METABOLISMO NITROGENADO

2020 primavera
¿Qué comprende el metabolismo nitrogenado?

Todas las reacciones químicas que implican la

fijación del nitrógeno atmosférico,
degradación y síntesis de compuestos
nitrogenados, es decir metabolitos que
contienen N en su estructura química.

¿Qué moléculas tiene nitrógeno en su

estructura?
Aminoácidos
Urea

Proteínas
 Coenzimas redox

NAD NADH
Bases nitrogenadas integrantes de los ácidos
nucleicos

Bases púricas

Bases pirimidínicas
 Aminas biológicas/biogénicas: neurotransmisores

La adrenalina es una hormona y un neurotransmisor. ​ Incrementa la

frecuencia cardíaca, contrae los vasos sanguíneos, dilata las vías aéreas, y
participa en la reacción de lucha o huida del sistema nervioso simpático.

La dopamina juega un papel importante en emociones como la motivación, el

placer, la excitación o la euforia.

La serotonina juega en el papel opuesto, produciendo sensaciones de calma,

por ello un déficit de esta hormona se relaciona con la aparición de la ansiedad
y la depresión.
Otros componentes importantes que derivan
de los aminoácidos
 Qué aprenderemos
➢ Concepto de balance nitrogenado
➢ Ingesta de proteínas, recambio de proteínas y dinámica de
los componentes celulares y balance nitrogenado
➢ Metabolismo de los aminoácidos: degradación y síntesis, y
concepto de aminoácidos esenciales
➢ Patologías asociadas a alteraciones de enzimas
➢ Eliminación del nitrógeno orgánico en mamíferos

➢ Fijación del nitrógeno atmosférico (N2) a NH3.

➢ Incorporación del nitrógeno del suelo o del agua a
compuestos orgánicos (aminoácidos)
➢ Metabolismo de bases nitrogenadas que forman ácidos
nucleicos
➢ Patologías y terapías asociadas a alteraciones en el
metabolismo nitrogenado.
 Balance nitrogenado

¿Cuándo un
individuo está
en balance o
equilibrio
nitrogenado?

N heces/fecas: N proteico y no proteico no digerido y a proteínas endógenas

del tracto gastrointestinal.
N orina: urea, NH3, aminoácidos que han filtrado en el glomérulo, ácido úrico
y creatinina (producto desecho de la creatina en el músculo y células
nervisosas).
N sudor: urea, NH3.
 ….Balance nitrogenado

• En un individuo adulto normal hay un equilibrio

entre el N ingerido (Ni) y el eliminado (Ne) (Ni =
Ne), manteniéndose constante la velocidad de
síntesis y degradación de proteínas.

• Hay un balance positivo cuando el organismo

retiene N, y el N ingerido (Ni) es mayor que el
eliminado (Ne) (Ni  Ne), condición de niños en
crecimiento, embarazadas y período de lactancia,
período post-inanición.
 ...Balance nitrogenado

• Hay un balance negativo cuando el Ni  Ne, en

ayuno, dieta sin suficientes aminoácidos esenciales
(desnutrición proteica, fiebre excesiva, senectud,
diabetes no controlada, sepsis e infecciones, a veces
asociadas a quemaduras extensas, neoplasias
avanzadas, post-operatorio, desarrollo muscular de
atletas).

• ¿Qué significa desnutrición proteica?

• ¿Por qué aumenta el nitrógeno excretado?
 ….Balance nitrogenado: de qué depende y
como se mide
• El balance nitrogenado (N ingerido y N eliminado)
depende de la ingesta y eliminación depende de
edad, salud-enfermedad, dieta.
• Si la dieta no aporta proteínas con suficientes
aminoácidos esenciales (se verá más adelante), la
maquinaria de síntesis proteica que requiere disponer
de aminoácidos activados unidos a t-RNA (aminoacil-
tRNA), estimula la degradación inespecífica de
proteínas intracelulares. Por esto, el exceso de
aminoácidos no utilizados se degradan y aumenta el N
que se elimina en la orina.
 ….Medición del nitrógeno ingerido y el
nitrógeno excretado
• Dieta ingerida
• Presencia de compuestos nitrogenados en orina y fecas.
• Al contenido nitrogenado de la dieta ingerida se le debe restar
el contenido en heces/fecas porque corresponde al realmente
incorporado al organismo (las células).

El método más ampliamente usado para las determinaciones:

• Método de KJELDHAL: Se fundamenta en la destrucción de la
materia orgánica con ácido sulfúrico concentrado, en presencia
de un catalizador con acción de calor, con posterior destilación y
titulación del nitrógeno proveniente de la muestra.
 …..Método de Kjeldahl
• El método Kjeldahl está presente en diversas normas
oficiales, como AOAC (Association of Official
Agricultural Chemists). Tales normas aseguran
características como calidad, seguridad, confiabilidad
y eficiencia.

• Ventajas: sencillo, preciso, bajo costo, modificado

para análisis de microgramos de proteína (micro
Kjeldhal). Es un método en que se utiliza mayores
cantidades de muestra y, así presenta menor
probabilidad de errores.
 Dinámica de los constituyentes celulares….

• Definición del concepto de dinámica de los

constituyentes celulares: “Todos los constituyentes
celulares (hidratos de carbono, lípidos, proteínas y
otros componentes nitrogenados) se encuentran en
procesos continuos de síntesis y degradación. Es
decir en un continuo recambio”.

• Esto le ocurre a los constituyentes funcionales

(enzimas, metabolitos) o estructurales (músculo), sin
importar si que sean moléculas simples o complejas.
…Esta dinámica respecto a proteínas comprende:
La ingesta de proteínas y degradación
proteolítica por enzimas digestivas
pepsina, quimotripsina, tripsina,
carboxipeptidasas, aminopeptidasas.

Su incorporación a la circulación
sanguínea y células como péptidos y
aminoácidos de la alimentación.

Su degradación una vez en las

células con eliminación de N y
liberación de cetoácidos y
vuelta a sintetizarse en el
organismo.
 ¿Por qué hay distintas enzimas?
Especificidad de las enzimas digestivas
Quimotripsina: en el sitio activo
tiene un denominado bolsillo
hidrofóbico (al que se une
triptofano, tirosina y fenilalanina).

Tripsina: en el sitio activo hay un

bolsillo negativo (se une arginina y
lisina).

Elastasa: el sitio activo

interacciona con residuos de
valina y treonina
¿Qué tipo de enlace rompen?
 ….Dinámica de los constituyentes celulares

Los aminoácidos/péptidos absorbidos:

• Son fuente de aminoácidos esenciales;
• Pueden ser fuente de energía a través de liberación
de esqueletos hidrocarbonados de cetoácidos;
• Son metabolitos para la síntesis de diversos
componentes nitrogenados, entre ellos proteínas y
otros compuestos ya mencionados.
 Enzimas hidrolíticas intracelulares
Ya dijimos que la digestión de proteínas permite la
incorporación a la circulación sanguínea de péptidos y
aminoácidos de la alimentación sintetizándose nuevos
compuestos nitrogenados.

Las enzimas proteolíticas

intralisomales dan cuenta del
recambio de proteínas
intracelulares, siendo fuente
de aminoácidos libres.
….Incorporación, degradación y síntesis de
proteínas intracelulares

PROTEÍNAS
de novo
 Metabolismo intracelular de los aminoácidos:
degradación y síntesis

La degradación de un aminoácido contempla la

eliminación del grupo -NH2 para excretar el exceso de
nitrógeno y a su vez, la degradación del esqueleto
hidrocarbonado (cetoácidos).
Estas reacciones comprenden
• Transaminación
• Desaminación oxidativa
• Y otros mecanismos: L-aminoácido y D-aminoácido
oxidasas
 …..Metabolismo intracelular de los
aminoácidos: degradación y síntesis

•1. Transaminación
Aminoácido 1 + -cetoácido 2 = aminoácido 2 + -
cetoácido 1
•2. Desaminación oxidativa
Glutamato + NAD(P) + H2O = -cetoglutarato + NH4+ +
NAD(P)H

Y otros mecanismos: L-aminoácido y D-aminoácido

oxidasas
Aminoácido + FAD + H2O = -cetoácido + NH3 + FADH2
1.- Aminotransferasas o aminotransaminasas:
reacciones de dos etapas

Reacción reversible
 1. Aminotransferasas o aminotransaminasas
requieren como coenzima al Piridoxal fosfato
derivado de la Vitamina B6.

B6

Coenzima
1.- Mecanismo de reacción de la transaminasa…….
1. …….Mecanismo de reacción de la transaminasa
 En resumen

Los aminoácidos Los cetoácidos del ciclo de

son dadores del Krebs o de la glicólisis son
grupo α-NH2 aceptores del α-NH2
 Valor clínico de las determinaciones de
transaminasas……..
Las principales enfermedades que causan elevación de las
transaminasas son:

• Hepatitis virales
• Cirrosis.
• Esteatosis hepática (Hígado graso).
• Abuso de alcohol.
• Lesión del hígado por drogas y medicamentos (hepatitis
• medicamentosa).
• Insuficiencia cardíaca.
• Isquemia del hígado (hepatitis isquémica).
• Cáncer del hígado.
• Enfermedades musculares.
 ……..Valor clínico de las determinaciones de
transaminasas
Hay muchas transaminasas con valor clínico provenientes de análisis
sanguíneo son:

Aspartato-aminotransferasa (AST) se encuentra en el corazón, hígado,

músculo esquelético, riñones, cerebro, páncreas, pulmón, eritrocitos y
leucocitos.
Aumenta sólo AST y los niveles de ALT son normales, señal de alteración cardíaca.

Alanino-aminotransferasa (ALT), en hígado y riñones, más específica de

daño hepático.

El cuociente AST/ALT nos orienta sobre patologías según:

- AST/ALT ≤ 1: Hepatitis viral.
- AST/ALT > 2: Cirrosis (de cualquier etiología).
- AST/ALT > 4: Sugiere fallo hepático agudo.
 EJERCICIO: Reacciones de transaminación de:

• Dadores
• Glutamato
• Aspartato

Aceptores ¿Qué tipo?

¿Productos finales?
 2. Desaminación oxidativa: glutamato
deshidrogenasa, reacción reversible

Catalizada por la Glutámico

deshidrogenasa (GDH)
Ac glutámico α-Cetoglutarato
Reacción reversible
La deficiencia en GDH causa el Síndrome de hiperinsulinismo-
hiperamonemia congénito caracterizado por una elevada velocidad
de oxidación de glutamato a α-cetoglutarato lo que estimula la
secreción de insulina en las células -pancreáticas, porque no hay
una detoxificación adecuada del amonio en el hígado.
 El nitrógeno (grupo NH2) es también
transportado al hígado como glutamina

Glutamina sintetasa, GS

Ambas reacciones son irreversibles

La glutaminasa libera el NH4+en el

hígado donde va a la síntesis de
urea (mitocondria).
Además, puede volverse a
incorporar en el glutamato
catalizado por la GS
 Concepto de aminoácidos esenciales
(mamíferos)……..
• Los aminoácidos esenciales son aquellos que el
propio organismo no puede sintetizar por sí mismo
o no lo hace a una velocidad adecuada. Esto implica
que la única fuente de estos aminoácidos en esos
organismos es la ingesta directa a través de la dieta.

• En plantas y microorganismos no hay aminoácidos

esenciales, tienen las vías metabólicas, por lo que
son fuente para los animales los ingieren en la dieta.
 ……..Concepto de aminoácidos esenciales:
(mamíferos)
• La mayoría de los aminoácidos se sintetiza por
transaminación a partir del cetoácido correspondiente,
que es un metabolito de la glicolisis y del ciclo de Krebs.
• Arg (esencial en niños) porque se utiliza en la síntesis de
urea.
• Tir se sintetiza de Fen; Cis se sintetiza de Met.
• La Pro no tiene enzima que participa en transaminación.
• La Lis por razones químicas es esencial como se muestra
ahora.
 ¿Qué le ocurre a lisina al desaminarse con una
transaminasa?

¿Podrá ser reversible esta

reacción para formar lisina a
partir de este producto cíclico?
Voet & Voet
 Degradación del esqueleto hidrocarbonado de los aminoácidos,
fuente de energía

Precursores de
Se convierten en
Glucosa
cuerpos cetónicos y
ácidos grasos

* AA glucogénicos y cetogénicos
 Moléculas biológicas derivadas de los
aminoácidos
• Glicina hemoglobina
• Glicina y Arginina fosfocreatina
(almacenamiento de energía en los músculos)
• Histidina histamina
• Tirosina melanina, catecolaminas y
hormonas tiroídeas
• Triptofano serotonina y melatonina
• También hormonas peptídicas (vasopresina,
hormonas de crecimiento, etc).
 Incorporación, degradación y síntesis de
proteínas intracelulares

PROTEÍNAS
de novo
 Eliminación del nitrógeno orgánico (de las proteínas,
aminoácidos y otros compuestos nitrogenados)
• Animales acuáticos que disponen de mucha agua alrededor
eliminan el nitrógeno como NH3 (altamente tóxico) , se denominan
amoniotélicos. Peces teleósteos y muchos invertebrados
acuáticos.
• Los que eliminan urea, o ureotélicos, disponen de niveles
intermedio de agua. Todos los mamíferos, peces elasmobranquios
y anfibios.
• Otros, como las aves eliminan ácido úrico, se denominan
uricotélicos. Reptiles, moluscos gasterótopos, insectos y aves.
Perro dálmata.

(derivado de
base púrica)
 Eliminación del nitrógeno orgánico
Ciclo de la urea en mamiferos
• El hígado es el único órgano donde la formación de urea. Algunos
enzimas se expresan parcialmente en otros órganos (intestino,
riñón).

CO2 + NH4+ + 3 ATP + Aspartato + 2 H2O → Urea + 2 ADP + 2 Pi + AMP + Fumarato

 Ciclo de la urea en el hígado

Citoplasma

Ciclo
catalítico
¿por qué?
 Ciclo de la urea en el hígado
Se sintetizan 10 Kg de urea al año en un adulto.

Funciones del ciclo de la urea:

• Eliminación del excedente de amonio formado en la
degradación de aminoácidos y otras sustancias nitrogenadas;
• Biosíntesis e inicio de la degradación de arginina. La arginina
es un aminoácido semi-esencial (niños).

Patologías asociadas a: alteraciones genéticas por la deficiencia

de una de los enzimas o el defecto de transporte de sus
metabolitos implica por un lado la acumulación de amonio
(hiper-amonemia).

.
Circuito compuestos nitrogenados
 Qué hemos aprendido
➢ Concepto de balance nitrogenado
➢ Ingesta de proteínas, recambio de proteínas y dinámica de los
componentes celulares y balance nitrogenado
➢ Metabolismo de los aminoácidos: degradación y síntesis, y
concepto de aminoácidos esenciales
➢ Eliminación del nitrógeno orgánico en mamíferos
➢ Patologías asociadas a alteraciones de enzimas

➢ Para Seminario 8 enero 2021

➢ Fijación del nitrógeno atmosférico (N2) a NH3.
➢ Incorporación del nitrógeno del suelo o del agua a
compuestos orgánicos (aminoácidos)
➢ Metabolismo de bases nitrogenadas que forman ácidos
nucleicos
➢ Patologías y terapías asociadas a alteraciones en el
metabolismo nitrogenado
➢ Voet & Voet