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Procedimiento

Preparación de cebolla una semana antes


1. Mantener una cebolla roja (paiteña) o perla en un recipiente con agua de tal
forma que solo las raíces tengan contacto con el agua.
2. Mantener l cebolla en el recipiente hasta el día del laboratorio.
3. Llevar al laboratorio la cebolla de experimento.
Preparación de muestra de raíces
Contar con bisturí o tijera, aproximadamente 0.5 a 1 cm de los ápices (puntas) de las
raíces de la cebolla.
Tinción de muestras
Procedimiento 1 (ácido clorhídrico, orceína B)
1. Colocar 2 gotas de una solución de ácido clorhídrico al 10 % en un vidrio reloj
y calentar hasta 40℃ aproximadamente , tomando el vidrio reloj con una
pinza de madera. Pueden obtener la temperatura deseada, al pasar el vidrio reloj
de 1 a 2 veces en la llamada del mechero y este ser tolerable el tener contacto
con el dorso de la mano.
2. Depositar los ápices de raíces en el vidrio reloj conteniendo las dos gotas de
ácido clorhídrico al 10 % (caliente) durante 8 minutos. Cuando sea necesario
pasar nuevamente el vidrio reloj por la llama del mechero con cuidado de no
sobrepasar l temperatura ya que el vidrio se puede romper.
3. Con una pinza retirar los ápices del vidrio reloj que los contiene y trasladarlos a
otro vidrio reloj conteniendo una gota del colorante aceto-orceina (Orceina B),
durante 4 minutos.
4. Depositar los ápices en una placa porta objetos, agregar una gota de ácido
acético al 45% y cubrir con una placa cubre objetos.
5. Con el dedo pulgar, hacer una ligera pero firme presión sobre l placa cubre
objetos, para obtener una extensión de la muestra, quedando prácticamente
trasparente Este es un paso importante, donde se debe asegura la muestra
quedando totalmente aplanada y trasparente de esto dependerá gran parte el
éxito de la observación.
6. Observar en el microscopio con los lentes objetivos 4, 10, 40 x , e identificar las
fases de la mitosis.
Procedimiento 2 (Orceina A y B):
1. Depositar los ápices de las raíces en un vidrio reloj conteniendo 2 a 3 gotas de
Orceina acética clorhídrica (Orceina A), durante 8 minutos.
2. Calentar suavemente el vidrio reloj a la llama del mechero de alcohol, con la
ayuda de una pinza de madera evitando la ebullición, hasta que emita vapores
tenues. Dejar enfriar y repetir el proceso. Puede lograr esto, pasando el vidrio
reloj de 2 a 3 veces en la llama del mechero, teniendo cuidado de no exceder la
temperatura porque el vidrio se puede romper.
3. Depositar con la ayuda de una pinza los ápices en una placa porta objetos, verte
1 gota de Orceina acética (Orceina B) y cubrir con el cubre objetos.
4. Proceder en la misma forma de los pasos 5 y 6 del procedimiento 1.
Procedimiento 3 (Carnoy y Acetocarmin ) : Opcional.
4. Depositar los ápices de raíces en un vidrio reloj contenido una a dos gotas de
solución fijadora de Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético) durante 18 minutos.
5. Trasladar con la ayuda de una pinza, los ápices a otro vidrio reloj que contenga
ácido clorhídrico al 10 % , durante 8 minutos.
6. Colocar los ápices en un vidrio reloj que contenga agua para lavar por 5
minutos.
7. Depositar los ápices en un vidrio reloj conteniendo Acerocamin , durante 18
minutos.
8. Con una pinza, depositar los ápices en una placa portaobjetos y cubrir con una
placa cubreonjetos.
9. Procede de la misma forma en los pasos 5 y6 del procedimiento 1.

Hipótesis

Si el meristemo de la raíz de la cebolla es un tejido en crecimiento ; entonces


podremos observar las fases de la mitosis.