UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

Calidad, Pertinencia y Calidez

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD

BIOQUÍMICA Y FARMACIA
Histología

Integrantes:
● Jessenia Morán
● Derick Pineda
● Yamileth Solano
● Bryan Pardo
● Jhon Muñoz
● Carlos Cuenca
● Henry Carrazco
● Lizbeth Gordillo
● Yulexy Romero
● Victoria Orellana

Curso: Tercer Semestre “A”

Fecha: Día 3, 10 de junio de 2021
Tema: Microscopio y métodos histológicos

Responda brevemente las siguientes preguntas:

1. ¿Qué es poder de resolución?

Se define como la capacidad de distinguir como imágenes separadas dos puntos
cercanos, y se mide utilizando como unidad la inversa del límite de resolución
(poder de resolución = 1/límite de resolución).
2. ¿Quiénes inventaron el microscopio compuesto?
Zachary y Francis Janssen

3. ¿Quiénes propusieron la teoría celular?

Matthias Schleiden (1804--1881) y Theodor Schwann (1810-- 1882)

4. ¿Cuáles son los tres postulados de la teoría celular?

1. La célula es la unidad anatómica y estructural que constituye a todos los seres vivos.

2. La célula es la unidad fisiológica de los seres vivos

 3. Las células tienen su origen en otra célula semejante y se forman por la división celular
de la misma.

5. Describa brevemente los componentes del microscopio óptico común

1. Oculares.

Son los sistemas de lentes más cercanos a la mira del observador. Son cilindros huecos en la
parte superior del microscopio provistos de lentes convergentes.

2. Estativo o brazo

Es la pieza de la parte posterior del microscopio. Sujeta al tubo en su parte superior y en la

parte inferior se acopla al pie del aparato.

3. Carro.

Permite mover la muestra con un movimiento ortogonal, hacia adelante y atrás, o de derecha a
izquierda.

4. Tornillo macrométrico.

hace que el tubo del microscopio se desliza verticalmente gracias a un sistema de cremallera.
Estos movimientos permiten que se enfoque rápidamente la preparación.

5. Tornillo micrométrico.

Este mecanismo ayuda a enfocar la muestra con un enfoque exacto y nítido a través del
movimiento casi imperceptible de la platina.

6. Tubo.

Tiene forma cilíndrica y por dentro es de color negro para evitar las molestias del reflejo de la
luz. Al final del tubo es donde se colocan los oculares.

7. Revólver.

Es una pieza giratoria en la que se enroscan los objetivos. Cuando giramos este dispositivo, los
objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo.
8. Objetivo.

Son las lentes que se regulan mediante el revólver. Son un sistema de lentes convergentes en
las que se pueden acoplar varios objetivos.

9. Condensador.

Es un sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra en la muestra
proporcionando mayor o menor contraste.

10. Platina.

Es la pieza metálica plana en la que se coloca la muestra a observar.

11. Diafragma.

También conocido como iris, a través de este se puede regular la intensidad de la luz abriéndolo
o cerrándolo.

12. Pie.

Constituye la base del microscopio y su apoyo principal.

6. ¿Cuáles son las partes de un microscopio?

1. Oculares.

2. Estativo.

3. Carro.

4. Tornillo macrométrico.

5. Tornillo micrométrico.

6. Tubo.

7. Revólver.

8. Objetivo.

9. Condensador.
10. Platina.

11. Diafragma.

12. Pie.

7. Describa brevemente el sistema de iluminación.

El sistema de iluminación está conformado por 2 partes del microscopio que son el
condensador y diafragma que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria
para efectuar la observación a través del microscopio.
8. Enliste 10 tipos de microscopios
○ Microscopio de luz ultravioleta.
○ Microscopio electrónico de transmisión (MET).
○ Microscopio de interferencia o contraste interferencial diferencial (DIC).
○ Microscopio petrográfico o de polarización.
○ Microscopio electrónico de barrido y transmisión.
○ Microscopio de fuerza atómica (scanning probe microscopy, SPM).
○ Microscopio en campo oscuro.
○ Microscopio de contraste de fases.
○ Microscopio de fluorescencia.
○ Microscopio electrónico de barrido (MEB).
9. Mencione el procedimiento de la iluminación Köhler
Es una técnica para iluminar uniformemente al espécimen desde una fuente de
iluminación no uniforme, del cual consiste en regular la marcha de los rayos de la luz
centrando la mayor intensidad de luz y cubriendo exactamente el diámetro frontal de
cada lente.

10. Mencione brevemente el procedimiento para la limpieza del microscopio.

Materiales
• Un trozo de tela o paño suave y limpio que no suelte pelusas.
• Líquido especial de limpieza de lentes. Sirve el líquido que venden en las ópticas para
limpiar los cristales de las gafas.
• Papel suave para la limpieza de lentes. Es el que se utiliza en las ópticas para limpiar
las lentes de las gafas. Si no podemos adquirir este tipo de papel podemos utilizar papel
absorbente suave o un paño de seda suave.
• Una gamuza muy fina, la podemos encontrar en ópticas o peleterías.
 • Una pera de caucho para soplar aire en los rincones menos accesibles. Es fácil
encontrarla en un laboratorio o fabricarla con una pipeta.
• Un pincel de cerdas muy suaves. Puede servir un pincel para pintar cuadros o un pincel
de pelo de camello.
• Bolas de silica en gel. Se utilizan para absorber la humedad. Son muy efectivas y
protegen el aparato de los cambios de temperatura. Es un material que cambia de color
cuando está saturado, pasa de tener tonalidad azul a rosa cuando necesita ser renovado.

Los elementos ópticos

• Para limpiar los elementos ópticos externos, que son los elementos que están en
contacto con el ambiente, utilizaremos el pincel de camello para remover las partículas
de polvo que se encuentren depositadas en las diferentes partes del microscopio. Utiliza
el pincel para frotar todas las partes para así desprender los restos incrustados de
suciedad y polvo.
• Seguidamente utiliza la pipeta y la pera para soplar chorros de aire y eliminar los restos
de polvo que estén en el microscopio. Una vez que hayas soplado por todos las partes
comprueba que estén limpias y libres de polvo, pelusas o pelos.
• Para las zonas que se resistan al pincel de camello utiliza una gamuza muy fina y frota
con movimientos circulares sin ejercer mucha presión las zonas que aun estén sucias.
• Para eliminar algunas manchas puedes humedecer la gamuza en líquido limpiador
especial para lentes y frotar con la gamuza humedecida en las manchas más difíciles.
• Una vez limpio todo el microscopio pasa un papel suave para la limpieza de lentes para
secar todo el aparato y no dejar ningún resto de humedad.
• Para limpiar los elementos ópticos externos es un procedimiento similar pero no es
aconsejable realizarlo de forma casera ya que después ajustar todas las piezas del
microscopio puede ser una tarea muy compleja y delicada.

Para el cuerpo

• Para limpiar el cuerpo del microscopio utilizaremos una mezcla de agua con jabón. Nos
ayudaremos de una esponja suave o una bayeta para frotar la suciedad adherida.
• Antes de pasar una bayeta podemos rascar la suciedad adherida al cuerpo del
microscopio con un cepillo pequeño de cerdas o un cepillo de dientes
11. ¿Qué es la técnica histológica?
 Un conjunto de operaciones al que se somete una materia organizada (tejido biológico),
a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio, posibilitando la
observación de estructuras no visibles al ojo humano.

12. ¿Qué es la fijación?

Fijar un tejido es preservar sus características morfológicas y moleculares lo más
parecidas posibles a las que poseía en su estado vivo. O, dicho de otra manera, la
fijación disminuye los cambios en los tejidos desde que se obtienen hasta que se
observan, tanto en organización estructural como en composición química.
13. ¿Qué es la apertura numérica (AN)?
La apertura numérica brinda una indicación de la capacidad de recolección de luz y
poder de resolución (a una distancia fija) de un objetivo. La A. N. de un objetivo está
impresa en el objetivo junto con otras especificaciones del objetivo. Esta puede variar
desde 0.04 para objetivos de bajo aumento hasta 1.3 o 1.4 para objetivos apocromáticos
de altos aumentos para uso con aceite de inmersión.
14. ¿Cuáles son las cualidades que deben tener los fijadores?
1.Actuar con rapidez, matando y fijando a las células antes de que aparezcan los
fenómenos agónicos o post-mortem
2. Poseer alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta hasta en las capas
profundas de la pieza a fijar.
3. Conservar, en lo posible, los detalles estructurales que presentaban in vivo.
4. Permitir o favorecer el empleo de los procedimientos necesarios para su observación
ulterior
5. Impedir la desaparición de los elementos solubles durante la fijación o después de
ella.
6. No provocar o impedir la producción de estructuras artificiales.
7. No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.

15. ¿Cuáles son los fijadores más utilizados?

· Formaldehído
· Glutaraldehído
· Ácido acético
· Etanol, metanol, acetona
· Formol
16. ¿Cuáles son los cinco tipos de microtomos?

Micrótomos de deslizamiento,

Micrótomos de rotación

Micrótomos de congelación

Ultra micrótomo

Micrótomos laser

17. ¿Cuáles son los métodos de coloración?

Técnica de tinción diferencial se utilizan para distinguir entre tipos de
microorganismos. La técnica de tinción diferencial consta de dos etapas: una tinción
simple seguida de una tinción de contraste. En la tinción de contraste se utiliza otro
colorante que tiñe (y por tanto, revela) las células no teñidas por el primer colorante.
Estas tinciones son muy utilizadas en microbiología

18. Enliste los pasos de la técnica de hematoxilina y eosina (HE)

a) Después de obtenido el corte se procede a desparafinar e hidratar de la siguiente
manera
1. Colocar los portaobjetos con el corte en la estufa a 58 _C de 15 min a 1
h.
2. Pasar por xilol 1 durante 5 min.
3. Pasar por xilol 2 durante 5 min.
4. Colocar en alcohol de 100% por 3 min.
5. Sumergir en alcohol de 96% por 3 min.
6. Pasar por alcohol de 80% durante 3 min.
7. Pasar por alcohol de 70% durante 3 min.
8. Pasar por agua destilada durante 3 min para hidratar completamente
b) Batería de tinción:
1. Hematoxilina de 5 a 10 min.
2. Agua corriente por 1 min.
3. Carbonato de litio a 0.5% para virar el color.
4. Agua corriente por 30 seg.
5. Alcohol ácido, una sumergida rápida (menos de 1 seg) para remover el
exceso de hematoxilina.
6. Agua corriente por 30 seg.
 7. Alcohol de 50% por 30 seg.
8. Eosina por 30 seg.
c) Batería para deshidratación y aclaramiento:
1. Sumergir en alcohol de 70% durante 3 min.
2. Sumergir en alcohol de 96% durante 3 min.
3. Colocar en alcohol de 100% durante 3 min.
4. Colocar en alcohol de 100% durante 3 min.
5. Sumergir en xilol 1 durante 3 min.
6. Sumergir en xilol 2 durante 5 min.
d) Montaje con resina EntellanR:
1. Limpiar el portaobjetos alrededor del corte.
2. Depositar sobre el mismo una gota de resina EntellanR disuelta en xilol.
3. Cubrir con un cubreobjetos.
4. Dejar secar entre 10 y 30 min antes de su observación al microscopio.
19. ¿Qué es la metacromasia?
Es el cambio que ocurre en el color que exhiben ciertos colorantes utilizados en tinciones
histológicas cuando se unen a determinadas sustancias presentes en estos tejidos,
llamadas cromotropos.

20. ¿Cuáles son los fijadores más apropiados para la microscopía

electrónica?
La mayor parte de las técnicas de tinción matan a las células.
Técnica que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible.
Permiten alcanzar ampliaciones hasta 5000 veces más potentes que el M.O.
21. Realice un dibujo o esquema de un microscopio óptico común y señale
las partes que lo componen.

13.Ocular

10.Tubo

7.Brazo

4.Objetivo

12.Pinza
5.Tonillo
9.Condensador macrométrico

11.Foco 3.Tornillo
micrométrico