10.

APÉNDICE

10.1. Procedimiento
10.1.1 Método de la Celda

1. Para llenar la celda, con la pipeta se toma 1 ml de la muestra. Cuidadosamente se

va llenando la celda para evitar la formación de burbujas al interior.
2. Determinar el número de campos a lo ancho de la celda, y la cantidad de
microrganismos encontrados en cada una.
3. Determinar el número total de microorganismos (algas) que equivale a la suma de
todos los microorganismos hallados en cada campo en a lo ancho de la celda.
4. Calcular el promedio de microrganismo por campo:

N ° total de microoganismos
Promedio de microorganismos X =
N ° total de campos

5. Determinación del número de campos a lo largo de la celda.

N° de campos a lo ancho de la Celda S-R (Ancho 20 mm)
N° de campos a lo largo de la Celda S-R (Largo 50 mm)
50 mm
N° de campos a lo largo de la Celda = (N° de campos a lo ancho de la Celda) x
20 mm
6. Determinación del número total de campos en total en la celda:
N° total de campos en la celda = N° campos a lo ancho x N° de campos a lo largo.

7. Determinación de la concentración de M.O. (N° de M.O./ml)

N ° de microorganismos
Concentración de microorganismos =
1 ml

X x N ° total de campos en toda la celda

Concentración de microorganismos/ml =
1ml

10.2.2. Método de la Franja

1. Calibrar el gotero a utilizar. Con ayuda de una probeta y de un gotero, contar la
cantidad de gotas que se necesita usar con un gotero para tener un volumen de 5
ml (mínima medida en una probeta)
2. Calibración: N Gotas <> 5 ml  X = 5/N ml
1 Gota <> X
3. Llenar el portaobjetos, con 1 gota de un gotero, luego colocar con mucho cuidado
el cubreobjetos tomando la mayor parte de la gota. Evitar las pérdidas.

Campos del microscopio

Nº de campo Nº de microorganismos
1 ….
2 …
… ….
∑Total de campos ∑ total de microorganismos

4. Determinar el número de microorganismos (algas) que equivale a la suma de

todos los microorganismos hallados en cada campo según la franja trazada.
5. Calcular el promedio de microrganismo por campo:

N ° total de microoganismos
Promedio de microorganismos X =
N ° total de campos

6. Determinación del número de campos a lo largo de la celda.

N° de campos a lo ancho de la Celda S-R (Ancho 22 mm o 18 mm)
N° de campos a lo largo de la Celda S-R (Largo 22 mm o 18 mm)

7. Determinación del número total de campos en tota la celda:

N° campos a lo ancho = N° de campos a lo largo.

N° total de campos en la celda = N° campos a lo ancho x N° de campos a lo largo.

2
 8. Determinación de la concentración de M.O. (N° de M.O./ml)

N ° de microorganismos
Concentración de microorganismos =
1 gota
X x N ° total de campos en toda la celda
Concentración de microorganismos/ml =
1 gota

10.2. Cálculos
MÉTODO DE LA CELDA S-R (OBJETIVO 10X)

 DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS POR CAMPO.

Σ( Número de microorganismos)
Promedio= X́ =
NúmeroTotal de campos

638
X́ =
12

X́ =53.17 m. o /campo

 DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE CAMPOS EN LA CELDA

Número de campos a lo ancho de la celda=20 mm

Número de campos a lolargo de la celda=50 mm

50 mm
Número de campos a lolargo=Número de camposa lo ancho x
20 mm

50 mm
Número de campos a lo largo=12 x
20 mm

Número de campos a lolargo=30

Número de campos en todala celda=Número de campos ancho x Número de campos largo

Número de campos en todala celda=12 x 30=360 campos

3
 DETERMINACIÓN DE LA COCNENTRACIÓN DE MICROORGANISMOS

Número de m. o
Concentración de m .o .=
Vol (ml)

X́ x Número de campos en todala celda

Concentración de m .o .=
1 ml

53.17 x 360
Concentración de m .o .=
1ml

m .o
Concentración de m .o .=19141.2
ml

MÉTODO DE LA FRANJA (OBJETIVO 10X)

 DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS POR CAMPO.

Σ( Número de microorganismos)
Promedio= X́ =
NúmeroTotal de campos

497
X́ =
13

X́ =38.23 m. o /campo

 DETERMINACIÓN DEL NÚMERO DE CAMPOS EN EL CUBRE OBJETO

Número total de campos=(Número de campos en el cubreobjeto)2

Número total de campos=(13)2

Número total de campos=169

 DETERMINACIÓN DEL VOLUMEN DE UNA GOTA

66 gotas−5 ml1 gota−V V =0.075 ml

4
 DETERMINACIÓN DE LA COCNENTRACIÓN DE MICROORGANISMOS

Número de m. o
Concentración de m .o .=
Vol (ml)

X́ x Número total de campos

Concentración de m .o .=
Volumen de 1 gota

38.23 x 169 x 66
Concentración de m .o .=
5 ml

m. o
Concentración de m .o .=85283.48
ml

10.3 Diagrama de flujo:

5
Método de la

Celda

Llenar la celda, con la pipeta se toma 1 ml de la muestra.

(Cuidadosamente llenar la celda para evitar la formación de
burbujas al interior)

Determinar el número de campos a lo ancho de la

celda, y la cantidad de microrganismos
encontrados en cada una.

Determinar el número total de microorganismos (algas)

que equivale a la suma de todos los microorganismos
hallados en cada campo en a lo ancho de la celda.

Calcular el promedio de
N ° total de microoganismos
microrganismo por campo Promedio de microorganismos X¿
N ° total de campos

Determinación del número de campos a lo largo de la celda.

Determinación del número total de campos en total en la celda:

N° total de campos en la celda = N° campos a lo ancho x N° de campos a
lo largo.

Determinación de la concentración de M.O. (N° de M.O./ml)

Método de la

Franja N ° de microorganismos
Concentración de microorganismos =
1 ml
Calibrar el gotero a utilizar. Con ayuda de una probeta y de un
gotero, contarConcentración de se necesita microorganismos/ml
la cantidad de gotas que usar con un =

gotero para tener un volumen de 5 ml (mínima medida en una

probeta) 6
 Calibración: N Gotas <> 5 ml  X = 5/N ml
1 Gota <> X

Llenar el portaobjetos, con 1 gota de un gotero,

luego colocar con mucho cuidado el cubreobjetos
tomando la mayor parte de la gota. Evitar las
pérdidas.

Determinar el número de microorganismos (algas)

que equivale a la suma de todos los
microorganismos hallados en cada campo según la
franja trazada.

Calcular el promedio de microrganismo por campo:

Promedio de microorganismos X =

N ° total de microoganismos
N ° total de campos

Determinación del número de campos a lo largo de

la celda.

Determinación del número total de campos en tota

la celda:

Determinación de la concentración de M.O. (N° de

M.O./ml)

N ° de microorganismos
Concentración de microorganismos =
1 gota
Concentración de microorganismos/ml =
X x N ° total de campos en toda la celda
1 gota

7
8