ACTIVIDAD ENZIMÁTICA: CATALASA.

Álvarez, J.1, Juárez M.1, López R.1,  Mendoza, A.1 Moreno,F.1

Departamento de Ingeniería en Biotecnología. Universidad Politécnica de Guanajuato, Av. Universidad Sur
1001, Comunidad Juan Alonso, Cortázar Guanajuato, México 38483, Teléfono (461) 44 14 300, Fax: (461)
4414 328.

RESUMEN: En el estudio de los tejidos vegetales y animales, se puede verificar la

presencia de catalasa, enzima esencial para la degradación del peróxido de hidrógeno en
agua, liberando oxígeno. Lo que se puede observar claramente en la muestra de hígado por
los peroxisomas contenidas en el tejido. Por el contrario, en la papa no se observó una
buena reacción en comparación, ya que contiene una menor cantidad de peroxisomas.
Obteniendo así diferencias significativas en las reacciones del peróxido entre ambas
muestras. Sin embargo, a pesar de esto, la diferencia entre ambos tejidos es aún más notoria
al ser sometidos a dos temperaturas distintas, frío y calor, el tejido vegetal sometido a calor
presento una actividad enzimática menor (00.44 ml/min), a la actividad producida por el
tejido animal sometido a la misma temperatura (22.38 ml/min), pero este último al ser
sometido a frío presento una mayor actividad enzimática (39.65 ml/min), y de igual manera
el tejido vegetal mostró mejor actividad bajo frío (26.79 ml/min). La presencia o aplicación
de calor en la catalasa animal, mostró que esta actúa de manera favorable, sin embargo, el
comportamiento es aún más positivo en presencia de frío, favoreciendo este mismo a la
actividad de la catalasa vegetal.

ABSTRACT
In the study of plant and animal tissues, the presence of catalase can be verified, an enzyme
essential for the degradation of hydrogen peroxide in water, releasing oxygen. What can be
clearly seen in the liver sample by the peroxisomes contained in the tissue. On the contrary,
in the potato a good reaction was not observed in comparison, since it contains a lower
amount of peroxisomes.
Obtaining significant differences in the peroxide reactions between both samples.
However, despite this, the difference between both tissues is even more noticeable when
subjected to two different temperatures, cold and heat, the plant tissue subjected to heat
showed a lower enzymatic activity (00.44 ml / min), to the activity produced by the animal
tissue subjected to the same temperature (22.38 ml / min), but the latter when subjected to
cold showed a greater enzymatic activity (39.65 ml/ min), and likewise the plant tissue
showed better activity under cold ( 26.79 ml /min).
The presence or application of heat in the animal catalase, showed that this acts favorably,
however the behavior is even more positive in the presence of cold, favoring the same to
the activity of the plant catalase.

PALABRAS CLAVE/ KEY WORDS

Catalasa, enzima, hígado, pH, papa, temperatura. Catalase, enzyme, liver, potato, pH.

INTRODUCCIÓN: La catalasa (peróxido de hidrógeno, oxidorreductasa EC 1.11.1.6) es

una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida
en el organismo humano, aunque su actividad varía en dependencia del tejido; ésta resulta
más elevada en el hígado y los riñones, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y
prácticamente nula en el tejido nervioso. Esta cataliza la dismutación del peróxido de
hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno. Este tipo de reacción es oxidorreducción, en la que un
elemento o especie química es a la vez reducido y oxidado.  El peróxido de hidrógeno es
uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su
potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima catalasa. En la reacción de la
catalasa ocurre la transferencia de dos electrones entre dos moléculas de peróxido de
hidrógeno en la cual una funciona como donador y otra como aceptor de electrones, esto
dependerá de las circunstancias en las que se exponga, ya sea dependiendo de la
temperatura, pH y otros factores. La mayoría de las enzimas son proteínas, por lo tanto,
todas las enzimas sufren desnaturalización frente al calor. La desnaturalización en un
sentido termodinámico se refiere al cambio de un estado ordenado de moléculas a otro
desordenado, lo que trae consigo un incremento en la entropía del sistema, esto quiere decir
que se pierden las estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria, sin que haya una hidrólisis
del enlace peptídico; es decir, los enlaces principalmente afectados son los de hidrógeno,
los hidrófobos y también iónicos, por esto el objetivo por medio de la presente es
comprender u observar las propiedades y los factores que influyen en la actividad de la
catalasa en un tejido vegetal y animal. El uso del peróxido y la función de catalasa como
antioxidante y los diferentes estados de propiedades en el que estos reaccionan.

METODOLOGÍA: Se formaron dos grupos de 15 de tubos, siendo un grupo asignado

para la catalasa animal (hígado) y el otro para la catalasa vegetal (papa). Posteriormente los
tubos fueron rotulados según el tratamiento aplicado, más la letra del tejido perteneciente
(X: control, A: ácido, B: base, H: temperatura, C: frío, Ea: hígado, Ev: papa).
Una vez rotulados los tubos se cortaron trozos de tamaño semejante tanto de papa como de
hígado, y fueron colocados en tubos de ensayo etiquetados. Se tomaron 6 tubos de papa y 6
de hígado rotulados H y C. De estos, a los tubos rotulados H, se les adiciono 3 ml de agua
destilada y se colocaron en baño maría de agua a ebullición por 10 minutos, pasado este
tiempo se realizó una decantación en estos mismos. Los tubos rotulados con C de ambos
tejidos se colocaron en baño de hielo por 20 minutos, realizándose el mismo procedimiento
al término.
A los 12 tubos con tejidos recuperados se les añadió 2 ml de agua oxigenada, registrando la
presencia o ausencia de actividad enzimática, existiendo la presencia de esta actividad fue
medida la altura de espuma resultante, la temperatura de reacción y el tiempo de la
velocidad de reacción.
Posteriormente, se tomaron los 6 tubos rotulados como A y B (A: Ácido, B: Base), siendo
añadidos 3mL de ácido clorhídrico a los tubos rotulados como A y 3mL de hidróxido de
sodio a los tubos B, ambas soluciones al 1.0 M, dejando reposar por 10 minutos, después se
realizó una decantación para añadir 2 ml de agua oxigenada, igual que en el caso anterior,
existiendo la presencia de la actividad enzimática fue medida la altura de la espuma y
fueron registradas las condiciones bajo las cuales fue realizada.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Tubo
+0-
Muestra animal (control)
Muestra vegetal (control)
Muestra animal + calor
Muestra vegetal + calor
Muestra animal - calor
Muestra vegetal - calor
Muestra animal + ácido
Muestra vegetal + ácido
Muestra animal + base
Muestra vegetal + base
Actividad
Producción de O2 / min
mm espuma
+ 60 mm 4.3657 x10-3 mol/min
+ 18mm 1.309 x10-3 mol/min
-
- -
-
- -
+ 87 6.8426 x 10-3 mol/min
+
18 3.6416 x10-3 mol/min
- 4 2.8864 x 10-4 mol/min
- - -
+ 33 2.404 x10-3 mol/min
- - -

Se obtuvo una mayor cantidad de oxígeno en las muestras de hígado (Tabla 1.)
con diferencias significativas en la reacción del peróxido en ambos tejidos, esto
ocurre porque la enzima catalasa, que está presente en el hígado y en la papa y
que se encarga de degradar el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno gaseoso,
actuó de manera más eficiente en el hígado debido a que ahí la enzima se
encuentra en proporciones mucho mayores que en la papa.
En la papa no se observa tanta producción ya que estas no contienen tantos
peroxisomas en las células como los tejidos del hígado y riñón, al igual que en el
rábano, en donde se puede observar una reacción casi nula frente al agua
oxigenada (Niedmann L, 2015).

En presencia de ácido clorhídrico hubo una producción considerable en la muestra

de hígado siendo de 2.8864 x 10-4 mol/min, mientras que en la papa no existió
producción. De la misma forma ocurrió con la sustancia alcalina, el hidróxido de
sodio fue considerable para la producción de oxígeno en el hígado a diferencia de
la papa en donde hubo producción.

Las catalasas mono funcionales dismutan el H 2O2 en O2 y H2O y lo hacen con una
gran eficiencia a cualquier pH entre 4 y 11. Son enzimas muy resistentes a
agentes desnaturalizantes y solventes orgánicos (Hansberg W, 2002).

CONCLUSIÓN Bajo la presente podemos evidenciar que la catalasa vegetal como

la catalasa animal está regida bajo factores como el pH, temperatura, que
influenciaran a esta en la catalización de la reacción. Justificando así mediante los
resultados obtenidos que en presencia de las temperaturas bajas se generó una
mayor actividad Enzimática tanto en la muestra animal como en la vegetal de igual
manera generando mayor producción de O2/min, así mismo se puede apreciar
que los factores menos benéficos para dichas actividades fueron temperaturas
elevadas, sustancias acidas y alcalinas por las cuales ocurrió una
desnaturalización de la enzima provocando la perdida de sus propiedades.

Cálculos
Para obtener la producción de gas se determinó primero el volumen de espuma
producido en cm3. Aplicamos un promedio de altura en cada muestra para
posteriormente obtener el volumen con la fórmula V = (π) (r 2) (h) con un radio de
0.75cm por cada tubo.
Ejemplo:
V1 = (π) (0.75cm)2 (6.5cm) V1 = 11.49cm3
Una vez que se obtuvo el volumen de la espuma se hicieron los cálculos para
determinar el número de moles del oxígeno (O 2). Sabiendo que cada cm3 equivale
a 1 ml se hizo una conversión de ml a L para poder aplicar la siguiente fórmula de
gases ideales:
PV =nRT

Donde:
P: es la presión atmosférica (1atm).
V: es el volumen de espuma producido (en litros)
n: es el número de moles
atm∙ L
R: es la constante de los gases (0.082 ).
mol ∙ ° K
T: es la temperatura (en °K)

Se despeja el número de moles (n) y se sustituye los valores del volumen (V) de la
siguiente manera según al tubo que le corresponda:

Nota: la temperatura en la reacción del peróxido de hidrógeno (H 2O2) con los

tubos con la muestra osciló entre 27-30° C. El tiempo de reacción en todos los
tubos fue de 1 minuto.

Ahora para conocer la producción de gramos se aplicó la fórmula siguiente:

n=g/PM Con esto se logró conocer la concentración del oxígeno en gramos para
que se pueda sustituir en la ley de los gases ideales y así determinar la producción
de oxígeno final.
REFERENCIAS 
Castro Rivera, J., & Baquero Duarte, L., & Narváez Cuenca, C. (2006).
CATALASA, PEROXIDASA Y POLIFENOLOXIDASA DE PITAYA AMARILLA
(Acanthocereus pitajaya). Revista Colombiana de Química, 35 (1), 91-101.
Universidad Nacional Autónoma de México. Cd Universitaria, México, DF,
MÉXICO. (2002). (http://laguna.fmedic.unam.mx/mensajebioquimico) (ISSN-
0188-137X)
Gerald Karp. (2004). Biología celular y molecular. México: McGraw-Hill
interamericana. Pág. 198.
Nomarski. (2012). Biología Celular. Junio 10, 2015, de Química y Biología Sitio
web:
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/cel
ular/programacell.htm
W. Becker, L. Kleinsmith & J. Hardin. (2006). El mundo de la célula. Madrid
(España): Pearson Addison Wesley. Pág. 388.
 REACA12-A

LISTAS DE COTEJO
INSTRUMENTO DE EVALUACIÓN PARA PRÁCTICAS

DATOS GENERALES DEL PROCESO DE EVALUACIÓN

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Revisar las características que se solicitan y califique en la columna “Valor Obtenido” el valor asignado con respecto al “Valor del Reactivo”. En la columna
“OBSERVACIONES” haga las indicaciones que puedan ayudar al alumno a saber cuales son las condiciones no cumplidas.

Valor del Valor

reactivo Característica a cumplir (Reactivo) OBSERVACIONES
Obtenido
Investigación previa y preparación de insumos requeridos
5%
para la práctica
Organización del trabajo, definición de roles y participación
15%
y de todos los miembros del equipo
Desarrollo correcto y adecuado de la secuencia de la práctica
10%

Modelo físico o Producto obtenido en la práctica, en tiempo

20%
y forma
 Contenido del reporte de la Práctica y Conclusiones, así
30%
como su entrega, en tiempo y forma
Examen individual de asimilación del conocimiento de la
20%
práctica

100% CALIFICACIÓN: