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UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA

PROGRAMA DE INGENIERÍA DE SISTEMAS


BIOLOGÍA GENERAL
Docente: Amadeo Perdomo
LABORATORIO N°. 2
ACCIÓN DE UNA ENZIMA PRESENTE EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES

Nombres: Ruben Darío Ordoñez Zambrano


Duvan Córdoba
Andrés Bolívar

Por parte del el área de biología general, realizamos una breve consulta sobre la
temática a que los aplicamos en práctica de laboratorio en la universidad de la
Amazonia “acción de una enzima 1 presente en tejidos vegetales y animales”. En
laboratorio recurrimos a la recolección de los implementos de trabajo esenciales para la
práctica tales como de tubos de ensayo, la marcación o enumeración de ellos,
termómetro, utilización de H 2 O2 , KMnO4 ,hígado de un animal y unos pedazos de papa,
luego a la puesta en práctica de los tres montajes que eran “acción de un catalizador 2
inorgánico 3 sobre el H 2 O 2 ”, “acción de un catalizador de origen animal sobre el H 2 O 2 “,
“acción de un catalizador de origen vegetal sobre H 2 O2 ” y “la medición de la reacción
de una enzima en términos de la producción de calor” mediante montajes paso a paso
para evitar accidentes fue que los realizamos para que se pudiera obtener unos buenos
y excelentes resultados, encontramos cambios físicos y químicos en cada
procedimiento o montaje que realizamos los cuales al final nos permitieron identificar
los fenómenos que se presentaron en cada uno de ellos, sobre todo conocer cosas
novedosas y aclarar dudas.

Palabras clave: Enzima, catalizador e


inorgánico.

Introducción enzima una alta especificidad. Existen


antioxidantes naturales, presentes en el
Acción de una enzima presente en organismo, o sintéticos. Los
tejidos vegetales y animales: Las antioxidantes en alimentos se definen
enzimas son un tipo de biomoléculas como preservantes que retardan el
caracterizadas por ser proteínas de deterioro, rancidez o decoloración
funcionalidad catalíticas que aceleran o debida a la oxidación. Después de que
retardan la velocidad a la cual las el antioxidante se une al agente
reacciones ocurren. Existe una amplia oxidante, éste no está libre para
clasificación de enzimas cada una de reaccionar con algunos compuestos
las cuales es responsable de una delos alimentos y por lo tanto no puede
reacción específica reconociendo un causar su oxidación. Los antioxidantes
sustrato en particular el cual le da a la pueden ser enzimas que aumentan la
velocidad de ruptura delos agentes definitivamente resuelta por Buchner
oxidantes (radicales libres).Entre ellas hacia finales del siglo XIX; exprimiendo
se encuentran las enzimas su masas celulares de Saccharomyces
peróxido, glutatión per oxidasa y la cerevisie obtuvo un líquido sin células,
catalasa. capaz de producir la mismas reacciones
La catalasa es una enzima que se químicas que se obtenían utilizando la
encuentra en las células de los animales suspensión de células, es decir, la
y vegetales, su función en este tipo de transformación del azúcar en alcohol y
tejidos es muy importante debido a que anhídrido carbónico. Por tanto, de la
durante el metabolismo celular se forma levadura se podía extraer una sustancia
una sustancia toxica para la célula que capaz de regular un proceso químico
es el peróxido de hidrogeno H2O2. La concreto.
catalasa descompone el H2O2 en sus Laurent -1768
dos productos, agua y oxígeno,
sustancia no dañina para las células de Más adelante se constató que el
los tejidos. Al igual que las disciplinas almidón era degradado a
experimentales que han surgido como monosacáridos y disacárido por la
rama común que es la biología, tiene acción del jugo salival (ptialina) y se
una historia propia construida a través describió la presencia de la pepsina en
el jugo gástrico. Posteriormente, fueron
de observaciones, experiencias,
aisladas sustancias de carácter
pruebas y teorías. Se inició con el
fermentativo a partir de numerosas
estudio de los procesos de fermentación especies vegetales. Se observó que el
y de putrefacción. extracto de algunas raíces tenía
Álvarez y Jiménez -1869 capacidad para modificar el color azul
de determinadas sustancias y que el
Antoine-Laurent Lavoisier (1743- 1794) extracto de trigo era capaz de
fue el primero en plantear sobre bases transformar el almidón en disacáridos y
cuantitativas el proceso de la dextrina. La vía para el estudio de esas
fermentación alcohólica al observar una sustancias estaba ya abierta. Los
relación entre cantidad de azúcar catalizadores favorecían determinada
presente y productos formados durante reacción química sin ser destruidos y sin
el proceso. Sostuvo que la fermentación aparecer en los productos finales. El
nombre enzimas, tomado del griego,
podía ser considerada como una
que significa literalmente & quot; en la
reacción química cualquiera. No
levadura & quot.
obstante Pasteur demostró pronto que Berzelius – 1786 y Kuhne 1945
los procesos de putrefacción y
fermentación eran provocados por la Por eso en el siguiente trabajo vamos a
presencia de bacterias y levadura. Si explicar de una forma más amplia lo que
bien algunos químicos consideraron es una enzima, su composición, su
esos procesos como metamorfosis de naturaleza su nomenclatura y muchas
sustancias que provocaban excitaciones cosas más que van hacer que el tema
en otras que estaban cerca de ellas, de enzimas este más claro para todos
esta cuestión fue, como ya se ha dicho, nosotros.
Ordoñez, Córdova y Bolívar - 2015
Materiales reacción.
KMnO 4 Compuesto
Material Aspectos químico de alta
Microscopio De vidrio, hierro y reacción.
plástico. Para
observar
microorganismos. Metodología
Tubos de ensayo De vidrio. Para
contener 1) Acción de un catalizador inorgánico
sustancias. sobre el H2O2.
Termómetro De vidrio con Marque tres tubos de ensayo con los
níquel. Para
números 1, 2 y 3. Agréguele a cada uno
medir la
una pequeña cantidad de KMnO2
temperatura.
aproximadamente igual (lo que pueda
Vaso de De vidrio. Para
precipitado. contener tomar con la punta de una cuchilla o un
sustancias. bisturí) y proceder de la siguiente
Bisturí De hierro. Para manera:
cortar trozos muy Nota: conserve, en una gradilla todos
finos o pequeños.
los tubos que utilizar en la práctica, para
Baño de María De acero. Para
efectuar comparaciones.
calentar
sustancias. a) Tome el tubo 1 por su parte
Hoya De acero. Para inferior y adiciónele 2ml de agua
contener oxigenada. Observe la intensidad
sustancias. de la reacción para que compare
Macerador De porcelana.
con los dos tubos siguientes.
Para triturar.
b) Utilizando unas pinzas coloque el
Gotero De plástico. Para
tomar cierta tubo 2 al baño de maría durante
cantidad de 10 minutos. Retirarlo, déjelo
sustancia y enfriar y agregarle 2 ml de agua
adicionarla. oxigenada. Observe la reacción y
Espátula De madera y compararla con la anterior
hierro. Para coger
cantidades de c) Coloque el tubo 3 en un
sustancia. recipiente con hielo durante 10
Pinzas De hierro. Para minutos. Retirarlo e
sostener inmediatamente agréguele 2 ml
recipientes. de agua oxigenada. Compare la
Hígado Un órgano reacción con los anteriores.
Papa Hortaliza. De
almidón.
H 2 O2 Compuesto 2) Acción de un catalizador de origen
químico de alta animal sobre el H2O2.
Marcar cuatro tubos de ensayo con los b) Tome un pedazo de papa similar
números 1, 2, 3, y 4 y proceder de la al anterior, agréguele al tubo 2 y
siguiente manera: colóquelo al baño de maría
durante 10 minutos. Retírelo,
a) Tome el tubo 1 por la parte
luego déjelo enfriar y adiciónele 2
inferior, agréguele un pequeño
ml de agua oxigenada.
pedazo de hígado y luego 2 ml
c) Tome el tubo 3, agréguele otro
de agua oxigenada. Observe la
pedazo de papa en cantidad
intensidad de la reacción
similar a la anterior y colóquelo
b) Tome un pedazo de hígado
en un recipiente con hielo
similar al anterior, agréguelo al
durante 10 minutos. Retírelo e
tubo 2 y colóquelo al baño de
inmediatamente adiciónele 2 ml
maría durante 10 minutos.
de agua oxigenada.
Retírelo, déjelo enfriar y
adiciónele 2 ml de agua
d) Tome el tubo 4, y agréguele,
oxigenada.
media cucharada de macerado
de papa y luego 2 ml de agua
c) Tome el tubo 3, agréguele otro
oxigenada.
pedazo de hígado en la misma
cantidad anterior y colóquelo en
un recipiente con hielo, durante 4) Medición de la reacción de una
10 minutos. Retírelo e enzima en términos de la producción de
inmediatamente adiciónele 2 ml calor.
de agua oxigenada
Realice un montaje procediendo así:
agréguele a un tubo de ensayo media
d) Tome el tubo 4, agréguele media
cucharada de macerado de papa y tome
cucharada de macerado de
su temperatura. El termómetro debe
hígado y luego 2ml de agua
dejarse descansar libremente de tal
oxigenada.
forma que la escala de la lectura quede
visible sobre la pared del tubo en la cual
3) Acción de catalizador de origen está apoyado. Coloque el conjunto en
vegetal sobre el H2O2. una gradilla, con agua oxigenada y
observar, cada 30 segundos, las
Marque cuatro tubos de ensayo con los
variaciones de las temperaturas. Anote
números 1, 2, 3, y 4, proceda de la
las temperaturas en una tabla.
siguiente manera:
a) Tome el tubo 1 por la parte
inferior, agréguele un pedazo de 5) Elabore una gráfica en papel
papa y luego 2 ml de agua milimetrado colocando en la ordenada la
oxigenada. Observe la intensidad temperatura y en la abscisa el tiempo,
de la reacción. con el objeto de visualizar claramente el
curso de la reacción. Si después de 5
minutos se agregara la misma cantidad
inicial de agua oxigenada.
Discusión propiedades químicas del sustrato unido
a su centro activo, debilitando los
La importancia de saber cómo actúan enlaces existentes y facilitando la
las enzimas en los distintos tipos de formación de otros nuevos.
tejidos presentes en la naturaleza y en
nuestro cuerpo. Las células son sistemas abiertos y,
El modo de acción de una se da en las como tales, intercambian
reacciones espontáneas, donde, los constantemente materia, energía e
productos finales tienen menos información con el exterior. El
energía libre de Gibbs (DG) que los metabolismo celular es el conjunto de
reactantes. Por tanto, en las reacciones de degradación y síntesis a
reacciones espontáneas se libera través de las cuales las células
energía de Gibbs (DG<0). Sin intercambian materia y energía con el
embargo, el comienzo de la reacción medio, permitiendo el mantenimiento del
requiere un aporte inicial de energía. sistema. Para hacer posibles estos
Esta energía inicial que hay que procesos a temperaturas compatibles
suministrar a los reactantes para que con los tejidos vivos, la velocidad de
la reacción transcurra se reacción de estos procesos es
llama energía de modificada por los catalizadores
activación (Ea). Cuanto menor es la biológicos o enzimas.
Ea más fácilmente transcurre la
reacción. El estudio de las enzimas es además
Gutiérrez, E. 1999 relevante para comprender su papel en
procesos de elaboración de alimentos y
Los enzimas son catalizadores en la producción industrial mediante
especialmente eficaces, ya que biotecnología.
disminuyen la Ea aún más que los
catalizadores inorgánicos. Por ejemplo, K.J. Bruen, Ballard JR, Morris SE, Cochran
la descomposición del agua oxigenada A, Edelman LS, Saffle JR (June de 2007)
(H2O2) para darH2O y O2 puede
ocurrir sin catalizador, con un Conclusión
catalizador inorgánico (platino), o con un
enzima específico (catalasa). Las Que las Funciones de las enzimas que
respectivas Ea para cada proceso son se observaron, se entrelazan y se
18, 12 y 6 Kcal/mol. Así, se puede pliegan en una o más cadenas poli
calcular que el platino acelera la peptídicas (muchas cadenas), las
reacción 20.000 veces, mientras que la cuales aportan un pequeño grupo de
catalasa la acelera 370.000 veces. Para aminoácidos para formar el sitio activo,
que una reacción química tenga lugar, o lugar donde se adhiere el sustrato, y
las moléculas de los reactantes deben donde se realiza la reacción. Una
chocar con una energía y una enzima y un sustrato no llegan a
orientación adecuadas. La actuación del adherirse si sus formas no encajan con
enzima (1) permite que los reactantes exactitud.
(sustratos) se unan a su centro activo
con una orientación óptima para que la Es importante identificar por medio de
reacción se produzca y (2) modifica las prácticas de laboratorio los distintos
factores que inciden en los cambios -Diccionario de la lengua
enzimáticos de distintos tipos de tejidos española (22. ª Edición), Real
o células como las de los animales y los Academia Española, 2001.
vegetales permitiéndonos aclarar dudas - San José, C.R 1997. Cámara
sobre cómo funcionan las enzimas, los Nacional de Productores de
catalizadores. Saber y conocer a ciencia Leche. 235 P. Gutiérrez, E. 1999.
cierta ¿porque algunas reacciones Condiciones en la cadena
producen calor al mezclarse? de producción e industrialización
de leche y productos lácteos.
Que las enzimas son muy importantes
en la producción de energía
permitiéndonos estar vivos. Ya que las Anexos
células son las que conforman los
tejidos vegetales o animales, que 1. ¿Qué cambios pueden sufrir, en
cuentan con catalizadores específicos, relación a la estructura química y
denominados enzimas que aceleran los al número inicial de moléculas, el
procesos metabólicos. sustrato y la enzima en una
reacción enzimática?
Bibliografía
El sustrato y la enzima en una
-Á. Álvarez, D. Jiménez 1768 de reacción enzimática pueden sufrir
la Universidad de Nariño; cambios en relación a su
Facultad de Ciencias Naturales y estructura química y al número
Exactas. inicial de moléculas, es que las
enzimas o proteínas sirven como
- A. Laurent 1768, R. Kuhne catalizadores en las reacciones
(1900-1967), OCW © R. López de sustancias químicas que
Fonseca – Departamento de aceleran el ritmo de una reacción
Ingeniería Química – Universidad reduciendo la cantidad de
del País Vasco/EHU. energía necesaria para activar la
- Murugappa S, Kunapuli SP, reacción, que intervine en un
"The role of ADP receptors in proceso biológico y químico del
platelet function", Front Biosci., metabolismo de los seres vivos o
2006 al experimentar un trabajo de en
-R. Ordoñez, D. Córdova y A. laboratorio en el cual
Bolívar – 2015, programa de ing. evidenciamos esos procesos.
Sistemas. Biología general. También pueden cambiar la
- K.J. Bruen, Ballard JR, Morris velocidad de reacción sin
SE, Cochran A, Edelman LS, modificar su estructura; listas
Saffle JR (June de 2007). para actuar con la entrada del
- Alberts, B et al. (1996) Biología siguiente sustrato (lugar donde
Molecular de la Célula. actúan las enzimas) y que sean
3ra Edición. Ediciones Omega compatibles a sus funciones. Se
S.A.Barcelona. debe a que las enzimas son
específicas para una reacción
catalizadora, son proteínas
biológicas, se caracteriza por
poseer un centro de actividad, que catalizan la hidrólisis de ATP se
donde se alojan las sustancias conocen como ATP asas.
que van a catalizar, formando
estructura enzima sustrato o 3. Si usted hace reaccionar agua
complejo, que encajando en la oxigenada con peroxidasa y
enzima sin cambiar su forma, espera hasta que termine la
pero si cambia su forma en un reacción, ¿Cómo comprobaría
encaje inducido. que la enzima conserva su poder
catalítico?
Que cuando un reactante se une
a un catalizador, se produce una Como sabemos la peroxidasa es
secuencia importante que hace un catalizador o tipo de enzima y
que aumente la concentración del estos siendo sustancias que
reactante en un área localizada disminuyen la energía de
de la solución, por arriba de su activación formando una
concentración en solución libre. asociación pasajera con las
Así ya no, nos enfrentamos con moléculas que reaccionan.
una solución química
homogénea, si no heterogénea. Sabemos que en un experimento
de laboratorio no sufren ninguna
Reactante + catalizador complejo alteración, por lo tanto quiere
catalizador-reactante. decir que se pueden volver a
utilizar rápidamente, a lo cual
2. ¿En toda reacción enzimática procederíamos a agregarle más
hay liberación de energía en agua oxigenada y esperaríamos
forma de calor? a que la peroxidasa reaccione
Explique. nuevamente y nos otorgue un
resultado donde se observe que
En toda reacción enzimática hay la reacción anterior conservó su
liberación de energía en forma de poder catalítico y nos permitió
calor, ya que la liberación de energía volver a realizar otro
resulten reacciones que den lugar a la procedimiento con el mismo de
producción de productos fosforados antes agregándole más agua
o que aumenten de una temperatura oxigenada.
ambiente o muy baja a un
sobrecalentamiento en la reacción 4. Siempre que en una reacción
enzimática. enzimática se libera energía ¿es
en forma de calor? Explique.
Como se dice en algunos libros
donde explica un claro ejemplo de la Siempre que sea una reacción
formación del calor, donde el ATP enzimática y libere calor se
(activador tisular del plasminógeno) a puede deducir que es una
veces se hidroliza directamente a reacción exotérmica por lo tanto
ADP (adenosín di fosfato) + esto quiere decir que libera calor,
fosfato, liberando energía para y esto sucede en enlaces de alta
distintas actividades. Las enzimas
energía, que al romperse genera  1º Ley: en un sistema
calor y/o trabajo. aislado la energía no se
crea ni se destruye, puede
Generalmente es en las ser transformada de una
reacciones catabólicas donde se forma en otra.
presenta (de descomposición de  2º Ley: no toda la energía
metabolitos complejos a más puede ser usada y el
simples). Esto sucede debido a desorden tiende a
que los metabolitos más aumentar, lo que se
complejos tienen enlaces de alta conoce como entropía.
energía, que al romperse genera
calor y/o trabajo. Tenemos que.
5. ¿En cuál organela celular se
Energía: Es la capacidad de sintetizan las enzimas?
realizar un trabajo. A pesar que
existen varias formas de energía: Como ya sabemos las enzimas
química, luminosa, mecánica, son proteínas, así que, ellas se
etc., solo hay dos tipos básicos: sintetizan en el retículo
 Potencial: es la capacidad endoplásmico rugoso gracias a
de realizar trabajo como los ribosomas. Ya que ellos son
resultado de su estado o los encargados de sintetizar y
posición. Puede estar en unir las proteínas, tanto para la
los enlaces químicos, en formación de proteínas como de
un gradiente de enzimas esenciales para la vida.
concentración, en un
potencial eléctrico, etc. Se denomina orgánulos (o
también organelas,
 Cinética: es la energía del organelos, organoides o
movimiento, puede existir mejor elementos celulares) a las
en forma de calor, luz, etc. diferentes estructuras contenidas
En términos bioquímicos, en el citoplasma de las células,
representa la capacidad de principalmente las eucariotas,
cambio, ya que la vida depende que tienen una forma
de que la energía pueda ser determinada. La célula
transformada de una forma a procariota carece de la mayor
otra, cuyo estudio es la base de parte de los orgánulos. El nombre
la termodinámica. Sus leyes son de orgánulos procede de
aplicables a los sistemas la analogía entre la función de
cerrados o aislados, es decir estas estructuras en las células, y
aquellos que no intercambian la función de los órganos en el
energía con el medio que los cuerpo.
rodea; las células son sistemas
abiertos, o sea pequeñas partes 6. ¿las enzimas naturales actúan
de un sistema cerrado mayor. únicamente en el interior de las
Las leyes de la termodinámica células?
expresan:
Las enzimas naturales no solo encuentra en la leche asociada al
actúan en el interior de las material fosfolipídico presente en
células, ya que tanto en las la membrana de los glóbulos
células procariotas como grasos, tiene un pH óptimo de
eucariotas actúan o se generan actividad de 9,75; se destruye
en el exterior de la célula, progresivamente por el ca1or y a
construyendo barreras de una temperatura de 62,8°C por
defensa extracelular. Aunque la 30 minutos su destrucción es
mayoría de las enzimas actúan total, resultando este temperatura
en el interior de ellas. ligeramente superior a la
requerida para inactivar a
7. Desde el punto de vista cualquiera de los
enzimático. ¿qué diferencia microorganismos patógenos
existe entre leche cruda y la presentes en la leche, entre ellos
pasteurizada? Mycobacterium tuberculosis y la
Coxiella burneti, por lo tanto, una
La principal diferencia es que la leche bien pasteurizada no debe
leche cruda no está tratada y se presentar una reacción positiva a
encuentra con altos niveles de la prueba de fosfatasa. 
colesterol, bacterias y otros
microorganismos que hacen que 8. ¿Cómo explicaría el hecho de
al consumirse genere dolores que la ptialina de la saliva actué
estomacales y otros problemas, sobre el almidón en la boca pero
lo contrario con la leche no en el estómago?
pasteurizada que esta
esterilizada y no genera daños Se puede decir que como la
estomacales y problemas al Tialina es una enzima que se
cuerpo. libera en la boca a través de la
saliva y que sólo funciona en
La leche cruda contiene todos los presencia de almidón. Ya que en
nutrientes intactos, mientras que el intestino ya no hay digestión
la leche pasteurizada destruye en sino que hay absorción de lo que
menor medida las enzimas, pero ya se ha digerido, no es posible
también las bacterias que que actué la Tialina, pues en
presenta la leche cruda. En la primer lugar allí no se secreta,
leche cruda se ha demostrado la segundo ya no hay almidones
presencia de tres tipos diferentes que romper a nivel del intestino y
de fosfatasas (mono estearasas, tercero, la Tialina liberada en la
diestearasas y piro fosfatasas), boca ya ha sido degradada a
entre ellas una mono estearasas nivel del Intestino. La ptialina
ácida y una alcalina, en la contiene amilasa salival, la
determinación de la actividad de enzima encargada de romper los
esta última se basa la prueba de enlaces externos del
eficiencia de la pasteurización.  almidón. Todas las enzimas
tienen un pH óptimo para su
La fosfatasa alcalina se funcionamiento; la amilasa es
una enzima que trabaja en un Lipasa: actúa sobre los lípidos y
nivel básico o de basicidad. De cataliza la hidrólisis de
hecho, al llegar al estómago, el triacilglicerol a glicerol.
bolo alimenticio contiene aún la Amilasa: actúa sobre el almidón y
amilasa, pero allí se lo degrada en maltosa.
desnaturaliza por el alto nivel de Sacarosa: actúa sobre la
acidez (recuerda que las sacarosa y la degrada en glucosa
proteínas, como las enzimas, se y fructosa.
desnaturalizan con el calor y la Lactasa: actúa sobre la lactosa y
acidez). Como los enlaces del la degrada en glucosa y
almidón aún no están rotos en su galactosa.
totalidad, en el intestino delgado Maltasa: actúa sobre la maltosa y
se encuentran con la amilasa la degrada en glucosa.
pancreática que termina de hacer
el trabajo de separarlo.

9. ¿Qué otros factores, además de


la temperatura y el PH influyen
en la actividad de una enzima?
 
Además de la temperatura y el
PH que influyen mucho en la
actividad de una enzima,
podemos encontrar que Los
Cofactores son moléculas que no
son péptidos los cuales se unen
a la enzima para que se realice la  
interacción con el sustrato, sin su
presencia simplemente no habría  
actividad enzimática. También
podemos encontrar otro factor
que es la Disponibilidad de
Sustrato que cuando no hay
sustrato simplemente la enzima
no trabaja. Por último tenemos
que los inhibidores competitivos,
los cuales son sustancias que
tienen similitud con el sustrato y
compiten por ese lugar
disminuyendo la actividad de la
enzima. 

10. Cite cinco enzimas con sus


sustratos respectivos sobre las
cuales actúan.

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