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MICROBIOLOGÍA E

INMUNOLOGÍA

LABORATORIO N° 10

ROL DEL LABORATORIO EN EL DIAGNÓSTICO


MICROBIOLÓGICO DE LAS INFECCIONES
URINARIAS y TRANSMISION SEXUAL

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LOGROS DEL APRENDIZAJE

1.- Conocer las diversas técnicas de diagnóstico microbiológico en la


infección urinaria y en las enfermedades de transmisión sexual.

2.- Entender la importancia del Urocultivo en el diagnóstico


microbiológico de la infección urinaria.

3.- Aprender a diferenciar la utilidad de las pruebas de tamizaje de las


pruebas confirmatorias en la infección por VIH.

4.- Conocer la diferencia y utilidad de las pruebas treponémicas y No


treponémicas en el diagnóstico de Sífilis.
1. Conocer las diversas técnicas de diagnóstico
microbiológico nos permitirá entender la importancia
del Urocultivo en el diagnóstico microbiológico de la
infección urinaria.

2. Reconocer las diversas técnicas de


diagnóstico microbiológico nos permitirá aprender a
diferenciar la utilidad de las pruebas de tamizaje de
las pruebas confirmatorias en la infección por VIH y
otras ITS.
MICROBIOTA URINARIA
❑ La orina humana en condiciones
normales no es estéril: posee su
propia microbiota o conjunto de
microorganismos residentes, que
pueden ser comensales,
mutualistas o patógenos.

❑ Está formada por un amplio


rango de 20-500 especies
bacterianas de los filos
Firmicutes, Actinobacteria,
Fusobacteria, Bacteroidetes,
Proteobacteria,Chloroflexi,
Spirochaetes, Synergistetes y
Fibrobacteres.

❑ Predominan Lactobacillus en
mujeres y Corynebacterium en
hombres
CLASIFICACIÓN
Infección Tracto Urinario - ITU
Invasión, multiplicación y colonización del
parénquima renal y/o sus vías de excreción,
por microorganismos patógenos.

Infección endógena (RARO) vs. Exógena

Monomicrobianas: Escherichia coli (85% de los


casos).
Pacientes diabéticos, inmunosuprimidos o que
están recibiendo tratamiento con antibióticos
suele aislarse Candida spp.

Polimicrobianas: Pacientes c/sonda

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MUESTRA

Las muestras se deben obtener


antes de iniciar el tratamiento
antibiótico, si no es así registrar el
tratamiento antimicrobiano que
sigue el paciente, o 72 horas de
finalizado el tratamiento.

Tipos de muestra:
• Orina chorro medio.
• Cateterismo vesical.
• Punción supra púbica.
• Pacientes con sonda.
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UROCULTIVO
FASE PRE ANALÍTICA

• Solicitud de Examen de orina y


urocultivo.

• La muestra debe ser colectada en


frasco estéril.

• El traslado al laboratorio debe ser en


el plazo de una hora. Cuando esto no
sea posible debe refrigerarse a 4ºC
durante un tiempo máximo de 24
horas.

• Tipo de muestra. 9
FLUJOGRAMA DE TRABAJO

➢ Prueba de Nitritos
EXAMEN DE ORINA
FASE ANALÍTICA
• Examen directo
• Gram
• Piuria: >=10 leucocitos(microl)
VPN: Tiene mas valor.

TIRAS REACTIVAS

▪ Son tiras disponibles comercialmente


que detectan la presencia de leucocitos
esterasa (una enzima liberada por los
leucocitos, que refleja la piuria) y nitrito
(que refleja la presencia de
Enterobacteriaceae, que convierte el
nitrato urinario en nitrito).
PRUEBA DE
NITRITOS
Permite valorar, en forma rápida (2 min).
la presencia de bacterias en la orina

• Sensibilidad 50% (rango: 16 –72%)


• Especificidad 98% (rango 95 – 100%)

Limitaciones:

• Cantidades inadecuadas de nitratos en la dieta.


• Uso de diuréticos (Micción Frecuente, orina diluida)
• Presencia de Uropatógenos No productoras de nitrato- reductasa (enterococos, estafilococos,P.
aeruginosa, etc)

• Recuentos < 100 000 UFC/ml.


• Orina remitida al laboratorio luego de varias horas de permanecer a temperatura ambiente.

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UROCULTIVO
FASE ANALÍTICA - CULTIVO
La metodología de la inoculación de la muestra en medios de cultivo o siembra
microbiológica depende de la forma de obtención de la muestra:

• Orina obtenida de catéter: Se siembra con asa de 0.001 ml (El desarrollo de una
colonia en el cultivo debe multiplicarse por 1000).

• Punción vesical: Se siembra con asa de 0.01 ml (El desarrollo de una colonia en el
cultivo se debe multiplicar por 10).

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INTERPRETACIÓN DEL
UROCULTIVO
Método Recuento (UFC/ml) Interpretación
Punción Cualquier crecimiento de Diagnóstico positivo
suprapúbica bacilos gram negativos

C. Vesical >50 mil Diagnóstico positivo


10 mil a 50 mil Infección probable
según patógeno y
cuadro clínico

<10 mil Infección poco probable

Mitad de micción >100 mil Infección probable


100 mil a 10 mil Dudoso
<10 mil Infección poco probable

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UROCULTIVO
FASE ANALITICA
ANTIBIOGRAMA

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UROCULTIVO

FALSOS NEGATIVOS: FALSOS POSITIVOS:

• Tratamiento antibiótico previo • Toma de muestra sin usar


• Arrastre de antisépticos utilizados técnica de chorro medio
en la higiene • Mala higiene
• Contaminación con secreción
• Obstrucción ureteral completo
Vulvo- vaginal
(anomalías o litiasis) • Heces en lactantes
• Lesión renal localizada y no • Jabón contaminado
comunicante • Recipiente no estéril
• Orinas con pH muy bajo o muy alto • Orinas no conservadas
<5o>8 refrigeradas
• Baja densidad urinaria < 1003
• Microorganismos diferentes a entero
patógenos:
Mycobacterium tuberculosis
• Insuficiente retención < 3 horas
• Ingesta de diuréticos o grandes
cantidades de líquidos: poliurea

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ROL DEL LABORATORIO EN
EL DIAGNÓSTICO DE LAS
INFECCIONES DE
TRANSMISIÓN SEXUAL

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MECANISMO DE INFECCIÓN
INFECCIÓN
INFECCIÖN AGUDA POR VIH
CATEGORIA CLÍNICA
Dx. tiempo infección:
Periodo de ventana:El tiempo entre el momento en que se contrae el virus y el momento en
que puede ser detectado

P 24
1er Marcador
detectable (Se detecta día 15)

Seroconversión: 3 a 4 semanas post infección

Periodo de infección aguda

> 20 días: Detección Ac.

Periodo Eclipse: VIH replicándose en


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HIV RNA: Aparece 10 días (7 - 21 días)
Las mucosas.
¿EN QUE SE BASAN LAS PRUEBAS VIH?
ELISA
DETECTA:
➢ Antígeno
➢ Anticuerpo
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ELISA DE 1° y 2° GENERACIÓN (ELISA INDIRECTA)

Detectan IgG

ELISA DE 3° GENERACIÓN
( TIPO SANDWICH INDIRECTO)
Detectan IgG e IgM
ELISA DE 4° GENERACIÓN

Detecta Ig G e IgM

(Directo): Detecta Ag P24

Detectan IgG e IgM


y Ag P24
Detectan Ag y Ac. Duración: 20 minutos

•Una muestra de su sangre, extraída de una vena o de un pinchazo en el dedo


•Líquidos recogidos en una compresa tratada que se frota en las encías superiores e inferiores
WESTERN BLOT

Detecta IgG
PRUEBAS CONFIRMATORIAS

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INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI)

Fluorocromo Detecta IgG

Usualmente se esperan de 3 a 4 semanas después de


haber realizado la Prueba de Elisa de 3° o 4° Generación
PCR

USOS:

➢ Pruebas confirmatorias
Indeterminadas

➢ Diagnóstico en neonatos

➢ Pronóstico de la enfermedad
Carga viral
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ALGORITMO DIAGNÓSTICO

Relación de riesgo < 6 semanas: Repetir


DIAGNÓSTICO
GONORREA
Neisseria gonorrhoeae

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GONORREA
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2 cm dentro de la uretra

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DIAGNÓSTICO
SÍFILIS
Treponema pallidum

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SÍFILIS
HISTORIA NATURAL DE LA SIFILIS
MANIFESTACIONES CLÍNICAS
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23/09/2019 51
23/09/2019 52
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APLIQUEMOS LO APRENDIDO

1.- Mencione la correlación adecuada:


a.- Recuento de CD4: Marcador de actividad de la enfermedad
b.- Carga viral: Marcador del sistema inmunológico
c.- Western Blot: Sensibilidad y especificidad > 99%
d.- ELISA: Prueba confirmatoria
2.- En relación a la Prueba de ELISA en VIH todo es falso, excepto:
a.- La prueba de ELISA de cuarta generación detecta Anticuerpos y antígeno p24
b.- La prueba de ELISA de primera generación detecta anticuerpos después de 20 días de la exposición
c.- La prueba de ELISA de segunda generación detecta anticuerpos después de 40 días de la exposición
d.- La prueba de ELISA de tercera generación detecta anticuerpos después de 10 días de la exposición

3.- En relación a la infección urinaria mencione lo falso:

a.- El agente etiológico más frecuente es E. Coli

b.- La vía de ingreso es usualmente por vía ascendente

c.- Usualmente es polimicrobiana

d.- La infección urinaria alta tiene síntomas sistémicos usualmente


INTEGREMOS LO APRENDIDO

“Siempre se solicitará un examen de


orina en caso de una infección
urinaria baja por el elevado riesgo
de hospitalizarse”.
¿Qué opinan?
ACTIVIDAD VIRTUAL ACTIVA (AVA) N° 10
Caso Clínico

Paciente femenina, 30 años, con antecedente de tener múltiples parejas


sexuales. Acude a la consulta prequirúrgica de cirugía porque será
intervenida por un cuadro clínico de Litiasis vesicular. Se realiza la
serología rápida VIH y sale reactiva.
Responda las siguientes preguntas:
1.- ¿Con el resultado de la prueba rápida podríamos considerar que la
paciente está infectada con VIH?. Justifique su respuesta
2.- ¿Cómo confirmamos o descartamos la infección en la paciente?
3.- ¿En que consiste el autodiagnóstico?
ACTIVIDAD VIRTUAL ACTIVA (AVA) N° 10

Bibliografía
Stevens D., Vrana C., Dlin R., Korte J. A Global Review of HIV Self-testing: Themes and
Implications. AIDS Behav. [Publicación periódica en línea] 2018.[Cited 2021 Feb 10]; 22
(2) [19 pp.]. Available from
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5910655/pdf/nihms958225.pdf

Gagnon M., French M., Hébert Y. The HIV self-testing debate: where do we stand? BMC
International Health and Human Rights [Publicación periódica en línea] 2018. [cited
2021 Feb 10]; [7 pp.]. Available from
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5774103/pdf/12914_2018_Article_146.pd
f
Sax P. Pruebas de detección y diagnóstico de la infección por VIH [en línea]. UpToDate.
Revisión de la literatura vigente hasta Enero 2021. [Citado: 2021 febrero 10]. Infección
VIH. https://www.uptodate.com/contents/screening-and-diagnostic-testing-for-hiv-
infection?search=VIH&source=search_result&selectedTitle=8~150&usage_type=default
&display_rank=8
“LA ENERGIA Y LA
PERSISTENCIA CONQUISTAN
TODAS LAS COSAS”

Benjamín Franklin

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