ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO
DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD: CIENCIAS
CARRERA: INGENIERÍA AMBIENTAL

GUÍA DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA AMBIENTAL

PRÁCTICA No 7

TEMA: FOTOSÍNTESIS, CROMATOGRAFÍA DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

1. DATOS GENERALES

NOMBRE(S): estudiante (s) CODIGO(S): estudiante (s)

Michael Steve Mosquera Lagos 62

GRUPO N°: ……

FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:

21 de diciembre de 2020 3 de enero de 2021

Riobamba- Ecuador
2020
PRÁCTICA No. 7: FOTOSÍNTESIS, CROMATOGRAFÍA DE PIGMENTOS
FOTOSINTÉTICOS

1. INTRODUCCIÓN

La fotosíntesis es un proceso que realizan los seres vivos que poseen en una célula pigmentos

fotosintéticos. Estos seres son capaces de absorber la luz solar y transformarla en una energía

química, que posteriormente estos seres utilizaran para formar materia orgánica a

partir de inorgánica. Los pigmentos vegetales, que se encuentran en los plastos, son la base

física en la que se sustenta el proceso fotosintético, posibilitando la síntesis de sustancias

orgánicas a partir de inorgánicas, mediante la conversión de energía luminosa en energía

química.

Tenemos dos tipos de pigmentos vegetales:

- Principales: clorofilas.

- Secundarios: carotenoides y ficobilinas.

Existen distintos tipos de clorofila (a, b, c, d, y bacterioclorofila) que poseen una estructura

molecular casi idéntica.

Las clorofilas a (verde azulada) y b (verde amarillenta) se encuentran en las plantas superiores y

en las algas verdes; la c en las algas pardas, en las diatomeas y en los dinoflagelados; y la d en

las algas rojas.

Los carotenoides son pigmentos de coloraciones amarillentas y rojas que se encuentran,

principalmente, en raíces y frutos (zanahoria, tomate, etc.). Los carotenoides agrupan a dos tipos

de pigmentos: los carotenos y las xantofilas.

Las ficobilinas están constituidas por pigmentos azules (ficocianinas) y rojos (ficoeritrinas). Se

encuentran en las algas azules y rojas.

Los pigmentos accesorios no actúan directamente en la fotosíntesis, aunque transfieren a la

clorofila la energía que absorben. Los principales grupos de pigmentos vegetales son las

clorofilas que poseen un color verde y los carotenoides que poseen colores del amarillo

al naranja. Estos pigmentos los encontramos en los tilacoides de los cloroplastos de las

plantas superiores y de las algas verdes. Las clorofilas a y b son muy similares estructuralmente.

El grupo metilo de la clorofila a hace que tenga mayor solubilidad en solventes no polares a

comparación de la clorofila b. Los carotenoides tienen 40 átomos de carbono y se dividen en

carotenos, que solamente tienen carbono e hidrogeno y las xantofilas que además de poseer

carbono e hidrogeno también poseen átomos de oxígeno. El Oxigeno se encuentra en los

extremos de la molécula como grupos hidroxilo que hacen que tengan más afinidad por los

solventes polares que los carotenos. Por lo que el método más eficaz y más utilizado para poder

conocer la cantidad de pigmentos fotosintéticos es la cromatografía que se basa en la

diferencia de afinidad que tienen los componentes de una mezcla de tal manera que al

introducir una tira de papel poroso en esa mezcla el disolvente arrastra con distinta velocidad a

los pigmentos según la solubilidad que tengan, permitiendo identificarlos perfectamente según su

color. Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores, que poseerán diferente grosor,

dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución

2.- OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Identificar aspectos fundamentales del proceso de la fotosíntesis

EQUIPOS Y MATERIALES

Materiales

2 vasos de vidrio

Tijeras

Colador

Dos pinzas de ropa

Alcohol

Gasa

Papel filtro

Hojas de espinaca

Mazo de mortero

300 ml de agua

Bicarbonato de sodio

Detergente liquido

Perforadora

Maskin

Marcador

Papel aluminio

Una lámpara

3 vasos de vidrio

Papel aluminio
3 jeringas de 20 ml rotuladas como A, B, C

2 vasos de vidrio, rotulados como A, B

1 alfiler

3.- INSTRUCCIONES

Separación de pigmentos fotosintéticos, cromatografía en papel

1. Lavar y secar las hojas de espinaca

2. Cortas las hojas de la espinaca en cuadrados pequeños, desechar las nervaduras centrales

de las hojas

3. Añadir alcohol de manera que cubra la espinaca

4. Machacar hasta conseguir una mezcla verde intensa

5. Colocar la gasa sobre el colador y tamizar la muestra en otro vaso

6. Colar el papel filtro formando u rectángulo de aproximadamente 3 cm de ancho

7. Con la ayuda de las pinzas de ropa fijar el papel en forma vertical de manera que la

mezcla suba por el papel filtro.

8. Dejar reposar 20 minutos

9. Observar lo que ocurre sobre el papel filtro

Tasa fotosintética

1. Perforar las hojas de espinaca, consiguiendo 30 discos

2. Dividir los 30 discos en 3 grupos de 10

3. Colocar 150 ml de agua en los dos vasos marcados con las letras A, B

4. Añadir 1/8 de cuchara de bicarbonato de sodio en el vaso A y mezclar

5. Añadir 1 gota de detergente liquido a los dos vasos y mezclar usando diferentes cucharas
 6. Introducir en la jeringa A los 10 discos de espinaca, repetir el procedimiento con las

jeringas B y C.

7. Llenar la jeringa A con 15 ml de la solución A. Sacar el aire de la jeringuilla

8. Llenar las jeringas B y C con 15 ml de la solución B, respectivamente

9. Cubrir la jeringa C con papel aluminio

10. Colocar en posición vertical las jeringas y exponerlas a la luz durante 45 minutos

11. Observar lo que ocurre

5.- RESULTADOS OBTENIDOS

Luego de una interesante introducción donde nos habla de conceptos clave sobre la fotosíntesis,

en el video se realiza el procedimiento propuesto en el punto anterior, obteniendo como resultado

la mezcla de la espinaca triturada en alcohol y correctamente cernida, se sujeta un pedazo de

papel filtro donde, con el paso del tiempo, una vez realizada la cromatografía, los pigmentos se

habrán separado y podemos observar la diferencia de colores, y de esta manera distribuirlos

como: clorofila a, clorofila b, xantofilas, carotenos; la mezcla bajo la luz del sol o mejor aún, con

una lámpara UV se observa un color rojizo, esto debido a la propiedad de fluorescencia de la

clorofila.

En el experimento de tasa fotosintética se realiza el procedimiento donde se usan dos diferentes

soluciones, en la solución A, se añade bicarbonato y detergente líquido, más la solución B solo

contiene jabón líquido, se dividen tres jeringas en donde se introducen los discos de espinaca,

pero la primera jeringa se llena con la solución A, y las otras con la solución B, a diferencia de

las dos jeringas a la última se la proteje de la luz con papel aluminio, se exhiben las muestras a

una luz artificial, arrojando como resultado que la muestra cuya solución tenia bicarbonato, los

discos de espinaca se dirigieron hacia la parte superior, por otra mano las jeringas b y c no

sufrieron cambio visible, se repite este procedimiento con una planta más fresca, pero ahora el
movimiento es contiguo a conforme se lo expuso a la luz, es decir se observa el movimiento mas

repentino o inmediato, cambia también que esta vez fue expuesto a luz solar.

6.- CUESTIONARIO

Cuál es el rango de longitud de onda que absorben los distintos pigmentos fotosintéticos?

El conjunto de longitudes de onda que absorbe un pigmento se conoce como su espectro de

absorción. En el siguiente diagrama, puedes ver los espectros de absorción de tres pigmentos

importantes en la fotosíntesis: clorofila a, clorofila b y β-caroteno. El conjunto de longitudes de

onda que un pigmento no absorbe, se refleja, y la luz reflejada es lo que vemos como color. Por

ejemplo, percibimos las plantas de color verde por su gran contenido de moléculas de clorofila a

y b, que reflejan luz verde.

Clorofila

La clorofila, el pigmento verde común a todas las células fotosintéticas, absorbe todas las

longitudes de onda del espectro visible, excepto las de la percepción global del verde, detectado

por nuestros ojos.

Hay cinco tipos principales de clorofila: a, b, c y d, más una molécula relacionada que se

encuentra en procariontes llamada bacterioclorofila. En las plantas, la clorofila a y clorofila b son

los principales pigmentos fotosintéticos. Las moléculas de clorofila absorben longitudes de onda

azules y rojas. Aunque tanto la clorofila a como la clorofila b absorben luz, la clorofila a tiene

una función única y crucial al convertir la energía de la luz en energía química. Debido a la

función central de la clorofila a en la fotosíntesis, todos los pigmentos utilizados además de la

clorofila a se conocen como pigmentos accesorios. El uso de pigmentos accesorios permite la

absorción de una gama más amplia de longitudes de onda y, por lo tanto, una captura mayor de

energía de la luz solar.

Carotenoides

Los carotenoides son otro grupo clave de pigmentos que absorben la luz violeta y verde azulada,

entonces sus pigmentos tienden a ser rojos, amarillos o anaranjados.

Por qué se usa bicarbonato de sodio en el experimento del cálculo de la tasa fotosintética?

Porque el ion bicarbonato sirve como la fuente de carbono para la fotosíntesis. El dióxido de

carbono (CO2) es necesario para la fotosíntesis y se encuentra tanto en el aire como disuelto en

el agua. El bicarbonato de sodio al disolverse con el agua produce más CO2 y nos permite

observar la aparición de bolsitas de aire en las hojas de la planta. Esto denota el desprendimiento

de oxígeno que se forma como producto de la fotosíntesis.

Por qué flotan los discos de las hojas después de ser expuestos a la luz?

Porque la fotosíntesis se realiza en la presencia luz. La respiración que usa el oxígeno producido

por la fotosíntesis hace que los discos de las hojas floten, porque el resultado neto es que la

fotosíntesis produce más oxígeno que el que se usa en la respiración. En esta investigación, la

velocidad a la que se elevan los "discos" de las hojas se usará como una medida indirecta de la

producción neta de oxígeno producida por la fotosíntesis.

Cuál es la importancia de la tasa fotosintética en los ecosistemas?

La tasa fotosintética está directamente relacionada con la radiación fotosinteticamente activa

(composición de la luz), a los factores de disponibilidad del agua, y al intercambio de los gases.

Es decir la tasa fotosintética depende de las condiciones ambientales de cada ecosistema.

debe funcionar de forma integrada y eficiente en un medio en el que existe una enorme

variabilidad natural de factores que afectan a la tasa de fotosíntesis, tales como la luz, la

temperatura, la humedad del aire, la disponibilidad hídrica y de nutrientes minerales en el suelo,

etc. A estos factores puede añadirse también el dióxido de carbono (C01), principal sustrato de la

fotosíntesis, ya que en los últimos años se está observando un rápido aumento de la

concentración de este gas en la atmósfera, hecho que muy probablemente está en la base de un

cambio climático de alcance global

La tasa de fotosíntesis de una hoja depende de más de 50 reacciones individuales, cada una de

las cuales presenta su propia respuesta a cada variable ambiental. Esta tasa fotosintética puede

variar ampliamente en el curso de un día y, también, entre las diferentes estaciones del año,

debido a variaciones naturales de factores ambientales como la luz y la temperatura. La tasa de

fotosíntesis puede variar también a más largo plazo en los próximos decenios, como respuesta a

los crecientes niveles de CO2 atmosférico, debido a los efectos directos del propio C01 en la

fotosíntesis, y también a los efectos indirectos, a través de posibles cambios en la temperatura y

el régimen hídrico causados por el incremento de C01 y de otros gases «invernadero» en la

atmósfera, lo que puede conducir a un cambio climático global de consecuencias no del todo

previsibles.

7.- CONCLUSIONES

Para concluir podemos regresar a la parte introductoria donde hablábamos de la fotosíntesis, o la

clorofila directamente, y pues podemos concluir que la clorofila a y la clorofila b tienden a dar

diferente coloración en dicho proceso, En la fotosíntesis, la energía solar se convierte en energía

química mediante organismos fotosintéticos. Sin embargo, en la fotosíntesis no se usan de igual

manera todas las distintas longitudes de onda en la luz del sol ya que los organismos

fotosintéticos contienen moléculas llamadas pigmentos que absorben solo longitudes de onda

específicas de la luz visible, mientras que reflejan otras.

El conjunto de longitudes de onda que absorbe un pigmento se conoce como su espectro de

absorción.

8.- RECOMENDACIONES

Para un mejor procedimiento cortar en cuadros la espinaca y eliminar las nervaduras más

grandes, también que el alcohol cubra la espinaca, usar diferentes cucharas para no contaminar la

mezcla cuando se prepare la solución, también es recomendable hacer las pruebas con una luz

artificial y otra con luz solar, para de este modo analizar la diferencia

9. BIBLIOGRAFIA

Moreno, S. G., Vela, H. P., & Alvarez, M. O. S. (2008). La fluorescencia de la clorofila a como

herramienta en la investigación de efectos tóxicos en el aparato fotosintético de plantas y algas. Revista

de Educación Bioquímica, 27(4), 119-129.

Básica, M. F., en Inglés, N., Quiles, M. J. C., & Pollmann, S. Guía de aprendizaje de Bioquímica.