Código FGA-73 v.

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Manual de Practicas
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PRACTICA Nº 6

1. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA

2.Objetivos
• Reconocer el proceso de fermentación como un procesos metabólico realizado por
diversos microorganismos a partir de compuestos orgánicos como los carbohidratos.
• Obtener alcohol etílico a partir de sustancias fermentables: azúcares, panela y fruta.
• Conocer y aplicar el método de separación de compuestos llamado destilación.
• Realizar pruebas para identificación de alcoholes.

3.Marco Teórico
La mayoría de los organismos consumimos glucosa y la oxidamos para obtener energía,
un producto de esta oxidación es el piruvato, este tiene números destinos alternativos en
los microorganismos anaerobios. Por ejemplo las bacterias del ácido láctico reducen el
piruvato a lactato en un solo paso. En cambio, las levaduras convierten el piruvato en
etanol en una ruta de dos pasos. Esta fermentación alcohólica comienza por la piruvato
decarboxilasa. Que va seguida de la reducción del acetaldehído a etanol, que depende
del NADH, catalizada por la enzima alcohol deshidrogenasa. (Ver figura abajo).1
La primera reacción requiere la presencia como coenzima de pirofosfato de tiamina. Esta
coenzima, procedente de la vitamina B1, interviene en varias reacciones de transferencia
de grupos que implican una porción aldehído activada.
Glucosa

Pi
Gliceraldehído 1, 3 Bifosfoglicerato
ADP

NAD+ NADH+ H+ Piruvato ATP

Piruvato decarboxilasa

Etanol Acetaldehído
Alcohol deshidrogenasa

La producción industrial del etanol ha adquirido una importancia tremenda cuando la

humanidad intenta considerar dos problemas serios:
La sustitución del petróleo, no renovable, por fuentes de energía renovables; y la
utilización de los materiales biológicos de desecho. Los esfuerzos en estos campos

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MATHEWS, et al. Bioquímica. 3a. Editorial Mac Graw Hill. 2.000. P. 516-518.
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necesitan de la bioingeniería para generar cepas bacterianas que puedan convertir

sustancias como la celulosa de los desechos humanos a animales a hexosas.2

Los tejidos animales también tienen alcohol deshidrogenasa, a pesar de que el etanol no
es un producto metabólico importante en los animales.
Algunas de las consecuencias metabólicas importantes de la intoxicación por etanol se
deben a la oxidación del etanol a acetaldehído por esta enzima en el hígado. Primero se
reduce excesivamente el NAD+ a NADH, que agota el flujo que transcurre por la
generación de energía. En segundo lugar, el acetaldehído es bastante tóxico, y muchos
de los efectos desagradables de las resacas son consecuencia de las acciones del
acetaldehído y sus metabolitos posteriores.3

La obtención del etanol a partir de una sustancia fermentada se realiza mediante la

técnica de destilación, que consiste en la evaporación parcial de un líquido (teniendo en
cuanta su punto de ebullición), con la transferencia de estos vapores y la subsiguiente
condensación y colección.

4.Materiales
1 Erlenmeyer de 250 ml.
6 Tubos de ensayo
1 Balón de 250 ml para destilación.
1 Gradilla.
2 pipetas graduadas de 5 ml.
1 Mechero.

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2 Soportes.
2 Pinzas
1 Pera
1 Churrusco
1 Termómetro
2 Perlas de ebullición.
1 Capsula de porcelana.
1 Aro
1 Malla.
2 Mangueras
1 capsula de porcelana
1 Panela.
1 Libra de Azúcar.
Cáscara de piña.
Uvas
Levadura.

Equipos
Equipo para destilación.

5. Reactivos
Etanol.
2 Propanol.
Terbutanol.
Reactivo de Lucas.

6.Procedimiento

A. Proceso de fermentación

Coloque en un recipiente de 1L una panela rallada, 2 papeletas de levadura (o pesas

25g), agua hasta alcanzar las ¾ partes del volumen del recipiente. Coloque en el frasco
un a tapa con un orificio por donde coloque un pitillo sin tocar la solución. (Si es posible
adicione una mínima cantidad de sulfato de amonio) deje durante aproximadamente 8
días.

B. Destilación de alcoholes

Decante el producto fermentable y páselo a través de una gasa para filtrar, transfiera la
solución obtenida al balón o erlenmeyer del equipo de destilación y acondicione el equipo
para destilación, tal como se ilustra en la figura.
Ajuste el equipo de destilación simple e inicie el proceso prendiendo la llama en el
mechero. Controle la temperatura para que no sobrecargue los 78ºC. Recoja el destilado
que se produzca en un erlenmeyer.

C. Propiedades químicas de reconocimiento:

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1 Combustibilidad: Coloque 1 ml de alcohol obtenido en una cápsula de porcelana y

acerque un fósforo encendido. Observe el tipo de combustión. Repita el procedimiento
con etanol.

2 Prueba de Lucas: tome 4 tubos de ensayo y márquelos, en el primero agregue 1 ml de

alcohol destilado, en los restantes adicione la misma cantidad de los alcoholes: etanol, 2
propanol y terbutanol, en orden estricto agregue 2 ml del reactivo de Lucas. Observe que
sucede y en cuanto tiempo se produce la reacción. Anote los resultados y obtenga
conclusiones.

7. Nivel de Riesgo:

• Nivel 2: Riesgo Medio (Bata de Laboratorio, Guantes, Cofia, Tapabocas, Zapato

Cerrado Bajo, Pantalón Largo).

Manejo de residuos:
• Línea 1
• Línea 18

Cuestionario
1. ¿En el proceso de destilación para la obtención de etanol? ¿Por qué se agrega sulfato
de amonio?
2. ¿Por qué es necesario realizar un orificio a la tapa del recipiente que contiene la
mezcla fermentadora? ¿Cómo se explica?
3. ¿Por qué es necesario controlar la temperatura en el proceso de destilación? ¿Y cuál
es la razón que sea controlada entre el rango de 75-80 ºC específicamente?
4. Investigue bajo qué procesos metabólicos se puede oxidar los alcoholes y
justifíquelos.
5. Consulte qué otros estilos de destilación se conocen y en qué tipo de separación
deban ser utilizados.

8.Bibliografías
MATHEWS, et al. Bioquímica. 3a. Editorial Mac Graw Hill. 2.000. P. 516-518.