SIEMBRA

OBJETIVOS: Aprender las diferentes técnicas de siembra para el

aislamiento de los diferentes microorganismos y su posterior identificación

CONCEPTO: La siembra es un medio que tiene como finalidad poner de manifiesto la

presencia de microorganismos en la muestra. Cuando se trata de un medio de cultivo
sólido, mediante la técnica de siembra por estrías se separan unos microorganismos de
otros para obtener así colonias diferenciadas

MATERIAL:
Asa de platino calibrada
Pipeta Pasteur
Mechero de Bunsen
Cajas de Petri con Medios de cultivo : habitualmente se utiliza un medio enriquecido
básico al que se van añadiendo medios selectivos sólidos ó líquidos para la búsqueda
de las distintas especies/géneros que pueda contener la muestra .
Incubación : Varian , pero la mayoría de los microorganismos crece a 35-37ºC.

TECNICA :

El ansa de inoculación debe esterilizarse flameándola en el mechero. Una vez realizado

este paso, NUNCA SE DEBE APOYAR EL ANSA SOBRE LA MESADA, ésta debe
mantenerse cerca de la llama para permitir que se enfríe.

Agotamiento por estría en placa:

Técnica de dilución en superficie que implica esparcir el inóculo, con un ansa, sobre la
superficie de una placa con medio sólido.
Existen varios procedimientos. En particular realizaremos las estrías en cuadrante (ver
figura).
1. Flamear y enfriar el ansa. Colocar una ansada del cultivo en la superficie del agar
(área 1), dispersar rápida y suavemente el inóculo sin arar el agar. Cerrar la placa.
2. Flamear y enfriar nuevamente el ansa, rotar la caja de petri 90º. Tocar con el ansa 2 o
3 veces un extremo del área 1 y hacer varias estrías a través del área 2. En ningún
momento el ansa deberá tocar nuevamente el área 1.
3. Flamear y enfriar nuevamente el ansa y rotar la caja de petri 90º. Repetir el
procedimiento anterior estriando el área 3.
4. Rápidamente, sin cerrar la caja, y sin volver a flamear el ansa, girar la caja de petri 90º
y realizar la última estría (área 4), en forma abierta. Evitar que el ansa toque
cualquiera de las áreas previamente estriadas.
5. Rotular la base de cada placa de petri con rotulador indeleble, indicando: medio de
cultivo, microorganismo inoculado, fecha y nombre.
6. Incubar en estufa a 30ºC-37ºC durante 24-48 hs.
7. Una vez obtenidas las colonias observar la morfología de las mismas y describirlas.
El flameo del ansa, en los puntos indicados, es para efectuar la dilución del cultivo a fin
que unos pocos microorganismos se encuentren estriados en cada área.
 2
1

37ºC – 24HRS

SIEMBRA EN TUBOS CON CALDO Y AGAR NUTRITIVO

1.- Sembrar un cultivo puro diferente en cada uno de los 2 tubos con caldo nutritivo y
en tubo con agar nutritivo inclinado .
2.- Sembrar con el asa extendida los cultivos en forma recta.