información catalítica

Temperatura optima
20
Homo sapiens
-
restauración de la actividad enzimática de la mutación G1363S mal plegada por expresión a
20 ° C
698078
25
Rattus norvegicus
-
ensayo de actividad
683231
37
Escherichia coli
-
-
698170

RANGO DE pH 
ORGANISMO 
UNIPROT 
COMENTARIO 
LITERATURA 
4 - 10
Sus scrofa
-
pH 4.0: aproximadamente el 60% de la actividad máxima, pH 10.0: aproximadamente el 50%
de la actividad máxima
208757
5-7
Homo sapiens
-
pH 5,0: aproximadamente el 70% de la actividad máxima, pH 7,0: aproximadamente el 65%
de la actividad máxima
208756

pH ÓPTIMO 
ORGANISMO 
UNIPROT 
COMENTARIO 
LITERATURA 
5,6 - 6,2
Sus scrofa
-
-
208757
5,8 - 6
Homo sapiens
-
hidrólisis de lactosa
208756
6
Rattus norvegicus
-
ensayo de actividad

ACTIVIDAD ESPECÍFICA [µmol / min / mg] 

ORGANISMO 
UNIPROT 
COMENTARIO 
LITERATURA 
0,00164
Homo sapiens
-
células no infectadas, actividad de la enzima lactasa en homogeneizados de células
679123
0,00167
Homo sapiens
-
rotavirus de mono rhesus, RRV, células infectadas, actividad de la enzima lactasa en
homogeneizados de células
679123
0,002
Homo sapiens
-
mutante S218fsX224, actividad media de lactasa
683038
0,0021
Homo sapiens
-
mutante Y1390X, actividad lactasa media
683038
0,00219
Homo sapiens
-
rotavirus de mono rhesus, RRV, células infectadas, actividad de la enzima lactasa en la
fracción enriquecida en el borde en cepillo
679123
0,003
Homo sapiens
-
mutante G1363S, actividad lactasa media
683038
0,0033
Rattus norvegicus
-
Las ratas son alimentadas a la fuerza con una dieta baja en calorías, con tratamiento con
hormona tiroidea.
675574
0,00344
Homo sapiens
-
células no infectadas, actividad de la enzima lactasa en la fracción enriquecida con borde en
cepillo
679123
0,00359
Homo sapiens
-
UV, células infectadas con RRV inactivadas con psoraleno, actividad de la enzima lactasa en
la fracción enriquecida con borde en cepillo
679123
0,0042
Rattus norvegicus
-
las ratas se alimentan con una dieta baja en almidón durante 7 días
675574
0,005
Homo sapiens
-
mutante Q268H, actividad lactasa media; mutante S1666fsX1722, actividad lactasa media
683038
0,0058
Rattus norvegicus
-
las ratas son alimentadas a la fuerza con una dieta de sacarosa, con tratamiento con hormona
tiroidea
675574
0,0067
Rattus norvegicus
-
las ratas se alimentan con una dieta baja en almidón, se les priva de hambre durante 3 días y
se inyectan hormonas tiroideas diariamente después de la dieta
675574
0,0083
Rattus norvegicus
-
las ratas son alimentadas a la fuerza con una dieta baja en calorías, sin tratamiento con
hormonas tiroideas; Las ratas son alimentadas a la fuerza con una dieta de sacarosa, sin
tratamiento con hormona tiroidea.
675574
0,01
Rattus norvegicus
-
las ratas se alimentan con una dieta rica en almidón durante 7 días
675574
0,012
Rattus norvegicus
-
las ratas se alimentan con una dieta baja en almidón, y se les deja de comer durante 3 días
675574
0,015
Rattus norvegicus
-
Rata de 30 días
683231
0,07
Rattus norvegicus
-
Rata de 18 días
683231
0,17
Rattus norvegicus
-
administración de tiroxina a cachorros de 8 días, actividad en el intestino de ratas lactantes
683869
0,172
Rattus norvegicus
-
Rata de 15 días
683231
0,27
Rattus norvegicus
-
controlar
683869
0,29
Rattus norvegicus
-
administración de insulina a cachorros de 8 días, actividad en el intestino de ratas lactantes
683869
0,36
Rattus norvegicus
-
administración de cortisona a cachorros de 8 días, actividad en el intestino de ratas lactantes
683869
16,1
Platyrrhini
-
lactasa
208760
18
Sus scrofa
-
-
208757
22
Rattus norvegicus
-
-
288794
32
Homo sapiens
-
-
208756
450
Platyrrhini
-
florizina hidrolasa
208760

lactosa [CPD: C00243 ];
H2O [CPD: C00001 ]

VALOR KM [mM] 
Sustrato 
ORGANISMO 
UNIPROT 
COMENTARIO 
LITERATURA 
IMAGEN 
22,2
2-O-beta-D-galactopiranosil-D-xilosa
Rattus norvegicus
-
Tampón de maleato de sodio 100 mM, pH 6,0, 25 ° C
664623

8.5
3-O-beta-D-galactopiranosil-D-xilosa
Rattus norvegicus
-
Tampón de maleato de sodio 100 mM, pH 6,0, 25 ° C
664623
58,8
4-O-beta-D-galactopiranosil-D-xilosa
Rattus norvegicus
-
Tampón de maleato de sodio 100 mM, pH 6,0, 25 ° C
664623

2,78 - 4,4
celobiosa
 2 entradas

0,149
daidzeína-7-glucósido
Ovis aries
-
pH 6, 37 ° C
208743

0.085
genisteína-7-glucósido
Ovis aries
-
pH 6, 37 ° C
208743

5,1 - 30
lactosa
 9 entradas

0,002 - 0,44
florizina
 3 entradas

0,046
quercetina-3-glucósido
Ovis aries
-
pH 6, 37 ° C
208743

0.044
quercetina-4'-glucósido
Ovis aries
-
pH 6, 37 ° C
208743

Información Adicional
Información Adicional
Homo sapiens
-
la infección por rotavirus disminuye la Vmax de LPH, descripción general
679123
-

patrones Prosite

Fx- [FYWM] - [GSTA] -x- [GSTA] -x- [GSTA] (2) - [FYNH] - [NQ] -xEx-
[GSTA]

estudio del sitio activo de la enzima

Patrón de consenso:
[LIVMFSTC] - [LIVFYS] - [LIV] - [LIVMST] -ENG- [LIVMFAR] - [CSAGN]

información de la familia de la
enzima

Descripción
Se ha demostrado [ 1 , 2 , 3 , 4 ] que las siguientes glicosil hidrolasas
pueden clasificarse, sobre la base de similitudes de secuencia, en una
sola familia:

 β-glucosidasas (EC 3.2.1.21 ) de diversas bacterias tales como la

cepa ATCC 21400 de Agrobacterium, Bacillus polymyxa y
Caldocellum saccharolyticum.
 Β-glucosidasas de dos plantas (trébol) (EC 3.2.1.21 ).
 Dos β-galactosidasas diferentes (EC 3.2.1.23 ) de las
arqueobacterias Sulfolobus solfataricus (genes bgaS y lacS).
 6-fosfo-β-galactosidasas (EC 3.2.1.85 ) de diversas bacterias como
Lactobacillus casei, Lactococcus lactis y Staphylococcus aureus.
 6-fosfo-β-glucosidasas (EC 3.2.1.86 ) de Escherichia coli (genes
bglB y ascB) y de Erwinia chrysanthemi (gen arbB).
 Plantas mirosinasas (EC 3.2.1.147 ) (sinigrinasa) (tioglucosidasa).
 Lactasa-florizina hidrolasa de mamífero (LPH) (EC 3.2.1.108 /
EC 3.2.1.62 ). La LPH, una glicoproteína de membrana integral, es
la enzima que divide la lactosa en el intestino delgado. La LPH es
 una proteína grande de aproximadamente 1900 residuos que
contiene cuatro repeticiones en tándem de un dominio de
aproximadamente 450 residuos que está relacionado
evolutivamente con las glicosil hidrolasas anteriores.

Una de las regiones conservadas en estas enzimas se centra en un

residuo de ácido glutámico conservado que se ha demostrado [ 5 ], en la
β-glucosidasa de Agrobacterium, que participa directamente en la
escisión del enlace glucosídico actuando como nucleófilo. Hemos
utilizado esta región como patrón de firma. Como segundo patrón de
firma, seleccionamos una región conservada, que se encuentra en el
extremo N-terminal de estas enzimas, esta región también contiene un
residuo de ácido glutámico.

Nota:

Este patrón recogerá los dos últimos dominios de LPH; los dos primeros
dominios, que se eliminan del precursor de LPH mediante procesamiento
proteolítico, han perdido el glutamato del sitio activo y, por lo tanto,
pueden estar inactivos [ 4 ].

análisis estructurales

Tecla de DescripciónComportamie
Puesto (s) Longitud
función nto

Hebra beta i 10 - 14 Fuentes combinadas 5

Hélice i 17 - 20 Fuentes combinadas 4

Hélice  i
26 - 28 Fuentes combinadas 3
Hélice  i
34 - 39 Fuentes combinadas 6
Hebra beta  i
41 - 43 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
46 - 48 Fuentes combinadas 3
Hélice  i
52 - 65 Fuentes combinadas 14
Hebra beta  i
70 - 74 Fuentes combinadas 5
Hélice i 77 - 80 Fuentes combinadas 4
Hebra beta  i
84 - 87 Fuentes combinadas 4
Hélice  i
90 - 106 Fuentes combinadas 17
Hebra beta  i
109 - 117 Fuentes combinadas 9
Hélice  i
121 - 125 Fuentes combinadas 5
Hélicei 128 - 130 Fuentes combinadas 3
Hélicei 133 - 148 Fuentes combinadas dieciséis
Hebra beta i
154-159 Fuentes combinadas 6
Hélice i
161 - 169 Fuentes combinadas 9
Hebra beta i
174-176 Fuentes combinadas 3
Hélice i
182 - 205 Fuentes combinadas 24
Hebra beta i
209 - 217 Fuentes combinadas 9
Hebra beta i
221 - 225 Fuentes combinadas 5
Hélice i
229 - 242 Fuentes combinadas 14
Hélicei 244 - 251 Fuentes combinadas 8
Hélice i
257 - 270 Fuentes combinadas 14
Hélice i
278 - 287 Fuentes combinadas 10
Gire  yo
288 - 290 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
293 - 297 Fuentes combinadas 5
Hebra beta  i
302 - 305 Fuentes combinadas 4
Hebra beta  i
312 - 314 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
325 - 328 Fuentes combinadas 4
Gire yo 329 - 331 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
332 - 334 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
338 - 340 Fuentes combinadas 3
Hélice  i
352 - 364 Fuentes combinadas 13
Hélice  i
366 - 368 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
371 - 375 Fuentes combinadas 5
Hélice  i
392 - 410 Fuentes combinadas 19
Hebra beta  i
415 - 421 Fuentes combinadas 7
Gire yo 429 - 431 Fuentes combinadas 3
Hélice  i
432 - 434 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
439 - 442 Fuentes combinadas 4
Gire  yo
444 - 446 Fuentes combinadas 3
Hebra beta  i
449 - 451 Fuentes combinadas 3
Hélice  i
453 - 464 Fuentes combinadas 12
identificación de tres sustratos

4-O-beta-D-galactopiranosil-D-xilosa + H2O
D-galactosa + D-xilosa

Rattus norvegicus
-
-
664623 , 683231
-
-
?
5-bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-fucopiranósido + H2O
?

Rattus norvegicus
-
37 ° C, 1 hora, lactasa de duración completa, lactasa madura, forma citosólica de lactasa
madura
698170
-
-
?

fluoresceína-di-beta-D-galactopiranósido + H2O
?

Rattus norvegicus
-
única forma citosólica de lactasa madura
698170
-
-
?

y dos posibles inhibidores/activadores de la enzima (PubChem)

D-glucal
Rattus norvegicus
-
40% de inhibición para 4-O-beta-D-galactopiranosil-D-xilosa y 75% de inhibición para 3-O-
beta-D-galactopiranosil-D-xilosa a 100 mM de D-glucal, sin aumento de inhibición por encima
de 100 mM D -glucal
664623

epigalocatequina-3-galato
Rattus norvegicus
-
La inhibición por epigalocatequina-3-galato de lactasa se alivia aproximadamente 1,7 veces
mediante proteínas ricas en prolina.
715230

/activadores de la enzima
cortisona
Rattus norvegicus
-
la administración de cortisona a cachorros de 8 días aumenta la actividad de la lactasa
683869

Información Adicional
Homo sapiens
-
La determinación de la actividad de la disacaridasa en muestras de biopsia intestinal muestra
una correlación muy significativa entre la actividad de la lactasa y el genotipo T / G-13915.
683765
-
Mediante la base de datos GenBank, de NCBI, obtener la
secuencia nucleotídica de la enzima.

3. Seleccionar solo los primeros 100 nucleótidos del marco de

lectura abierto del gen de la enzima y proseguir con el ejercicio
2.