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Lizeth Gómez
Grupo: 151009_48
1
Práctica No. 1
“Bioseguridad”
En esta práctica lo primero fue determinar la manera correcta de lavarse las manos y el
reconocimiento de las normas de seguridad en el laboratorio para realizar las prácticas siguientes.
Lo primero fue realizar la lectura de la guía y en esta se identificó la manera correcta para el
lavado de las manos.
1. Abrir el grifo del agua y mojarse las manos. 2. Aplicar jabón en la palma de las manos 3. Frótese las palmas de las manos
4. Frotar la palma de la mano contra el dorso de la 5. Frótese las palmas de las manos entre sí con los 6. Frótese el dorso de los dedos de la mono contra
otra mono entrelazando los dedos entre si dedos entrelazados la palma de la otra agarrándose los dedos
2
7. Atrape el dedo pulgar de una mano con la otra y 8. Frote la punta de los dedos sobre la palma de la
9. Enjuague las manos
refregué con movimientos circulares mano opuesta
10. Utilice una toalla de papel desechable para
11. Seque sus manos 12. Arrojar la basura y listo manos limpias
cerrar el grifo
3
4
Lo Siguiente Fue observar el video ´´Seguridad en el laboratorio
´´
Seguridad en el Laboratorio.
Atender
Indicaciones antes De Acuerdo a cada
Información Oportuna de iniciar cualquier práctica realizada
Para Evitar y Minimizar práctica de
Riesgos laboratorio
No Consumir Alimentos
No Correr
Dentro del Laboratorio
Guantes. Precauciones
Gorro. a Tener en
Cuenta Identificar Ubicación
Gafas de
extintores
Seguridad
Bata
Tapabocas
(Filtro
N95) Revisar Material
Suministrado para
cada Práctica
6
Nombre Descripción Uso Gráfico
Para contener
Pequeño tubo pequeñas
cilíndrico de muestras liquidas
Tubo de ensayo vidrio con un o solidas
extremo Se somete a
abierto variaciones de
temperatura
Armado de
Frasco de vidrio aparatos de
Erlenmeyer ampliamente destilación o para
utilizado en hacer reaccionar
laboratorios de sustancias que
química y física necesitan un largo
calentamiento
Aumentar la
resolución de Usado entre el
un microscopio lente frontal y el
Aceite de inmersión
mediante la cubre objetos de
inmersión del vidrio
lente objetivo
7
Nombre Descripción Uso Gráfico
Tienen dos
partes
Instrumento: se
conecta a un
soporte o rejilla
mediante una
doble nuez
Sujetar diferentes
Pinzas Pinza metálica: objetos de vidrio
Estructura
parecida a unas
tenazas se
compone de
dos brazos, que
aprietan el
cuello de los
frascos
moldes de
madera con
huecos de Se utiliza para
forma sostener y
Gradilla rectangular y almacenar gran
un mango que cantidad de tubos
permite de ensayo
manipular la
herramienta
Pequeño
Sirve para
contenedor en
calentar o fundir
porcelana
Cápsula sustancias solidas
semiesférico
o evaporar
con un pico en
líquidos
su costado
8
Nombre Descripción Uso Gráfico
Viene
acompañado
Se utiliza para
con un brazo
Mortero moler y mezclar
pesado para
sustancias
machacar y
moles
Se utiliza para
Recipiente
preparar o
cilíndrico de
calentar
Vaso de precipitado vidrio
sustancias, medir
borosilicatado
o traspasar
fino
líquidos
Instrumento
volumétrico
consiste en un Permite contener
Probeta cilindro líquidos y medir
graduado de volumes de forma
vidrio
borosilicatado
Sostener los
Pieza delgada y objetos para
Laminas portaobjetos
plana de vidrio examinarlos bajo
un microscopio
9
Nombre Descripción Uso Gráfico
Se coloca sobre
un objeto que va
Fina hoja
ha ser observado
material
bajo el
Laminas cubreobjetos transparente de
microscopio el
plancha
cual se suele
cuadrada
encontrar sobre
el portapapeles
10
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 2
“Microscopía”
Introducción
11
Su sistema óptico posee un lente condensador (que concentra la luz
proveniente de la fuente), una serie de lentes objetivos (que recogen los
rayos difractados por la muestra), con diferentes poderes de aumentos
(usualmente 4x, 10x, 40x y 100x) y uno o dos lentes oculares (cerca de
los ojos) que generalmente proporcionan un aumento de 10x. Los
términos de aumento se expresan en x, de tal forma que un aumento de
10x (“diez por”) significa que una imagen está aumentada 10 veces el
tamaño original. El aumento total del microscopio es el producto de los
aumentos del lente objetivo más el lente ocular
Procedimiento:
12
1. Agua estancada 10 X
13
3. Hilo + gota de agua 10X 40 X
14
Papel milimetrado + gota de agua 4 X 10 X
15
40 X
16
Células Vegetales
a. Cebolla
Cebolla + Lugol 40 X
a. Elodea
a. Papa
17
Células Animales
18
a. Sangre humana
Extendido de sangre 40 X
19
a. Observación de organismos unicelulares
Agua estancada 10 X
Cuestionario
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1. Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las
preparaciones.
2. Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las
distintas estructuras celulares
21
4. ¿Son todos de igual tamaño y forma? Explique su respuesta.
22
A mayor aumento menor iluminación, a menor aumento mayor
iluminación
Las célula vegetal tienen una pared celular, cloroplastos: organelos, son
autótrofos y el tamaño
23
11. ¿La morfología, el tamaño y ubicación del núcleo es igual en
todas las células? ¿Habrá células con más de un núcleo? ¿Pueden
existir células sin núcleo? Justifique su respuesta.
Las procarias pueden existir sin núcleo como bacterias, virus ...
Si, se observa la membrana celular con los diferentes aumentos pero aún
no se lograban diferenciar las vacuolas
Eritrocitos son los encargados de llevar el oxígeno a las células. Los leucocitos
o glóbulos blancos nos defienden de las infecciones.
Cada tipo de colorante nos sirve para identificar cierto tipo de tejido
Por ejemplo: La eosina es un colorante ácido, entonces tiñe las estructuras
básicas que están en el citoplasma, por eso se ven color rosa.
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Descripción de la actividad práctica Guía 3
“célula, crenación, hemolisis, plasmólisis y turgencia”
Introducción
25
Objetivo
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1. Células Sanguíneas
Lamina 1 lamina 2
Extendido de sangre 40 X sangre + agua
Lamina 3 lamina 4
Sangre + NaCl al 0,2 % sangre + NaCl al 0,9 %
27
Lamina 5
Sangre + NaCl al 20%
Células Vegetales
28
Lamina 6
1. elodea 10 X elodea 40 X
Lamina 7 lamina 8
Elodea + agua destilada Elodea + gotas NaCl al 02 %
29
Lamina 9 lamina 10
Elodia + gotas NaCl al 0,9% Elodia gotas NaCl al 20%
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Presentación de resultados y cuestionario
31
32
B. En un cuadro presente los resultados de las soluciones
hipotónicas, isotónicas e hipertónicas para los dos tipos de células.
Difusión
proceso irreversible por el cual un grupo de partículas se distribuye de manera
uniforme en un medio ya sea vacío o formado por otro grupo de partículas. Se
encuentra impulsado por el movimiento térmico de las partículas que
componen ese sistema
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ósmosis
es un fenómeno físico relacionado con el comportamiento de un sólido como
soluto de una solución ante una membrana semipermeable para el solvente
pero no para los solutos. Tal comportamiento entraña una difusión simple a
través de la membrana, sin "gasto de energía". La ósmosis del agua es un
fenómeno biológico importante para la fisiología celular de los seres vivos.
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 4
“Permeabilidad selectiva de la membrana del eritrocito”
Introducción
Cuando un eritrocito es colocado en una solución isotónica, que contiene moléculas que pueden
atravesar la membrana, la molécula penetrante entra en la célula ocasionando que ésta estalle.
Este estallamiento de los eritrocitos es llamado hemólisis y puede ser detectado por medio de un
espectrofotómetro, que mide el cambio en la absorción de la luz, debido al paso de la hemoglobina
hacia el exterior.
Cuestionario
1. Describa en detalle la estructura de la membrana plasmática según el modelo actual.
Esquematícelo.
Permite seleccionar
Bicapa Lipídica que
las moléculas que
delimita la célula
deben entrar y salir de
la célula. De esta
forma se mantiene
Capa formada por estable el medio
Fosfolípidos, Glucolìpidos intracelular, regulando
y Proteínas el paso
Permeabilidad
de agua, iones y meta
Membrana Plasmática. Selectiva
bolitos, a la vez que
mantiene el potencial
Equilibrio entre el electroquímico (hacien
interior y el exterior do que el medio
de la célula interno esté cargado
negativamente). La
membrana plasmática
Regula la entrada y
salida de muchas 35
sustancias.
2. Explique las características que debe presentar una molécula para que pueda atravesar
fácilmente la membrana plasmática.
R/pta. Lo que ingresa o sale de la célula, se realiza mediante los sistemas de transportes
(moléculas o grupos de ellas, generalmente proteínas).
Estos funcionan como poros selectivos, permiten el ingreso de sustancias entre otras e inclusive las
obliga a entrar o salir de acuerdo a la necesidad de la célula.
Las muestras de sangre sin anticoagulantes generalmente se utilizan para dividir las células
sanguíneas del plasma.
Las muestras de sangre con anticoagulantes se emplean generalmente para el conteo de células
sanguíneas, al igual que diversas pruebas para determinar anomalías o patologías propias de las
células sanguíneas.
4. Si hubiéramos utilizado sangre de otro animal mamífero, ¿esperaríamos los mismos resultados?,
explíquelo en función de la permeabilidad de la membrana.
R/pta. Los resultados hubieran sido los mismo ya que la sangre de todos los animales mamíferos
poseen las misma cualidad un ejemplo serían los glóbulos rojos en los mamíferos adultos, los cuales
pierden su nucleó y organelos para llevar más hemoglobina.
Por tal motivo la permeabilidad debería ser la misma ya que se ingresa o saca de acuerdo a la
necesidad de la célula.
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tiempo fractosa Ácido glicerol metanol
cítrico
30 segundos 1.24 1.56 1.53 51.78
1 minuto 1.23 1.49 1.70 56.37
1 1/2minuto 1.23 25.15 1.88 56.47
2 minutos 1.25 27.81 2.07 56.60
2 ½ minuto 1.26 27.75 2.24 56.82
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 5
“Meiosis y Mitosis”
Introducción:
En esta guía encontraremos las diferencias que hay en el proceso de la mitosis y la meiosis. Podemos decir
que la mitosis es la división del núcleo celular por el cual se conservan los organelos y la información
genética contenida en sus cromosomas, que pasa de esta manera a las células hijas resultantes de la
mitosis. Esta es para la formación de tejidos, lo que nos indica que se encuentran en la mayoría de nuestro
cuerpo, esta se divide en cuatro fases: Profase, Metafase, Anafase y telofase.
Procedimiento
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o rosácea y lave con abundante
agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido
tratadas para inhibir o retardar la germinación de las raicillas.
2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres
palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.
3. Póngalo a germinar a 25°C o a temperatura ambiente durante 3 días, al cabo de estos
aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar
con agua cada 24 horas.
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5. Cuando las raíces tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raíz de
aproximadamente 2 – 3 mm a partir del ápice.
6. Colóquelas en una lámina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante acetocarmín.
7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con ayuda de la punta de una
lanceta, de unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raíz quede
extendida.
8. Use papel absorbente para retirar el exceso de colorante realice una suave presión, evitando
que él cubre objetos resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura
por mucha presión que se realice.
9. Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para evitar que se seque y
de esta manera conservar la preparación durante varios días.
10. Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e
identifique las células.
11. Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas
en color rosáceo – morado.
12. Ubique el objetivo de 100 x y escriba sus observaciones anotando las diferencias en
cada uno de los aumentos mencionados.
13. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interface y
células en división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis.
Presentación de resultados
-MITOSIS
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-MEIOSIS
40
Cuestionario
41
Fig. 1
En esta encontramos varias fases:
Podemos encontrar interface, metafase I, telofase I.
42
Fig. 2
En esta encontramos interface y anafase I.
Fig. 3
En esta encontramos interface y metafase I.
Rta: La mitosis tiene 46 cromátides como este se duplica pasa a tener 92 cromátides, que da como
resultado 46 pares de cromosoma
4. ¿Cuántos cromosomas poseen las células en meiosis?
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Rta: Como anteriormente habíamos explicado en la mitosis son 46 pares de cromosomas, pero
en la meiosis se duplican por 4, por lo tanto, el resultado final de este proceso es de 184
cromosomas.
5. ¿Qué es la cromatina?
Rta: Sustancia que se encuentra en el núcleo de la célula formando el material cromosómico, está compuesto
de ADN unido a proteínas.
Podemos deducir que la cromatina es la asociación de ADN y proteínas organizados en cromosomas.
6. ¿Qué es la interface?
Rta: La interface es el periodo en el cual la célula crece y duplica su ADN. Se puede decir que esta
es la etapa más larga de todas y en la cual la célula no se divide, esta se divide en 4 fases: fase M,
G1, S y G2.
7. ¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada una de ellas?
Rta: Las fases del ciclo celular son cuatro.
Fase M: en esta encontramos la mitosis (división del núcleo) y la citocinesis (división de la
célula).
Fase G1: en esta fase la célula es metabólicamente activa y está en crecimiento, pero sin
replica de ADN.
Fase S: esta fase es de síntesis o replicación de ADN (duplicación).
Fase G2: en esta fase se produce el crecimiento celular y síntesis de proteínas útiles para la
mitosis.
8. ¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y por qué?
Rta:
Se duplica en la fase S, ya que la célula sintetiza una copia completa del ADN en su núcleo.
Además, duplica una estructura de micro túbulos llamada centrosoma. Los centrosomas ayudan a
separar el ADN durante la fase M.
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9. ¿Cuáles son las partes del cromosoma?
Rta:
Cromática
Estas son las dos partes principales que conforman el cromosoma, dándole su forma. Su particular
forma, permite la publicación del ADN.
Telómero
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Es completamente imperceptible, pero marcan el final de los cromosomas, este es el que permite
que los brazos se mantengan separados.
Brazo corto
Como su nombre lo indica, es el brazo de menor tamaño de ambas cromátidas. Es nombrado
comúnmente como brazo “q”.
Brazo largo
Este, se refiere a la zona más larga de ambas cromátidas, suele estar en la parte inferior después
del centrómero y es nombrado como brazo “p”.
Constricción secundaria
Aunque no se encuentran en todos los cromosomas, la constricción secundaria permite reorganizar
la información y transmitirla al ARN
Satélite
Los satélites forman parte de la constricción secundaria, y se encuentran separados del
cromosoma.
10. ¿Qué es una célula diploide?
Rta: También son conocidas como 2n son las células tienen el número y la composición de
cromosomas normal, ósea:
2n = 46 cromosomas (1 célula n = 23 cromosomas).
46
12. ¿Qué es la metafase?
Rta: en esta fase los cromosomas se mueven hasta que se alinean (placa metafásica) en la
mitad del hueso.
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Anafase I: en esta fase los cromosomas homólogos se separan, desplazándose a los polos.
Telofase I: en esta fase el núcleo aún no se vuelve a formar todavía, pero hay citocinesis
(división de la célula).
MEIOSIS II:
Profase II: en esta ya no hay núcleo ni membrana nuclear, se rompe la envoltura nuclear y se
forma el huso mitótico.
Metafase II Los n cromosomas se alinean en la placa metafásica.
Anafase II: se separan las cromátidas hermanas de cada cromosoma (mitosis normal).
Telofase II: se forman las envolturas en los cuatro núcleos haploides y se produce citocinesis.
16. ¿En cuál fase de la meiosis ocurre la reducción del número de cromosomas en
la célula (pasa de condición diploide a haploide)?
Rta: En la fase de la meiosis II, es donde ocurre la reducción de cromosomas, principalmente en
la última fase (telofase II), ya que se forma el núcleo con contenido genético y se produce la
separación de las dos células.
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 6
“Extracción de ADN”
Procedimiento.
Obtención de ADN a partir de células vegetales
El primer paso fue tomar un par de hojas de espinacas y partirlas en varios pedazos pequeños que
cupieran en el mortero luego se fue moliendo dentro del mismo de tal modo que queden bien
espichadas
Luego se le agrego agua para que se mezclara con lo que se estaba moliendo.
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50
Pasar la mezcla a un vaso de precipitado para agregar jabón líquido, después dejar reposar por 10
minutos.
51
Agregar jugo de piña revolver a 180ª 5 veces. y dejar reposar por 5 minutos.
Agregar la mezcla de alcohol isopropilico con colorantes y dejar reposar por 5 minutos.
52
Observar la obtención del ADN
53
54
Después de realizar buches por 5 minutos con la mezcla depositar en vaso de
precipitado para agregar jabón liquido.
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56
Agregar Jugo de piña y revolver a 180ª 5 veces y dejar reposar por 5 minutos.
57
58
Observar la obtención del ADN
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Presentación de resultados
https://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_desoxirribonucleico
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1. Una molécula de azúcar llamada desoxirribosa.
2. Un grupo Fosfato.
3. Y uno de los cuatro posibles compuestos nitrogenados llamados: Adeina (A), Guanina (G),
Timina (T) y Citosina(C)
Cuestionario
R/pta. La extracción del ADN se realiza con fines de investigación en los diferentes campos como lo
son, La Biotecnología, La Ingeniería Genética, etc.
R/pta. La cadena de ADN es la que contiene el código genético, en él están escritas las
instrucciones que deben seguir las células para construir un organismo y mantenerlo vivo.
R/pta. Para romper la membrana plasmática e incluso la pared celular y el jabón elimina las
proteínas que degradan el ADN.
R/pta.
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5. ¿Por qué se utiliza el alcohol?
6. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas formando la cromatina ¿En qué etapa
del experimento se separa el ADN de las proteínas?
R/pta. Al momento de añadir el jabón este empieza a separar las proteínas del ADN, luego cuando
le agregamos la enzima del jugo de piña este también contribuye a la separación de las proteínas y
finalmente Al agregar el Alcohol, se precipita fuera de la solución dejando el resto de células en la
solución acuosa.
7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN? ¿qué se deduce sobre la
solubilidad de ADN en el agua salada y el etanol?
8. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que requieren la extracción de ADN?
(Explique al menos 3 técnicas e incluya imágenes).
R/pta. Reacción en cadena de Polimerasa (PCR): Es la amplificación del ADN in vitro por medio de
la polimeraciòn de cadena de ADN utilizando un termociclador.
Microrray:
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 7
“Genética humana”
INTRODUCCIÓN
Procedimiento
1. Enrollamiento de lengua
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2. Separación de los lóbulos de las orejas
Un alelo dominante L determina que los lóbulos de las orejas estén separados, es decir que no
estén adheridas completamente a la cabeza. En algunas personas los lóbulos, están adheridos
totalmente a la cabeza. El que estén los lóbulos de las orejas adheridas, es una condición
homocigótica determinada por un gen recesivo.
Alelo dominante L (Mayúscula)
Alelo recesivo l (Minúscula)
Paso 2 - Observe los rasgos de los lóbulos de sus orejas y los de sus compañeros y escriba sus
resultados.
65
3. Pulgar en escuadra
Algunas personas pueden separar el dedo pulgar hasta formar un ángulo de 90°. Esto se llama
“pulgar en escuadra”. Un alelo recesivo p determina esta cualidad. Un alelo dominante P, que se
encuentra en la mayoría de las personas, evita que esta separación sea mayor de 45°
Alelo dominante P (Mayúscula)
Alelo recesivo p (Minúscula)
Paso 3 - Determine si tiene esta cualidad y anote estas observaciones.
66
4. Pico de viuda
Algunas personas muestran la característica de que su línea del pelo baja hasta un punto definido
en la mitad de la frente. Esta se conoce como “pico de viuda”. Este rasgo resulta de la acción de un
alelo dominante V. El alelo recesivo v determina la característica de una línea continua en el pelo.
Alelo dominante V (Mayúscula)
Alelo recesivo v (Minúscula)
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Paso 4 - Con un espejo determine su fenotipo y anote sus observaciones
Note la presencia o ausencia de vello sobre las falanges de los dedos. La presencia de vello se debe
a un gen dominante D. La ausencia se debe a un gen recesivo d. Otros alelos determinan se
crecerá vello sobre las falanges de los dedos, así como la cantidad del mismo.
Alelo dominante D (Mayúscula)
Alelo recesivo d (Minúscula)
Pasó 5 - Para observar el vello, utilice una lupa y examine sus dedos con mucho cuidado. Algunos
individuos tienen muy fino sobre los dedos. Anote sus observaciones para este alelo
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6. Dedo anular más corto que el dedo índice
Algunos genetistas creen que, si el dedo anular es más corto, se debe a un gen influido por el sexo
del individuo. De acuerdo con esta teoría, los varones poseen un gen dominante A y las mujeres
uno recesivo a.
Alelo dominante A (Mayúscula)
Alelo recesivo a (Minúscula)
Paso 6 - Extienda su mano hacia delante, con los dedos juntos. Su dedo anular ¿es más largo o
más corto que el índice? En caso de duda coloque su mano sobre un pedazo de papel blanco al tope
69
del papel. Asegúrese de que es la punta del dedo y no la uña la que se encuentra en el tope del
papel. Compare el tamaño del dedo anular con el tamaño del dedo índice y anote sus
observaciones.
70
B. ¿Cómo influye el ambiente en la expresión de los genes?
Rta el genotipo junto a factores ambientales que actúan sobre el ADN, determina las
características del organismo, es decir, su fenotipo. De otro modo, el genotipo puede definirse
como el conjunto de genes de un organismo y el fenotipo como el conjunto de rasgos de un
organismo.
71
Lizeth Gómez Marcela Castro Christian Onofre
Característica
Fenotipo Genotipo(s) posible(s) Fenotipo Genotipo(s) posible(s) Fenotipo Genotipo(s) posible(s)
RECESIV DOMINANT
Enrollamiento de lengua NO SI DOMINANTE SI
O E
Separación de los lóbulos de las orejas SI DOMINANTE DOMINANTE RECESIVO
RECESIV RECESIV
Pulgar en escuadra SI SI SI RECESIVO
O O
RECESIV DOMINANT
Pico de viuda SI DOMINANTE NO SI
O E
Vello en las falanges de los dedos de la DOMINANT
SI DOMINANTE SI DOMINANTE SI
mano E
RECESIV DOMINANT
Dedo anular más corto que el dedo índice NO SI DOMINANTE SI
O E
Hombre
Sexo Hombre____ Mujer X Hombre___ Mujer X Mujer___
_X_
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Referencias.
73
Curtis, H. (2007). Biología. Bogotá: Ed. Panamericana.
Recuperado
de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2055/VisorEbookV2/Ebook/9789
500605502
Karp, G. (2009). Biología Celular y Molecular. Conceptos y
Experimentos Quinta Edición. México: Ed. McGraw-Hill. Recuperado
de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2053/book.aspx?i=419&pg=
74