Está en la página 1de 17

SUDAN NEGRO

Grupo Grupo
Cromoforo Auxocromo
Azoico Radical Hidroxilo -OH
Metilo -CH3

Estructura que Colorea


Afinidad NUCLEOS Y CITOPLASMA EN
ACIDA ROJO. LIPIDOS Y MELANINA
EN NEGRO
Procedimiento Tecnico

--Sudan Negro B....................................................................................................................... 0,5 g


--Propilenglicol............................................................................................................................... 100 ml
Añadir una pequeña cantidad de propilenglicol (propanodiol) al colorante
y mezclar. Agregar el propilenglicol restante lentamente; calentar de
forma gradual hasta 95ºC, agitando constantemente. Filtrar a través de
papel de filtro mientras este caliente. Dejar enfriar. Esta solución se
conserva indefinidamente. Filtrar antes de usar.
HEMATOXILINA ACIDA FOSFOTUNGSTICA

Grupo Grupo
Cromoforo Auxocromo
Iminas Quinonicas Radical Hidroxilo -OH

Afinidad Estructura que Colorea


ESTRIACIONES MUSCULARES, FIBRAS DE
NEUROGLÍA: AZUL OSCURO.FIBRINA:AZUL
INDIFERENTE. ACIDO: OSCURO. NÚCLEOS:AZUL.MIELINA:AZUL
ACIDO FOSFOTUNGSTICO CLARO. COLÁGENO,OSTEOIDE, CARTÍLAGO,
FIBRAS ELÁSTICAS: MARRÓN OSCURO /
BASICO: HEMATOXILINA ROJO.CITOPLASMAS: MARRÓN ROSÁCEO
PÁLIDO.
Procedimiento Tecnico
--Hematoxilina....................................................................................................................... 1 g
--Acido Fosfotungstico..................................................................................................... 20 g
--Agua Destilada.................................................................................................................. 1000 ml
Disolver los productos sólidos en agua destilada. La hematoxilina se
disuelve más rápidamente con la ayuda de calor. Después de que se enfrié
se puede combinar con la mezcla de ácido fosfotúngstico y agua. El
proceso de maduración requiere ordinariamente varias semanas, pero si se
añade 0,2 g de permanganato potásico, el colorante madurará
inmediatamente
PAS PERIODIC ACID SCHIFF

Grupo Grupo
Cromoforo Auxocromo
Reacciona con dos Radical Amino -NH2
Aldehidos Hidroxilo -OH

Estructura que Colorea


Afinidad CARBOHIDRATOS.
NUCLEOS: AZUL.
BASI CA MATERIAL PAS POSITIVO
ROJO OSCURO
Procedimiento Tecnico
METODO DE COLEMAN
--Agua Hirviendo...................................................................................................... 200 ml
--Fucsina Básica (clorhidrato de pararosanilina).............................. 1 g
Dejar enfriar tras la disolucion
--Metabisulfito Potásico.......................................................................................... 2 g
--Ácido Clorhídrico normal.................................................................................... 10 ml
Al cabo de 24 horas se añade:
--Carbón Activo............................................................................................................. 0,5 g
Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar
Procedimiento Tecnico

METODO DE LLILIE
--Fucsina Básica ................................................................................................................ 1 g
--Metabisulfito Sódico...................................................................................................... 2,9 g
--Ácido Clorhídrico al 0,15N.................................................................................... 100 ml
Dejar que la solución se decolore agitando de vez en cuando. Cuando
haya una casi total decoloración (12 a 24 h) se continúa con la receta
--Carbón Activo............................................................................................................. 0,5 g
Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar
Procedimiento Tecnico

METODO DE GRAUMANN
--Fucsina Acida........................................................................................................... 0,5 g
--Metabisulfito Potasico.......................................................................................... 0,5 g
--Ácido Clorhídrico al 1 N.................................................................................... 15 ml
--Agua Destilada......................................................................................................... 85 ml
Mezclar las soluciones, dejar sedimentar durante 24 h. Cuando se
alcance una decoloración casi total se sigue con la receta
--Carbón activo............................................................................................................. 0,5 g
Agitar vigorosamente durante 1 min, dejar sedimentar y filtrar
PIRONINA

Grupo Grupo
Cromoforo Auxocromo
Xanteno Grupo Metilo -CH3

Afinidad Estructura que Colorea


BASICA AFINIDADPOR EL ARN
Procedimiento Tecnico
Verde de Metilo-Pironina Y
--Verde de Metilo............................................................................................................................1 g
--Tampón Acetato (0.2 M, pH 4.8).................................................................................50 ml
--Pyronina Y.........................................................................................................................................0.1g

Purificación del Verde de Metilo:


Agitar Verde de metilo en solución acuosa al 2% en un exceso de
cloroformo o de alcohol amilo. El Violeta de Metilo con taminante se
separará en la fracción de cloroformo después de unos días. La fase
acuosa contendrá sólo Verde de Metilo puro.
Procedimiento Tecnico
Solución stock de Verde de Metilo-Pironia Y
--Verde de Metilo (purificado al 2% solución acusoa)...................................10 ml
--Pironina Y (5% solución acuosa).................................................................................17.5 ml
--Agua Destilada...........................................................................................................................250 ml

Solución de trabajo de Verde de Metilo- Pironina Y


--Tampón Acetato (0.2 M, pH 4.8)..................................................................................1 vol
--Stock Verde de Metilo-Pironina Y....................................................................................1 vol
Mezclar justo antes de usar y lamancenar como máximo una semana.
PAPANICOLAU

Afinidad Estructura que Colorea


DIFERENCIACION
TANTO ACIDA COMO
CELULAR: NUCLEOS,
BASICA
CITOPLASMAS
Procedimiento Tecnico
COLORACIÓN DE PAPANICOLAOU
Comprende 17 pasos agrupados en 5 etapas (hidratación, tinción
nuclear, tinción citoplasmática, deshidratación, aclaramiento).
Uso de 3 colorantes (Hematoxilina de Harris, Orange G y EA-50)
1.- Agua Corriente 5’ => Hidratación
2.-Hematoxilina de Harris 7’ => Tinción Nuclear => Colorante
3.-Agua Corriente 2’ => Tinción Nuclear
4.-Agua Acida 1% 2” => Tinción Nuclear
5.-Agua Corriente 2’ => Tinción Nuclear
6.-Agua Amoniacal 10” => Tinción Nuclear
7.-Agua Corriente 2’ => Tinción Nuclear
Procedimiento Tecnico

8.-Alcohol Etílico de 96% 1’ => Tinción Citoplasmática


9.-Orange G 3’ => Tinción Citoplasmática => Colorante
10.-Alcohol Etílico de 96% 30” => Tinción Citoplasmática
11.-EA50 2’ => Tinción Citoplasmática => Colorante
12.-Alcohol Etílico de 96% 30” => Deshidratación
13.-Alcohol Etílico de 96% 30” => Deshidratación
14.-Alcohol Absoluto 30” => Deshidratación
15.-Alcohol Absoluto 30” => Deshidratación
16.-Xilol 2’ => Aclaramiento
17.-Xilol 1’ => Aclaramiento
PAP-MART

Afinidad Estructura que Colorea


CITOPLASMAS Y SUS
ACIDA
ESTRUCTURAS
Procedimiento Tecnico
Solución «stock»
Orange G.................................................................................................................... 1,5 g
Pardo de Bismarck............................................................................................... 0,25g
Eosina Y....................................................................................................................... 2,5 g
Verde luz.................................................................................................................... 2,5 g
Ácido Phosfotúngstico....................................................................................... 4,3 g
Carbonato de Litio.............................................................................................. 0,4 g
Agua Destilada...................................................................................................... 100 ml
Alcohol Al 100........................................................................................................ 900 ml
Todos los reactivos se mezclan
Procedimiento Tecnico

Solución de trabajo «stock»


Pap-Mart............................................................................................. 10 g
Agua destilada............................................................................... 100 ml
Disolver la preparación, macerando o agitando hasta
eliminar las partículas mas grandes, Añadir:
Etanol al 70o
100.......................................................................................................... 900 ml

También podría gustarte