Fecha de Emisión:

PROCEDIMIENTO DETERMINACIÓN DE 07-05-2009

FÓSFORO TOTAL EN ALIMENTOS. Revisión: 1
Método Espectrofotométrico del
molibdato de amonio Fecha revisión:
07-05-2009
Laboratorio Nutrientes, Página 1 de 3
Aditivos y PRT-711.02-056
Contaminantes

1. OBJETIVO
Determinar el fósforo total en muestras alimenticias.

2. CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE

El método es aplicable a alimentos en general, sólidos y líquidos.

3. FUNDAMENTO
El método se basa en la formación de fosfomolibdato que en presencia de ácido ascórbico se
reduce a azul de molibdeno y cuya absorbancia se lee a 660 nm.

4. REFERENCIAS
4.1 Schdmit-Hebbel, H. “Ciencia y Tecnología de los Alimentos”. Editorial Universitaria,
Santiago-Chile, 1981.
4.2 Pulliainen & Walin: Journal of A.O.A.C. International Vol. 79, N°6 (1996).

5. TERMINOLOGÍA
No Aplica

6. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

6.1 Materiales y equipos
6.1.1 Balanza analítica, sensibilidad 0,1 mg.
6.1.2 Mufla regulable a 550 ± 15°C.
6.1.3 Baño termorregulador.
6.1.4 Espectrofotómetro visible.
6.1.5 Cápsulas de porcelana.
6.1.6 Placa calefactora.
6.1.7 Material usual de laboratorio.
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6.2 Reactivos
6.2.1 Ácido clorhídrico p.a. 37%.
6.2.2 Solución 1: Tampón pH 4: Pesar 34 g de acetato de sodio trihidratado, disolver en
agua y mezclar con 57 mL de ácido acético glacial, completar 1 litro con agua,
controlar pH con peachímetro.
6.2.3 Solución 2: Ácido ascórbico: Preparar al 1% en solución de ácido oxálico al 0,5%
recién preparado.
6.2.4 Solución 3: Molibdato de amonio sulfúrico: Preparar diluyendo 75 mL de ácido
sulfúrico en 200 mL de agua, que son agregados a una solución que contiene 25 g de
molibdato de amonio disueltos en 300 mL de agua.
6.2.5 Solución estándar de trabajo: 25 µg/mL. Tomar 25 mL de la solución de 100 µg/mL y
enrasar a 100 mL con agua.

7. DESARROLLO
7.1 Pesar 1 a g de muestra previamente homogenizada.
7.2 Precalcinar y luego calcinar a 550°C por 8 horas hasta cenizas blancas.
7.3 Tratar las cenizas en el crisol a temperatura ambiente con 5 mL de agua y 5 mL de ácido
clorhídrico. Cubrir con vidrio reloj y herir cuidadosamente 5 min. en placa calefactora,
evitando que se seque. Transferir cuantitativamente a matraz aforado de 100 mL con agua
destilada y aforar.
7.4 Medir 5 mL de la solución muestra, agregar 10 mL de la solución 1, luego 1 mL de la
solución 2 y finalmente 5 mL de la solución 3. Mezclar después de cada adición y aforar a
100 mL con agua.
7.5 Leer la absorbancia a 660 nm a los 30 minutos exactos desde que se adiciona la solución 3.
7.6 Hacer un blanco y un estándar con 5 mL de la solución 6.2.5 que serán sometidas al mismo
tratamiento del punto 7.4.
7.7 Expresión de resultados:

g de fósforo = ____Am x C_______

As x a x P x 10

Am: Absorbancia muestra.

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As: Absorbancia estándar.

C: Masa en µg del estándar
a: Alícuota muestra, mL.
P: Peso muestra, g.

7.8 Para expresar:

g fósforo en g de PO4 se multiplica por el factor 3.066
g fósforo en g de P2O5 se multiplica por el factor 2.291.

7.9 Observaciones:
Para análisis de materias primas se deben modificar los pesos de muestras y las alícuotas a tomar.

7.10 Informe:
Se indicará identificación de la muestra, método utilizado, limite de detección, normativa y limite
permitido cuando corresponda y el resultado obtenido en la unidad correspondiente.

8. REGISTROS
8.1 Registro de análisis proximal en alimentos

9. ANEXOS
No Aplica