromatium,
de vida libre Thicapsa. Clorobium, Rhodospirillum,
Rhodomicrobium, Rhodopseudomonas,
Rhodopila, Rhodobacter,
Heliobacterium, Heliobacillus,
Heliphilum.
Quimiolitótrofos Dominio Archaea: Methanosarcina,
Methanococcus, Methanobacterium,
Methanospirillum, Methanolobus.

Desulfotomaculum Rhodopseudomonas Methanospirillum

 Fijadores de nitrógeno
Fijadores simbióticos

Plantas leguminosas: Soya,
guisante, treból, etc., en
asociación con una bacteria
de los géneros Rhizobium,
Bradyrhizobium, Sinorhizobium
o Azorhizobium.

Plantas no leguminosas:
Alnus, Myrica, Ceanothus,
Comptonia y Casuarina; en
asociación con actinomicetos
del género Frankia.

Nódulos de Rhizobium en las

raíces de la soya.
 Complejo Nitrogenasa

N2 + 8e- + 8H+
2HN3 +H2

El complejo de fijación
de N2 está conformado
por dos nitrogenasas.
I. Dinitrogenasa, proteína
de FeMo.
II. Dinitrogenasa-
Reductasa, proteína de
Fe-S.
Ambas proteínas son
sensibles al O2.

Nature 460, 839-847(13 August 2009)

Proceso de
fijación
Los electrones son
llevados desde la
dinitrogenasa-
reductasa a la
dinitrogenasa con la
hidrólisis de ATP.
 Fijación simbiótica
de nitrógeno
La penetración de los tejidos de la
raíz puede ocurrir de dos diferentes
formas:
1. Independiente de la infección
intracelular de los cabellos de la raíz.
Rhizobium destruye la capa de
células que lo rodean para entrar a la
raíz, se reproduce y eventualmente
invade las células de la planta. En
algunos casos (no en todos) requiere
Algunas bacterias que son de factores de nodulación para este
capaces de fijar el nitrógeno proceso de infección.
en simbiosis con plantas
forman nódulos en las raíces 2. Modelo clásico de infección de los
de las mismas. cabellos de la raíz.
 Formación de nódulos
La planta libera
flavonoides que
inducen en la
bacteria (ej.
Rhizobium) la
expresión de los
factores de
nodulación, los
cuales inducen el
enrollamiento de
los cabellos de la
raíz, penetración
de la bacteria y
división de las
células corticales.
Nature Reviews Microbiology 12, 933-945, ( December 2004)
 Formación de nódulos

Nature Reviews Microbiology 7, 312-320 (April 2009)

Los hilos de infección se extienden por el cabello de raíz hacia las

células corticales de la raíz. Los hilos de infección ramifican en el
nódulo (que es formado por dividiendo células corticales), en el
cual Rhizobium es liberado.
 Interacciones y nodulación
En la infección participan proteínas de adhesión como las
ricadhesinas de algunas bacterias unen calcio en la superficie
de los cabellos de la raíz y las lectinas que son proteínas-
carbohidratos como receptores de las plantas.
Los polisacáridos de superficie forman estructuras complejas
macromoleculares en el interfaz de planta de bacteria y tienen
funciones estructurales y de señalización. La ubicación de estos
polisacáridos sobre la superficie de Rhizobium les da roles
importantes en el reconocimiento y la especificidad de una
simbiosis.
Para algunas leguminosas, polisacáridos de superficie
simbióticamente modificados son requeridos para el desarrollo
de la nodulación, y estos a menudo son controlados por la
cascada regulatoria de flavonoides-nod box–NodD.
 Expresión de los factores de
nodulación
Los favonoides inducen los factores de nodulación. Los sistemas de
secreción se forman en la bacteria. El SST3 para el complejo Rhc y
el SST4 para el complejo VirB-VirD4.
Las funciones de las proteínas secretadas son: formar los poros en
las células de las plantas y controlar las defensas de las células
para permitir la infección.

Nature Reviews Microbiology 7, 312-320 (April 2009)

Simbiosoma y bacteroides
Cuando los rhizobios se
multiplican dentro de las
células de la plata se
transforman en células
hinchadas, deformes y
ramificadas llamadas
bacteriodes (4).
El simbiosoma es una estructura
donde los bacteroides están
rodeado por porciones de la
membrana de la célula
vegetal.
La fijación de N2 comienza
cuando se ha formado el
simbiosoma.
 Fijación de N2 y O2
El amonio formado por la fijación es liberado a la planta para formar
los compuestos orgánicos nitrogenados.
La leghemoglobina captura el O2 para mantener los niveles ya que
el proceso de fijación se lleva a cabo en condiciones
microaerofílicas.

Nature Reviews Microbiology 2, 621-631 (August 2004)

 Ciclo del Nitrógeno
N2
Fijación del nitrógeno Aeróbico
Oxidación del amonio
NH4+ NO2-
N2O Asimilación
Amonificación del nitrito del amonio
Desnitrificación

Amoni-

Oxidación del nitrito

ficación

R-NH2

NO
Reducción
-
asimilatoria del NO 3

NO2- -
NO3-
Reducción desasimilatoria de NO 3
Anaeróbico
Formas del
Compuesto Estado de
nitrógeno oxidación
Nitrógeno -3
orgánico (R-NH2)
Amonio (NH3) -3

Nitrógeno gas 0
(N2)
Oxido nitroso +1
(N2O)
Oxido nítrico +2
(NO)
Nitrito (NO2-) +3

Dióxido de +4
nitrógeno (NO2)

Nitrato (NO3-) +5
 Amonificación
Durante la descomposición de los compuestos orgánicos
nitrogenados como aminoácidos y nucleótidos se libera amoniaco.
La mayoría de las plantas, animales y microorganismos pueden
realizar el proceso de conversión de nitrógeno orgánico en amonio
o amoniaco.

Ureasa
CO(NH2)2 + H2O Ureasa 2NH3 + CO2

Alanina Deshidrogenasa
 Amonificación

Aminoácido-Oxidasas

R-CHNH2COOH + Enz-FAD
α-cetoácido + NH3 + CO2 + Enz-FADH2

Enz-FADH2 + O2 no enzimático Enz-FAD + H2O2

Deaminasas no oxidativas
 Asimilación del amonio
La incorporación inicial de amoníaco a la materia orgánica viva
suele estar acompañada de reacciones de la glutamina
sintasa/glutamato sintasa o por la aminación directa de un alfa-
cetoácido para formar un aminoácido.

Glutamato deshidrogenasas (GDH)

α-cetoglutarato + NH4+ + NADH + H+ ↔ L-glutamato + NAD+
α-cetoglutarato + NH4+ + NADPH + H+ ↔ L-glutamato + NADP+

Glutamina sintasa (GS) – Glutamato sintasa (GOGAT)

L-glutamato + NH4+ + ATP → L-glutamina + ADP + Pi
α-cetoglutarato + L-glutamina + NADPH + H+ ↔ 2L-glutamato + NADP+

α-cetoglutarato + NH4+ + ATP + NADPH + H+ ↔ L-glutamato + ADP + Pi + NADP+

 Asimilación del amonio
Los iones amonio pueden ser
asimilados por numerosas plantas
y por muchos microorganismos
que los incorporan a sus
aminoácidos y a otros
compuestos bioquímicos que
contienen nitrógeno.

Alanina deshidrogenasa
Piruvato + NH4+ + NADH + H+ ↔ L-alanina + NAD+
Piruvato + NH4+ + NADPH + H+ ↔ L-alanina + NADP+

Aspartasa
Fumarato + NH4+ ↔ L-aspartato
 Aminotransferasas
aminoácido + enzima
α-ceto ácido + E-NH2

Aspartato + α-cetoglutarato ↔ oxaloacetato + glutamato

Alanina + α-cetoglutarato ↔ piruvato y glutamato