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PRE-LABORATORIO Y POST-LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA I

GUÍA N°7-IDENTIFICACIÓN DE CLOSTRIDIOS SULFITO-REDUCTORES

PRESENTADO POR:

LAURA VALENTINA BALLESTEROS ROMERO

LEANDRA TOSCANO HOSTEN

PRESENTADO A:

BACTERIÓLOGA. MARÍA CAMILA VELASCO PAREJA

HORARIO: MIÉRCOLES 7:00AM-8:59AM

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA

2020-I

MONTERÍA-CÓRDOBA
PRE-LABORATORIO

1. ¿Qué alimentos están frecuentemente implicados en las intoxicaciones alimentarias por


clostridios sulfito-reductores?
2. ¿Por qué considera usted que es importante en análisis microbiológico de los alimentos y
que otro tipo de intoxicaciones produce clostridios sulfito-reductores?
3. ¿Realice un esquema del procedimiento de laboratorio?

POST-LABORATORIO

1. Investigar el fundamento del medio SPS.


2. ¿Qué otros medios se usan para recuento y aislamiento de clostridios sulfito-reductores?
3. ¿Cómo se hace el diagnóstico de las intoxicaciones alimentarias por este tipo de bacteria y
cuál es su tratamiento?
4. ¿Cuál es la presentación clínica de la infección por C. difficile y C. perfringens?
5. ¿Qué muestras clínicas se utilizan con frecuencia para el diagnóstico de estas infecciones?

SOLUCIÓN PRE-LABORATORIO

1. Generalmente la bacteria se encuentra en alimentos causantes de los brotes de


intoxicación alimentaria por Clostridium perfringens son:
 Jugos cárnicos
 Carne de res
 Carne de ave (pollo, gallina, pavo, avestruz, pato, etc.)

(Algunas cepas no se destruyen, aunque se cocine bien la carne, y en cambio otras, sí.)

2. Considero sumamente importante el análisis microbiológico, puesto a que se trata de una


bacteria que se encuentra en alimentos de consumo diario lo cual representa un riesgo
para todas las personas y de no ser controlada, se expone a la población a un brote con
clostridios que podría pasar a daños mayores.

3. ESQUEMA DE IDENTIFICACIÓN

Agregamos 10ml de
Inicialmente se Se realizan tres Tomamos un tubo agar SPS y dejamos
prepara el material diluciones, siguiendo estéril y añadimos solidificar
de laboratorio las indicaciones del 1ml de cada
docente disolución Agregamos 5ml de
agar SPS y dejamos
Se calienta cada solidificar
disolución a
80°x10min Incubamos en
anaerobiosis por
Realizamos el conteo 24/48h a 37°.
de las colonias

SOLUCIÓN POST-LABORATORIO
1. FUNDAMENTO AGAR SPS

El Agar SPS (Sulfito Polimixina Sulfadiazina) es un medio selectivo moderado para recuperar
Clostridium perfringens de alimentos frescos o en conserva, e ingredientes alimentarios. La
peptona de caseína proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales
para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente las
del grupo B. El citrato férrico y el sulfito de sodio son indicadores de H2S. C. perfringens
reduce el sulfito a sulfuro que, a su vez, reacciona con el hierro y forma un precipitado de
sulfuro de hierro negro, visto como colonias negras. El sulfato de polimixina B y la sulfadiazina
son inhibidores de organismos distintos a Clostridium spp. El agar bacteriológico es el agente
solidificante. Algunos microorganismos distintos de C. perfringens también crecen en Agar
SPS, por lo que es mejor realizar una tinción de Gram y buscar esporas. Muchos
microorganismos comunes están total o parcialmente inhibidos, pero si se desarrollan,
generalmente no forman colonias ni esporas negras, ni reducen el nitrato y son bacilos
vegetativos Gram positivos no móviles.

2. MEDIOS PARA EL AISLAMIENTO DE CLOSTRIDIOS SULFITO REDUCTORES

El Agar TSC: es el medio Normativo para análisis de Clostridium perfringens, tanto en muestras de
alimentos, como de aguas de consumo humano.

FUNDAMENTO: Clostridium perfringens presenta una


buena tolerancia a la Neomicina y a la Polimixina, que
inhiben el crecimiento de la flora secundaria. La
Neomicina inhibe particularmente el crecimiento de
Clostridium bifermentans.

Agar SPS: El SPS Agar es un medio selectivo utilizado en el aislamiento selectivo de Clostridium,
especialmente diseñado para la detección y enumeración de Clostridium perfringens y Clostridium
botulinum en muestras de alimentos.

FUNDAMENTO: El sulfito sódico presente en el medio


es reducido a Sulfuro de Hidrógeno (SH2) por la
mayoría de los Clostridium spp. El Sulfuro de Hidrógeno
reaccionará con el Citrato Férrico y formará un
precipitado, Sulfuro de Hierro, que le da el color negro
a las colonias.
Diagnóstico: Generalmente se realiza un análisis médico basado en la sintomatología del paciente,
que a pesar de ser confusa y se pueda relacionar con lo que provocan otros microorganismos,
suele realizarse el análisis de los alimentos o de las heces del paciente contaminadas. Este análisis
confirma analizando alimentos contaminados o muestras de heces de personas infectadas en
busca de Clostridium perfringens. La enfermedad por C. difficile se confirma con la detección de la
citotóxina o la enterotoxina o los agentes de la toxina en las heces.

Tratamiento: El tratamiento de las intoxicaciones alimentarias es sintomático. Solo se debe usar


metronidazol y vancomicina en la enfermedad grave por C. difficile.

4. Cuál es la presentación clínica de la infección por C. difficile y C. perfringens

Infección por C. difficile:

● Diarrea (deposiciones sueltas y acuosas) o evacuación de las heces frecuentes durante varios
días.

● Cuadros febriles.

● Dolor o sensibilidad del estómago.

● Pérdida de apetito.

● Náuseas

Infección por C. perfringens:

 Intoxicación alimentaria: diarrea acuosa y retortijones abdominales. La infección también


causa dolor abdominal, distensión abdominal por gases, diarrea grave, deshidratación y
una importante disminución de la presión arterial.

Infecciones de tejidos blandos:

 Los síntomas pueden consistir en edema, dolor, gas con crepitaciones, exudados con olor
desagradable, coloración intensa del sitio afectado y progresión a shock, insuficiencia
renal y a veces la muerte.

5.

Heces, ya sean acuosas o sueltas.

Sangre de pacientes infectados.

Muestra de alimentos

Aspirados de heridas, abscesos o ampollas


Webgrafía

https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0301-732X200

https://sites.google.com/site/informeexamenpracticodemicro/recuento-de-esporas-de-
clostridios-sulfito-reductores

http://f-soria.es/Inform_soria/Difco%20Fichas%20tecnicas/TUBOS%20DIFCO/FT%20SPS
%20AGAR.pdf

http://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/270_hoja_tecnica_es.pdf

http://f-soria.es/Inform_soria/Difco%20Fichas%20tecnicas/PLACAS%20DIFCO%20Y
%20CROMOGENICAS%20BD/FT%20NEW%20YORK%20CITY.pdf

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