UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE

GROHMANN FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA-
MICROBIOLOGÍA

CURSO: FICOLOGIA
INFORME 04
TECNICAS DE COLORACION

NOMBRE: Sandra Adela Del Carpio Azañero

CODIGO: 2017-118008
AÑO ACADÉMICO: 4to año
FACULTAD: Ciencias
ESCUELA PROFESIONAL: Biología - Microbiología
TACNA-PERU
2021
 INFORME 04
TECNICAS DE COLORACION

I. INTRODUCCION:

Los colorantes para las células generalmente deben ser soluciones acuosas

para lo cual se disuelve el producto con un poco de alcohol, luego se añade

agua destilada porque el exceso de alcohol extrae el agua de las células y

esta solución debe estar dentro del 1% actuando mejor las formas más

diluidas que se indican en las fórmulas respectivas.[ CITATION Tom07 \l 3082 ]

Las algas como grupo poseen características homogéneas en términos

morfológicos, fisiológicos y ecológicos.

Por medio de algunas características tanto morfológicas (color del talo)

como químicas (reactivas y colorantes) podemos diferenciar a qué grupo

algal pertenece

II. OBJETIVO:

 Identificar los tipos de tinciones en la caracterización morfológica de

algas.

III. MARCO TEORICO:

El estudio de las algas, como el de los vegetales en general, requiere un

conocimiento estructural externo e interno. El primero puede efectuarse a

simple vista, mientras que para el segundo es necesario un estudio

microscópico observando cortes o preparaciones adecuadas preparadas por

técnicas histológicas.

La micro técnica histológica puede considerarse que nació con la

introducción de los fijadores aproximadamente en el año de 1830 cuando

Jacobson) usó el ácido crómico para este fin. En 1849, Harting introduce la

coloración por el carmín y Waldeyer obtiene, en 1863, la hematoxilina del

palo de campeche (Haematoxylon campechianimi). En este mismo año

Benecke usa las anilinas para colorear. Estas técnicas quedan completas en

1870, cuando His introduce el micrótomo. Las modificaciones que han

sufrido estos métodos han sido notables y actualmente se usan distintos tipos

de fijadores y colorantes

Los métodos de tinción se utilizan en forma directa con las muestras del

paciente o se aplican a los preparados obtenidos a partir del desarrollo de los

microorganismos en cultivos. La preparación década muestra incluye la

aplicación de alguna parte de ella un sobre una porta objeto (es decir,

preparación del ¨frotis¨) para una evaluación microscópica. Por lo general las

muestras se colocan sobre porta objetos con un hisopo que contiene el

material del paciente o con una pipeta dentro de la cual se encuentra la

muestra de líquido aspirado.

IV. PROCEDIMIENTO:

IV.1. Preservación:

Para el posterior estudio del material colectado es necesario conservar las

algas con el mínimo grado de alteración posible.

Para esto se pueden utilizar las siguientes sustancias conservadoras

FORMALINA AGUA DULCE AL 3%

Formalina 30 ml
Agua de la localidad (de

preferencia) o agua 970 ml

corriente (de la llave):

 Solución Carnoy: etanol y ácido acético glacial 3:1

GLUTERALDEHIDO AL 3%

Gluteraldehído: 30 ml

Agua de la localidad (de 970 ml

preferencia) o agua

corriente (de la llave):

IV.2. Preparaciones microscópicas:

a) Preparaciones frescas:

 Solo se usan durante una práctica de corta duración y

generalmente se hacen a partir de material vivo y posteriormente

se lavan.
  Mediante un gotero se toma una submuestra concentrada del

material biológico a observar, se coloca dos o tres gotas del

concentrado en un portaobjetos.

 Colocar el cubreobjetos de manera oblicua haciendo que la

muestra corra por el extremo que está en contacto con el

portaobjetos y dejarlo caer de un solo golpe, sin levantar el

extremo de contacto para evitar la formación de burbujas.

b) Preparaciones semipermanentes

 Coloque una gota de colorante y tres del medio de montaje

elegido.

 Con la ayuda de las pinzas y agujas de disección coloque los

cortes en el colorante y medio de montaje, déjelos reposar

durante un minuto.

 Coloque el cubreobjetos, teniendo cuidado que no forme

burbujas.

 Proceda a la identificación de la muestra, si es necesario

mediante ligeros golpecitos sobre el cubreobjetos, trate de

acomodar los cortes de tal manera que faciliten su identificación.

 Pasados ocho días, si es necesario agregue más colorante con el

medio de montaje o bien selle los bordes con pintura de uñas

transparente.

c) Preparaciones permanentes

 Colocar dos gotas de miel con fenol en un portaobjetos.

 En un extremo de la gota de miel colocar una pequeña gotita del

colorante a utilizar.
  Mediante una aguja de disección arrastrar el colorante hacia la

miel y revolver hasta homogenizar el color.

 Agregar una gota de muestra concentrada sobre la miel coloreada

y homogenizar mediante una aguja de disección, sin agitar fuerte.

 Colocar el cubreobjetos sin llegar a formar burbujas.

V. RESULTADOS:

a) Preparaciones frescas:

- Género: Euglena
- Orden: Euglenales
- División: Euglenophyta
- Forma : Solitaria o colonial
- Estructura:
Presenta un estigma
Contiene periplasto rígido
Presenta flagelos para su
locomoción

- Género: Skeletonema
- Orden: Centrales
- División: Heterokontophyta VI. CONCLUSION:
- Forma : Solitaria o colonial
- Estructura: Gracias a la práctica realizada se
Frustulo de contorno circular.
logró identificar los tipos de
Presenta cerdas que unen a las células.
tinciones en la caracterización

morfológica de algas, además de

las diferentes preparaciones microscópicas que existen para el correcto

estudio de las macro y micro algas.

VII. BIBLIOGRAFÍA

 Saenz, T. A. (2007). Tecnicas de coloraciones de celulas y tejidos en

Microbiologia, Parasitologia e Histologia.

 Técnicas de tinción. (2016). Slideshare.net.

https://es.slideshare.net/awui000/tcnicas-de-tincin-62323326

 Equipo 5. (2021, July 15). Métodos y Técnicas de Tinción. Blogspot.com.

http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/10/metodos-y-

tecnicas-de tincion.html

VIII. CUESTIONARIO:

VIII.1. Explicar la técnica de montaje en fresco

Una preparación en fresco simple ("entre porta y cubre") consiste en

colocar una gota de líquido con los microorganismos sobre un

portaobjetos y a continuación cubrirla con un cubreobjetos.

Este método se utiliza comúnmente, por ejemplo, para ver los

organismos microscópicos que crecen en el agua del estanque o de otros

medios líquidos, especialmente cuando el estudio de su movimiento y el

comportamiento.

Se debe tener cuidado para eliminar las burbujas de aire que puedan

interferir con la visualización y dificultar los movimientos de los

 organismos. También se utiliza para investigaciones rápidas que no se

requiera un registro permanente, así como para examinar líquidos

fisiológicos como la sangre, la orina, la saliva, el semen, y la secreción

vaginal.

VIII.2. Mencionar los tipos de colorantes

VIII.2.1. De acuerdo a su origen:

a) Naturales: Colorantes obtenidos a partir de la naturaleza ya

sea de fuentes animales o vegetales. Ejemplo: carmín,

hematoxilina.

b) Artificiales: Colorantes obtenidos mayormente como

derivados del alquitrán de hulla. Ejemplo: cristal violeta,

safranina, etc.

VIII.2.2. De acuerdo a su composición química:

a) Básicos: Colorante que en su parte cromofora llevan carga

eléctrica positiva, la que tendría una fuerte afinidad por los

grupos electronegativos que normalmente presentan las

bacterias en su protoplasma como los ácidos nucleicos y

derivados. Ejemplo: fucsina básica, cristal violeta.

b) Ácidos:

Colorantes que en su parte cromofora llevan cargas

eléctricas negativas en la que tendría fuerte afinidad por los

grupos electro positivos de la célula (citoplasma). Ejemplo:

Anaranjado de metilo, ácido fénico.

c) Neutro: Resulta de la combinación de los colorantes ácidos y

básicos. Ejemplo: Giemsa, Wright.

VIII.3. Componentes Gelatina de Kaiser o Gelatina glicerinada (medio

montaje)

Es un medio de montaje acuoso compuesto por: gelatina, glicerina y

fenolque

Es utilizado sobre todo para montar preparados histológicos teñidos (p.

ej. tinción del azul Nilo).

El valor pH del producto se encuentra en el área neutra.

Antes del uso, el medio de montaje es derretido en el armario térmico a

unos 60 °C para aplicarlo después al preparado sirviéndose sencillamente

de una varilla de vidrio