INFORME DE

LABORATORIO N° 4 DE
QUÍMICA ANALÍTICA
INSTRUMENTAL
“ANÁLISIS DE FOSFATOS EN UNA MUESTRA DE GASEOSA: MÉTODO DEL ÁCIDO
ASCÓRBICO”

INTEGRANTES:
 Javier Cabezas, Joan Paolo
 León Luis, Denilson
 Mamani Parillo, Flor de María

SECCIÓN: C1 - 5 - A

Fecha de realización: 22/03/2019

Fecha de entrega: 29/03/2019

2019-1
1. Objetivos
1.1. Objetivo general
● Realizar prueba espectrofotométrica a una determinada muestra, en este
caso a una muestra de gaseosa, que contiene el cromóforo de fosfatos y
determinar el P total que se encuentra dentro de ella.

1.2. Objetivos específicos

 Preparar las soluciones patrón con concentraciones de 0.4 ppm, 0.8ppm;
1.2ppm; 1.6ppm y 2ppm

 Realizar la curva de calibración con las absorbancias de los respectivos

patrones preparados
 Preparar la solución con el analito de interés
 Preparar todos los reactivos que son parte de la mezcla de la solución
reductora
 2. Procedimiento
 Preparación de solución estándar desde una concentración de 1000
ppm hasta una concentración de 4ppm

Pesar 0.38824g de KH2PO4

Disolver el sólido en un vaso

precipitado.

Luego colocar la solución en

una fiola de 200mL y enrasarlo
Se preparó solución de con agua U.P
1000 ppm

Luego, a partir de la solución de

1000 ppm, se preparó la solución
de 100 ppm

Se tomó 10 ml de la solución de
1000 ppm y se colocó en una fiola
de 100ml para luego enrasarlo con
Se preparó solución de agua U.P
100 ppm

Se toma 4ml de la solución de

100ppm y se coloca en una fiola de
100ml y se enrasa con agua U.P

Se preparó solución de
4 ppm
 Procedimiento para a preparación de la solución reductora

Preparación de solución de
molibdato de amonio

Se pesa 1g de (NH4)6Mo7O24.4H2O y se
disuelve en un vaso precipitado con agua ultra
pura.

Se coloca la disolución en una fiola de 50ml y se

enrasa con agua ultra pura.
Solución A

Preparación de solución de
ácido ascórbico

Se pesa 1.76g de ácido ascórbico y se disuelve

en un vaso precipitado con agua ultra pura.

Se coloca la disolución en una fiola de 100ml y se

enrasa con agua ultra pura.

Solución B

Preparación de la solución
de ácido sulfúrico

Se diluye 17 ml de ácido sulfúrico

concentrado en 200 mL de agua ultra pura Solución C

Para la preparación final de la solución reductora, en una fiola de 250mL, se coloca

39mL de solución de molibdato de amonio, 60ml de solución de ácido ascórbico y
125mL de solución de ácido sulfúrico. Luego de ello, finalmente se enrasa.
  Cuadro de la preparación de muestras patrón de 0.4 ppm; 0.8
ppm; 1.2 ppm; 1.6 ppm y 2ppm; además de la muestra en blanco
y de la muestra problema de gaseosa.

Todas las muestras a continuación, se prepararon en tubos de

ensayos.
La concentración final de cada patrón está expresado en ppm como
P2O5.
Blanco Patrón Patrón Patrón Patrón Patrón Muestra
de 0.4 de 0.8 de 1.2 de de 2 problema
ppm ppm ppm 1.6ppm ppm
Volumen de 0 0.5 1 1.5 2 2.5
solución
estándar (mL)
Volumen de - - - - - - 0.25
muestra de
gaseosa(mL)
Volumen de 2 2 2 2 2 2 2
solución
reductora(mL)
Volumen de 3 2.5 2 1.5 1 0.5 2.75
agua
desionizada
(mL)
Volumen 5 5 5 5 5 5 5
final(mL)

Tubos de ensayos con las muestras patrón

y con la muestra que contiene la gaseosa.

Se los procede a calentar por baño María a una

temperatura de 50°C por 45 minutos.

Proceder a realizar la lectura espectrofotométrica

3. Cálculos y Resultados
En la primera parte se realiza el barrido espectral de la muestra patrón de mayor
concentración.
Primero se realiza la medida de la línea base con el solvente que se está usando;
en este caso con el agua ultra pura.
Luego se realiza el análisis de la muestra; que da los siguientes resultados:
Longitud Longitud Longitud
de onda Absorbancia de onda Absorbancia de onda Absorbancia
680 0.446 750 0.758 820 1.211
682 0.451 752 0.768 822 1.221
684 0.456 754 0.778 824 1.222
686 0.461 756 0.788 826 1.224
688 0.466 758 0.803 828 1.226
690 0.471 760 0.818 830 1.226
692 0.476 762 0.833 832 1.225
694 0.481 764 0.848 834 1.221
696 0.486 766 0.863 836 1.212
698 0.491 768 0.878 838 1.211
700 0.496 770 0.893 840 1.208
702 0.501 772 0.908 842 1.196
704 0.506 774 0.923 844 1.195
706 0.516 776 0.938 846 1.183
708 0.531 778 0.953 848 1.172
710 0.546 780 0.968 850 1.153
712 0.561 782 0.974 852 1.133
714 0.576 784 1.001 854 1.118
716 0.591 786 1.012 856 1.089
718 0.601 788 1.037 858 1.071
720 0.611 790 1.053 860 1.046
722 0.621 792 1.072 862 1.032
724 0.631 794 1.087 864 1.012
726 0.641 796 1.098 866 0.996
728 0.651 798 1.11 868 0.98
730 0.661 800 1.121 870 0.952
732 0.671 802 1.127 872 0.93
734 0.681 804 1.14 874 0.902
736 0.688 806 1.152 876 0.86
738 0.698 808 1.16 878 0.828
740 0.708 810 1.172 880 0.798
742 0.718 812 1.192
744 0.728 814 1.2
746 0.738 816 1.209
 Longitud de onda vs Absorbancia (Patrón
1.4
2ppm)
1.2
1
Absorbancia

0.8
0.6
0.4
0.2
0
680 730 780 830 880 930
Longitud de onda (nm)

Absorbancia

Como se vio en la gráfica, la longitud de onda de máxima absorbancia se

encuentra en el pico de la gráfica formada , en este caso la longitud de onda es de:
830 nm con una absorbancia de 1.226. Entonces este resultado muestra que se
cumple con la lectura teórica que se le debe hacer a todas las muestras patrón para
relizar la curva de calibrado.
Por lo tanto se prosiguió a realizar la lectura de las muestras patrón a 830nm; y se
mostró estos resultados:

ppm P2O5 (mg/L) Absorbancia

0 0
0.4 0.304
0.8 0.598
1.2 0.863
1.6 1.102
2 1.478
Tabla 1. Datos experimentales Fuente: creación propia
 Curva de calibración
1.6
1.4 y = 0.7178x + 0.0064
R² = 0.9968
1.2
Absorbancia

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Concentración (ppm)

Fuente: creación propia

A la curva de calibración se la va tomar en cuenta como si fuera de una función lineal:

𝒚 = 𝒂 + 𝒃𝒙
Determinación de correlación significativa:
Como se ve la función lineal de la gráfica, tiene un coeficiente de correlación lineal de
0.996, lo cual es aceptable para el posterior análisis de concentración de la muestra
problema. Mientras el coeficiente de correlación este más cercano a 1, se
obtendrá valores de correlación significativa entre x y y. (Miller.j, pág.118); pero
antes de ello se calculará los límites de detección y de cuantificación.

Para ello primero se realizó el siguiente cuadro:

y x 𝑥 − 𝑥̅ (𝑥1 − 𝑥̅ )2 𝑦̂ 𝑦1 − 𝑦̂ (𝑦1 − 𝑦̂)2 𝑥1 2

0 0 -1 1 0.0064 -0.0064 0.00004096 0
0.304 0.4 -0.6 0.36 0.29352 0.0148 0.00021904 0.16
0.598 0.8 -0.2 0.04 0.58064 0.01736 0.00030137 0.64
0.863 1.2 0.2 0.04 0.86776 0.00476 2.2658E-05 1.44
1.102 1.6 0.6 0.36 1.15488 -0.05288 0.00279629 2.56
1.478 2 1 1 1.442 0.036 0.001296 4
Ῡ 0.724166 SUMA TOTAL
Promedio
1 0 2.8 4.3452 0.01364 0.00467632 8.8
de x
Errores aleatorios en dirección de y:

∑𝑖(𝑦1 − 𝑦̂ )2
𝑆𝑦⁄ = √
𝑥 𝑛−2

0.00467632
𝑆𝑦⁄ = √
𝑥 4

𝑆𝑦⁄ = 0.03419
𝑥

Desviación estándar de la pendiente:

0.03419
𝑆𝑏 =
√∑𝑖(𝑥1 − 𝑥̅ )2

0.03419
𝑆𝑏 =
√2.8
𝑆𝑏 = 0.02043
Hallando:
 Límites de detección:

𝐿𝑂𝐷 = 𝑦𝐵 + 3𝑆𝐵

𝐿𝑂𝐷 = 0 + 3 ∗ 0.02043

𝐿𝑂𝐷 = 0.06129

 Límite de cuantificación:

𝐿𝑂𝑄 = 𝑦𝐵 + 10𝑆𝐵

𝐿𝑂𝑄 = 0 + 10 ∗ 0.02043

𝐿𝑂𝑄 = 0.2043
Absorbancia de la muestra obtenida mediante el equipo:

Absorbancia de la muestra a 830nm

Muestra Absorbancia
Gaseosa Sprite 0.006

Calculo concentración de la muestra:

La pendiente y la ordenada están sujetos a errores aleatorios, por eso es mejor
usar esta fórmula:

𝑦0 = 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 − (absorbancia obtenida de la muestra de gaseosa)

𝑆𝑥0 = 𝑑𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛

𝑆𝑦⁄ 1 (𝑦0 − 𝑦̅)2

𝑥
𝑆𝑥0 = ∗ √1 + + 2
𝑏 𝑛 𝑏 ∑𝑖(𝑥1 − 𝑥̅)2

0.03419 1 (𝑦0 − 0.724166)2

𝑆𝑥0 = ∗ √1 + +
0.7178 6 0.71782 ∗ 2.8

(𝑦0 − 0.724166)2
𝑆𝑥0 = 0.04763 ∗ √1.166 +
1.44267

 Reemplazando para la muestra de gaseosa donde 𝑦0 es 0.006

(0.006 − 0.724166)2
𝑆𝑥02 = 0.04763 ∗ √1.166 +
1.44267

𝑆𝑥02 = 0.04763 ∗ √1.524

𝑆𝑥02 = 0.058799

 Concentración de P2O5 en la muestra de gaseosa:

𝑦 = 𝑎 + 𝑏𝑥
 0.006 = 0.006 + 0.7178𝑥2

𝑥2 = 0

Entonces:
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑃2𝑂5 = 0 ± 0.058799
 Concentración obtenida:

La muestra de gaseosa que se tomó fue de 0.25 ml; por tanto ésta contiene
0.058799 ppm de P2O5.

 Contenido de P en la muestra de gaseosa:

62𝑚𝑔𝑃
20*20*0.058799 ppm de P2O5 *142𝑚𝑔𝑃 =10.269 ppm de P.
2 𝑂5

Discusión de resultados:
La determinación del límite de cuantificación es mayor que el valor de
absorbancia de las muestra, por lo cual no se debe de cuantificar. Además,
comparando con el valor de límite de detección es menor a este, por lo que
no se puede afirmar al presencia exacta sin errores,de P en estas muestra
de gaseosa;

4. Conclusiones.

 La curva de calibración se realizó en base al protocolo de: Journal of

Chemical Education (Determination of Phosphorus in Cola Drinks); y se usó
como muestra 0.25 ml de gaseosa Sprite sin contenido de gas.
La concentración del P en la gaseosa Sprite es 10,269 ppm
 Par esta prueba se usó el pentamolibdato de amonio. El complejo formado
con molibdeno hexavalente se reduce a una forma pentavalente azul por
medio de ácido ascórbico en medio ácido y en ese estado se realizó la
lectura el espectro.
 Se prepararon muestras patrón a diferentes concentraciones para pruebas de
absorciones moleculares y con ello se hizo la curva de calibrado con un
r=0.9984.
 Una parte importante del procedimiento experimental es el calentamiento a
50°C por 45 minutos, que se le hace a las soluciones patrón y muestra; esto
se hace para aumentar la rapidez del cambio de color de las soluciones.

Recomendaciones.
  Si la absorbancia de la muestra problema sale negativo tomando en
cuenta la longitud de onda de máxima absorbancia del patrón de mayor
concentración; entonces se trabaja con la longitud de onda teórica que
en este caso fue de 830 nm.
 Se recomienda que las soluciones que están en tubos de ensayo al ser
de muy poca cantidad; llevarlos a un previo calentamiento tal como dice
el protocolo y antes de llevarlo al espectrofotómetro.
 Usar celdas de vidrio porque la lectura se hará en 830nm.

Referencia bibliográfica
 [1] Miller J. (2002). Estadística y Quimiometría para Química Analítica. Cuarta
edición. Madrid: Pearson education. (pág. 113 -118), (pág. 125-128)
 Journal of Chemical Education. (Determination of Phosphorus in Cola Drinks):
Recuperado de: file:///C:/Users/Usuario/Downloads/lozano-calero1996%20(3).pdf.