Micropropagación de Fragaria x ananassa var.

albión a partir
de Semillas. (Fresa)
La fresa fragaria x ananassa var albion es la variedad más común cultivada
en Venezuela, pertenece a la familia de las Rosaceae y es el resultado de un
cruce entre el fino sabor de Fragaria virginiana y el gran tamaño de la
infrutecencia de Fragaria chiloensis. Su uso como fruto fresco o en conserva
para elaboración de jugos, helados, perfumes, cremas le confiere un lugar
importante en la economía del país. El objetivo de esta investigación fue la
germinación in vitro de semillas de esta especie, para usarlo como material
de partida para la propagación masiva de dicha especie.

Fig.1-Fresas de la variedad. albion.

Material vegetal: Las fresas de la variedad mencionada se compraron en

los supermercados, luego se lavaron con agua destilada, se licuaron
rápidamente en licuadoras domesticas para eliminar el arilo y restos de la
infrutescencia , luego ese contenido fue tamizado 3 veces. Una vez obtenidas
las semillas se colocaron a secar en la estufa por 12 horas, para luego proceder
al método de desinfección descrito a continuación.
Fig.2-Semillas de Fresa ya secas, listas para la siembra In Vitro.

Desinfección.
1-Se lavaron con Jabón azul por 15 minutos.

2-Luego se sometieron a una desinfección con Povidine (Solución Yodada) al

40% por 15 minutos.

3-Se enjuagaron con agua destilada.

4-Se sometieron a otra desinfección con Vitavax (Fungicida) al 20% por 15

minutos más.

5- Enjuague con agua destilada.

6-Por último se desinfectaron con una solución de cloro al 30% por 15 min mas.

7-Se llevan a cámara de flujo laminar para realizar 3 lavados con agua destilada
estéril.

8-Se procede a la siembra en los medios de cultivo preparados

Composición del medio de cultivo utilizado para la siembra.

Las semillas fueron sembradas en un medio de cultivo compuesto por las sales
de Murashige y Skoog (1962), suplementado con tiamina 0,4mg/L, mio-inositol
100 mg/L, sacarosa 30 gr/L, agar 7,5 gr/L, pH 5,7 sin hormonas de crecimiento.
Luego se colocaron en la cámara de crecimiento a luz continua con una
temperatura de 27 ± C°

Hasta el momento se han realizado dos siembras.

Primera siembra fecha: 17/11/2016

Se sembraron 11 frascos con un promedio de 80 semillas por frasco (880

semillas promedio), de los cuales se observo un 45% de contaminación . Para
el 12 /12/ 16 se observa el comienzo de germinación en las semillas.

Fig. 3. Germinación de las semillas de fresa. 1 Siembra 17/ 11 / 16.

La segunda siembra se realiza el 15 / 12 / 16 en la cual se sembraron 15 frascos

de compota de los cuales hubo 10 frascos contaminados, quedando 5 frascos
donde a la fecha del 10 / 01 / 17 se observa ya germinación de semillas.

Fig. 4- Semillas germinadas de la 2 siembra. 15/ 12 / 16.

Fig 5. Semillas Germinadas de Fresa a los 3 Meses.

El 16 / 2/ 17 se repicaron las primeras plantas de la primera siembra de semillas

de fresa que se realizo el 17/11/16 en Medio de cultivo compuesto por las sales
de MS (1962). (6 frascos).

Frasco N° de plantas altura

1 organogenesis 1 cm

2 2 1,5 a 2 cm

3 1 2 cm

4 1 2,2 cm

5 organogenesis 1,4 cm

Observaciones: Pudimos observar que tenemos organogénesis directa en dos

de los frascos
Figura. 5. Plantas de Fresa ya repicadas.

Se pudo observar que estamos en presencia de una organogénesis directa en la

mayoria de las plantas obtenidas por germinación de semillas, estas planticas
una vez germinadas son repicadas al mismo medio, luego de 2 meses de
repicadas se observa que la organogénesis es realmente impresionante. De las
42 planticas germinadas que cambiamos de medio se obtienen los siguientes
resultados en un contaje de 14 plantas.

Planta N de Brotes. Planta N de brotes

-1 28 -8 51

-2 38 -9 45

-3 41 -10 39

-4 55 -11 52

-6 45 -12 49

-7 48 -13 50

-14 38

De un total de 14 plantas obtenidas por germinación de semillas obtenemos un

total de 579 plantas de Fresa, donde la altura promedio de las plantas fue de 2,5
cm. Este contaje se realizo el 25/04/17.
Fig. 6 Plantas de Fresa antes de separarlas para pasarlas a medio de
enraizamiento.

Fig 7. Plantas de Fresa, se puede observar la cantidad de plantas por semilla

germinada debido a la organogénesis.

Todas estas plantas fueron pasadas a medio de enraizamiento el cual es un

medio compuesto por sales de Murashige y Skoog (1962) a la mitad, mioinositol,
tiamina, pH 5,7 y 7,5 gr de agar. Aquí se dejaran por lo menos un mes y medio
mas para realizar luego su respectivo paso a tierra.
Presupuesto de costos para la propagación de
FRESA Variedad Capitola y Camino Real.

Los medios de cultivo se encuentran constituidos por los siguientes

componentes:

Nutrientes Minerales:
-NH4NO3 Nitrato de amonio----------------------------------500 gr--------19.000 bs.S

-KNO3 nitrato de potasio---------------------------------------500 gr--------18.000 bs.S

-H3BO3 acido borico--------------------------------------------500 gr---------14.000 bs.S

-KH2PO4 Fosfato de Potasio---------------------------------500 gr---------17.000 bs.S

-KI Ioduro de Potasio-------------------------------------------500 gr---------14.000 bs.S

-NA2MOO4.2H2O Sodio Molibdato dihidratado--------100 gr----------17.000 bs.S

-COCL2.6H2O Cloruro de Cobalto hexahidratado---- 100 gr----------15.000 bs.S

-MGSO4.7H2O Sulfato de Magnesio heptahidratado-100 gr---------17.000 bs.S

-MNSO4.7H2O Sulfato de Manganeso heptahidratado -100gr-------19.000 bs.S

-CUSO4.5H2O Sulfato de Cobre pentahidratado--------- 100 gr------ 20.000 bs.S

-NA2EDTA Acido etilendinitrotetra-acético------------------300 gr-------15.000 bs.S

-FESO4.7H2O Sulfato de Hierro II---------------------------300 gr--------13.000 bs.S

Vitaminas:
-Tiamina------------------------------------------------------100 gr---------------27.080 bs.S

-Mio-Inositol--------------------------------------------------300 gr-------------23.000 bs.S

-Cysteina------------------------------------------------------250 gr-------------25.000 bs.S

Reguladores de Crecimiento:
-AIA ácido indolacético-------------------------------------100 gr-------26.000 bs.S

-ANA ácido Naftalenacético-------------------------------100 gr-------25.000 bs.S

-BA Benciladenina-------------------------------------------100 gr-------25.000 bs.S

Carbohidratos:
-Sacarosa-------------------------------------------------------- 5 Kg---------2.000 bs.S

Agentes Solidificantes:
-Agar Power-------------------------------------------------------4 kg------150.000 bs.S

Personal para el proyecto:

-2 Investigadores--- 35.000.000 bs x mes para un año de proyecto. Serian
70.000.000 por mes o 70.000 bs.S por mes para los investigadores que
trabajaran en el proyecto.

Equipos:
-Uso y Mantenimiento de Equipos de Laboratorio---------------------700.000 bs.S

OTROS ASPECTOS:

- El tiempo de duración del proyecto de propagación de Fresa

correspondería a un año de trabajo o mas eso depende del desarrollo del
proyecto.

- Para la contratación del proyecto se requiere el 100% del costo estipulado

por mes para cada investigador.

- Este monto estipula la propagación de 2 variedades de Fresa.

- El material Vegetal a propagar in vitro será aportado por la persona

contratante.

- La Etapa de Aclimatación si es posible que sea realizada por la persona

contratante.

- Otro Aspecto a considerar IMPORTANTISIMO seria la reparación de los

aires acondicionados del cuarto de crecimiento así mismo la reposición
de los bombillos de luz blanca que están quemados del cuarto de
crecimiento.
OJO: En este presupuesto no está incluido el papel de aluminio, el envoplast, el
alcohol, las hojillas de bisturí ni el material de vidrio todo eso va por el laboratorio y
por lo que nosotros vamos a percibir mensualmente.

Es importante José que tu le digas a los que quieren el proyecto que nosotros les
vamos a dar de las otras variedades que tenemos en el laboratorio para que las
prueben en campo, que seria la Morangueiro Variedad Brasilera y la otra que
nosotros tenemos aquí como Variedad Merideña.

José nosotros por los momentos nos conformamos con nuestro sueldo para
arrancar y recuerda que de ahí nosotros le tenemos que dar a la Prof. Eva para que
no haya problemas.