1 7

20
S P
-U
U M
FE
O
ÍFIC
N T
IE
C
O
Límites microbianos
UEN TR

NC
S E
RI A
M O
M E
 Origen de técnicas de cultivo en medios sólidos
En 1881 dentro del Congreso Médico 1 7
20
Internacional en Londres, Robert Koch describió
S P
un método de cultivo de microorganismos
-U
empleando medios después de agregar
U M
gelatina. FE
O
FIC
Í sus
En 1882, fue perfeccionado por
N T
colaboradores Fanny y Walther IE Hesse
C
O
sustituyendo la gelatina por agar-agar.
R
N T
En esos años también U E Julius Richard Petri
C
Ndel mismo nombre. Con esto y
E
inventó las cajas
S dilución serial desarrollada por
la técnica
R I Ade
Joseph
M O Lister, se conforma la técnica de cultivo
MyEaislamiento con medios sólidos.
 MGA 0571, Límites microbianos
1 7
2 0
S P
- U
En los productos no estériles que carecen de especificación,
M
U
aplicar el Apéndice VII Análisis microbiológico FE de productos
C O
farmacéuticos no estériles, con carácter F I
obligatorio. Nuevo
T Í
E N
CI
R O
N T
UE
NC
S E
RI A
M O
M E
 MGA 0571, Límites microbianos
Los métodos para evaluar la calidad microbiológica de materias017
P 2
primas, productos intermedios y terminados son descritos en el MGA
0571, Límites microbianos. US
-
U M
Las técnicas de enumeración de microorganismos F E
descritas son:
C O
F I
T Í
• Filtración por membrana
N
IE
C - vaciado
• Cuenta en placa
R O
T en placa – extensión
• Cuenta
N
UE
C• Numero más probable
E N
A S
R I
M O
ME
MGA 0571, Límites microbianos
1 7
En el mismo método se incluyen técnicas de enriquecimiento selectivo20
S P
U
para el aislamiento e identificación de los microorganismos específicos
-
y grupos indicadores: M U
FE
• Escherichia coli O
• Salmonella sp ÍFIC
N T
• Pseudomonas aeruginosa IE
C
• Staphylococcus aureus R O
N T
E
• Clostridium sporogenes
U
NC
• Candida albicans
S E
I A
• Bacterias
R Gram negativas bilis tolerantes
M O
M E
MGA 0571, Límites microbianos
1 7
2
Promoción de crecimiento y características selectivas e inhibitorias
0
P
de los medios de cultivo US-
U M
• Reorganización de la información de promoción FE en medios de
C O
cultivo líquidos y sólidos. PropiedadesÍF I
selectivas y diferenciales.
N T
• Incubar los medios en el menorIEtiempo de incubación indicado.
C
RO si el número de microorganismos
• El medio de cultivo Tcumple
E N
recuperados es U comparable en un factor no mayor de 2 (50 a 200 %)
N C
con un S E
lote control.
R I A
O
M EM
 MGA 0571, Límites microbianos
1 7
2 0
Evaluación de la aptitud del método S P
- U
• Mantener a los microorganismos de referencia mediante M el sistema
lote semilla véase Apéndice VI, Conservación, E U
mantenimiento y
F
manejo de cultivos microbianos: sistema Clote O semilla, de manera
I
que los microorganismos no tengan T ÍF de 5 pases a partir de la
más
E N
cepa original o un sistema de conservación que asegure esto. Nuevo
CI
• Un periodo diferenteTRde O conservación de suspensiones de
microorganismos deEN referencia puede establecerse siempre que se
demuestre la N CU
estabilidad de las mismas. Nuevo
S E
R I A
M O
M E
MGA 0571, Límites microbianos
1 7
2 0
Evaluación de la aptitud del método S P
- U
• Verifica la aptitud del método de filtración por membranaM o el
método de cuenta en placa, el promedio de E U cuenta de los
la
F
microorganismos de referencia en presencia C Odel producto, no debe
F I
diferir por un factor mayor que 2 de los
T Ívalores del control.
E N
• La aptitud de las pruebas para CI recuperar a los microorganismos
contaminantes en presenciaR O del producto debe determinarse y
N T
confirmarse cada vez E que se introduzca un cambio en el método o
U evaluación corresponde al control positivo de la
en el producto. NCEsta
prueba. S E
Nuevo

R I A
M O
ME
 MGA 0571, Límites microbianos
1 7
Expresión de resultados 20
S P
U en la
• Las técnicas de enumeración de microorganismos está basado
-
cuenta de células viables, usando como unidadMde expresión
E
Unidades Formadoras de Colonias (UFC) o Numero U Más Probable
F
(NMP).
F CO
I
T Í
• La expresión de resultados I N
E para la determinación de
C es “ausencia
microorganismos específicos o presencia” en
R O
N T
determinado tamaño de muestra.
UE
NC
S E
RI A
M O
ME
 MGA 0571, Límites microbianos
1 7
2 0
Los resultados generados por P
métodos
S
-U
microbiológicos deben ser interpretados U M por
FE
microbiólogos calificados; entendiendo C O la variabilidad
F I
T Í
E N
per se de los mismos y losIfactores que contribuyen al
C
resultado final . R O
N T
UE
NC
S E
RI A
M O
M E
 Apéndice VII, Análisis microbiológico de
productos farmacéuticos no estériles 1 7
2 0
S P
En éste apéndice se proporcionan lineamientos de carácter - Ugeneral
U
para auxiliar al fabricante en los aspectos a considerar M
para el control
E
microbiológico de productos no estérilesO F así como en el
IC
establecimiento de sus especificacionesÍFmicrobiológicas. Aquellos
N T
IE
productos que cuenten con una monografía farmacopeica con límites
C
establecidos para las pruebasOde enumeración y(o) investigación de
T R
N deben cumplir con lo requerido en la
microorganismos específicos
E
monografía. NuevoNC
U
S E
RI A
M O
M E
Apéndice VII, Análisis microbiológico de
productos farmacéuticos no estériles 1 7
2 0
S P
-U
En las tablas A7.1 y A.7.2, se incluye una lista de grupos indicadores y
microorganismos específicos para los que se establecen U M criterios de
FE
aceptación. En algunos excipientes y preparados farmacéuticos puede
O
FICacción e investigar otros
ser necesario establecer niveles de alerta Íy(o)
N T
microorganismos, dependiendo de laEnaturaleza de las materias primas
CI
y el proceso de
R O
fabricación. Nuevo
N T
UE
NC
S E
RI A
M O
M E
Apéndice VII, Análisis microbiológico de
productos farmacéuticos no estériles 1 7
2 0
Producto
Organismos mesofílicos Hongos filamentosos y
S
Ausencia por 1g o 1 mL de P
producto
aerobios (OMA) (UFC/g o mL) levaduras (UFC/ g o mL)
- U
Oral solido 103 102
M
Escherichia coli
U
Oral líquido 102 101
FE coli
Escherichia

C O
Rectal 103 102
F I -----

T Í Staphylococcus aureus
Bucal 102
IE N
101 Pseudomonas aeruginosa
Tópica
C 10 Staphylococcus aureus (1g, 1 mL o parche)
102
O
(incluye parches 1 Pseudomonas aeruginosa (1g, 1 mL o
transdérmicos)
TR parche)
Nasal 10
EN 2 101 Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
U
C10 Staphylococcus aureus
N
Ótico 2 101 Pseudomonas aeruginosa
E
AS
Staphylococcus aureus
Vaginal
RI 102 101 Pseudomonas aeruginosa
Candida albicans
O
EM
Staphylococcus aureus
Para inhalación 102 101 Pseudomonas aeruginosa
M Bacterias Gram (-) tolerantes a la bilis
 Apéndice VII, Análisis microbiológico de
productos farmacéuticos no estériles 1 7
0
2
S P
U
Elementos, no limitativos, para un análisis de riesgos y especificaciones:
-
U M
 Disponibilidad de materiales de la calidad deseada.FE
C O
 Proceso de fabricación F I
T Í
 Vía de administración
I E N
 Capacidad para soportar elO C
crecimiento
TR
 Presencia de preservativos
N adecuados
UE
N C
 Uso de inmunosupresores, corticosteroides.
 Tipo de S E
población al que se le administra el producto, presencia de
I A
R o daños en los pacientes.
lesiones
M O
M E
 Apéndice VII, Análisis microbiológico de
productos farmacéuticos no estériles 1 7
2 0
S P
-U
U M
¿Qué diferencia existe entre un resultado FE de 100
C O
o 101 UFC/g? F I
T Í
IE N
C
¿Cómo procedemos
R O sí aislamos un
N T
microorganismos UE enlistado en el apéndice VII ?
NC
S E
¿Y si noI A está en la lista?
O R
E M
M