Espectrometrı́a

Ley de Beer
Curso 2011-2012

1. Fundamento fı́sico
1.1. Ley de Beer-Lambert
En esta práctica estudiaremos el proceso de absorción de la radiación elec-
tromagnética por parte de disoluciones de sustancias colorantes. La magnitud
que relaciona la potencia transmitida con la potencia incidente se denomina
absorbancia(A) y viene definida por la expresión:
Pi
A = log (1)
Pt
según esta ecuación la absorbancia es una magnitud adimensional.
La ley de Beer-Lambert nos relaciona la absorbancia con la concentración
de soluto que analizamos en la muestra, la ecuación correspondiente es:

A = εbc (2)
donde ε es la magnitud conocida como absortividad molar; suponiendo que
la distancia que recorre la radiación en la cubeta de la muestra b se expresa
en centimetros y c representa la concentración en moles por litro, las uni-
dades para la absortividad serán litro · cm−1 · mol−1 puesto que como ya se
comentó A es una cantidad adimensional.

1.2. Espectro de absorción de una sustancia colorante

La representación gráfica de la absorbancia A en función de la longitud
de onda λ para una sustancia determinada es lo que se denomina espectro
de absorción. Por lo general el comportamiento de estas gráficas presenta
un máximo destacado y será en esta zona de máxima absorbancia donde
realizaremos los cálculos, pues nos proporciona mayor sensibilidad a la hora
de determinar la concentración que es el objetivo último de la práctica.

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 En nuestro caso particular, el objetivo de esta parte de la práctica es la
determinación de la concentración de una disolución problema de permanga-
nato potásico. Debido al color púrpura de la disolución, supondremos que el
máximo de absorbancia lo dará en la zona del color complementario en este
caso en el entorno verde con longitudes de onda comprendidas en el intervalo
de 500 − 560 nm.

1.3. Obtención del espectro de absorbancia

Antes de empezar las medidadas, conectaremos el espectrofotómetro y
esperamos el tiempo suficiente para que la óptica se estabilice.
En primer lugar procederemos a efectuar el blanco correspondiente a
nuestro problema depositando agua destilada en la cubeta de muestras y
ajustando este valor al cero de absorbancia.
Una vez obtenido esta medida, procedemos a colocar nuestra disolución
problema en la cubeta y empezamos las medidas de absorbancia en un valor
de 10 nm por debajo de lı́mite inferior para esta sustancia (490nm).
Repetimos el proceso para una longitud de onda 10 nm superior a la
anterior volviendo a efectuar el blanco como en el caso anterior, este proceso
se repetirá hasta alcanzar un valor de 20nm superior al de referencia en
nuestro intervalo (580nm).
La representación gráfica de la absorbancia (A) con respecto a la longitud
de onda (λ) nos da el espectro de absorbancia buscado.
El valor de máxima absorbancia será el que utilizaremos para determinar
la concentración de la disolución problema.

1.4. Obtención de la recta de calibrado

En este apartado obtendremos la recta de calibrado, es decir el ajuste de
la absorbancia en función de la concentración para poder resolver el valor de
la disolución problema.
Procedemos de la siguiente manera; en primer lugar preparamos una di-
solución 0, 01 M de permanganato potásico, a partir de está, obtendremos
mediante dilución cuatro concentraciones en matraces distintos de 2x10−5 M,
6x10−5 M, 1x10−4 M y 4x10−4 M.
La medida de la absorbancia para cada una de estas concentraciones se
realizará según el protocolo del apartado anterior, es decir se procedera a
realizar el blanco antes de cualquiera de las cuatro mediadas y todas ellas se
realizarán al valor de longitud de onda anteriormente calculado, limpiando
cuidadosamente la cubeta en cada caso.

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 Con los resultados obtenidos se realizará el ajuste lineal de la absorban-
cia frente a la concentración, una vez determinada la ecuación de la recta,
mediremos la absorbancia de la disolución problema y calcularemos la con-
centración por sustitución en la ecuación obtenida.

2. Polarimetrı́a y actividad óptica

El poları́metro es un instrumento que nos permitirá calcular la activi-
dad óptica que presentan distintas sustancias, el calculo de la constante de
actividad especı́fica lo realizaremos mediante ajuste lineal de los resultados
obtenidos.
La actividad óptica es la propiedad de ciertas sustancias en disolución,
de cambiar la orientación del vector campo eléctrico al ser atravesadas por
este. La ecuación que nos relaciona las distintas magnitudes es:

c l λ20
α=Γ (3)
c0 l0 λ20
donde las magnitudes con subı́ndice representan los valores standar de con-
centración, longitud de la muestra y longitud de onda empleada cuando ob-
tenemos el valor de Γ para el ángulo de rotación.
Nuestro método consistira en determinar el factor Γ a partir de medidas
de ángulo rotado para distintas concentraciones, representaremos el valor α
obtenido en función de la concentración, la pendiente de la recta obtenida
contendrá el factor buscado Γ

2.1. Procedimiento experimental

En primer lugar determinaremos el nivel de cero, colocando uno de los
tubos de muestra vacio y limpio en el brazo del polarimétro. Giraremos la
escala graduada hasta observar por el ocular la transición entre la banda
oscura ocupando la zona central y su paso a las zonas laterales. La posición
intermedia entre ambas donde observamos un campo brillante uniforme nos
dara el valor del cero sobre la escala que tomaremos como referencia de
nuestras medidas.
Para preparar las distintas disoluciones utilizaremos lactosa que disolve-
remos en agua en distintas proporciones. En primer lugar disolveremos 10
gramos de lactosa en 20 centimetros cúbicos de agua destilada, una vez con-
seguida la disolución, dispondremos esta en el vial de medida del poları́metro.
Una vez realizada la primera medida añadiremos a la primera disolución
10 centimetros cúbicos de agua destilada y repetiremos el proceso de medida

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para esta concentración. Seguiremos con las medidas añadiendo siempre 10
cc. de agua hasta completar cinco medidas con cinco concentraciones dife-
rentes.
El analisı́s de los resultados se realizara mediante ajuste lineal del an-
gulo girado con respecto a la concentración utilizada para los cinco puntos
obtenidos.