A signatura Bioquímica

Reconocimiento de Biomoléculas
Botero, S.L1 Hernández, A.G2
Departamento de Ciencias Básicas
Correo:sonial.boterog@utadeo.edu.co1, andresg.hernandeza@utadeo.edu.co2

RESUMEN
Podemos afirmar que las moléculas que constituyen los seres vivos son los
carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, cada uno de ellos con funciones
biológicas determinadas, en este laboratorio se realizó un reconocimiento por medio de
ensayos cualitativos la presencia de las diferentes biomoléculas en diferentes tipos de
muestras, realizando comparaciones entre cada uno de ellos para así tener certeza de
cómo se comportan frente a los diferentes reactantes.
ABSTRACT
We can affirm that the molecules that constitute the living beings are the carbohydrates,
lipids, proteins and nucleic acids, each of them with determined biological functions, in
this laboratory was realized by means of qualitative tests the presence of the different
biomolecules in different Types of samples, making comparisons between each of them
to be sure how they behave against different reactants.

KEY WORDS: carbohydrates, lipids, proteins and nucleic acids.

FUNDAMENTO TEÓRICO
Se les considera biomoléculas a todos los compuestos químicos que al estar en
conjunto conforman la materia viva, es decir, las bases químicas que permiten subsistir
al ser vivo, existen infinidades de biomoléculas, Pero entre las más necesarias o las
que se encuentran en abundancia son en primer lugar el nitrógeno, oxigeno, hidrógeno
y carbono, en Segundo lugar, se puede mencionar sulfuro y fósforo [ CITATION CON17 \l
9226 ]

Dichas biomoléculas se clasifican en 2 posibles, si el organismo los debe ingerir en su

dieta “inorgánicos” como el agua y las sales inorgánicas o si por el contrario son
sintetizadas por el organismo “orgánicas” como lo son: [ CITATION bio11 \l 9226 ]
Proteínas: son moléculas complejas formadas por unidades más simples llamadas
aminoácidos, los cuales están unidos por enlaces pepiticos. Estos compuestos son
esenciales en la química de la vida y son componentes estructurales de las células y
tejidos. El crecimiento adecuado, la restauración y el mantenimiento del organismo
dependen del abastecimiento de estas sustancias.
Abundantes en alimentos de origen animal, además de su función estructural también
realizan otras: transportadoras, hormonales, inmunológicas [ CITATION Res06 \l 9226 ]

Carbohidratos: Los carbohidratos típicos son azucares, almidones y celulosa. Los

almidones y azucares sirven de combustible para la célula (proveedores de energía), y
la celulosa es un componente estructural de las plantas. [ CITATION far10 \l 9226 ]

Los carbohidratos se clasifican como:

Monosacáridos o azucares simples, los cuales pueden tener de tres a siete átomos de
carbono en su estructura. La glucosa es el ejemplo más conocido de las hexosas
(azúcar de seis átomos de carbono).
Disacáridos o azucares dobles, los cuales están constituido por dos monosacáridos,
como por ejemplo la sacarosa que está conformada por una glucosa unida a una
fructosa.
Polisacáridos los cuales forman largas cadenas de monosacáridos como es el caso del
almidón que se encuentran en los vegetales
Lípidos: Son moléculas orgánicas apolares, que tienden a ser insolubles en agua, pero
solubles en solventes apolares como el éter o tolueno. Estos están formados por C, H,
O, además pueden tener otros elementos como P. Con respecto a las unidades básicas
de estas grasas encontramos al glicerol y los ácidos grasos, los cuáles se unen por un
enlace éster. La clasificación de los lípidos es algo más compleja que otras moléculas y
se pueden encontrar dos grandes grupos según el proceso de saponificación: lípidos
saponificables y lípidos insaponificables[ CITATION bio15 \l 9226 ]

La saponificación es la hidrólisis básica de las uniones éster de las grasas y los aceites.
Por lo tanto, los lípidos saponificables son aquellos que se pueden hidrolizar en medio
básico, dando tres unidades de jabón (sal sódica o potásica de un ácido graso) y una
unidad de glicerina. 
Los lípidos insaponificables o también llamados simples son aquellos que no se
hidrolizan fácilmente, y son los esteroides, prostaglandinas y terpenos [ CITATION Rau14 \l
9226 ]

Ácidos Nucleicos: Estas moléculas orgánicas están compuestas por C,H,O,N,P,

siendo su unidad básica el nucleótido, monómero que está estructurado por una base
nitrogenada que puede ser adenina, timina, guanina, citosina o uracilo, una pentosa
(azúcar) y un grupo fosfato, estos nucleótidos se unen otros a través de enlaces
fosfodiéster[ CITATION bio15 \l 9226 ]
MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIALES

 3 goteros
 Gradillas
 24 tubos de ensayo
 Pinza para tubo
 3 pipetas graduadas
 Propipeta
 2 vasos de precipitados

REACTIVOS

 α-naftol
 Reactivo de Biuret
 NaOH 15%
 Cloroformo
 Anhídrido acético
 Ácido sulfúrico concentrado
 Difenilamina fresco

MUESTRAS

 Rafinosa
 Extracto de papa
 caseína
 Clara de huevo
 Extracto de ADN
 Extracto de cebolla
 Colesterol
 Aceite de cocina
 Fosfatidilcolina
MÉTODOS
Reconocimiento de carbohidratos.

Reconocimiento de proteínas.
Reconocimiento de lípidos saponificables

Reconocimiento de lípidos insaponificables

Reconocimiento de ADN
RESULTADOS

REACTIVO RECONOCIMIENTO MUESTRAS RESULTADO OBSERVACIÓN

Formación anillo
Rafinosa Positivo
violeta
Agua Son cambio de
Molish Carbohidratos Negativo
destilada color 
Extracto de Formación anillo
Positivo
papa violeta

Caseína Positivo Coloración azul

Agua Coloración
Biuret Proteínas Negativo
destilada violeta
Clara de
Positivo Coloración azul
Huevo
Fosfatidilcolin Formación
Positivo
a espuma
Lípidos Agua Sin cambio de
Hidróxido de sodio Negativo
saponificables destilada color
Aceite de Formación
Positivo
cocina espuma
Coloración verde
Colesterol Positivo
esmeralda 
Cloroformo + Lípidos Agua  Sin cambio de
Negativo
Anhídrido acético insaponificables destilada color
 Clara de Coloración
Negativo
huevo marrón 
Extracto de Coloración azul
Positivo
ADN oscura
Agua
Difenilamina ADN Negativo Coloración
destilada
Extracto de Coloración azul
Positivo
cebolla oscura

ANÁLISIS DE RESULTADOS
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
El reactivo de Molish se usa comúnmente para realizar una identificación cualitativa de
carbohidratos en una muestra, en donde los disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos
se hidrolizan con el ácido sulfúrico hasta su estado base es decir monosacáridos, los
cuales se convierten en furfural que posteriormente reaccionaran con el alfa-naftol
formando una coloración purpura característica. (Morales 2005)

Reacción de Molish

https://sites.com/site/bioquia9/reaccion-de-molish

Tanto para la Rafinosa ubicada en la izquierda de la

imagen, usada como patrón positivo y para la muestra de
extracto de papa se observó una coloración naranja en el
tubo, la formación de una capa de ácido bajo la capa
acuosa y una interface en forma de anillo color violeta. La
muestra negativa que es agua destilada no tuvo cambio de
coloración. Lo anterior concuerda con la hipótesis planteada
antes de la práctica.

RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
Por medio de la acción del reactivo de Biuret se evidencia la presencia de proteínas y
péptidos en sustancias problemas, debido a la formación de un complejo de color
violeta-azul formado entre en cobre y el grupo amino de los enlaces peptídicos, la
intensidad del color dependerá de la cantidad de proteínas presentes
 Reacción de Biuret

http://quimicadesexto2012.blogspot.com.co/2012/06/informe-
de-la-experiencia.html

Muestra Contenido Proteína

Clara de huevo Agua 88% Ovoalbúmina 54%

Grasa 0.2% Conalbúmina: 13%

Minerales 0.8% Ovomucoide: 11%

Proteína 11.0% Ovomucina 1.5%

Avidina 0.05%

Lisozima

Flavoproteina

Ovoinhibidor 0.1%

Para esta prueba se usó como muestra clara de huevo,

por la literatura (Tabla contenido de clara de huevo)
sabíamos que esta tiene un porcentaje muy alto de
proteínas, por otro lado, la muestra patrón positiva
utilizada fue caseína debido a que es una proteína pura
con alto contenido de aminoácidos, para ambos casos el
resultado que se obtuvo fue positivo mostrando una
coloración más intensa para la caseína; el patrón
negativo utilizado corresponde a agua destilada. Lo
anterior da concordancia a la hipótesis planteada.
RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS SAPONIFICABLES
La siguiente reacción se conoce como saponificación y es de gran importancia en la
industria de agentes de limpieza y cosméticos. Se da entre un lípido con ácidos grasos
y un agente álcali (Generalmente Hidróxido de Sodio) dando lugar a la formación de
soluciones espumosas de tipo antipático, es decir con zonas apolares y polares.
(Carrero,2010)

Saponificación de ácidos grasos.

http://biomodel.uah.es/model2/lip/fig/neutralizacion.png

La muestra de aceite de cocina (Derecha) presento

saponificación, ya que está compuesta por una variedad
importante de ácidos grados, esto fue evidente por la formación
de sales, es decir una fase superficial espumosa al agitar el tubo.
Semejante a esto ocurrió en el patrón positivo de fosfatidilcolina
que presenta en su estructura esfingosina, dos ácidos grados, un
grupo fosfato y colina. Para la muestra negativa de agua
destilada ubicada al costado izquierdo de la imagen no se
observa cambio de coloración ni formación de jabón. Lo anterior
concuerda con las hipótesis planteadas con anterioridad.

RECONOCIMEINTO DE LIPIDOS INSAPONIFICABLES

Mediante esta prueba se buscaba reconocer la presencia de lípidos

de la categoría no saponificables, dando como resultado la
evidencia del ciclo de pentanoperhidrofenantreno característico del
colesterol que sirvió como patrón positivo, el cual reaccionó con el
anhídrido acético y el ácido sulfúrico mostrando una coloración
verde esmeralda después de un tiempo. Por otro lado, la muestra
de aceite no reaccionó, suponemos que estaba contaminado o
tenía presencia de diferentes compuestos, dado que no mostró la
coloración característica, de igual forma el agua destilada no
reaccionó. Por lo anterior no se tiene relación con hipótesis
planteada con anterioridad.
RECONOCIMIENTO DE ADN
Este ensayo cualitativo se utiliza para identificar la presencia de ADN en diferentes
tejidos, para esto se utilizan como reactivos que al llegar a cierta temperatura rompen
los enlaces fosfodiester presentes en los nucleótidos de ADN, hidrolizando los enlaces
glucosídicios que hay entre la pentosa y la base, esto da como resultado la formación
de un compuesto llamado hidroxi-aldehido levulinico que forma coloraciones azules
cuando reacciona con difenilamina.

Reconocimiento de ADN con difenilamina

http://b.se-todo.com/himiya/3940/index.html

Según los resultados obtenidos en la práctica podemos

inferir que en el patrón de extracto de ADN se presenta
mayor cantidad de esta biomolécula por que la intensidad
de su coloración es mayor, mientras que el extracto de
cebolla sufrió una deshidratación que genero hidroxi.
-aldehídos levulinicos, dando como resultado una
coloración azul translucida, después de pasar un tiempo
considerable a baño María, como en los anteriores
ensayos la muestra negativa utilizada fue agua destilada.
El resultado obtenido da concordancia con la hipótesis
planteada con anterioridad.

CONCLUSIONES
  El reactivo de Molish me permite reconocer carbohidratos, evidenciado en la
formación de un anillo color violeta inmerso en las muestras.
 Para efectuar el reconocimiento de proteínas y enlaces peptídicos se puede
utilizar el reactivo de Biuret, que forma diferentes tonalidades violetas según el
contenido de esta biomolécula.
 Una excelente prueba para clasificar un lípido es la saponificación que permite
reconocer que muestra contiene dentro de su estructura ácidos grasos como por
ejemplo los cerebrosidos o la fosfadilcolina ya que estos en reacción formaran
jabones.
 Aquellos lípidos que no contiene ácidos grasos dentro de su estructura no
forman jabones, son característicos de esta clase las hormonas y el colesterol.
En reacción de identificación formarán coloraciones verdosas.
 Para identificar ácidos nucleicos se utiliza el reactivo difenilamina el cual resulta
muy efectivo para reconocer este tipo de biomoléculas, dando tonalidades azules
como respuesta positiva.

BIBLIOGRAFÍA

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Obtenido de http://www.bionova.org.es/biocast/tema03.htm
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 Carrero,I y Herráez,A.(2010 03 de agosto). Jabones y detergentes.
[biomodel.uah.es] de :http://biomodel.uah.es/m odel2/lip/fig/neutralizacion.png