Seleccionar la superficiendo a muestrear.

Rotular en el exterior del tubo estéril los datos de la muestra a analizar.

Abrir el vial, remover el hisopo cuidando de tocar la punta.

Humedecer el hisopo estéril en un tubo con 10 ml de caldo de soya tripticaseina y presionar

ligeramente en la pared del tubo con un movimiento de rotación para quitar el exceso de
solución.

Sostener el hisopo formando un ángulo de 30 ° con la superficie de contacto.

Frotar la punta del hisopo vigorosamente en la superficie de aproximadamente 10 cmx 10 cm,

cada una en dirección opuesta a la anterior.

Colocar el hisopo en el tubo con la solución diluyente (caldo de soya tripticaseina), quebrando
la parte del hisopo que estuvo en contacto con los dedos del muestreador, la cual debe ser
desechada a la basura.

Agitar vigorosamente el recipiente que contiene los hisopos por 10 segundos, para liberar las
bacterias del hisopo.

Incubar 24 ± 2 hrs a 36 ± 1°C

Homogenizar el recipiente que contiene los hisopos y tomar 1 ml del cultivo a analizar, con una
pipeta de vidrio de 5 ml estéril, transferir 1 ml a un tubo que contiene 10 ml de caldo MKTTn
(previamente adicionado con 0.2 ml de Yodo-yoduro 0.1 N) y 0.1 ml a un tubo que contiene 10
ml de caldo RVS para hacer el enriquecimiento. Incubar el caldo RVS a 41.5 °C ± 1 °C por 24
hrs y el caldo MKTTn A 36 °C ± 1°C por 24 hrs ± 3 horas.

Proceder con la etapa de aislamiento diferencial:

A) Homogenizar los tubos de caldo MKTTn y caldo RVS

B) Tomar una muestra de los cultivos anteriores con una asa microbiológica estéril y
estriar por agotamiento en agar Xilosa lisina desoxicolato (XLD), agar entérico (HE),
agar Sulfito Bismuto (SB)
C) El agar XLD y hektoen se incuban a 36 °C ± 1°C durante 24 hrs y Sulfito Bismuto se
incuba a la misma temperatura por 48 hrs.

9.- Observar el desarrollo de las colonias y sus características obtenidas en los medios sólidos
selectivos ya mencionados. Seleccionar dos colonias sospechosas, de acuerdo a las
características específicas del desarrollo de este microorganismo.