Protocolo sobre eutanasia para animales utilizados

en experimentación y otros fines científicos

Dra. Teresa Rodrigo
Presidenta de SECAL
 MARCO LEGISLATIVO DE LA EXPERIMENTACIÓN ANIMAL
EUROPEO
• Directiva 86/609/CEE relativa a la aproximación de las
disposiciones legales, reglamentarias y administrativas de
los Estados Miembros respecto a la protección de los
animales utilizados para experimentación y otros fines
científicos.
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• Directiva 2010/63/UE relativa a la protección de los
animales utilizados para fines científicos.
ESPAÑOL AUTONÓMICO
• Real Decreto 223/1988 sobre la protección de los animales de experimentación
utilizados para experimentación y otros fines científicos.
• Real Decreto 1201/2005 de 10 de octubre sobre la protección de los animales
utilizados para la investigación y otros fines científicos.
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• Real Decreto 53/2013, de 1 de febrero, por el que se establecen las normes
básicas aplicables para la protección de los animales utilizados en
experimentación y otros fines científicos, incluyendo la docencia.
• Orden ECC/566/2015, de 20 de marzo, por la que se establecen los requisitos
de capacitación que debe cumplir el personal que maneje animales utilizados,
criados o suministrados con fines de experimentación y otros fines científicos,
incluyendo la docencia.
ÁMBITO DE APLICACIÓN INSTALACIONES

MARCO LEGISLATIVO

PERSONAL PROCEDIMIENT0S
3 Rs de Russell y Burch (1959): The Principles of Humane Experimental Technique
 REEMPLAZAR
Los procedimientos in vivo deben ser reemplazados siempre que sea posible por
métodos alternativos que no utilicen animales vivos, como modelos matemáticos,
simulaciones por ordenador o cultivos celulares. Siempre que sea posible, se deben
utilizar los animales con el sistema nervioso menos desarrollado.

Centro Europeo para la validación de métodos alternativos (ECVAM, 1991, Italia). http://ecvam.jrc.ec.europa.eu/

Grupo de trabajo especializado en métodos alternativos de la Asociación Española de Toxicología (GTEMA, España)
http://www.uv.es/aetoxweb/grupos/gtema/gtema.html

Plataforma europea para los métodos alternativos. http://www.ecopa.eu/

Red Española de Métodos Alternativos (REMA) http://www.remanet.net/

REDUCIR
Los proyectos de investigación que requieren el uso de animales de
laboratorio deben ser realizados con el número mínimo necesario de
animales que permitan obtener resultados científicamente válidos.

• Diseño experimental y análisis de datos.

• Disminuir la variabilidad de los resultados.
1. Condiciones ambientales
2. Condiciones de los animales
3. Control de calidad de alimento y nido
• Armonización y estandarización de los procedimientos
experimentales (BPL's; ISO)
REFINAR
Hace referencia a todo lo que permite disminuir la severidad de los procedimientos:

• Condiciones y calidad del ambiente en el que son criados y mantenidos los animales
antes y durante la experimentación.
• Procedimientos para minimizar y eliminar el dolor y asegurar al máximo el bienestar
animal :
 Reconocimiento de signos de dolor, estrés y malestar.
 Utilización de anestésicos y analgésicos.
• Refinamiento en las técnicas experimentales (administraciones y extracciones de
muestras, métodos de asepsia en procedimientos quirúrgicos, etc.)

Métodos de eutanasia

RD 53/2013 Eutanasia: La interrupción de la vida de un animal con el menor

sufrimiento posible, de acuerdo con su especie y estado.
Los principales motivos por los que se sacrifican animales en los laboratorios o establecimientos de cría son:

 Al final de un experimento o cuando pudieran proseguir con

efectos adversos.
 Para obtener sangre y otros tejidos con un fin científico.
 Cuando los niveles de dolor, angustia y sufrimiento es
probable que sobrepasen el nivel previsto.
 Cuando el campo de estudio sea la salud o el bienestar de
los animales.
 Cuando ya no sean aptos para la cría.
 Animales no utilizados.
Artículo 7 del RD 53/2013. Métodos de eutanasia

1. La eutanasia de los animales se realizará:

a) Con el menor dolor, sufrimiento y angustia posibles.

b) Por una persona capacitada.
c) En un establecimiento de un criador, suministrador o usuario, salvo que se trate de un estudio de campo o que sea
aplicable lo previsto en el apartado 1.b) del anexo III.

4. Los letras b) y c) del apartado 1 y el apartado 2 no se aplicarán cuando sea necesario dar muerte a un animal en situaciones de
emergencia por motivos de bienestar animal, sanidad animal, salud pública, orden público, o medioambientales.
Obligatoriedad de confirmación de la muerte del animal:

ANEXO III del RD53/2013

La eutanasia de los animales debe completarse por uno de los siguientes métodos:

a) Confirmación del cese permanente de la circulación.

b) Destrucción del cerebro.
c) Luxación cervical.
d) Desangramiento.
e) Confirmación del comienzo de rigor mortis.
Artículo 7 del RD 53/2013

2. En relación con los animales a que se refiere el anexo III se utilizará el método de eutanasia adecuado tal como figura en
dicho anexo.

Perros,gatos,
Grandes
Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos hurones y Primates
mamíferos
zorros

Sobredosis de anestésico (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1)

Pistola de clavija perforada (2)

Dióxido de carbono (3)

(1) Debe utilizarse, en su caso, previa sedación del animal.

(2) Únicamente en reptiles grandes.

(3) Únicamente con liberación paulatina del gas. No utilizar en fetos de roedores y en roedores
neonatos.
 ANEXO III del RD53/2013- Métodos de eutanasia de los animales

Perros,gatos,
Grandes
Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos hurones y Primates
mamíferos
zorros

Dislocación cervical (4) (5) (6)

Conmoción cerebral/Golpe contundente

(7) (8) (9) (10)
en la cabeza

Decapitación (11) (12)

(4) Únicamente para aves de menos de 1 Kg. Las aves de más de 250 g deben sedarse.
(5) Únicamente para roedores de menos de 1 Kg. Los roedores de más de 150 g deben sedarse.
(6) Únicamente para conejos de menos de 1 Kg. Los conejos de más de 150 g deben sedarse.
(7) Únicamente para aves de menos de 5 Kg.
(8) Únicamente roedores de menos de 1 Kg.
(9) Únicamente para conejos de menos de 5 Kg.
(10) Únicamente en neonatos.
(11) Únicamente para aves de menos de 250 g.
(12) Únicamente si no se pueden utilizar otros métodos.
 ANEXO III del RD53/2013- Métodos de eutanasia de los animales

Perros,gatos,
Grandes
Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos hurones y Primates
mamíferos
zorros

Aturdimiento eléctrico (13) (13) (13) (13) (13) (13)

Gases inertes (Ar,N2) (14)

Disparo con rifles, pistolas y municiones

(15) (16) (15)
adecuados

(13) Requiere material especial.

(14) Únicamente en cerdos.

(15) Únicamente en condiciones de campo por tiradores expertos.

(16) Únicamente en condiciones de campo por tiradores expertos, si no se pueden utilizar otros métodos.
 ¿Se pueden utilizar otros métodos diferentes a los enumerados anteriormente?

Artículo 7 del RD 53/2013

3. El órgano competente podrá conceder excepciones al requisito establecido en el apartado 2:

a) Para permitir el uso de otro método siempre que a partir de pruebas científicas se considere que el método posee al menos, la
misma ausencia de crueldad; o bien
b) Si se justifica científicamente que la finalidad del procedimiento no puede conseguirse utilizando ninguno de los métodos de
eutanasia contemplados en el anexo III.

ANEXO III del RD53/2013

a) Si los animales están inconscientes, a condición de que no recobren el conocimiento antes de morir.

b) Si los animales se utilizan en el marco de una investigación de índole agropecuaria, cuando el objetivo del proyecto disponga que
los animales se mantengan en condiciones similares a las de los animales de las explotaciones comerciales, en cuyo caso, podrán
ser sacrificados de conformidad con los requisitos establecidos en el anexo I del Reglamento (CE) n.º 1099/2009, del Consejo, de
24 de septiembre de 2009, relativo a la protección de los animales en el momento de la matanza.
 ¿Cómo elegir el método de eutanasia?

Criterios de bienestar animal + Requerimientos experimentales

CEEA (OEBA) + Órgano evaluador de proyectos

 ¿Cómo elegir el método de eutanasia?

Criterios de bienestar animal

 Que el método sea indoloro, consiga una rápida inconsciencia y muerte.

 Que sea apropiado para la edad, especie y salud del animal.

 Que requiera una mínima movilización y evite la excitación.

 Que minimice el miedo y el estrés en el animal.

 Que sea fiable, reproducible, irreversible, sencillo de administrar (en dosis pequeñas si es posible) y seguro para
el operador.

 Y que en la medida de lo posible, sea estéticamente aceptable para el operador.

Métodos de eutanasia recomendados en función de la especie

Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 1. Close B.(Chair), Banister K., Baumans V., et al. , 1996. Laboratory
Animals, 30, 193-316; http://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.1258/002367796780739871
Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. Close B.(Chair), Banister K., Baumans V., et al. , 1997. Laboratory
Animals, 31, 1-32; http://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.1258/002367797780600297
AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2013 Edition; https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf

CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; https://www.ccac.ca/Documents/Standards/Guidelines/Euthanasia.pdf

 Influencia potencial sobre los datos científicos

Barbitúricos y Anestésicos MS222, Dislocación

Métodos/ Sistemas afectados Ar/N2 CO2 Concusión Decapitación
derivados inhalatorios Tricaína cervical

Sistema Circulatorio

Sistema Digestivo

Sistema Excretor

Sistema Muscular

Sistema Nervioso

Sistema Respiratorio

Sistema Metabólico

 En ratas, el llenado rápido incrementa los leucocitos, linfocitos y la glucosa, y disminuye elaspartato aminotransferasa
(AST), la creatina quinasa (CK) y el calcio.
 En ratones y ratas, reduce el PH sanguíneo.
 En ratones da lugar a niveles de potasio inexactos en suero.
 De manera general, la hemorragia pulmonar puede afectar los estudios histológicos.
 En ratones y ratas (en comparación con el isoflurano y la dislocación cervical), incrementa las concentraciones de
fármaco en plasma durante las pruebas farmacocinéticas.
CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; Addendum
 Influencia potencial sobre los datos científicos

Barbitúricos y Anestésicos MS222, Dislocación

Métodos/ Sistemas afectados Ar/N2 CO2 Concusión Decapitación
derivados inhalatorios Tricaína cervical

Sistema Circulatorio

Sistema Digestivo

Sistema Excretor

Sistema Muscular

Sistema Nervioso

Sistema Respiratorio

Sistema Metabólico

 De manera general, los niveles de neuropéptidos y la histología cerebral pueden verse afectados debido al daño tisular
en el sistema nervioso central o la descarga neuronal inducida.
 De manera general, produce una disminución del flujo coronario; disminución de la función contráctil en preparaciones
aisladas de corazón perfundido.
 En ratones, da lugar a altos niveles de serotonina en el pulmón.
 En ratones, da lugar a un incremento en los recuentos de células formadoras de colonias de granulocitos y macrófagos
en cultivos de médula ósea.
CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; Addendum
Consideración de la Directiva 2010/63/UE

“La utilización de métodos inadecuados para matar a un animal puede provocarle dolor, angustia y sufrimiento
considerables. También es importante el grado de competencia de la persona que realiza esa operación. Por
consiguiente, los animales deben ser sacrificados solo por una persona competente y utilizando un método adecuado
para la especie”.

Capacitación del personal

Artículo 7 del RD 53/2013. Métodos de eutanasia

1. La eutanasia de los animales se realizará:

a) Con el menor dolor, sufrimiento y angustia posibles.

b) Por una persona capacitada.

c) En un establecimiento de un criador, suministrador o usuario, salvo que se trate de un estudio de

campo o que sea aplicable lo previsto en el apartado 1.b) del anexo III.

La formación para la capacitación de la eutanasia debe incluir:

• el reconocimiento del dolor y la angustia de los animales,

• los métodos apropiados de manejo y restricción del animal,
• la aplicación correcta del método de eutanasia y la utilización correcta de los equipos,
• el reconocimiento y la valoración de la inconsciencia, y
• el reconocimiento y la confirmación de la muerte.
Funciones del personal:

a) Cuidado de los animales.

b) Eutanasia de los animales.
c) Realización de los procedimientos.
d)Diseño de proyectos y procedimientos.
e) Asunción de la responsabilidad de la supervisión “in situ” del bienestar y cuidado de los animales
f)Asunción de las funciones de veterinario designado.

Capacitación para la función b) Curso de formación + Trabajo bajo supervisión (mín. 15-20 h)

Mantenimiento de la capacitación Función b): 25 horas en 8 años

IMPORTANTE: La capacitación es por especies o grupos de especies

GRACIAS POR VUESTRA ATENCIÓN