IDENTIFICACION DE LIPIDOS

Ana C. De La Ossa, Steffy M. González, Harold Y. Pérez

Laboratorio de Bioquímica
Facultad de Ingeniería
Programa de Ingeniería Agroindustrial
Universidad de Sucre

RESUMEN
En la práctica de laboratorio #3 (Identificación de lípidos), teniendo en cuenta que
estos son de origen biológico, solubles en disolventes orgánicos y muy poco
solubles en agua. Existen varios tipos de lípidos como ácidos grasos, ceras,
triglicéridos, fosfolípidos entre otros. Esta práctica fue de suma importancia ya que
permitió identificar la presencia de lípidos. Para la realización de la práctica se
llevó a cabo diferentes pruebas como la de solubilidad identificando en esta como
su nombre lo indica; cuál era soluble respecto a la solución utilizada (con agua y
éter), para la segunda prueba la tinción resulto que el aceite vegetal, la grasa
animal y la leche fueron mezclados con sudan III y tuvo un resultado favorable y el
aceite vegetal + tinta roja no resulto tinción, en la tercera prueba de saponificación
resulto positivo obteniendo así jabón; y para la última prueba de Lieberman resulto
positivo para prueba de colesterol obteniendo una coloración verde oscura.

Palabras claves: Lípidos, grasas, solubilidad, saponificación, colesterol.

INTRODUCCION acumulan como grasas, en los peces

Los lípidos son biomoléculas
orgánicas insolubles en el agua, que
pueden extraerse de las células y de
los tejidos mediante disolventes no
polares, por ejemplo, el cloroformo, el
éter o el benceno. Los lípidos
desempeñan diversas funciones
biológicas importantes, actuando
como componentes estructurales de
las membranas, como formas de
transporte y almacenamiento de
combustible catabólico, como
cubierta protectora sobre la superficie
de muchos organismos y como
componentes de la superficie celular
relacionadas con el reconocimiento
de las células, la especificidad de
especie y la inmunidad de los tejidos.
La forma en que los lípidos son
acumulados por un ser vivo varían,
por ejemplo, en los mamíferos se
como ceras; en las plantas se
almacenan en forma de aceites
protectores con aromas y sabores
característicos. Algunas sustancias
clasificadas entre los lípidos poseen
una intensa actividad biológica, se
encuentran entre ellas algunas
vitaminas y hormonas. Los lípidos
constituyen moléculas híbridas como
los glucolípidos, que contienen lípidos
y glúcidos, y las lipoproteínas, que
contienen lípidos y proteínas. En
estas biomoléculas las propiedades
químicas y físicas características de
sus componentes están fusionadas
para cumplir funciones biológicas
especializadas. Los lípidos, pueden
separarse fácilmente de otras
biomoléculas por extracción con
solventes orgánicos no polares como
ya se mencionó anteriormente,
tomando en cuenta sus
características de solubilidad y
observando el tipo de lípido que
desea extraerse. [1]
MARCO TEORICO
Los lípidos son un conjunto de
moléculas orgánicas (la mayoría
biomoléculas), que están constituidas
principalmente por carbono e transportan en forma de triglicéridos,
hidrógeno y en menor medida por
oxígeno. También pueden contener
fósforo, azufre y nitrógeno. Debido a
su estructura, son moléculas
hidrófobas (insolubles en agua), pero
son solubles en disolventes orgánicos
no polares como la bencina, el
benceno y el cloroformo lo que
permite su extracción mediante este
tipo de disolventes. A los lípidos se
les llama incorrectamente grasas, ya
que las grasas son solo un tipo de
lípidos procedentes de animales y
son los más ampliamente distribuidos
en la naturaleza.
Clasificación bioquímica
Lípidos saponificables. Son los
semejantes a las ceras y grasas y
que tienen enlaces éster y pueden
hidrolizarse.
Simples. Son los que contienen
carbono, hidrógeno y oxígeno.
Acilglicéridos. Son ésteres de
ácidos grasos con glicerol. Cuando
son sólidos se les llama grasas y
cuando son líquidos a temperatura
ambiente se llaman aceites.
Céridos (ceras).
Complejos. Son los lípidos que,
además de contener en su molécula
carbono, hidrógeno y oxígeno,
contienen otros elementos como
nitrógeno, fósforo, azufre u otra
biomolécula como un glúcido. A los
lípidos complejos también se les
llama lípidos de membrana pues son
las principales moléculas que forman
las membranas celulares.
Ácidos grasos
Para que los ácidos grasos puedan
ser utilizados a nivel celular se
que consisten en una molécula de
glicerol unida a tres ácidos grasos por
lo que también es llamado triester de
glicerilo.
Estructura en tres dimensiones del
ácido linoleico, un tipo de ácido
graso. En rojo se observa la cabeza
polar correspondiente a un grupo
carboxilo. Son las unidades básicas
de los lípidos saponificables, y
consisten en moléculas formadas por
una larga cadena hidrocarbonada
(CH2) con un número par de átomos
de carbono (2-24) y un grupo
carboxilo (COOH) terminal. La
presencia de dobles enlaces en el
ácido graso reduce el punto de
fusión. Los ácidos grasos se dividen
en saturados e insaturados.
Esterificación. Los ácidos grasos
pueden formar ésteres con grupos
alcohol de otras moléculas.
Saponificación. Por hidrólisis alcalina
los ésteres formados anteriormente
dan lugar a jabones (sal del ácido
graso).
Autooxidación. Los ácidos grasos
insaturados pueden oxidarse
espontáneamente, dando como
resultado aldehídos donde existían
los dobles enlaces covalentes.
Acilglicéridos
Representación tridimensional de un
triglicérido. Los Acilglicéridos o
acilgliceroles son ésteres de ácidos
grasos con glicerol (glicerina),
formados mediante una reacción de
condensación llamada esterificación.
Una molécula de glicerol puede
reaccionar con hasta tres moléculas
de ácidos grasos, puesto que tiene
tres grupos hidroxilo. Según el
número de ácidos grasos que se
unan a la molécula de glicerina,
existen tres tipos de acilgliceroles:
Monoglicéridos: solo existe un ácido
graso unido a la molécula de
glicerina.
Diacilglicéridos: la molécula de
glicerina se une a dos ácidos grasos.
Triacilglicérido o triglicéridos: la
glicerina está unida a tres ácidos
grasos. Son los más importantes y
extendidos de los tres. Los
triglicéridos constituyen la principal
reserva energética de los animales,
en los que constituyen las grasas; en
los vegetales constituyen los aceites.
El exceso de lípidos es almacenado
en grandes depósitos en el tejido
adiposo de los animales.
Céridos: Las ceras son moléculas
que se obtienen por esterificación de
un ácido graso con un alcohol
monovalente lineal de cadena larga.
Por ejemplo la cera de abeja. Son
sustancias altamente insolubles en
medios acuosos y a temperatura
ambiente se presentan sólidas y
duras. En los animales las podemos
encontrar en la superficie del cuerpo,
piel, plumas, cutícula, etc. En los
vegetales, las ceras recubren en la
epidermis de frutos, tallos, junto con
la cutícula o la suberina, que evitan la
pérdida de agua por evaporación.
Complejos
Los complejos además de contener
carbono, hidrógeno y oxígeno,
pueden tener azufre, fosfato y
nitrógeno e inclusive glúcido.
Fosfolípidos
Los fosfolípidos se caracterizan por
poseer un grupo de naturaleza de
fosfato que les otorga una marcada
polaridad. Se clasifican en dos
grupos, según posean glicerol o
esfingosina. [2]
Fosfoglicéridos
Estructura de un Fosfoglicéridos; X
representa el alcohol o aminoalcohol
que se esterifica con el grupo fosfato;
el resto representa el ácido
fosfatídico. Los fosfoglicéridos están
compuestos por ácido fosfatídico, una
molécula compleja compuesta por
glicerol, al que se unen dos ácidos
grasos (uno saturado y otro
insaturado) y un grupo fosfato; el
grupo fosfato posee un alcohol o un
aminoalcohol, y el conjunto posee
una marcada polaridad y forma lo que
se denomina la "cabeza" polar del
Fosfoglicéridos; los dos ácidos grasos
forman las dos "colas" hidrófobas; por
tanto, los fosfoglicéridos son
moléculas con un fuerte carácter
anfipático que les permite formar
bicapas, que son la arquitectura
básica de todas las membranas
biológicas.
Fosfoesfingolípidos
Son esfingolípidos con un grupo
fosfato, tienen una arquitectura
molecular y unas propiedades
similares a los fosfoglicéridos. No
obstante, no contienen glicerol, sino
esfingosina, un aminoalcohol de
cadena larga al que se unen un ácido
graso, conjunto conocido con el
nombre de ceramida; a dicho
conjunto se le une un grupo fosfato y
a éste un aminoalcohol; el más
abundante es la esfingomielina, en la
que el ácido graso es el ácido
lignocérico y el aminoalcohol la
colina; es el componente principal de
la vaina de mielina que recubre los
axones de las neuronas.
Glucolípidos
Los glucolípidos son esfingolípidos
formados por una ceramida
(aminoalcohol + ácido graso) unida a
un glúcido, careciendo, por tanto, de
grupo fosfato. Al igual que los
Fosfoesfingolípidos poseen ceramida,
pero a diferencia de ellos, no tienen
fosfato ni alcohol. Se hallan en las
bicapas lipídicas de todas las
membranas celulares, y son
especialmente abundantes en el
tejido nervioso; el nombre de los dos
tipos principales de glucolípidos alude
a este hecho:
Cerebrósidos. Son glucolípidos en
los que la ceramida se une un
monosacárido (glucosa o galactosa) o
a un oligosacárido.
Gangliósidos. Son glucolípidos en los
que la ceramida se une a un
oligosacárido complejo en el que
siempre hay ácido siálico.
Los glucolípidos se localizan en la
cara externa de la bicapa de las
membranas celulares donde actúan
de receptores. [3]
Lípidos insaponificables.
Terpenos
Los terpenos, terpenoides o
isoprenoides, son lípidos derivados
del hidrocarburo isopreno (o 2-metil-
1,3-butadieno). Los terpenos
biológicos constan, como mínimo de
dos moléculas de isopreno. Algunos
terpenos importantes son los aceites
esenciales (mentol, limoneno,
geraniol), el fitol (que forma parte de
la molécula de clorofila), las vitaminas
A, K y E, los carotenoides (que son
pigmentos fotosintéticos) y el caucho
(que se obtiene del árbol Hevea
brasiliensis).
Esteroides
Los esteroides son lípidos derivados
del núcleo del hidrocarburo esterano
(o ciclopentanoperhidrofenantreno),
esto es, se componen de cuatro
anillos fusionados de carbono que
posee diversos grupos funcionales
(carbonilo, hidroxilo) por lo que la
molécula tiene partes hidrofílicas e
hidrofóbicas (carácter anfipático).
Entre los esteroides más destacados
se encuentran los ácidos biliares, las
hormonas sexuales, las
corticosteroides, la vitamina D y el
colesterol. El colesterol es el
precursor de numerosos esteroides y
es un componente más de la bicapa
de las membranas celulares.
Esteroides Anabólicos es la forma
como se conoce a las substancias
sintéticas basadas en hormonas
sexuales masculinas (andrógenos).
Prostaglandinas
Los eicosanoides o prostaglandinas
son lípidos derivados de los ácidos
grasos esenciales de 20 carbonos
tipo omega-3 y omega-6. Los
principales precursores de los
eicosanoides son el ácido
araquidónico, el ácido linoleico y el
ácido linoleico. Todos los
eicosanoides son moléculas de 20
átomos de carbono y pueden
clasificarse en tres tipos:
prostaglandinas, tromboxanos y
leucotrienos. [4]
OBJETIVOS
 Reconocer las propiedades de
los lípidos de origen animal y
vegetal.
 Aplicar las técnicas de las
propiedades de los lípidos a
partir de materiales bilógicos.
 Conocer la reacción de los
lípidos ante los reactivos
utilizados y las características
esenciales.
MATERIALES Y REACTIVOS
 1beaker de 100ml
 Tubos de ensayo
 Pinza y gradilla para tubos de
ensayo
 Mechero
 Aceite vegetal
 Grasa animal usada
 Leche
 Huevo criollo
 Tinta china
 Solución de sacarosa
 Cloroformo
 Sudan iii
 Éter
 Solución NaOH al 20%
METODOLOGIA
Prueba1: SOLUBILIDAD
Se tomaron 4 tubos de ensayo, para
cada tubo adicionarle soluciones
diferentes; para el tubo 1 se le
adiciono 2ml de aceite vegetal y 2ml
de agua destilada, para el tubo 2 se
le adiciono 1ml de aceite vegetal y
1ml de éter, en el tubo 3 se le agregó
1ml de grasa animal usada y 1ml de
agua destilada; y para el 4 tubo de
ensayo 1ml de grasa animal usada
más 1ml de éter, se agito y así se
procedió a observar solubilidad en
cada uno de los tubos de ensayo.
Prueba2: TINCIÓN
En 4 tubos de ensayo se
desarrollaron las siguientes pruebas:
para el tubo 1 se tomó 2ml de aceite RESULTADOS
vegetal y se le añadió 5 gotas de IDENTIFICACIÓN DE LIPIDOS
Pruebas Resultados Observación
solución alcohólica de sudan III, de
Tubo1: No es El aceite
igual forma se procedió hacer con el aceite soluble vegetal no se
tubo 2 pero adicionándole 2ml de vegetal+ disolvió en el
agua agua (2capas)
grasa animal usada y la misma destilad
cantidad de solución alcohólica sudan solubilidad a
III, en el tubo 3 se tomó 1ml de leche Tubo2: Se disolvió el
aceite soluble aceite vegetal
y 5 gotas de solución alcohólica de vegetal+ con el éter.
sudan III; y para el tubo 4 se hizo de éter
la siguiente forma, se tomó 1ml de Tubo3: No es El aceite no se
grasa soluble disolvió con el
aceite vegetal y se le añadieron 3 animal agua.
gotas de tinta roja agitándose +agua
Tubo4: Se disolvió la
después y observando cada uno de
grasa soluble grasa animal
los tubos. animal+ con el éter.
éter
Tubo1: Hubo Hubo tinción
Prueba3: SAPONIFICACIÓN sudan III tinción por completo
Para la prueba de saponificación se tinción + aceite entre el sudan
tomaron 3 tubos de ensayo: vegetal III y el aceite
vegetal.
añadiendo la misma cantidad de Tubo2: Hubo Se tiño
solución para cada tubo (NaOH)20% sudan III tinción completo el
P/V; en el tubo 1 con 2ml de aceite + grasa sudan III con
animal la grasa
vegetal, en el tubo 2 con 2ml de animal.
grasa animal usada y en el tubo 3 se Tubo3: Hubo Se tiño por
sudan III tinción completa la
le añadió 2ml de leche. Se agito y se
+ leche leche con el
precedió a llevar en baño de maría Sudan III.
por 30 minutos para así observar Tubo4: No hubo No hubo
aceite tinción tinción, la tinta
finalmente. vegetal se fue hasta el
+tinta fondo.
Prueba4: ENSAYO DE roja
Tubo1: positivo Formación de
LIEBERMAN-BURCHARD aceite 3 capas,
En 1 grupo se preparó la solución de vegetal+ presencia de
la muestra a utilizar y de allí se tomó NaOH jabón.
Tubo2: positivo Formación de
1ml de dicha muestra (cloroformo + saponificació grasa 3 capas,
yema de huevo) en un tubo de n animal+ presencia de
NaOH jabón.
ensayo luego se le adiciono 1ml de
Tubo3: positivo Formación de
anhídrido + 4 gotas de ácido sulfúrico. leche+ 3 capas,
Se procedió a observar la formación NaOH presencia de
jabón.
del color. Lieberman- Prueba positiva Coloración
burchard para Colesterol verde azulada
ANALISIS DE RESULTADOS
1. Prueba de solubilidad: Los lípidos
son compuestos orgánicos naturales
y tiene moléculas orgánicas entre sí;
son caracterizadas por su solubilidad
en los disolventes orgánicos no
polares y por ser insolubles en agua.
Al realizar la prueba del aceite
vegetal y la grasa animal usada con
el agua resulta no soluble, debido a
que los enlaces polares son más
enérgicamente viables y estables; por
eso se dice que no hay adhesión
entre las moléculas de aguas y las
sustancias lipídicas porque las
cadenas de hidrocarburos no son
capaces de establecer afinidad entre
las moléculas de agua y por este
hecho no se mezclan. Por el contrario
al hacer uso del éter con el aceite
vegetal y la grasa animal usada si
hay solubilidad entre ambos puesto
que la mayor parte de las moléculas
de los lípidos son no polar ya que es
una cadena simétrica (hidrocarburo) y
a esto se debe que los lípidos tienen
una cola hidrofóbica, ya que el agua
es polar y es insoluble en estos.
2. Prueba de tinción: Se hizo la
prueba del aceite vegetal, la grasa
animal usada y la leche con la
solución de sudan III resultando
positivo (tinción en las tres pruebas)
se debe a que los colorantes para las
grasas son más solubles en las
propias grasas que en el medio en el
que van disueltas; ya que en la leche
resulto igual (tinción) que en el aceite
vegetal y la grasa animal puesto que
esta también contiene grasa. Se
demuestra que mediante la tinción de
triglicéridos con color rojo hay
presencia de grasas. Al realizar la
prueba de aceite vegetal y tinta roja
no se observa tinción completa
indicando que el aceite vegetal es
insoluble en este reactivo por lo que
solo se nota que al adicionar la tinta
roja llego al fondo del tubo de ensayo
diferenciando la solubilidad de las
grasas y aceite entre el sudan III y la
tinta roja.
3. Prueba de saponificación: La
prueba de saponificación al realizar
con aceite vegetal, grasa animal y
leche resulta positiva para todas, ya
que el NaOH es una base fuerte que
al ser mezclado con grasas y aceites
le permite la formación de sal sódica
lo que se conoce como el jabón, ya
que estos (grasa y aceite) son lípidos
saponificables y poseen ácidos
grasos en la molécula conteniendo
solo oxígeno, carbono e hidrogeno.
La formación de las tres capas en el
tubo de ensayo indican: la capa
inferior es la que contiene la glicerina,
la capa intermedia presento un
aspecto grueso siendo el jabón
formado y la capa superior es el
aceite o grasa que no se utiliza.
4. Prueba de Lieberman-burchard:
Para la prueba resulto identificación
de colesterol teniendo como resultado
una coloración verde azulado oscuro,
al obtener esto se produce una
pérdida de agua y una protonizacion
del colesterol y son constituidos en un
medio anhidro polímeros de
hidrocarburos no saturados; haciendo
presencia el grupo esteroide. La
coloración verde azulado se debe a
que el grupo hidroxilo (-OH) del
colesterol que reacciona con los
reactivos y el aumento de la
conjugación de la sustitución en el
anillo fusionado.
CONCLUSIONES
En la realización de la práctica No. 3,
de la identificación de polisacáridos,
se pueden sacar las siguientes
conclusiones:
1. El aceite es soluble en un éter
debido a que ambos
compuestos no son polares, en
sus moléculas no se presentan
densidades de cargas
opuestas.
2. Las moléculas del agua son
polares y las del aceite (lípido)
son no polares, debido a las
diferentes estructuras y en una capa que, por su menor
densidades, no hay adhesión
entre las moléculas de agua y
la sustancia lipídica. Por lo
tanto estos dos reactivos se
repelen entre sí frente a una
prueba de solubilidad y dan
como resultado dos fases.
3. Reacciones como la
esterificación, saponificación y
Autooxidación, ocurren
comúnmente en los lípidos y
ácidos grasos, y es vital
conocer qué producto se
obtiene de cada reacción. A
partir de las reacciones
orgánicas podemos obtener
compuestos necesarios en la
industria, así como otros
procesos químicos. Los
compuestos que no se
encuentran de manera natural,
pueden ser sintetizados en
laboratorio si se conocen todas
las condiciones necesarias
para su síntesis.
CONSULTAS
1. ¿cuál es el fundamento y
reacciones de cada uno de los
ensayos?
R/ 1. PRUEBA DE SOLUBILIDAD:
Los lípidos son insolubles en agua.
Cuando se agitan fuertemente en ella
se dividen en pequeñísimas gotas
formando una emulsión de aspecto
lechoso, que es transitoria, pues
desaparece en reposo por
reagrupación de las gotas de grasa
densidad, se sitúa sobre el agua. Por
el contrario, las grasas son solubles
en disolventes orgánicos, como el
éter, cloroformo, acetona, benceno,
etc.
2. ENSAYO DE TINCION: La técnica
del Sudán III es un método utilizado
generalmente para demostrar la
presencia de grasas mediante tinción
de triglicéridos, aunque también tiñe
otros lípidos. Pertenece al grupo de
colorantes indiferentes, que son
aquellos que no tienen afinidad por
estructuras ácidas o básicas. Son
insolubles en el agua y tiñen aquellas
sustancias que tienen un poder de
disolución superior al del líquido
empleado para preparar la solución
colorante. Los colorantes para grasas
son más solubles en las propias
grasas que en el medio en el que van
disueltos. Así, al bañar la grasa con la
solución del colorante, éste tiende a
disolverse en la grasa que se va
cargando del colorante. Por regla
general estos colorantes siempre van
en solución alcohólica o bien en una
mezcla de alcohol/acetona
alcohol/agua.
4. ENSAYO DE LIEBERMAN-
BURCHARD: El colesterol reacciona
con anhídrido acético y ácido
sulfúrico concentrado. Se produce
una pérdida de agua y una
preconización del colesterol. Se
constituyen en medio anhidros
polímeros de hidrocarburos no
saturados de intenso color verde
azulado.
o

ANEXOS

3. SAPONIFICACION: Las grasas

reaccionan en caliente con el
hidróxido sódico o potásico
descomponiéndose en los dos
elementos que las integran: glicerina
y ácidos grasos. Éstos se combinan
con los iones sodio o potasio del
hidróxido para dar jabones, que son
en consecuencia las sales sódicas o Figura 1 (resultados prueba de
potásicas de los ácidos grasos. En solubilidad)
los seres vivos, la hidrólisis de los
triglicéridos se realiza mediante la
acción de enzimas específicos
(lipasas) que dan lugar a la formación
de ácidos grasos y glicerina.

Figura 2 (resultados prueba de

tinción)
Figura 3 (baño de maría para prueba Figura 6 (resultado prueba de
de saponificación) Lieberman-burchard (presencia de
colesterol))

REFERENCIAS
[1]https://www.studocu.com/es/docu
ment/universidad-nacional-autonoma-
de-
mexico/bioquimica/resumenes/reporte
-de-practica-6-lipidospdf/347436/view

[2] Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL.

Biochemistry. San Francisco: W.H.
Figura 4 (baño de maría 15 minutos
Freeman. ISBN 9780716787242.
después)

[3] Mc Murry, John (2008). «27». En

Sergio R. Cervantes. Química
Orgánica. México: Cengage Learning.
p. 1060. ISBN 6074813493.

[4] Rodriguez - Pérez, Arcadio de la

Cruz - María Esther de la Cruz
(2006). «Biololeculas». En McGraw-
Hill. Química Orgánica Vivencial.
México: McGraw-hill.

Figura 5 (resultado jabón) [5] www.fcnym.unlp.edi.ar