CÓDIGO: SGC.DI.

505
GUÍA PARA LAS PRÁCTICAS DE VERSIÓN: 2.0
FECHA ÚLTIMA
LABORATORIO, TALLER O CAMPO REVISIÓN: 12/04/17
1 Número de página

DEPARTAMENTO: CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA CARRERA: INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

LABORATORIO DE SISTEMAS PERIODO 201811 PREGRADO. S-II.
ASIGNATURA: BIOLÓGICOS LECTIVO: NIVEL: 1
OCTURBE 18 – FEBRERO 19
DOCENTE: LOURDES KARINA PONCE LOAIZA NRC: 4076, 4077, 4079, 4080 PRÁCTICA N°: 5
LUGAR DE LA PRÁCTICA: DOCENCIA DE BIOTECNOLOGÍA. PLANTA BAJA. BLOQUE G.
TEMA DE LA USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO CLARO, ENFOCANDO LA LETRA “e” Y
PRÁCTICA: RESPETANDO NORMAS DE BIOSEGURIDAD DENTRO DEL LABORATORIO.
INTRODUCCIÓN:
El microscopio óptico es un instrumento básico que permite
observar células muy pequeñas o microscópicas no
observables a simple vista (Tortora, Funke, Case, 2013),
viene del Latín micro (pequeño) y Griego skopos (para mirar),
es utilizado en investigación microbiológica, para
identificación de microorganismos y sus estructuras con o sin
tratamiento de tinciones y fijaciones (Madigan, Martinko,
Parker, 2012; Willey, Sherwood, Woolverton, 2008). El
microscopio de campo claro es utilizado generalmente en
cursos básicos de biología y microbiología, se compone de
lentes objetivos y oculares que funcionan conjuntamente para
producir una imagen (Madigan, Martinko, Parker. 2012).
Se hace pasar la luz visible a través de una muestra, luego a
través de los lentes se dobla la luz, haciendo que la imagen
se magnifique como se proyecta en una cámara (Reece,
Taylor, Simon, Dickey, 2012).
La figura tomada de Reece et al., (2012) muestra el rango de
tamaño de células comparadas con estructuras mayores y
menores, las unidades comunes de longitud que utilizan los
biólogos se enumeran en la parte inferior; la escala es
logarítmica para acomodar el rango de tamaños, comenzando
con 10 metros (m) y se va reduciendo 10 veces en longitud
cada vez; la mayoría de las células están entre 1 y 100
micrómetros (μm) de diámetro, siendo visibles sólo con un
microscopio, ciertas bacterias son tan pequeñas como 0,2 μm
de diámetro y apenas se pueden ver con un microscopio de
luz.
Debido al sistema de lentes y delicado manejo del
microscopio se debe conocer cada una de sus partes y
funciones (Miller, Levine 2010; Mader, 2013; Tortora, Funke,
Case, 2013.), además, proceder con su limpieza y transporte
de forma adecuada (Brown, 2007).
La presente práctica tiene como objetivo principal: usar
correctamente el microscopio óptico de campo claro,
enfocando la letra “e” y respetando normas de bioseguridad
dentro del laboratorio. Tomado de: Reece et al., (2012).

OBJETIVOS:
• Seguir normas del laboratorio de docencia de la ESPE, para el buen uso del microscopio óptico de campo claro.
• Reconocer cada una de las partes del microscopio en base a la observación de las mismas y bibliografía investigada.
• Manipular correctamente el microscopio siguiendo normas universales.
• Identi fic ar las func iones del mic roscopi o, enfoc ando la l etra “e” des de un rec orte de peri ódic o, c on fundamen to
c onfi able .
• Distinguir correctamente los pasos para hacer uso de un microscopio óptico de campo claro.
• Seleccionar con criterio protocolos, equipos y materiales dentro del laboratorio.
• Manipular materiales del laboratorio, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
• Discutir en forma grupal y con criterio, los resultados obtenidos.
 • Realizar limpieza de los mesones del laboratorio de docencia, respetando normas de bioseguridad.
• Mantener correctamente el cuaderno de laboratorio con investigación científica actualizada de la práctica y sus resultados.
• Redactar correctamente un informe con uso del método científico en base a la práctica de laboratorio.
MATERIALES:
REACTIVOS: Ninguno INSUMOS: Placas portaobjetos, cubreobjetos, tijeras, papel de limpieza
MATERIALES DE PROTECCIÓN PERSONAL: para microscopios, algodón (torundas), alcohol antiséptico.
Mandil.
EQUIPOS: Microscopios ópticos de campo claro.
MUESTRA: Recorte de periódico para en clase seleccionar la letra “e”. ORGANISMOS: Ninguno.
INSTRUCCIONES:
• Revisar los libros e información subidos al aula virtual.
• Obtener y resumir información en el cuaderno de investigación sobre los temas planificados: microscopio, óptico de campo
claro, partes, funciones, limpieza y transporte. Al mismo tiempo contestar en redacción el siguiente cuestionario: ¿Cuáles son las
partes y funciones del microscopio óptico de campo claro?, ¿Cómo se manipula el microscopio?, ¿Qué tipo de muestras se
pueden observar en los microscopios ópticos de campo claro?, ¿Con qué aumentos de lente objetivo cuenta el microscopio
óptico?, ¿Por qué es necesario enfocar primero con un aumento menor antes de los aumentos mayores?, ¿Por qué se invierten
las imágenes al observar las muestras en el microscopio?, ¿Cómo se debe transportar un microscopio?, ¿Cuál es la manera
correcta de limpiar los lentes y demás partes de un microscopio?, ¿Cuándo se utiliza el objetivo de 100x con aceite de inmersión?,
¿Qué función tiene el uso del aceite de inmersión en el lente 100X?, ¿En qué condiciones debe dejar el microscopio después de
usarlo, en cuanto lentes objetivos, platina, luz, conexión eléctrica?.
• Escribir las partes del microscopio según corresponda en el gráfico anexo.
• Pegar o transcribir los objetivos y procedimiento de esta guía de laboratorio.
• Depositar mochilas u otro en los lugares destinados a la entrada de los laboratorios de docencia.
• Portar mandil manga larga con puño y cerrado, zapatos cerrados, pantalón, cabello recogido, cuaderno y esferos.
• Ingresar al laboratorio con tiempo antes de la hora asignada, ya que, la clase empieza puntualmente.
• Un estudiante según planificación realiza una exposición de 10 minutos para dar introducción al tema, antes de la práctica.

ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

Observación y manipulación del microscopio óptico de campo claro
1. Cortar una pequeña letra “e” (minúscula) de un pedazo de periódico y colocarla en el centro de una placa portaobjetos, si es
necesario colocar un cubreobjetos.
2. Verificar que el número de bitácora corresponde al número de microscopio óptico.
3. Anotar en la bitácora del microscopio óptico correspondiente, los datos sugeridos según las normas del laboratorio de
docencia, como hora y nombre del estudiante.
4. Verificar que los cables de conexión estén ajustados a los microscopios.
5. Conectar el microscopio en los enchufes 110v, encenderlo, ubicar el tornillo de aumento de luz y dejarlo en intensidad
media.
6. Observando externamente (no por los oculares), colocar la placa porta objetos en la pinza porta placas, ubicando la letra “e”,
justo en el orificio medio de la platina y donde coincide la luz que emite el microscopio.
7. Ubicar el objetivo de menor aumento, haciendo girar el revólver. Si el anterior operador que utilizó el microscopio lo hizo de
forma correcta, el lente objetivo en posición será el de menor aumento (4x).
8. Manipular el macrométrico de tal forma que suba la platina lo más cerca del lente objetivo (justo hasta el tope), mirando
externamente (sin mirar por los oculares).
9. Adecuar los lentes oculares a los ojos de cada operador, abrirlos según la distancia de los ojos, ajustarlos a cada ojo al cerrar
uno y observar con el otro.
10. Observando por los oculares, bajar lentamente la platina con el macrométrico, hasta ubicar la muestra y girar el micrométrico
para perfeccionar el enfoque.
11. Identificar las funciones de manejo del condensador, apertura de diafragma, luz emitida desde la fuente, lentes oculares del
microscopio y platina, haciendo uso de estos y observando los cambios en la observación.
12. Una vez enfocada correctamente la muestra, graficar el resultado y tomar fotografías.
13. Cambiar al siguiente aumento del lente objetivo 10X, manipulando desde el revólver, ahora se observará parte de la letra “e”,
ya no de una forma completa.
14. Manipular solo el micrométrico para mejorar el enfoque.
15. Procurar que una parte teñida de la letra “e” quede en el centro, manipulando la platina hacia la derecha o izquierda.
16. Proceder a cambiar al lente objetivo del siguiente aumento 40x y manipular solo el micrométrico para mejorar el enfoque, ahora
se observará solo una pequeña parte de la letra “e” y además detalles de tinta de la misma. Si la perdió en el campo, mueva la
platina hacia los lados y si necesita más luz manipular nuevamente, apertura de diafragma y luz del microscopio.
17. Bajar totalmente la platina y retirar la placa portaobjetos utilizada.
18. Manipular el revólver para dejar el objetivo de menor aumento, bajar la luz, proceder a apagar el microscopio y desconectarlo.
19. Limpiar correctamente cada uno de los lentes con papel especial, empezando por el de menor aumento (4x), hasta el de 100x.
Además, limpiar la platina y cualquier otra parte del microscopio que lo requiera con una torunda de algodón con alcohol exprimida.
Use el material necesario para dejarlo completamente limpio.
20. Proceder a ponerle el protector y dejarlo hacia atrás de la mesa, siempre lejos de los lavabos.
21. Anotar los demás datos requeridos en la bitácora, dejando claro los lentes que utilizó y cualquier otra observación, como
lentes sucios, placas en el equipo, conectado, etc. colocar la bitácora cerca del microscopio correspondiente o en su defecto y
según disposición del laboratorio en las repisas destinadas en completo orden.

En cada paso, anotar en el cuaderno de investigación, los resultados obtenidos en las observaciones con los diferentes objetivos:
4x, 10x y 40x: identificación, muestra, estructuras, detalles u otros.

RESULTADOS OBTENIDOS:
• Reconocimiento de cada una de las partes microscopio óptico de campo claro y sus funciones.
• Enfoque de la letra “e” en el microscopio óptico de campo claro respetando normas de bioseguridad.
• Diferenciación de las características y cambios de la letra “e” con los lentes objetivos: 4x, 10x y 40x.

CONCLUSIONES:
Al final de la práctica el estudiante:
• Recoge información acerca del uso del microscopio.
• Reconoce el microscopio óptico de campo claro y sus partes.
• Verifica las funciones del microscopio óptico haciendo uso de cada una de ellas al observar la letra "e" (recorte de periódico).
• Identifica y diferencia los cambios que se producen al observar una muestra con diferentes aumentos.
• Manipula el microscopio respetando normas universales.
• Maneja adecuadamente la bitácora correspondiente a cada microscopio, reportando los datos solicitados.
• Manipula materiales de laboratorio respetando normas de bioseguridad.
• Limpia y transporta el microscopio correctamente.
• Plantea y responde preguntas acerca del uso correcto del microscopio.
• Realiza registros de los resultados y toma fotos que serán compartidas en red social entre todos los estudiantes.
• Respeta plazos de tareas programadas al cumplir con un control de lectura e investigación en el cuaderno de laboratorio.
• Realiza una exposición y discusión del tema investigado.
• Maneja adecuadamente el cuaderno de laboratorio con la investigación programada.
• Desarrolla sus actividades dentro de la clase con honestidad, respeto, disciplina y responsabilidad.
• Planifica los siguientes temas de investigación: Tipos de fijaciones y tinciones, diferencias entre células procariotes y eucariotes,
RECOMENDACIONES:
• Anotar cada uno de los detalles del proceso de la práctica y resultados obtenidos.
• Graficar los resultados en su cuaderno, señalando estructuras, muestra, detalles, lente objetivo, u otros.
• Tomar fotografías desde el ocular del microscopio para subirlas por equipo de trabajo en el grupo Facebook.
• Portar siempre el mandil cerrado.
• Ordenar completamente el laboratorio.
• Limpiar los mesones con savlon diluido.
• Lavarse las manos con jabón.
• Asegurarse de que todos los materiales y equipos estén limpios y en completo orden para poder salir.
BIBLIOGRAFÍA:
• Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Walter, P. 2008. Molecular Biology of The cell. Garland Science. Fifth
edition. U. S. A. Pp: 579 – 602
• Brown, A. 2007. Bensons Microbiological applications. Laboratory Manual in general microbiology. Editorial interamericana Mc.
Graw Hill. Eighth edition. U. S. A. Pp: 1 – 9.
• De Robertis, E., Hib, J. 2004. Fundamentos de Biología celular y molecular de De Robertis. Editorial El Ateneo. Cuarta edición.
Argentina. Pp: 401 – 105.
• Universidad de las Fuerzas Armadas - Espe. 2012. Manual de laboratorio de biotecnología docencia. Quito-Ecuador.
• González, M., Caballero, M., Olivares, E., Santisteban, A., Serrano, Ma. P. 2003. Prácticas de laboratorio y de aula: biología,
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 molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta edición. U. S. A.
• Madigan, M., Martinko, J., Parker. 2012. Brock Biología de los microorganismos. Pearson Prentice Hall. Décima edición, España.
Pp: 55 - 61.
• Madigan, M., Martinko, J., Parker. 2013. Brock Biology of Microorganisms. Pearson Prentice Hall. Thirteenth edition, USA.
• Mader, S., 2013. Laboratory Manual to accompany Biology. Mc Graw Hill. Eleventh edition. USA. Pp: 9 -26.
• Miller, K., Levine, J. 2010. Biología. Pearson. Edición en español. USA. Pp: 190- 192.
• Panigua, R., Nistal, M., Sesma, P., Álvarez – Uria, M., Fraile, B., Anadón, R., Sáes, F. 2007. Biología celular. McGraw – Hill.
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• Reece, J., Taylor, M., Simon, E., Dickey, J. 2012. Campbell Biology. Concepts & Connections. Pearson, Seventh edition. USA. Pp
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• Salomon, E. P., Berg, L., Martin, D., 2008. Biología de Villée. Editorial interamericana Mc. Graw Hill. Octava edición. España. 75
– 81.
• Tortora, G., Funke, B., Case, Ch. 2013. Microbiology. An introduction. Pearson. Eleventh edition. U. S. A. Pp: 53 – 63.
• Willey, J., Sherwood, L., Woolverton, C. 2008. Microbiología de Prescott, Harley y Klein. Mc. Graw Hill, Séptima edición. España.
Pp: 17-31.
AUTORÍA DE GUÍAS PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO: Lourdes Karina Ponce Loaiza y María Fernanda Loayza Villa
(Docentes de la Carrera de Ingeniería en Biotecnología - Universidad de las Fuerzas Armadas - ESPE). Editado: 31/05/2018
FIRMAS

Nombre: KARINA PONCE LOAIZA M. S. Nombre: VALERIA OCHOA M. S. Nombre: PATRICIA JÍMENEZ PH. D.
DOCENTE DE LA CARRERA COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR DE LABORATORIOS
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA CONOCIMIENTO DE BIOTECNOLOGÍA

ANEXO:
Escribir las partes del microscopio óptico de campo claro, según corresponda.