FLAGELADO II -PROTOZOARIO

Diagnóstico Leishmania

 Microscopía Huésped humano: etapa de amastigotes en el examen microscópico de muestras de tejido. Los
amastigotes se pueden visualizar con tinciones de Giemsa y hematoxilina y eosina (H&E). Los amastigotes de
Leishmania spp. son morfológicamente indistinguibles de los de Trypanosoma cruzi.

Los amastigotes son ovoides y miden 1-5 micrómetros de largo por 1-2 micrómetros de ancho. Poseen un núcleo y un
cinetoplasto.

 Análisis de isoenzimas

El aislamiento se puede realizar utilizando el medio bifásico que incluye una fase sólida compuesta de base de agar
sangre (por ejemplo, medio NNN), con sangre de conejo desfibinada. Después del aislamiento, los parásitos se pueden
caracterizar a nivel complejo y, a veces, a nivel de especie utilizando análisis de isoenzimas, que es el método de
diagnóstico convencional para la identificación de especies de Leishmania.. La identificación diagnóstica de Leishmania
con este método puede llevar varias semanas.

Diagnóstico

■ Serología

La detección de anticuerpos puede resultar útil en la l eishmaniasis visceral, pero tiene un valor limitado en la
enfermedad cutánea, ya que la mayoría de los pacientes no desarrollan una respuesta de anticuerpos significativa.
Además, puede ocurrir reactividad cruzada con Trypanosoma cruzi , un hecho a considerar cuando se investiga la
respuesta de anticuerpos contra Leishmania en pacientes que han estado en América Central o del Sur.

■ Diagnóstico molecular

Los enfoques moleculares tienen el potencial de ser más sensibles y rápidos; por ejemplo, los resultados pueden estar
disponibles en días en lugar de semanas. El método se basa en la amplificación por PCR utilizando cebadores genéricos
que amplifican un segmento del espaciador transcrito interno de ARNr 2 (ITS2) de múltiples especies de Leishmania.

MORFOLOGÍA

 Los amastigotes de Leishmania son esféricos a ovoides y

miden 1-5 µm de largo por 1-2 µm de ancho. Poseen un
núcleo grande, un cinetoplasto prominente y un axonema
corto, el último de los cuales rara vez es visible al microscopio
óptico. Los organismos residen en los macrófagos del
huésped y se pueden encontrar en todo el cuerpo.

 Los promastigotes no se encuentran en el

tejido humano; esta etapa ocurre en el
intestino medio de los huéspedes
intermediarios de la mosca de la arena
(géneros Phlebotomus y Lutzomyia). Los
promastigotes son alargados, delgados y
miden alrededor de 10-12 µm de longitud.
 Tienen un gran núcleo central y un cinetoplasto ubicado cerca del extremo anterior. Surge un flagelo en el extremo
anterior, que puede ser más largo que el resto del promastigote.
7 SEMANA VII FLAGELADOS II TRICHO LEISH

PROTOZOARIOS – FLAGELADOS
Trichomonas vaginalis

 Es un parásito flagelado, descrito por Donne en 1836.

 Anaerobio, de membrana ondulante y con 4 flagelos,
ovalado, y un poco más grande que un leucocito.
 El humano es el único huésped, con parejas sexuales
múltiples. Es de contagio sexual, pero el parásito puede
ser aislado en fluidos corporales (orina).
 La incubación es de 3-28 días.
 También hay transmisión perinatal. ( madre a feto).
 Puede ser asintomática en un 3-15%.
 Los reservorios son el hombre y la mujer, pero el vector
es el hombre.

• Trichomonas vaginalis, un flagelado, es el protozoo patógeno más común de los seres humanos en los países
industrializados.

• Distribución geográfica Mundial: Mayor prevalencia entre personas con múltiples parejas sexuales u otras
enfermedades venéreas.

• Presentación clínica: La infección por Trichomonas vaginalis en mujeres suele ser sintomática. La vaginitis con
secreción purulenta es el síntoma prominente y puede acompañarse de lesiones vulvares y cervicales, dolor abdominal,
disuria y dispareunia. En los hombres, la infección suele ser asintomática; ocasionalmente, pueden ocurrir uretritis,
epididimitis y prostatitis.

La clínica es:

 Prurito, escozor, dispareunia, disuria o dolor pélvico, en la mujer.

 Flujo amarillo-verdoso, con burbujas (en un 20%).
 Eritema vulvar con escoriaciones. Cérvix enrojecido.
 En el hombre, hay pérdida uretral escasa y/o disuria. Pero puede ser infección
asintomática en el 10-50%.
 El pH está aumentado (medio adecuado para crecimiento de Tv). Y con KOH
da olor a pescado por las aminas.
 El tratamiento de elección es el metronidazol, y luego el tinidazol.
 Diagnóstico de laboratorio- Trichomonas vaginalis
El examen microscópico de preparaciones húmedas puede establecer el diagnóstico mediante la detección de
organismos activamente móviles. Este es el método de diagnóstico más práctico y rápido (que permite un
tratamiento inmediato). La tinción directa con anticuerpos inmunofluorescentes es más sensible que las
preparaciones húmedas, pero técnicamente más compleja. El cultivo del parásito es el método más sensible, pero
los resultados no están disponibles hasta dentro de 3 a 7 días (Lab. clínico). En las mujeres, se debe realizar un
examen de las secreciones vaginales y uretrales (citología). En los hombres, deben examinarse las secreciones
uretrales o prostáticas anteriores.

LEISMANIASIS
Distribución geográfica.

• La leishmaniasis se encuentra en partes de unos 88 países. La mayoría de los países afectados se encuentran en los
trópicos y subtrópicos. Los entornos en los que se encuentra la leishmaniasis van desde las selvas tropicales de
América Central y del Sur hasta los desiertos de Asia occidental. Más del 90 por ciento de los casos mundiales de
leishmaniasis visceral se encuentran en India, Bangladesh, Nepal, Sudán y Brasil.

• La leishmaniasis se encuentra en México, América Central y América del Sur, desde el norte de Argentina hasta
Texas (no en Uruguay, Chile o Canadá), el sur de Europa (la leishmaniasis no es común en los viajeros al sur de
Europa), Asia (no el sudeste asiático), el Medio Oriente y África (particularmente el este y norte de África, con
algunos casos en otros lugares).

La leishmaniasis es una enfermedad transmitida por vectores que es transmitida por flebótomos y causada por
protozoos intracelulares obligados del género Leishmania . La infección humana es causada por aproximadamente
21 de 30 especies que infectan a mamíferos. Estos incluyen el complejo de L. donovani con 3 especies ( L. donovani ,
L. infantum y L. chagasi ); el complejo de L. mexicana con 3 especies principales ( L. mexicana , L. amazonensis y L.
venezuelensis ); L. tropica ; L. major ; L. aethiopica ; y el subgénero Viannia con 4 especies principales (L. (V.)
braziliensis , L. (V.) guyanensis , L. (V.) panamensis y L. (V.) peruviana ). Las diferentes especies son
morfológicamente indistinguibles, pero pueden diferenciarse mediante análisis de isoenzimas, métodos
moleculares o anticuerpos monoclonales.

Presentación clínica
• La leishmaniasis humana abarca múltiples síndromes clínicos, sobre todo las formas visceral, cutánea y mucosa.
Las infecciones pueden resultar en dos formas principales de enfermedad, leishmaniasis cutánea y leishmaniasis
visceral (kala-azar). Diferentes especies pueden estar asociadas con diversas manifestaciones clínicas y secuelas. La
identificación de especies puede facilitar el manejo clínico, como las decisiones sobre si está indicado o qué
tratamiento. especie, ubicación geográfica y respuesta inmune del huésped. La leishmaniasis cutánea se caracteriza
por una o más lesiones cutáneas en áreas donde se alimentan los flebótomos. Las personas que tienen leishmaniasis
cutánea tienen una o más llagas en la piel. Las llagas pueden cambiar de tamaño y apariencia con el tiempo. A
menudo terminan pareciéndose a un volcán, con un borde elevado y un cráter central. Una costra cubre algunas
llagas. Las llagas pueden ser indoloras o dolorosas. Algunas personas tienen glándulas inflamadas cerca de las llagas
(por ejemplo, en la axila si las llagas están en el brazo o la mano).

• Las personas que tienen leishmaniasis visceral suelen tener fiebre, pérdida de peso y agrandamiento del bazo y del
hígado (por lo general, el bazo es más grande que el hígado). Algunos pacientes tienen glándulas inflamadas. Ciertos
análisis de sangre son anormales. Por ejemplo, los pacientes suelen tener recuentos sanguíneos bajos, incluido un
recuento bajo de glóbulos rojos (anemia), un recuento bajo de glóbulos blancos y un recuento bajo de plaquetas.
 Algunos pacientes desarrollan leishmaniasis dérmica post kala-azar. La leishmaniasis visceral se está convirtiendo en
una importante infección oportunista en áreas donde coexiste con el VIH.

Las leishmanias se presentan bajo dos formas diferentes: • Promastigotes • Amastigotes.

ZOONOSIS

Una zoonosis es toda enfermedad

propia de un animal concreto
que accidentalmente
es contagiada a un ser humano,
donde el patógeno
empieza a desarrollarse y a
causarle daños.

Maneras que pueden permitir que el patógeno

salte del animal al humano y le provoque una
enfermedad.

Estas formas de contagio se clasifican de la

siguiente manera.

1. Contacto directo: fluidos con el animal (saliva,

orina, sangre, heces, mucosas…)

2. Contacto indirecto: áreas y las superficies en los

que se encuentra el animal, dejado gérmenes
encima de los objetos.
3. Vectores: nos muerde una garrapata o una pulga o nos pica un mosquito.

4. Transmisión alimentaria: cuando comemos algo que procede de un animal con gérmenes, estos pueden llegar a
nuestro interior. Consumo de carne cruda con patógenos, leche sin pasteurizar, huevos poco cocinados y frutas y
verduras contaminadas con heces de animales enfermos.

PROTOZOARIOS – FLAGELADOS
• Hospedadores Humano y animales (perro, gato, castor y ganado vacuno).
• Distribución geográfica
A nivel mundial, más frecuente en climas cálidos y en niños.
• Presentación clínica
• Portador asintomático
• Diarrea grave y malabsorción.
• La giardiasis aguda: período de incubación de 1 a 14 días (promedio de 7 días) y generalmente dura de 1 a 3 semanas.
• Síntomas: diarrea, dolor abdominal, hinchazón, náuseas y vómitos. Giardiasis crónica, los síntomas son recurrentes y
pueden producirse malabsorción y debilitamiento.

Giardia lamblia fue el primer protozoo parásito visto en 1681 por Antony van Leeuwenhoeck.
La Giardia intestinalis (G. duodenalis o G. lamblia) produce una parasitosis intestinal denominada GIARDIASIS y es
predominante en niños. Lugar que ocupa en el huésped: Intestino delgado Infección fecal – oral.

Dientamoeba fragilis
• A pesar de su nombre, no es una ameba sino un flagelado intestinal, más estrechamente relacionado con las
tricomonas. En muestras de heces humanas, casi siempre se encuentra únicamente como trofozoíto.
• Se ha informado la rara presencia de formas putativas de quiste y prequiste en muestras clínicas.
• Potencial de transmisión? Poco conocido
• Trofozoítos en algunos Primates y cerdos)
TRIPANOSOMIASIS AMERICANA.
 Trypanosoma cruzi, es un protozoo parásito que es el agente causante de la enfermedad de Chagas (tripanosomiasis
americana).
 Aparte de los humanos, varios mamíferos sirven como reservorios de T. cruzi, por ejemplo, armadillos, zarigüeyas,
mapaches, ratas de bosque, algunos otros roedores y perros domésticos. Las especies comunes de vectores de
triatominos para la tripanosomiasis pertenecen a los géneros Triatoma (T. dimidiata), Rhodnius y Panstrongylus.

 Distribución geográfica: T. cruzi es endémica en vectores y reservorios de vida silvestre en las Américas desde la
mitad sur de los Estados Unidos hasta Argentina. Se han reportado casos de enfermedad de Chagas en países de
América del Sur y Centroamérica. Los triatominos proliferan en casas en malas condiciones (muros de barro y techos
de paja), razón por la cual las personas que viven en áreas rurales en algunos países donde la enfermedad es
endémica están expuestas a un mayor riesgo de contraer la infección.

 Presentación clínica: Contacto con las heces de un insecto triatominio el cual se alimenta de la sangre de seres
humanos y animales. La infección también puede transmitirse a través de:

• madre a bebé (congénita),

• productos derivados de la sangre contaminados (durante transfusiones)
• órganos trasplantados de donantes infectados
Fase aguda: suele ser asintomática, puede ser más grave con posibles síntomas y signos cardíacos o neurológicos. Es
posible que se desarrollen lesiones nodulares o furúnculos, generalmente llamados chagomas, alrededor del sitio de
alimentación del vector. Los chagomas que aparecen en los párpados se conocen comúnmente como hinchazón firme
palpebral y periocular. La mayoría de los casos agudos se resuelven en un período de unas pocas semanas o meses hasta
convertirse en una forma crónica subclínica de la enfermedad ("forma indeterminada"). La reactivación de la
enfermedad de Chagas a partir de esta forma asintomática puede ocurrir en pacientes con VIH o en aquellos que reciben
medicamentos inmunosupresores.
Fase crónica: sintomática, puede no ocurrir durante años o incluso décadas después de la infección inicial. Puede incluir
afectación cardíaca o gastrointestinal,
que ocasionalmente
ocurren juntas. Las complicaciones de
la enfermedad de Chagas crónica
pueden ser fatales. La invasión de
amastigote del músculo liso puede
producir megaesófago,
megacolon y miocardiopatía
dilatada.
TRIPANOSOMIASIS AFRICANA [TRYPANOSOMA BRUCEI GAMBIENSE] [TRYPANOSOMA BRUCEI RHODESIENSE]
Los "tripanosomas africanos" o "tripanosomas del viejo mundo" son hemoflagelados. . Dos subespecies que causan
distintos patrones de enfermedad en los seres humanos: T. b. gambiense , causante de tripanosomiasis africana crónica
(“enfermedad del sueño de África occidental”) y T. b. rhodesiense , que causa tripanosomiasis africana aguda
(“enfermedad del sueño de África oriental”). La tercera subespecie T. b. brucei es un parásito principalmente del ganado
y ocasionalmente de otros animales y, en condiciones normales, no infecta a los seres humano.
PRESENTACIÓN CLÍNICA
• La infección ocurre en dos etapas que a veces pueden estar precedidas por el desarrollo de un chancro tripanosomal
en el sitio de inoculación a los pocos días de ser picado por una mosca infectada (ocurre más comúnmente con T. b.
Rhodesiense ). La enfermedad de primera etapa (hemolinfática) implica signos y síntomas inespecíficos como fiebre
intermitente, prurito y linfadenopatía. La linfadenopatía cervical del triángulo posterior, o "signo de Winterbottom",
se observa comúnmente en T. b. gambiense , pero también se pueden observar adenopatías en las regiones axilar,
inguinal y epitroclear. Los ganglios linfáticos agrandados tienden a ser submandibulares, axilares e inguinales en T. b.
rhodesiense.

• En la segunda etapa de la enfermedad

(meningoencefalítica), la invasión del
sistema nervioso central causa una
variedad de manifestaciones
neuropsiquiátricas que incluyen
trastornos del sueño, de ahí el nombre
común de "enfermedad del sueño
africana". También se observa afectación
cardíaca grave con anomalías
electrocardiográficas compatibles con
perimiocarditis. Estas alteraciones son
generalmente leves en T. b. gambiense,
pero son más graves y aparecen antes en
T. b. Infecciones por Rhodesiense . El
curso de la infección es mucho más
agudo y rápido con T. b. rhodesiense que
T. b. gambiense, y ambas infecciones son
casi siempre fatales sin tratamiento.
 PROTOZOARIO – FLAGELADO I

MORFOLOGÍA:

Quistes: ovalados a elipsoides y miden 8-19 µm (promedio de 10-14 µm). Los quistes maduros tienen 4 núcleos,
mientras que los quistes inmaduros tienen dos. Los núcleos y las fibrillas son visibles tanto en las preparaciones
húmedas teñidas con yodo como en los frotis teñidos con tricrómico.

Trofozoítos: tienen forma de pera y miden de 10 a 20 micrómetros de longitud. En las muestras permanentes y teñidas,
suelen ser visibles 2 núcleos grandes. También se pueden ver los discos de succión (utilizados para adherirse al epitelio
de la mucosa del hospedador), los cuerpos medios y los flagelos son 8 (4 pares).
 TRYPANOSOMIASIS

• El amastigote: carece de flagelo y posee el cinetoplasto aliado del núcleo. Estadio del
género Trypanosoma sin flagelo libre, es la forma que el parásito adopta cuando está
intracelular. Se multiplican por división binaria
• El promastigote: Tiene forma alargada, con el cinetoplasto en la parte anterior del
parásito de donde sale el flagelo. LEISHMANIA
• El epimastigote: es más largo y tiene el cinetoplasto cerca del núcleo de donde sale el
flagelo.
• El tripomastigote: posee el cinetoplasto en la pared posterior del núcleo, además
tiene membrana ondulante y en la parte anterior del parásito sale el flagelo

MORFOLOGÍA

• Los tripomastigotes de Trypansoma cruzi son la única etapa que se encuentra en la

sangre de una persona infectada. Los tripomastigotes circulantes móviles se ven fácilmente en los portaobjetos de
 sangre fresca anticoagulada en la infección aguda, pero rara vez se detectan por microscopía en la infección crónica
por T. cruzi.

• Un tripomastigote típico tiene un cinetoplasto grande, subterminal o terminal, un núcleo de ubicación central, una
membrana ondulante y un flagelo que corre a lo largo de la membrana ondulante, dejando el cuerpo en el extremo
anterior. Los tripanosomas miden de 12 a 30 µm de longitud. Los tripomastigotes pueden verse en el líquido
cefalorraquídeo (LCR) en infecciones del sistema nervioso central; también se puede observar el parásito en estadio
amastigote en muestras histopatológicas de órganos afectados.

• Las dos subespecies de Trypanosoma brucei que causan la tripanosomiasis africana, T. b. gambiense y T. b.
rhodesiense , son indistinguibles morfológicamente. Un tripomastigote típico tiene un pequeño cinetoplasto ubicado
en el extremo posterior, un núcleo ubicado en el centro, una membrana ondulante y un flagelo que corre a lo largo
de la membrana ondulante, dejando el cuerpo en el extremo anterior. Los tripomastigotes son el único estadio que
se encuentra en los pacientes. Los tripanosomas varían en longitud de 14 a 33 µm.

Amastigotes de T. cruzi en tejido cardíaco.

• En el tejido, el parásito forma amastigotes

caracterizados por un solo núcleo y
cinetoplasto. Los amastigotes de T. cruzi son morfológicamente indistinguibles de los de Leishmania spp.

Epimastigotes de T. cruzi , de cultivo.

• La etapa de epimastigote no se observa en

humanos, pero se puede encontrar en el intestino
medio de los triatominos que han ingerido
tripomastigotes de un hospedador infectado.

Insecto triatomino, el vector de T. cruzi.

• El Trypanosoma cruzi se transmite por insectos

besadores (Hemiptera: Reduviidae). Los géneros
 más comunes responsables de la transmisión de la enfermedad son vectores del género: Triatoma, Rhodnius y
Panstrongylus . La infección generalmente ocurre después de que los insectos defecan en el lugar de la picadura y el
huésped los frota en la herida al rascarse.

• [Trypanosoma brucei gambiense] [Trypanosoma brucei rhodesiense]. El único

vector conocido para cada uno es la mosca tsetsé (Glossina spp.)

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Tripanosomiasis americana

• En la etapa aguda de la enfermedad, el diagnóstico se puede realizar al encontrar tripomastigotes en la sangre
circulante o en el líquido cefalorraquídeo (LCR). Durante la etapa crónica, los tripomastigotes generalmente no se
encuentran circulando en la sangre y se recomiendan pruebas serológicas. Los amastigotes se pueden encontrar en
muestras de biopsia teñidas con hematoxilina y eosina (H&E) o Giemsa.
• Serología (detección de anticuerpos)

Durante la fase aguda de la enfermedad, el examen de frotis de sangre generalmente revela la presencia de
tripomastigotes. Sin embargo, durante la fase crónica de la infección, la parasitemia es baja y el inmunodiagnóstico es
una técnica útil para determinar si el paciente está infectado. El diagnóstico de la enfermedad de Chagas crónica en
pacientes sospechosos se basa en la serología de al menos dos pruebas serológicas diferentes. En otros países se
encuentran disponibles comercialmente varios métodos serológicos para el diagnóstico de laboratorio de la enfermedad
de Chagas. La sensibilidad y especificidad de estas pruebas son muy variables.

• Pruebas moleculares:

Diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas se realiza para los casos de sospecha de infección aguda (incluida la
transmisión por transfusión o trasplante), la enfermedad de Chagas congénita y para el seguimiento de presuntas
exposiciones de laboratorio. Para la enfermedad de Chagas crónica, la serología es generalmente más apropiada,
aunque la detección molecular puede realizarse para casos reactivados asociados con inmunosupresión.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Tripanosomiasis africana

El diagnóstico se basa en la demostración de tripanosomas mediante examen microscópico del líquido del chancro,
aspirados de ganglios linfáticos, sangre, médula ósea o, en las últimas etapas de la infección, líquido cefalorraquídeo. Se
debe examinar una preparación húmeda en busca de tripanosomas móviles y, además, se debe fijar un frotis de sangre
(delgado o espeso), teñirlo con Giemsa (o Field) y examinarlo
Detección de anticuerpos. Pruebas rápidas para T. b. gambiense se utilizan para el cribado de sangre completa para su
control / eliminación; el rendimiento es variable según la endemicidad. Sin embargo, con T. b. rhodesiense , la
seroconversión se produce después del inicio de los síntomas clínicos.
Detección molecular No se validan pruebas basadas en ácidos nucleicos para el diagnóstico de tripanosomiasis africana,
y el rendimiento diagnóstico varía considerablemente entre estas pruebas.