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LOS BETA-GLUCANOS DE CEBADA Y SU

DEGRADACIÓN DURANTE EL MALTEADO Y LA


FABRICACIÓN DE LA CERVEZA*

YU-LAI JIN 1, R. ALEX SPEERS 1, ALLAN T. PAULSON 1,


y ROBERT J. STEWART 2
1
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍAS DE LA ALIMENTACIÓN, UNIVERSIDAD DE DAL-
HOUSIE, 1360 BARRINGTON STREET, D401, HALIFAX, NS, CANADÁ B3J 2X4.
2
DEPARTAMENTO AMERICANO DE TECNOLOGÍA LABATT-ITW , 197 RICHMOND STREET, LONDRES,
ON, CANADÁ N6A 4M3.

RESUMEN SUMMARY

Los polímeros de beta-glucanos que se originan en las Beta-glucan polymers originating from barley endosperm
paredes de las células del endospermo de la cebada son cell walls are one of the major concerns in the brewing
causa de gran preocupación en la industria cervecera. La industry. The amount and molecular weight of β-glucans in
cantidad y el peso molecular de los β-glucanos en la malta malt affect brewhouse extract yield and wort and beer vis-
afectan a las viscosidades del mosto y la cerveza, así como cosities, as well as lautering, diatomaceous earth, and mem-
a la filtración en la cuba filtro y a las filtraciones de cerveza brane filtrations. Barley β-glucans are also associated with
con tierra de diatomeas o por membranas. Los β-glucanos beer hazes. Precipitation and gel formation of β-glucan poly-
de la cebada también tienen que ver con la turbidez en cer- mers can be enhanced by factors such as ethanol concen-
veza. La precipitación o formación de geles de los políme- tration, and freezing and thawing, as well as by turbulent
ros de β-glucano puede ser propiciada por la concentración shear. Understanding the properties and degradation of β-
de etanol y la congelación y descongelación repetidas, glucans and the aggregation mechanisms of these poly-
como también por efectos de cizalladura turbulentos. El mers helps brewers adopt preventative and corrective ope-
conocimiento de las propiedades y los mecanismos de la rations to minimize the β-glucan-related processing difficul-
degradación de los β-glucanos y de la agregación de estos ties.
polímeros ayuda al cervecero a adoptar medidas preventi-
vas y correctivas para minimizar las dificultades en el pro- Keywords: β-glucan, β-glucanase, brewing, degradation,
ceso relacionadas con los β-glucanos. shearing, viscosity

Palabras clave: β-glucano, β-glucanasa, cocimiento,


degradación, fuerzas de cizalladura, viscosidad

Los beta-glucanos de cebada [(1,3) (1,4)-β-D-glucanos] la filtración (48, 64, 91, 98, 130, 131, 142, 143). Por último,
constituyen el componente principal (70%) de las paredes los β-glucanos, junto a las proteínas, los polifenoles y los
de las células del endospermo (136). Los beta-glucanos pentosanos participan en la formación de turbidez en el
se encuentran unidos entre sí en las paredes de las célu- mosto y la cerveza (47, 64, 82, 89, 99, 118, 159, 167, 168).
las del endospermo (61,136) a través de enlaces de pro- Por ello, el contenido y el tipo de los β-glucanos de cebada
teínas-polisacáridos o enlaces fenol-éster formados entre han sido mencionados como indicadores de la calidad del
las moléculas de proteína, ácido ferúlico y polisacáridos malteado (3, 36, 73, 113, 125).
(23,34, 63,153). La mayoría de la literatura sobre fabrica-
ción cervecera menciona niveles de beta-glucanos de Cabe mencionar que en muchos de los artículos citados en
cebada del 2–6% (p/p) (91). Los niveles de beta-glucanos este informe, los términos “peso molecular” (sin unidad) y
en los mostos de producción y de laboratorio pueden “masa molecular” (típicamente con unidades de kDa) han
alcanzar cifras de 1.290 mg/L, aunque el rango 100–300 sido utilizados indistintamente para indicar el tamaño de los
mg/ l se considera normal. Los niveles de beta-glucanos polímeros. A menudo, las técnicas de filtración/ permeación
en cerveza recogidos en la literatura varían de 0 a 1.152 de gel se emplearon sin calibración universal y los autores
mg/L (91). indican en realidad pesos moleculares relativos. En todo
este artículo, los autores han optado por expresar todos los
Los beta-glucanos reducen el rendimiento en extracto en la tamaños moleculares como un peso molecular (PM).
sala de cocimiento (21, 53, 60, 73, 74, 121), ya que una
degradación defectuosa de los β-glucanos deja almidón y No obstante, los niveles de β-glucanos por sí solos no siem-
proteínas sin convertir en el bagazo (21, 30–32, 132). Estos pre pueden predecir dificultades en los procesos (124,157).
residuos forman una capa de partículas finas que retrasa la Su distribución de PM también es importante. Se ha infor-
filtración (31), lo que lleva a una pérdida aún mayor de mado que los PM de los beta-glucanos en cebada, malta y
extracto. Los beta-glucanos también poseen una influencia cerveza varían de 150.000 a 1.937.000, de 800.000 a
principal sobre las viscosidades aparentes del mosto y de 1.220.000 y de 1.000 a 10.000.000, respectivamente (4, 35,
la cerveza (44,91) lo que, a su vez, afecta al rendimiento en 63, 83, 173). Se cree que la agregación de cadenas mole-
culares es la responsable de algunos de los valores de PM
más elevados registrados en la cerveza. Los beta-glucanos
* Este artículo fue publicado originalmente en Master Brewers Association of de peso molecular elevado (PME) pueden precipitar con
the Americas (MBAA) Technical Quarterly y se republica con el permiso del facilidad tras un tratamiento de congelación-descongela-
MBAA Editorial Commitee. ción, mientras que las fracciones con PM inferiores a

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200.000 no precipitan incluso después de procesos de con- en el cual η es la viscosidad
.
aparente (Pa.s), σ es el esfuer-
gelación y descongelación repetidos (83). Recientemente, zo de corte (Pa) y γ es la velocidad de corte (s-1). Para flui-
se ha informado de la existencia de una correlación entre la dos con fluidificación o dilatación por cizalladura, una rela-
concentración de beta-glucanos en cerveza y la filtrabilidad ción potencial rige el comportamiento del flujo,
Vmax, (volumen máximo de cerveza que se puede filtrar a
.
través de un filtro de membrana) (91, 128, 130). Cuando se σ = mγn (2)
examinaron tanto la concentración como el PM medio de los
beta-glucanos para ver sus efectos sobre el valor Vmax, un en la cual m es el coeficiente de consistencia, numérica-
análisis de regresión múltiple reveló que ambos factores son mente idéntico a la viscosidad aparente a 1 s-1 y n es el índi-
importantes a la hora de determinar la filtrabilidad de la cer- ce de comportamiento del flujo. Cuando n < 1, el fluido se
veza (91, 128). comporta como un líquido con fluidificación por cizalladura;
cuando n > 1, el fluido muestra un comportamiento de dila-
El desarrollo y la aplicación de nuevas tecnologías durante tación por cizalladura; y cuando n = 1, el fluido es newto-
las últimas tres décadas han hecho que la comprensión y la niano. Aparte del efecto de la magnitud de la velocidad de
resolución de los problemas relacionados con los β-gluca- corte sobre las viscosidades de los fluidos, la duración del
nos resulten más acuciantes (122). La fabricación de alta corte o cizalla también puede afectar a la viscosidad del
densidad, la utilización de la centrifugación, la filtración de fluido. Los fluidos que pueden mostrar una reducción en la
flujo tangencial y la producción de cervezas ‘dry’ y ‘ice’ pue- viscosidad aparente con cizallamiento continuado a una
den acelerar la formación de precipitados de β-glucanos y velocidad de corte constante reciben el nombre de “fluidos
la colmatación de los filtros de membrana. Este artículo tixotrópicos”. Los β-glucanos de cebada a 0,5% (p/v) en un
resume los conocimientos actuales sobre las propiedades sistema de mosto modelo ha mostrado propiedades ligera-
fisicoquímicas de los β-glucanos de la cebada y su degra- mente tixotrópicas (142).
dación durante el malteado y la fabricación de la cerveza.
Un parámetro importante en relación con la viscosidad de
un polímetro es su viscosidad intrínseca, definida como el
valor de la viscosidad limite a medida que la concentración
se acerca a cero. De acuerdo con la ley de Mark-Houwink
(130), la viscosidad intrínseca de un polímero depende de
la forma y de la deformabilidad de las moléculas,

[η] = KM α (3)

en la cual [η] es la viscosidad intrínseca (dl/g), M es el peso


molecular y K y α son constantes para un polímero en un
sistema de disolventes dado. El exponente α en la ecuación
Figura 1. Flujo laminar de un fluido viscoso entre planos paralelos. de Mark-Houwink (Ecuación 3) para los β-glucanos se ha
A = superficie, Us = velocidad relativa entre planos, d = distancia
.
fijado en 0,75, lo que sugiere una configuración en espiral
entre dos planos, F = fuerza, γ = velocidad de corte, σ = esfuerzo aleatoria (163). Esto respalda la hipótesis de que las molé-
de corte y η = viscosidad. culas de β-glucanos existen como espirales aleatorias en
soluciones acuosas (41, 99, 101,174). En la literatura exis-
tente, se recogen casos en los que los β-glucanos de ceba-
da de varios PM poseen viscosidades comprendidas entre
Propiedades físicas de los β-Glucanos 0,7 y 31,0 dl/g en diferentes condiciones de disolvente (46,
65, 69, 88, 91, 105, 130, 174, 175). Las concentraciones ele-
Los beta-glucanos son polímeros lineales. En soluciones vadas en β-glucanos resultan en viscosidades de mosto
acuosas, se doblan y giran y recorren un amplio espacio. elevadas (36,67). Puesto que las fracciones de PME pose-
Estas moléculas en un fluido suelen colisionar entre sí y cau- en un efecto mayor sobre la viscosidad aparente, la estima-
sar fricción intramolecular. La viscosidad, la medición de ción de la concentración de β-glucanos totales no nos per-
esta fricción interna en un fluido, se puede comprender mite obtener una información demasiado concluyente. Esto
fácilmente cuando se considera el movimiento entre dos puede explicar en parte por qué los contenidos totales en β-
capas de fluido. Cuanto mayor es la fricción (es decir, cuan- glucanos no siempre muestran una correlación coherente
to más elevada es la viscosidad), mayor será la cantidad de con la viscosidad aparente (150).
fuerza que se precise para causar movimiento entre capas
adyacentes. Esta fuerza por unidad de superficie necesaria Mediante la medición de las viscosidades aparentes de una
para el movimiento recibe el nombre de “esfuerzo de corte solución de β-glucanos de salvado de avena (3,75 mg/g) a
o cizalladura”. El gradiente de velocidad entre las dos 20, 40, 60 y 80°C, se puede calcular una energía de activa-
capas a medida que se mueven una por efecto de la otra ción de 42 y 17 kJ/ moles (cuando se corta a 5,81 y 581 s-1,
recibe el nombre de “velocidad de corte o cizalladura”. La respectivamente) utilizando la relación de Arrhenius (169).
viscosidad del fluido es igual al esfuerzo de corte por velo- El valor del índice de comportamiento de flujos para los β-
cidad de corte (Fig. 1). Según Newton, la viscosidad a una glucanos muestra la dependencia de la cizalla por parte de
temperatura dada es independiente de la velocidad de la viscosidad de los β-glucanos (15, 37, 66, 170). La visco-
corte. Los líquidos como el agua y la cerveza que se com- sidad aparente de un extracto de centeno (presumiblemen-
portan de esta forma reciben el nombre de “fluidos newto- te newtoniano) (72) mostraba una buena correlación con el
nianos”. No obstante, muchos fluidos, incluidas las solucio- contenido en arabinoxylanos (r = 0,98) pero inadecuada
nes de β-glucanos en concentraciones elevadas, no siguen con el contenido en β-glucanos (r = 0,67). Este descubri-
las asunciones de Newton y reciben el nombre de “fluidos miento se explicaba por un comportamiento no newtoniano
no newtonianos”. La viscosidad de un fluido no newtoniano (fluidificación por cizalladura) de los polímeros de β-gluca-
recibe el nombre de “viscosidad aparente” porque depende nos (72). Cuando se estudió la relación entre la concentra-
del efecto de corte (cizalla). Si un fluido muestra una visco- ción en β-glucanos y la viscosidad relativa de su suspen-
sidad aparente menor con una velocidad de corte crecien- sión, la concentración a la cual se superponían las cadenas
te (es decir, fluidificación por cizalladura), recibe el nombre del polímero (concentración crítica, c*) se estimó en 0,42 g/l
de “fluido pseudoplástico”. Para un fluido newtoniano, (104). Recientemente, se ha reportado que el valor c* de un
.
β-glucano de cebada (327.000) es de 2,1–6,5 g/l en dife-
η = σ/γ (1) rentes tampones (130, 131). Esta concentración crítica indi-

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ca la transición de soluciones de β-glucanos entre regiones Los β-glucanos de la cebada se identificaron en primer
diluidas (c < c*) y semidiluídas y marca el inicio de una lugar como cadenas no ramificadas de residuos de β-D-glu-
superposición e interpenetración molecular significativa y copiranosa con un número igual de enlaces β-(1,3)- y β-
un comportamiento no newtoniano (119). (1,4) (13). Trabajos posteriores propusieron relaciones entre
enlaces β-(1,3)- y β-(1,4) dentro del rango de 3.2:1 a 6.6:1
Varios factores pueden alterar el comportamiento del flujo (87,141, 144, 171), que es mayor en la fracción soluble en
de las soluciones de β-glucanos. El acoplamiento de proteí- agua extraída a 65°C que en la extraída a 40°C (86). La
nas a moléculas de β-glucanos causa una fluidificación por solubilidad inferior de los β-glucanos solubles en agua a
cizalla más pronunciada de las soluciones de β-glucanos 65°C se asocia a su PM más elevado y a un mayor conteni-
de la aleurona de avena (15, 162). El tratamiento con prote- do en enlaces β-(1,4) (86). La mayor parte de las cadenas
asa resulta en coeficientes de consistencia más bajos e de β-glucanos de cebada se pueden representar como un
índices de comportamiento de los flujos superiores (15). Los copolímero de unidades de celulotriosil y celulotetraosil
azúcares, como la sacarosa y la maltosa, también incre- conectadas mediante enlaces β-(1,3), mientras que el resto
mentan las viscosidades aparentes de las soluciones de β- consiste en bloques más largos de hasta 20 residuos con-
glucanos (14,143). Entre los factores considerados (es secutivos de β-(1,4)-glucosil (54, 84, 86, 87, 107, 174). Los
decir, etanol, pH, maltosa, extracto de levadura, cerveza lio- bloques adyacentes de enlaces β-(1,4) presentan una ten-
filizada e iones de Ca2+, Mg2+, Na+, Zn2+, SO42– y PO42–), sólo dencia a una agregación entre cadenas, reduciendo su
el etanol, el pH y la maltosa tuvieron efectos significativos (P solubilidad en agua (84, 86, 175). Los enlaces β-(1,3) del
< 0,05) sobre la viscosidad aparente de una suspensión de polímero aportan a las cadenas moleculares mayor flexibili-
β-glucanos al 0,5% (p/p) (142,143). dad en comparación con la de las cadenas de celulosa,
que sólo se componen de enlaces β-(1,4) (41).
El cizallamiento también tiene su impacto sobre el comporta-
miento de los flujos y la agregación de los polímeros de β-glu- En los últimos 40 años, se ha demostrado que los β-gluca-
canos. Durante las operaciones cerveceras, el cizallamiento nos son el componente principal del precipitado formado
generado por el trasiego de mosto y cerveza se ve afectado por los procesos de congelación y descongelación de la
por el diseño de las tuberías (por ejemplo, flujo de entrada, cerveza (71, 83, 99, 159, 160, 177). La fabricación de cer-
giros, colectores y tuberías en T y cuerpos de válvulas), el veza a escala de planta piloto muestra que la formación de
hervido en la caldera de ebullición y el diseño de los whirlpo- partículas de β-glucanos en la cerveza se ve influenciada
ols, bombas centrífugas y otros dispositivos de mezclado por la calidad de la malta, el método de agitación de la
(49). Después de un estudio de las velocidades de corte y maceración y la finura de la molienda (98). Varios factores
del historial de corte durante los procesos cerveceros, se han afectan a la precipitación de los polisacáridos (también lla-
sugerido velocidades de corte de 400 s–1 como velocidad mada “formación de gel” por algunos investigadores) en la
“media” que ocurre durante la fabricación de la cerveza cerveza. El tamaño molecular, las concentraciones de eta-
comercial (130, 142,143). Se han observado velocidades de nol y polisacáridos, la cizalladura y la congelación afectan a
corte superiores a 1.200 s–1 cuando se ha bombeado mosto la precipitación de β-glucanos en la cerveza (100). La can-
de un whirlpool a un enfriador de mosto y desde un enfriador tidad de precipitado de β-glucanos y el nivel de turbidez se
de mosto a las cubas de fermentación (130,142). El bombeo incrementaban con la concentración de β-glucanos, el tiem-
suave del mosto caliente es imprescindible para evitar una po de almacenamiento y la concentración de etanol (64, 68,
reducción en la calidad de la cerveza (49). Para la transfe- 142, 143, 160). El grado de agregación de los polímeros
rencia de la cuba de maceración, el diseño de las tuberías (Mw/Mwo) se puede calcular dividiendo el peso molecular
debería minimizar la longitud, la extensión y el número de medio aparente (Mw) de una micela de polímeros por el
giros con velocidades inferiores a 1,5 m/s (10). Las solucio- peso molecular medio aparente de un polímero único (Mwo)
nes deberían transferirse a velocidades bajas con bombas que forma la micela (69). Este cociente Mw/Mwo varía de 4-
de boca ancha que se operen en la zona óptima de sus cur- 5 para los β-glucanos de avena (164) hasta 17-70 para los
vas de rendimiento a fin de minimizar la cizalla dentro del β-glucanos separados de la cerveza (69), lo que indica que
cuerpo de la bomba (10). Puesto que la cizalladura incre- los polímeros de β-glucanos individuales sufren una agre-
menta la precipitación de los β-glucanos (102, 123, 142, 143), gación. Aunque el contenido en β-glucanos de la cerveza
el bombeo de mosto o cerveza, la centrifugación de cerveza variaba de 560 a 1.152 mg/l (fermentada a partir de mostos
y la filtración a través de membranas de flujo tangencial con de 15°P macerados utilizando diferentes procedimientos
caudal elevado afectan a las velocidades de filtración de la con un porcentaje de cebada del 20%), el contenido en β-
cerveza (en especial durante la filtración por membrana). La glucanos con “formación de gel” (es decir, los β-glucanos
precipitación de β-glucanos en cerveza se acelera mediante precipitados después de la homogeneización) se descubrió
el bombeo centrífugo y la centrifugación por discos (99) debi- era de 560–585 mg/L (102). La diferencia entre el contenido
do a las altas velocidades de corte. de β-glucanos totales y el contenido de β-glucanos precipi-
tados podría deberse al nivel de β-glucanos de peso mole-
Propiedades químicas de los β-Glucanos de la cebada cular bajo (<10,000), que se cree no causan problemas en
los procesos (21); mientras que los β-glucanos de PME pro-
Se han desarrollado varios métodos para establecer el con- vocan precipitados en la cerveza (63, 84, 99). Izawa et al.
tenido en β-glucanos durante el malteado y la fabricación (83) señalaban que los β-glucanos menores de 200.000 no
de la cerveza. Se utilizaba la precipitación con sulfato de precipitaban en la cerveza congelada. No obstante, algu-
amonio de los β-glucanos para establecer el contenido de nos investigadores han establecido que las moléculas
los solubles y los susceptibles de precipitación hasta que pequeñas de β-glucanos (es decir, β-glucanos dializados)
se desarrollaron nuevos procedimientos a principios de los todavía se pueden asociar a través de enlaces de hidróge-
años ‘80. Entre otros procedimientos desarrollados se inclu- no y causar problemas en los procesos (75, 99, 100, 177).
yen: los métodos enzimáticos (9, 114, 115), los fluorimétri-
cos con Calcofluor- (85, 90, 94, 112), los espectroscópicos La cizalla tiene un efecto importante tanto sobre la viscosi-
que utilizan los enlaces mediante rojo Congo (7,103), los dad aparente como sobre la eficacia de filtración de la cer-
viscosimétricos (36, 50, 67) y las técnicas de espectrosco- veza (123, 142, 143). Del mismo modo, el nivel de turbidez
pia por reflactancia en el infrarrojo cercano (158). Los méto- se puede incrementar mediante cizallamiento por turbulen-
dos tanto enzimáticos como fluorimétricos se han incluido cias de soluciones de β-glucanos al 0,5% (p/p), en especial
en la Analytica-EBC (59) y se ha incluido un método fluori- en presencia de etanol al 6% (v/p) (142, 143). La agrega-
métrico como un método de la Sociedad Americana de Quí- ción de los polímeros de β-glucanos en soluciones acuosas
micos Cerveceros (ASBC) (6). La Asociación Internacional depende de la composición y la temperatura del disolvente
de Químicos Analíticos Oficiales (AOAC) (116) ha adoptado (69, 142, 143). La presencia de moléculas hidrofílicas de
un método enzimático. peso molecular bajo (PMB), como la sacarosa o la maltosa,

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en soluciones acuosas de β-glucanos puede reducir el nivel con actividad esterolítica (22, 25, 26, 179). La solubilasa de
de actividad del agua. Yalpani (176) ha propuesto que un beta-glucanos también se ha identificado como una endo-
nivel de actividad del agua reducido (debido a un elevado β-(1,3)-glucanasa, una fosfolipasa o una endo-β-(1,4)-glu-
contenido en azúcar) induce la unión de los enlaces entre canasa (32, 137, 178). La actividad de la solubilasa de beta-
cadenas de los polímeros de β-glucanos. glucanos está presente en la cebada tal cual, se incremen-
ta de 1,5 a 1,7 veces durante la germinación y cierta canti-
El etanol favorece la asociación de moléculas de β-gluca- dad se pierde durante el secado (25, 122). Se dice que la
nos debido a una constante dieléctrica reducida y a una solubilasa (carboxipeptidasa) sobrevive a 62°C durante 30
mayor cantidad de enlaces de hidrógeno (100). El etanol a minutos en solución (20). Un estudio mediante la filtración
una concentración aproximada del 20% (p/p) puede causar por gel sugirió que la solubilasa de β-glucanos se compone
precipitación de los β-glucanos. A concentraciones de eta- de cuatro fracciones (26). Una de las fracciones mostraba
nol superiores al 20% (p/p), también se precipitan los α-glu- actividad de solubilasa de β-glucanos y de solubilasa de
canos (es decir, dextrinas). El potencial de formación de gel arabinoxylanos. Otra fracción mostraba actividad estearási-
de los β-glucanos se incrementa con el nivel de β-glucanos ca general, así como actividad de solubilasa de β-glucanos.
de PME (43). Un tratamiento de congelación-descongela- Las otras dos fracciones mostraban actividad de solubilasa
ción acelera la precipitación de β-glucanos debido a un de β-glucanos, carboxipeptidasa y actividad generalizada
incremento en las concentraciones de β-glucanos y etanol de estearásica y feruloil estearásica. No obstante, ninguna
durante el congelado (100). Una actividad del agua reduci- de las fracciones mostraba actividad detectable de β-glu-
da durante el congelado favorece la asociación de las molé- canasa (26).
culas de β-glucanos. Asimismo, se sabe que el calenta-
miento de la cerveza (es decir, durante la pasteurización) Las endo-β-glucanasas son responsables del descenso en
solubiliza los β-glucanos de la cerveza (11, 58, 100, 157). el tamaño molecular de los β-glucanos durante el malteado
y la maceración. Las endo-β-glucanasas presentan activi-
La formación de geles es un proceso por el cual polímeros dad laminarinásica (EC 3.2.1.6) y liquenásica (EC 3.2.1.73)
aleatorios o amorfos crean configuraciones ordenadas. Un (147). La liquenasa es el nombre comercial de la β-gluca-
gel se puede definir como una red tridimensional continua nasa producida por Bacillus subtilis, una enzima sinónima
de moléculas o partículas conectadas que atrapan un volu- de la endo-β-(1,3)(1,4)-glucanasa o β-(1,3)(1,4)-D-glucan-4-
men importante de una fase líquida continua. A concentra- glucanohidrolasa, que específicamente divide los enlaces
ciones elevadas, los β-glucanos de cebada forman distintos β-(1,4) de las unidades de glucosa O-3 sustituidas (es decir,
geles semisólidos (42). No obstante, durante la fabricación –3
G1–4G1–) de los β-glucanos de cebada (115,120,172). La
de la cerveza, los polímeros de β-glucanos en concentra- laminarinasa (una glucósido hidrolasa que hidroliza tanto la
ciones muy bajas sólo pueden formar geles o agregados laminarina como la liquenina) ataca los enlaces β-(1,3)- y β-
débiles. Se han propuesto los modelos tipo micela o de (1,4)-D-glucosídicos en los β-glucanos de la cebada. De
agregación de espirales aleatorias para la precipitación / nuevo, las endo-β-glucanasas se sintetizan en las primeras
formación de gel de las moléculas de β-glucanos. Vårum et fases de la germinación. El ácido giberélico (AG) estimula la
al. (164) afirman que una estructura tipo micela basada en síntesis de las endo-β-glucanasas (108,111,133,180). En la
los resultados de dispersión de la luz de soluciones de β- cebada tal cual existe una cantidad considerable de endo-
glucanos de aleurona de avena. Las moléculas de beta-glu- β-glucanasas (92). Durante el remojo, hasta que se alcanza
canos se unen lateralmente mediante enlaces de puente de un contenido en humedad del 46%, sólo existe un ligero
hidrógeno para formar micelas bordadas (68). La alineación incremento de su nivel de actividad (92). Tras la germina-
lateral de moléculas de β-glucanos forma un “tallo” relativa- ción de 3 días, la actividad endo-β-glucanasa alcanza su
mente rígido que constituye la región interna de las micelas, nivel máximo, que es 4,5 veces el presente en la cebada
mientras que las cadenas de polímeros de la región externa (92,97). La mayoría de la actividad endo-β-glucanásica
de las micelas mantienen su flexibilidad cuando el “tallo” se (62%) sobrevive a un secado de 23 horas, incluido un pro-
vuelve rígido (68). El modelo de micela bordeada puede ceso de curado a 80°C durante 2 horas (92). No obstante,
ayudar a explicar la interconexión y la precipitación de los el secado a altas temperaturas mientras el contenido en
β-glucanos en la cerveza. humedad de la malta sigue siendo elevado puede causar
una inactividad enzimática acelerada (39). Las endo-β-glu-
Bloques β-(1,4) largos y consecutivos permiten la formación canasas de la malta son muy sensibles al calor en solución
de una estructura en forma de hélice a partir de dos cade- (20, 39, 57, 77, 106) y la pérdida de actividad puede ser
nas de polímeros de β-glucanos, lo que permite una alinea- importante (20, 39, 92). Cabe destacar que las enzimas
ción posterior de dos hélices adyacentes para formar zonas poseen una termoestabilidad mayor en infusiones más
de unión (101, 148). El modelo de la agregación aleatoria de espesas debido al efecto protector de la glutationa reduci-
espirales resulta más útil para comprender las interacciones da en el extracto crudo (22, 23). El dl-Ditiotreitol (otro agen-
entre las moléculas de β-glucanos cuando se forma el gel te reductor), es decir, una mezcla de ditiotreitoles con con-
en soluciones concentradas de β-glucanos. figuraciones en d- y l- de los centros quirales) también pro-
tege el nivel de actividad endo-β-glucanásica durante la
β-Glucanasas endógenas de la cebada dilución o el almacenamiento en frío (40). Éste es un resul-
tado de la protección del residuo Met7 en la parte activa de
Las beta-glucanasas son las principales enzimas responsa- la enzima (120).
bles de la degradación de las paredes de las células del
endospermo de la cebada. El nivel de actividad β-glucaná- La endo-β-glucanasa de cebada tiene dos isoenzimas, EI y
sica en la malta viene establecido por la variedad y año, así EII, que se derivan de diferentes tejidos y bajo controles
como también por condiciones de crecimiento y malteado. genéticos diferentes (156). La isoenzima EII sólo se expre-
La actividad enzimática en los granos no germinados puede sa en capas de aleurona, mientras que EI se expresa en el
causar niveles limitados de hidrólisis de β-glucanos y redu- escutelo y hojas y raíces jóvenes, así como en las capas de
cir la viscosidad aparente de los β-glucanos extraídos (32). aleurona (156). EI y EII comparten un pH óptimo de 4,7
(62,92). La constante de Michaelis (Km), un indicador de la
La primera fase de la degradación de los β-glucanos es la afinidad de las enzimas al sustrato, varía entre 3 y 4 g/l para
solubilización del polímero en las células de las paredes del las endo-β-glucanasas de la malta (92, 127).
endospermo (24). La actividad de la enzima solubilizadora
de los β-glucanos se ha detectado en la cebada y la malta Los estudios realizados no han indicado relación aparente
(19, 20, 25, 26, 135, 178, 179). La enzima solubilizadora de alguna entre el nivel de endo-β-glucanasa de la malta y la
β-glucanos (solubilasa de β-glucanos) se calificó en un pri- viscosidad aparente del mosto o entre el nivel de actividad
mer momento como una carboxipeptidasa estable al calor β-glucanasa de la malta y el grado de degradación de β-

CERVEZA Y MALTA – 26 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
glucanos durante el malteado y la maceración a 65°C (96, degradación de las paredes celulares durante la germina-
128, 151). Se ha demostrado que los β-glucanos se degra- ción.
dan parcialmente durante el primer y segundo día de ger-
minación, incluso cuando los niveles in vivo de la actividad La calidad de la cebada cruda influye en la degradación de
endo-β-glucanásica son bajos (139, 140). Por lo tanto, el los β-glucanos durante el malteado. La cantidad de β-glu-
nivel de actividad de las β-glucanasas en la cebada malte- canos presente tras el malteado es proporcional a la canti-
ada no se puede utilizar como indicador fiable de la modifi- dad de β-glucanos en la cebada cruda (19). Por tanto, el
cación del endospermo (es decir, la rotura de las macromo- cultivo de cebada con niveles bajos de β-glucanos es una
léculas en otras más pequeñas) (136). de las soluciones a los problemas generados por los β-glu-
canos (3, 20). No obstante, esto ha demostrado cierta com-
Las endo-β-glucanasas no son las únicas enzimas implica- plejidad si se desea mantener al mismo tiempo la integridad
das en la degradación de los β-glucanos. Una exo-β-gluca- de la cáscara. La calidad de la malta y no el método de
nasa está presente en la cebada y su nivel de actividad se maceración es el factor determinante para establecer el
incrementa de tres a cuatro veces tras la germinación (62). nivel de β-glucanos en el mosto (122). Se ha propuesto un
Libera glucosa a partir de los extremos no reductores de las índice de β-glucanasa de cebada (es decir, el porcentaje de
moléculas de sustrato. Dos isoenzimas, ExoI y ExoII, se han β-glucanos degradado durante el malteado) como paráme-
identificado y caracterizado con valores pI de 7,8 y 8,0, res- tro de garantía de la calidad (149). En efecto, este paráme-
pectivamente (79), y pesos moleculares aparentes de tro refleja la modificación de los polímeros de β-glucanos en
69.000–70.000 y 71.000, respectivamente (79, 80). Ambas lugar del nivel de actividad de β-glucanasa. El contenido en
isoenzimas comparten un pH óptimo de 5,25 (78). La pérdi- β-glucanos de la malta también se ve afectado por la ener-
da de actividad de exo-β-glucanasa durante el secado arti- gía germinativa de la cebada (28, 51, 125). La abrasión de
ficial es más severa que la de las endo-β-glucanasas (62). los granos de cebada antes del malteado también reduce la
Puesto que la exo-β-glucanasa elimina únicamente una uni- viscosidad aparente del mosto (151) debido a una modifi-
dad de glucosa cada vez que ataca las moléculas de β-glu- cación mejorada del endospermo amiláceo en el extremo
canos de la cebada, tiene menos impacto sobre la degra- distal.
dación del polímero y la reducción de la viscosidad aparen-
te del mosto por causa de los β-glucanos. Por el contrario, Debido a la insolubilidad de las paredes celulares intactas,
las endo-β-glucanasas desempeñan un papel importante la degradación de β-glucanos es principalmente un resulta-
en la degradación de los polímeros de β-glucanos. do del ataque enzimático durante el malteado (en especial,
durante la germinación). Sólo se produce un declive ligero
Degradación de los β-Glucanos durante el malteado en el contenido en β-glucanos durante el remojado, pero
tiene lugar una degradación rápida y estable de los β-glu-
La modificación de endospermo de cebada durante el mal- canos durante los primeros 3 días de germinación, seguida
teado se ve afectada por muchos factores. Una hidratación de un descenso sin valor estimable durante las últimas
homogénea del endospermo , una germinación rápida y fases de la germinación y el secado (20). Un tiempo de
uniforme y una elevada respuesta del AG pueden garantizar remojado más prolongado (30 frente a 18 horas) a una tem-
la producción, distribución, migración y acción óptimas de peratura del agua de remojado más elevada (22 frente a
las enzimas degradadoras del endospermo (136). La velo- 16°C) reduce el nivel y el tamaño de los β-glucanos de
cidad de la modificación citolítica se puede ver influenciada mosto y, por lo tanto, mejora la filtración del mosto y la cer-
por el grosor de las paredes de las células de endospermo veza (128). No obstante, un remojado más prolongado y a
(3, 129), el tamaño molecular y la estructura fina de los β- temperaturas más altas puede causar un descenso en el
glucanos (5, 9, 125, 135), los niveles de enzimas hidrolíticas extracto de malta, el poder diastático y, en algunos casos,
(18, 27, 39, 155), la distribución de las enzimas en el endos- en el límite de atenuación. Tal y como se esperaba, un pro-
permo (134) o la eficacia de la liberación de enzimas en la grama largo y templado de remojado lleva a un mejor equi-
capa de aleurona (140). Las paredes de las células de la librio de las especificaciones de la malta para la mayoría de
aleurona de cebada poseen una capa externa de arabino- cultivos de cebada (128). El micromalteado también ha
xilano. Es necesario que el endospermo elimine el recubri- indicado que se hace necesaria la germinación con conte-
miento de arabinoxilano con xilanasa a fin de que las endo- nidos elevados de humedad de 45–48% para la degrada-
β-glucanasas degraden la capa interna de β-glucanos (16) ción de los β-glucanos (38, 63, 54). El efecto del remojado
permitiendo así una liberación adicional de hidrolasas. a 20°C, seguido por una germinación precoz a 20°C y más
Como componente principal de las paredes de las células tarde a 12°C equivale a un remojado y a una germinación a
de endospermo , los niveles de β-glucanos afectan a 16°C en términos de contenido de β-glucanos en mosto
muchos parámetros de modificación, como la diferencia de (154). La aplicación del AG facilita la degradación de β-glu-
extracto fino/ grueso, la viscosidad aparente del mosto, la canos y reduce el tiempo de germinación (38).
friabilidad y el índice de Kolbach (122, 154).
Se ha observado que la actividad endo-β-glucanasa se
Después de examinar la iniciación de la degradación de β- desarrolla con mayor rapidez en la sala de germinación que
glucanos, Scott (152) y Bathgate et al. (32) sugirieron que la durante la germinación neumática, lo que resulta en un nivel
liberación inicial de β-glucanos se veía afectada por las inferior de β-glucanos en malta (8). Un incremento acelera-
endo-β-(1,3)-glucanasas , que se pueden encontrar en la do de la temperatura durante la fase inicial de la germina-
cebada remojada (110, 140). Las carboxipeptidasas (solu- ción en sala causa un incremento más rápido en los niveles
bilasas de β-glucanos) también participan en la liberación de endo-β-glucanasa (8). Cuando la germinación neumáti-
de β-glucanos (19–21, 23, 33). Puesto que los β-glucanos ca se ajustó de un incremento escalonado en la temperatu-
se asocian a proteínas y fosfolípidos, (137), las proteasas y ra del grano a un incremento de la temperatura más acele-
las fosfolipidasas también pueden contribuir a la liberación rado y a una temperatura superior, se potenciaba el desa-
de β-glucanos en las paredes de las células de endosper- rrollo de β-glucanasas. La proteólisis se puede controlar
mo (135). No obstante, la proteólisis preliminar de los frag- reduciendo la temperatura de germinación en las últimas
mentos de pared celular por la proteinasa K (una endopep- fases para evitar el exceso de degradación de las proteínas
tidasa) in vitro no mejoró la solubilización de los hidratos de beneficiosas para la espuma de la cerveza. La malta trata-
carbono de las paredes celulares (40). Así pues, la proteó- da de este modo presenta niveles inferiores de β-glucanos
lisis no es un paso indispensable previo a la degradación sin que se vean alterados otros atributos de la calidad (8).
de las paredes celulares por las endo-β-glucanasas . Este Cabe destacar que la composición química de los β-gluca-
descubrimiento no apoya la teoría de que la solubilasa de β- nos de malta parcialmente modificada (germinación de 2
glucanos (en especial, la carboxipeptidasa) precede a o días) es similar a la de los β-glucanos extraídos de la ceba-
actúa en combinación con las β-glucanasas in vivo para la da, pero las propiedades físicas y las susceptibilidades

CERVEZA Y MALTA – 27 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
enzimáticas no son las mismas (29). Los beta-glucanos importantes que afectan a la degradación de β-glucanos
extraídos de la malta germinada durante 2 días es más vis- durante la maceración. El nivel de β-glucanasa en la malta
cosa y “retrocede” de solución a geles o precipitados más y la temperatura de maceración afectan al potencial de pre-
fácilmente (29). Un tiempo de malteado más largo reduce la cipitación de β-glucanos. Los beta-glucanos disueltos
viscosidad específica del mosto (151) debido a una degra- durante la maceración a una temperatura inferior a 65°C
dación prolongada de las macromoléculas. Por lo tanto, el poseen un potencial más elevado para formar geles que los
tiempo de germinación se puede ampliar para reducir el β-glucanos extraídos a una temperatura superior a 65°C
contenido de β-glucanos en la malta (56), pero esto llevará (102). Cuando los β-glucanos solubles en agua a 40 y 65°C
a niveles más elevados de proteínas solubles. Se desacon- son hidrolizados con una endo-β-glucanasa comercial, una
seja la utilización de malta con índices Kolbach superiores degradación limitada facilita la precipitación de β-glucanos
al 41% en las fábricas de cerveza modernas ya que la cer- causada por el congelado y descongelado (86, 136). Una
veza presentará una espuma de baja calidad, un sabor degradación enzimática insuficiente de β-glucanos durante
áspero y una acidez poco satisfactoria (17). el malteado y la maceración produce polímeros con una ele-
vada tendencia a asociarse y precipitarse (136).
Estudios histoquímicos también han ayudado a incrementar
nuestros conocimientos sobre la degradación de los β-glu- Las concentraciones de β-glucanos en mosto son más ele-
canos durante la germinación. Las secciones de grano de vadas en una maceración a 65°C que en una maceración a
cebada incubados con isoenzimas EI y EII de β-glucanasa 35–55°C (56). Una concentración inferior de β-glucanos se
purificadas han mostrado ataques similares sobre las pare- puede obtener utilizando una temperatura de maceración
des de las células de endospermo por ambas isoenzimas de 48°C y ampliando el tiempo de reposo (77, 95). La mace-
(16). No obstante, las paredes de las células no se degra- ración a 65°C con poca actividad endo-b-glucanasa causa
dan de forma uniforme por las endo-β-glucanasas . Las una concentración elevada de β-glucanos y una viscosidad
paredes celulares externas del endospermo son más sus- aparente elevada del mosto (56, 126).
ceptibles al ataque de las β-glucanasas que las paredes
celulares interiores del endospermo , presumiblemente La mayoría (aproximadamente el 70%) de los β-glucanos de
debido a la diferencia en la estructura de las paredes (16). malta se disuelve en mosto dulce tras la maceración por
Un estudio con microscopio electrónico de barrido (SEM) infusión (63). Con el enfriamiento del mosto dulce, aproxi-
sugiere que los núcleos de malta germinados durante 5 madamente un 30% de los β-glucanos se precipita (63).
días siguen conteniendo remanentes de paredes celulares Cuando la infusión se macera a 40–45°C durante un máxi-
(96). Durante la germinación de la cebada, existe una fron- mo de 2 horas, el mosto contiene poca cantidad de β-glu-
tera clara que divide las zonas del endospermo modifica- canos. Sin embargo, el nivel de β-glucanos se incrementa
das y no modificadas que se pueden distinguir gracias al cuando la maceración única tiene lugar a temperaturas más
tintado con Calcofluor (1). El examen mediante SEM y la elevadas, de hasta 80°C (77). Se extrae una cantidad
microscopía electrónica por transmisión han revelado rema- importante de β-glucanos cuando la temperatura de mace-
nentes de paredes celulares después de que las paredes ración es superior a 60°C como resultado de los cambios
celulares fueran atacadas por enzimas durante la germina- causados por la gelatinización del almidón y la acción de la
ción (1). solubilasa de β-glucanos (2, 77, 138). La liberación o
extracción no enzimática de β-glucanos puede tener lugar
El secado tiene una influencia significativa sobre la homo- durante la maceración (138). Por lo tanto, una práctica efec-
geneidad del nivel de β-glucanos en malta en una partida, tiva consiste en utilizar temperaturas de maceración más
en especial dada la mayor profundidad de las capas de bajas que ronden los 45–48°C para permitir la hidrólisis de
grano empleadas en las plantas de malteado modernas. En β-glucanos antes de la sacarificación. No obstante, perío-
caso de un secadero con doble suelo, la degradación de dos de espera largos a temperaturas que ronden las del
los β-glucanos se mantiene durante la henificación (es reposo de proteólisis causa un exceso de proteólisis en la
decir, fase inicial de secado a baja temperatura), particular- infusión y tiene como resultado una persistencia defectuosa
mente en la capa superior del secadero donde las tempe- de la espuma (122) y una cerveza con menos cuerpo. Un
raturas más bajas y los contenidos en humedad más eleva- período de reposo prolongado a 45–48°C puede degradar
dos favorecen una degradación prolongada de los β-gluca- los β-glucanos más solubilizados durante la sacarificación
nos (8). Mientras estudiaban la falta de homogeneidad indu- (24). Por lo tanto, unos niveles elevados de β-glucanasa de
cida por el secado, Piglas et al. (145) examinaron los nive- malta resultan beneficiosos (39, 151).
les de β-glucanos y β-glucanasa en malta en la parte supe-
rior, media e inferior de una capa de grano estática de 80 Para reducir el contenido en β-glucanos de la cerveza (es
cm. de grosor. En los niveles inferior, medio y superior, el decir, por debajo de los 200 mg/ l), se hace necesaria una
contenido en β-glucanos variaba, registrándose valores de actividad de endo-β-glucanasa en la malta suficiente (12).
0,83, 0,54 y 0,49%, respectivamente, mientras que la activi- Las endo-β-glucanasas son responsables de la β-glucanóli-
dad de β-glucanasa variaba con valores de 170, 158 y 139 sis durante la maceración con niveles de actividad máximos
unidades/ kg, respectivamente. El contenido en β-glucanos en valores de pH entre 4,5 y 4,8 y temperaturas entre 40 y
del mosto registrado en la parte inferior, media y superior de 45°C. La exo-β-glucanasa con condiciones óptimas a un pH
la malta variaba con valores de 135, 90 y 83 mg/ l, respec- de 4,5 y 40°C contribuye poco a la reducción de la viscosi-
tivamente (145). Los niveles más bajos de β-glucanos regis- dad aparente del mosto (122, 123). Durante la maceración,
trados en la malta de la capa superior obedecían probable- las β-glucanasas se inactivan lentamente a temperaturas
mente al período más largo de exposición al tratamiento en tan bajas como 40°C y se inactivan con rapidez a tempera-
caliente (30–35°C) con un contenido elevado de humedad turas superiores a 50°C (39, 77, 106, 151). Se puede detec-
(alrededor del 45%) durante las primeras 9 horas de seca- tar muy poca actividad β-glucanasa después de 5 minutos
do (145). a 55°C y no se detecta actividad alguna a temperaturas más
altas (12, 77).
Degradación de los β-Glucanos durante la maceración
Otros parámetros de la maceración también influyen sobre
La malta de cebada normalmente contiene suficiente solu- la concentración de los β-glucanos en mosto. La finura de
bilasa de β-glucanos estable al calor para disolver los β-glu- los molidos afecta a la concentración de los β-glucanos
canos en el mosto durante 10 minutos de maceración a totales y de PME en el mosto. Merece destacarse que no
65°C (19). No obstante, cuando se utiliza malta inactivada existe diferencia en el nivel de actividad β-glucanasa entre
por el calor (es decir, sin actividad solubilásica), el nivel de los molidos finos y gruesos (77, 126). Los molidos finos
β-glucanos solubilizados también es considerable (56). La siempre producen mosto con niveles de β-glucanos más
temperatura de maceración es uno de los factores más elevados que los molidos más gruesos, con una diferencia

CERVEZA Y MALTA – 28 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
que oscila entre 43 y 177 mg/ l para las muestras de malta elevadas durante la maceración, mayor rendimiento en
examinadas (165). Por lo tanto, para obtener malta con nive- extracto y la inactivación de las enzimas añadidas median-
les elevados de β-glucanos, un molido más grueso puede te el hervido del mosto (21).
ayudar a reducir los niveles de β-glucanos en el mosto a fin
de prevenir problemas posteriores a expensas de un rendi- Conclusiones
miento en extracto reducido. El espesor de la infusión y el
método de agitación también influyen sobre el nivel de β- Durante los últimos 50 años, se han llevado a cabo inconta-
glucanos en el mosto (77). Cuando se utiliza malta modifi- bles intentos de entender la estructura básica, la localización
cada por defecto, el nivel de β-glucanos en el mosto se ve histoquímica, las propiedades fisicoquímicas y la degrada-
afectado por las temperaturas de maceración y sacarifica- ción de los polímeros de β-glucanos. Una viscosidad apa-
ción (77). Por lo tanto, incluso la malta óptimamente modifi- rente elevada y la agregación moléculas de estos polímeros
cada con un nivel bajo de β-glucanos en mosto (142 mg/ l) suelen provocar problemas técnicos para la filtración de la
durante la maceración a pequeña escala puede producir cerveza y su estabilidad. No obstante, no se ha definido
mostos con concentraciones elevadas de β-glucanos enfoque sensible y fiable alguno para alertar a los malteros y
(410–430 mg/ l) en una sala de cocimiento (77). fabricantes de cerveza de los problemas causados por los
β-glucanos. La concepción de un método de predicción pre-
Incorporación de β-Glucanasa exógena durante la fabri- coz durante las fases de fabricación a fin de detectar la pre-
cación de la cerveza sencia de β-glucanos problemáticos sigue siendo una de las
prioridades principales de la investigación. La relación entre
Los problemas con los beta-glucanos durante la fabricación estructura y propiedades, el mecanismo exacto de agrega-
de la cerveza se asocian principalmente a la utilización de ción molecular y la comprensión del comportamiento de los
la cebada como aditivo o a la utilización de malta modifica- β-glucanos durante la fabricación de la cerveza todavía no
da de manera deficiente (166). Los β-glucanos parcialmen- han quedado lo suficientemente clarificados. La formación
te degradados resultan particularmente problemáticos de turbidez por β-glucanos inducida por cizalla y las dificul-
durante la fabricación de la cerveza porque pueden tener tades tecnológicas asociadas son asuntos emergentes rela-
como resultado un bagazo pegajoso (retrasándose así la cionados con estos polímeros problemáticos. Estudiar las
separación del mosto debido a la baja permeabilidad), propiedades reológicas de los precipitados y/ o los geles de
reducir la velocidad de filtración de la cerveza e inducir tur- β-glucanos casi con total seguridad ayudará a comprender
bidez en la cerveza (136). Muchos factores pueden causar mejor el comportamiento de los polímeros de β-glucanos
una modificación deficiente o desigual del endospermo de presentes en el mosto y la cerveza.
cebada: daños en los granos, reposo vegetativo, absorción
desigual de AG, dosis elevadas de bromato de potasio uti- RECONOCIMIENTOS
lizadas para malta cultivada durante períodos cortos, malte-
ado de las cebadas crudas mezcladas que poseen energí- Se agradece profundamente la concesión de una beca
as germinativas distintas y diferentes velocidades de modi- estratégica por parte del Consejo de Investigación de Inge-
ficación de endospermo (136), granos mezclados de tama- niería y Ciencias Naturales de Canadá a R. A. Speers y A. T.
ños de maíz diferentes (81), diferencia en temperatura y Paulson. También se aprecia sinceramente la concesión de
suministro de oxígeno durante el remojado y la germinación dos becas para graduados concedidas por la Asociación
(93) y falta de homogeneidad durante el secado (145). Las Americana de Químicos Cerealistas (1999–2001) a Y.-L. Jin.
β-glucanasas microbianas han sido utilizadas para mejorar
la filtración a fin de incrementar el rendimiento en extracto y REFERENCIAS
prevenir las turbideces por β-glucanos (146, 166). Las
(1,3)(1,4)-β-glucanasas de cebada y Bacillus poseen espe- 1. Aarnes, A. S. H., and Lie, S. (1986). Cell wall degradation
cificidades de sustrato idénticas (120). La hidrólisis de los in endosperm of barley during germination. J. Inst. Brew.
β-glucanos por (1,3)(1,4)-β-glucanasas bacterianas y de la 92:185-187.
cebada también siguen el mismo proceso estereoquímico
(45,109). Las β-glucanasas microbianas se pueden incor- 2. Aastrup, S., and Erdal, K. (1987). A mass balance study of
porar durante el malteado, la maceración o la fermentación. β-glucan in malt, spent grains and wort using the Calcofluor
Se ha intentado la incorporación de preparados de celulasa method. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Madrid 21:353-
comercial durante el malteado (70, 76). 360. IRL Press at Oxford University Press, Oxford, U.K.

La incorporación de β-glucanasa estable al calor durante la 3. Aastrup, S., and Munck, L. (1985). A β-glucan mutant in
maceración reduce el nivel de β-glucanos en mosto (55, 87, barley with thin cell walls. In: New Approaches to Research
95, 129, 161). on Cereal Carbohydrates, pp. 291-296. R. D. Hill and L.
Munck, Eds. Elsevier Science Ltd., Amsterdam, Nether-
La incorporación de β-glucanasa (que contiene actividad lands.
de amilasa y, posiblemente, de proteasa) a las infusiones
con adición de cebada puede reducir el contenido en β-glu- 4. Aastrup, S., Erdal, K., and Munck, L. (1985). Low β-glucan
canos de PME en el mosto y la cerveza, lo que lleva a una barley mutants and their malting behaviour. In: Proc. Congr.
filtrabilidad de la cerveza mejorada (117, 126, 157). Se ha Eur. Brew. Conv. Helsinki 20:387-393. IRL Press at Oxford
probado un preparado enzimático fúngico que contiene University Press, Oxford, U.K.
tanto β-glucanasas como arabinoxilanasas durante la pro-
ducción de mosto (52). Cabe destacar que diferentes pre- 5. Ahluwalia, B., and Ellis, E. (1985). Studies of β-glucan in
parados de β-glucanasas exógenas utilizados en las dosis barley, malt and endosperm cell walls. In: New Approaches
recomendadas por los fabricantes poseen eficacias varia- to Research on Cereal Carbohydrates, pp. 285-290. R. D.
bles a la hora de reducir los niveles de β-glucanos en mosto Hill and L. Munck, Eds. Elsevier Science Ltd., Amsterdam,
(2). Asimismo, se pueden utilizar preparados de endo-β-glu- Netherlands.
canasa de B. subtilis para hidrolizar los β-glucanos de cer-
veza durante la fermentación y mejorar el rendimiento en fil- 6. American Society of Brewing Chemists. (1992). Methods
tración de la cerveza (75). La incorporación de 20 ppm de of Analysis, 8th rev. ed. Wort-18 β-Glucan in Congress wort
β-glucanasa a 0–2°C durante 2 días multiplica por siete la by fluorescence. The Society, St. Paul, MN.
filtrabilidad mediante membrana de la cerveza brillante
(157). No obstante, se prefiere la incorporación de β-gluca- 7. Anderson, I. W. (1990). The effect of β-glucan molecular
nasas estables al calor durante la maceración porque se weight on the sensitivity of dye binding assay procedures for
consigue mayor actividad de las enzimas a temperaturas β-glucan estimation. J. Inst. Brew. 96:323-326.

CERVEZA Y MALTA – 29 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
8. Anderson, I. W., Dickenson, C. J., and Anderson, R. G. 26. Bamforth, C. W., Moore, J., McKillop, D., Williamson,
(1989). β-Glucan in production malting. In: Proc. Congr. Eur. G., and Kroon, P. A. (1997). Enzymes from barley which
Brew. Conv. Zurich 22:213-220. IRL Press at Oxford Univer- solubilize β-glucan. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv.
sity Press, Oxford, U.K. Maastricht 26:75-82. IRL Press at Oxford University Press,
Oxford, U.K.
9. Anderson, M. A., Cook, J. A., and Stone, B. A. (1978).
Enzymatic determination of (1→3), (1→4)-β-D-glucans in 27. Bass, E. J., Bendelow, V. W., and Meredith, W. O. S.
barley grain and other cereals. J. Inst. Brew. 84:233-239. (1957). Enzymes that degrade barley gums. V. Relation
between endo-beta-polyglucosidase activity and other
10. Andrews, J. M. H. (1996). Shear forces in brewhouse barley and malt properties. Cereal Chem. 34:219-225.
operations. Brew. Guardian 125(6):33-36.

11. Annemüller, G., and Schnick, T. (1999). A proposal for a 28. Bathgate, G. N. (1983). The relationship between malt
filterability and stability check in unfiltered storage beer. ‘friability’ and wort viscosity. J. Inst. Brew. 89:416-419.
Brauwelt Int. 17:192-197.
29. Bathgate, G. N., and Dalgliesh, C. E. (1975). The diver-
12. Annemüller, G., Bauch, T., Nagel, R., and Böhm, W. sity of barley and malt β-glucans. Proc. Am. Soc. Brew.
(1996). Endo-β-glucanase levels—A measure for the Chem. 33:32-36.
“cytolytic power” of malt? Brauwelt Int. 14:312-317.
30. Bathgate, G. N., and Palmer, G. H. (1973). The in vivo
13. Aspinall, G. O., and Telfer, R. G. J. (1954). Cereal gums. and in vitro degradation of barley and malt starch granules.
Part I. The methylation of barley glucans. J. Chem. Soc. J. Inst. Brew. 79:402-409.
Abstr. 3519-3522.

14. Autio, K., Myllymäki, O., and Mälkki, Y. (1987). Flow 31. Bathgate, G. N., and Palmer, G. H. (1975). The predic-
properties of solutions of oat β-glucans. J. Food Sci. tion of brewing behaviour of malts from bench scale trials.
52:1364-1366. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Nice 15:61-81. Elsevier Sci-
entific Co., Amsterdam, Netherlands.
15. Autio, K., Myllymäki, O., Suortti, T., Saastamoinen, M.,
and Poutanen, K. (1992). Physical properties of (1→3), 32. Bathgate, G. N., Palmer, G. H., and Wilson, G. (1974).
(1→4)-β-D-glucan preparates isolated from Finnish oat vari- The action of endo-β-glucanases on barley and malt β-glu-
eties. Food Hydrocoll. 5:513-522. cans. J. Inst. Brew. 80:278-285.

16. Autio, K., Mannonen, L., Pietilä, K., Koskinen, M., Siika- 33. Baxter, E. D. (1978). Purification and properties of malt
Aho, M., and Linko, M. (1996). Incubation of barley kernel carboxypeptidases attacking hordein. J. Inst. Brew. 84:271-
sections with purified cell wall degrading enzymes. J. Inst. 275.
Brew. 102:427-432.
34. Baxter, E. D., and Wainwright, T. (1979). Hordein and
17. Back, W., and Narziss, L. (1997). Malt parameters and malting quality. J. Am. Soc. Brew. Chem. 37:8-12.
beer quality. Brauwelt Int. 15:29-35.
35. Beer, M. U., Wood, P. J., and Weisz, J. (1997). Molecular
18. Ballance, G. M., and Meredith, W. O. S. (1974). Devel-
weight distribution and (1→3)(1→4)-β-D-glucan content of
opment of cytolytic enzyme activities during germination of
consecutive extracts of various oat and barley cultivars.
different barleys. Can. J. Plant Sci. 54:223-229.
Cereal Chem. 74:476-480.
19. Bamforth, C. W. (1981). Enzymolysis of β-glucan. In:
Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Copenhagen 18:335-346. IRL 36. Bendelow, V. M. (1975). Determination of non-starch car-
Press at Oxford University Press, Oxford, U.K. bohydrates in barley breeding programs. J. Inst. Brew.
81:127-130.
20. Bamforth, C. W. (1985). Biochemical approaches to beer
quality. J. Inst. Brew. 91::154-160. 37. Bhatty, R. S. (1995). Laboratory and pilot plant extraction
and purification of β-glucans from hull-less barley and oat
21. Bamforth, C. W. (1994). β-Glucan and β-glucanases in brans. J. Cereal Sci. 22:163-170.
malting and brewing: Practical aspects. Brew. Dig.
69:(5):12-16, 21. 38. Bourne, D. T., and Wheeler, R. E. (1984). Environmental
and varietal differences in total β-glucan contents of barley
22. Bamforth, C. W., and Martin, H. L. (1981). The develop- and the effectiveness of its breakdown under different malt-
ment of β-glucan solubilase during barley germination. J. ing conditions. J. Inst. Brew. 90:306-310.
Inst. Brew. 87:81-84.
39. Bourne, D. T., Jones, M., and Pierce, J. S. (1976). Beta
23. Bamforth, C. W., and Martin, H. L. (1983). The degrada- glucan and beta glucanase in malting and brewing. Tech. Q.
tion of β-glucan during malting and mashing: The role of β- Master Brew. Assoc. Am. 13:3-7.
glucanase. J. Inst. Brew. 89:303-307.
40. Brunswick, P., Manners, D. J., and Stark, J. R. (1988).
24. Bamforth, C. W., and Quain, D. E. (1989). Enzymes in Degradation of isolated barley endosperm cell walls by puri-
brewing and distilling. In: Cereal Science and Technology, fied endo-(1→3)(1→4)-β-D-glucanases and malt extracts. J.
pp. 326-366. G. H. Palmer, Ed. Aberdeen University Press, Cereal Sci. 7:153-168.
Aberdeen, U.K.
41. Buliga, G. S., Brant, D. A., and Fincher, G. B. (1986).
25. Bamforth, C. W., Martin, H. L., and Wainwright, T. (1979). The sequence statistics and solution conformation of a
A role for carboxypeptidase in the solubilization of barley β- barley (1→3)(1→4)-β-D-glucan. Carbohydr. Res. 157:139-
glucan. J. Inst. Brew. 85:334-338. 156.

CERVEZA Y MALTA – 30 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
42. Burkus, Z., and Temelli, F. (1999). Gelation of barley β- 57. Erdal, K., and Gjertsen, P. (1971). β-Glucans in malting
glucan concentrate. J. Food Sci. 64:198-201. and brewing III. The action of endo-β-glucanases. In: Proc.
Congr. Eur. Brew. Conv. Estoril 13:49-57. Elsevier Scientific
43. Byrne, H., and Letters, R. (1992). Technical factors in Co., Amsterdam, Netherlands.
selecting a barley adjunct. In: Proc. Conv. Inst. Brew. Aust.
N.Z. Sect. 22nd, Melbourne, pp. 125-128. Institute of Brew- 58. Esser, K. D. (1996). Attempt to critically evaluate meth-
ing, London, U.K. ods of predicting beer filterability. Brauwelt Int. 14:120-125.

44. Charalambous, G. (1981). Involatile constituents of beer. 59. European Brewery Convention. (1987). Analytica-EBC,
In: Brewing Science, Vol. 2, pp. 167-254. J. R. A. Pollock, 4th ed. 3.11.1 High molecular weight beta-glucan (enzymic
Ed. Academic Press, Inc., New York. method), E56/1-E56/3; 3.11.2 High molecular weight beta-
glucan (fluorimetric method), E56/5-E56/7. Brauerei- und
45. Chen, L., Sadek, M., Stone, B. A., Brownlee, R. T. C., Getränke-Rundschau, Zurich, Switzerland.
Fincher, G. B., and Høj, P. B. (1995). Stereochemical course
of glucan hydrolysis by barley (1→3)- and (1→4)-β-glu- 60. Evans, E., Stenholm, K., Vilpola, A., Home, S., and Hugh-
canases. Biochem. Biophys. Acta 1253:112-116. es, G. (1998). Pilot scale evaluation of mash filter perfor-
mance of malts with variable quality. Tech. Q. Master Brew.
46. Christensen, B. E., Ulset, A.-S., Beer, M. U., Knuckles, B. Assoc. Am. 35:189-195.
E., Williams, D. L., Fishman, M. L., Chau, H. K., and Wood,
P. J. (2001). Macromolecular characterisation of three barley 61. Fincher, G. B. (1975). Morphology and chemical compo-
β-glucan standards by size-exclusion chromatography com- sition of barley endosperm cell walls. J. Inst. Brew. 81:116-
bined with light scattering and viscometry: An inter-laborato- 122.
ry study. Carbohydr. Polym. 45:11-22.
62. Fincher, G. B., and Stone, B. A. (1993). Physiology and
47. Coote, N., and Kirsop, B. H. (1976). A haze consisting biochemistry of germination in barley. In: Barley: Chemistry
largely of pentosan. J. Inst. Brew. 82:34. and Technology. pp. 247-295. A. W. MacGregor and R. S.
Bhatty, Eds. American Association of Cereal Chemists, St.
48. Crabb, D., and Bathgate, C. V. (1973). The influence of Paul, MN.
β-glucanase on efficiency of wort separation. J. Inst. Brew.
79:519-524. 63. Forrest, I. S., and Wainwright, T. (1977). Differentiation
between desirable and troublesome β-glucans. In: Proc.
49. Denk, V. (1996). The role of microfluid mechanics in Congr. Eur. Brew. Conv. Amsterdam 16:401-413. European
brewing engineering. Brauwelt Int. 14:58-62. Brewing Convention, printed by DSW, Dordrecht, Nether-
lands.
50. Doehlert, D. C., Zhang, D., McMullen, S., and Moore, W.
64. Gjertsen, P. (1966). Beta-glucans in malting and brew-
R. (1997). Crop quality and utilization—Estimation of mixed
ing. I. Influence of beta-glucans on the filtration of strong
linkage β-glucan concentration in oat and barley from vis-
beers. Proc. Am. Soc. Brew. Chem., pp. 113-120.
cosity of whole grain flour slurry. Crop Sci. 37:235-238.
65. Gómez, C., Navarro, A., Manzanares, P., Horta, A., and
51. Drost, B. W., Aalbers, V. J., and Pesman, L. (1980). Pre- Carbonell, J. V. (1997). Physical and structural properties of
diction of brewing quality by malt modification determina- barley (1→3),(1→4)-β-D-glucan. Part I. Determination of
tion. In: Relationship Between Malt and Beer. Eur. Brew. molecular weight and macromolecular radius by light scat-
Conv. Monogr. 6, pp. 224-234. Fachverlag Hans Carl, Nürn- tering. Carbohydr. Polym. 32:7-15.
berg, Germany.
66. Gómez, C., Navarro, A., Garnier, C., Horta, A., and Car-
52. Ducroo, P., and Frelon, P. G. (1989). Improvement of bonell, J. V. (1997). Physical and structural properties of bar-
beer production by the use of β-glucanase-pentosanase ley (1→3),(1→4)-β-D-glucan. Part III. Formation of aggre-
from Disporotrichum dimorphosporum. In: Proc. Congr. Eur. gates analysed through its viscoelastic and flow behaviour.
Brew. Conv. Zurich 22:445-452. IRL Press at Oxford Univer- Carbohydr. Polym. 34:141-148.
sity Press, Oxford, U.K.
67. Greenberg, D. C., and Whitmore, E. T. (1974). A rapid
53. Edmunds, M. D., Allan, G. R., Fincher, G. B., and Stuart, method for estimating the viscosity of barley extracts. J. Inst.
I. M. (1994). The quantification of (1→3, 1→4)-β-glucanase Brew. 80:31-33.
isoenzymes during malting using an enzyme-linked
immunosorbent assay. In: Proc. Conv. Inst. Brew. Asia Pacif- 68. Grimm, A., and Krüger, E. (1994). Determination of high
ic Sect., 23rd, Sydney, pp. 79-83. Institute of Brewing, Lon- molecular beta-glucan. In: Malting Technology. Eur. Brew.
don, U.K. Conv. Monogr. 23, pp. 94-109. Fachverlag Hans Carl, Nürn-
berg, Germany.
54. Edney, M. J., Marchylo, B. A., and MacGregor, A. W.
(1991). Structure of total barley beta-glucan. J. Inst. Brew. 69. Grimm, A., Krüger, E., and Burchard, W. (1995). Solution
97:39-44. properties of b-D-(1,3)(1,4)-glucan isolated from beer. Car-
bohydr. Polym. 32:205-214.
55. Enari, T.-M., and Markkanen, P. H. (1975). Microbial β-
glucanases in brewing. Proc. Am. Soc. Brew. Chem. 33:13- 70. Grujic, O. (1998). Application of a commercial enzyme
17. preparation in the barley malting process. J. Inst. Brew.
104:249-253.
56. Erdal, K., and Gjertsen, P. (1967). β-Glucans in malting
and brewing II. The fate of β-glucans during mashing. In: 71. Haas, G. J., and Fleischman, A. I. (1964). The formation,
Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Madrid 11:302-319. Elsevier nature, and prevention of precipitations in frozen and
Scientific Co., Amsterdam, Netherlands. thawed beers. J. Agric. Food Chem. 12:409-411.

CERVEZA Y MALTA – 31 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
72. Härkönen, H., Pessa, E., Suortti, T., and Poutanen, K. non-starch polysaccharides—II. Alkali-extractable β-glu-
(1997). Distribution and some properties of cell wall poly- cans and arabinoxylans. Carbohydr. Polym. 35:259-269.
saccharides in rye milling fractions. J. Cereal Sci. 26:95-104.
88. Izydorczyk, M. S., Biliaderis, C. G., Macri, L. J., and Mac-
73. Haselmore, R. M., Tunnicliffe, C. G., Peipi, M. G., and Gregor, A. W. (1998). Fractionation of oat (1→3), (1→4)-β-
Slack, C. R. (1990). Using wort β-glucan levels to aid selec- glucans and characterisation of the fractions. J. Cereal Sci.
tion in a barley breeding programme. In: Proc. Conv. Inst. 27:321-325.
Brew. Aust. N.Z. Sect., 21st, Auckland, pp. 79-82. Institute of
Brewing, London, U.K. 89. Jackson, G., and Bamforth, C. W. (1983). Anomalous
haze readings due to β-glucans. J. Inst. Brew. 89:155-156.
74. Henry, R. J. (1986). Genetic and environmental variation
in the pentosan and β-glucan contents of barley, and their 90. Jensen, S. A., and Aastrup, S. (1981). A fluorimetric
relation to malting quality. J. Cereal Sci. 15:269-277. method for measuring 1,3:1,4-β-glucan in beer, wort, malt
and barley by use of Calcofluor. Carlsberg Res. Commun.
75. Hinchliffe, E., and Box, W. G. (1985). Beer enzymes and 46:87-95.
genes: The application of a concerted approach to β-glucan
degradation. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Helsinki 20:267- 91. Jin, Y.-L. (2002). Effect of β-glucan and environmental
274. IRL Press at Oxford University Press, Oxford, U.K. factors on the physical and chemical properties of wort and
beer. Ph.D. thesis. Dalhousie University, Halifax, NS, Cana-
76. Home, S., Maunula, H., and Linko, M. (1983). Cellu- da.
lases—A novel solution to some malting and brewing prob-
lems. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. London 19:385-392. 92. Jin, Y.-L., and Liu, Z.-Q. (1994). Studies on malt endo-β-
IRL Press at Oxford University Press, Oxford, U.K. glucanase. Damei Kexue (Barley Sci.) 46(1):36-38.

77. Home, S., Pietilä, K., and Sjöholm, K. (1993). Control of 93. Jin, Y.-L., and Liu, Z.-Q. (1994). Oxygen uptake and aer-
glucanolysis in mashing. J. Am. Soc. Brew. Chem. 84:108- ation during steeping and germination. Damei Kexue (Bar-
113. ley Sci.) 46(3):41-44.

78. Hrmova, M., and Fincher, G. B. (1998). Barley β-glucan 94. Jørgensen, K. G., Jensen, S. A., Hartlev, P., and Munck,
exohydrolases. Substrate specificity and kinetic properties. L. (1985). The analysis of β-glucan in wort and beer using
Carbohydr. Res. 305:209-221. Calcofluor. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Helsinki
20:403-410. IRL Press at Oxford University Press, Oxford,
79. Hrmova, M., Harvey, A. J., Wang, J., Shirley, N. J., Jones, U.K.
G. P., Stone, B. A., Høj, P. B., and Fincher, G. B. (1996). Bar-
ley b-D-glucan exohydrolases with b-D-glucosidase activity. 95. Kettunen, A., Hamalainen, J. J., Stenholm, K., and
Purification, characterization, and determination of primary Pietilä, K. (1996). A model for the prediction of β-glucan con-
structure from a cDNA clone. J. Biol. Chem. 271:5277-5286. centration during mashing. J. Food Eng. 29:185-200.

80. Hrmova, M., Varghese, J. N., Høj, P. B., and Fincher, G. 96. Klopper, W. J. (1975). Beta-glucans and beta-glucanas-
B. (1998). Crystallization and preliminary X-ray analysis of β- es. In: Barley and Malting. Eur. Brew. Conv. Monogr. 2, pp.
glucan exohydrolase isoenzyme ExoI from barley (Hordeum 133-145. Fachverlag Hans Carl, Nürnberg, Germany.
vulgare). Acta Crystallogr. Sect. D Biol. Crystallogr. 54:687-
689. 97. Lee, R., Allan, G., Greig, R., Dunn, C., and Stuart, M.
(1998). The effect of (1→3, 1→4)-β-glucan and arabinoxylan
81. Hyde, W. R., and Brookes, P. A. (1978). Malt quality in on malt quality and brewhouse performance. In: Proc. Conv.
relation to beer quality. J. Inst. Brew. 84:167-174. Inst. Brew. Asia Pacific Sect., 25th, Perth, pp. 33-37. Institute
of Brewing, London, U.K.
82. Igarashi, H., and Amaha, M. (1969). Frozen beer precip-
itates. II. Chemical structure of the β-glucan isolated from 98. Leedham, P. A., Savage, D. J., Crabb, D., and Morgan,
the precipitates. J. Inst. Brew. 75:292-299. G. T. (1975). Materials and methods of wort production that
influence beer filtration. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv.
83. Izawa, M., Kano, Y., and Kamimura, M. (1990). β-Glucan Nice 15:201-215. Elsevier Scientific Co., Amsterdam,
responsible for haze formation in beer. Curr. Dev. Malting Netherlands.
Brew. Distill. 3:427-430.
99. Letters, R. (1977). Beta-glucans in brewing. In: Proc.
84. Izawa, M., Kano, Y., and Koshino, S. (1993). Relationship Congr. Eur. Brew. Conv. Amsterdam 16:211-224. European
between structure and solubility of (1→3),(1→4)-β-D-glucan Brewing Convention, printed by DSW, Dordrecht, Nether-
from barley. J. Am. Soc. Brew. Chem. 51:23-127. lands.

85. Izawa, M., Takashio, M., and Tamaki, T. (1996). Determi- 100. Letters, R. (1995). Carbohydrate gels. A problem with
nation of high molecular weight β-glucan in wort and beer newer brewing technologies. In: Proc. Sci. Tech. Conv. Inst.
using a post-column Calcofluor flow-injection-analysis (FIA) Brew. Cent. S. Afr. Sect., 5th, Victoria Falls, pp. 115-121.
method. J. Inst. Brew. 102:183-189. Institute of Brewing, London, U.K.

86. Izydorczyk, M. S., Macri, L. J., and MacGregor, A. W. 101. Letters, R. (1995). Shapely polysaccharides in brewing.
(1998). Structure and physiochemical properties of barley Ferment 8:301-305.
non-starch polysaccharides—I. Water-extractable β-glucans
and arabinoxylans. Carbohydr. Polym. 35:249-258. 102. Letters, R., Byrne, H., and Doherty, M. (1985). The com-
plexity of beer β-glucans. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv.
87. Izydorczyk, M. S., Macri, L. J., and MacGregor, A. W. Helsinki 20:395-402. IRL Press at Oxford University Press,
(1998). Structure and physiochemical properties of barley Oxford, U.K.

CERVEZA Y MALTA – 32 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
103. Li, Y.-X., Yin, X.-S., Gu, G.-X., and Lu, J. (1997). Mea- 119. Morris, E. R., Cutler, A. N., Ross-Murphy, S. B., Rees, D.
surement of β-glucans in wort and beer by Congo red. J. A., and Price, J. (1981). Concentration and shear rate
Wuxi Univ. Light Ind. 16(1):8-13. dependence of viscosity in random coil polysaccharide
solutions. Carbohydr. Polym. 1:5-21.
104. Linemann, A., and Krüger, E. (1997). Relationships
between structure and characteristics of β-glucan in beer 120. Müller, J. J., Thomsen, K. K., and Heinemann, U.
production. Part 1: Properties in dissolving β-glucan out of (1998). Crystal structure of barley 1,3-1,4-β-glucanase at
beer. Brauwelt Int. 15:344-351. 2.0-Å resolution and comparison with Bacillus 1,3-1,4-β-glu-
canase. J. Biol. Chem. 273:3438-3446.
105. Linemann, A., and Krüger, E. (1998). Relationships
between structure and characteristics of β-glucan in beer 121. Munck, L. (1987). Quality assessment of brewing barley
production. Part 2: Changes in states of dissolution of β-glu- varieties. In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Madrid 21:145-
can and formation of β-glucan gel during the brewing 156. IRL Press at Oxford University Press, Oxford, U.K.
process. Brauwelt Int. 16:132-139.
122. Narziss, L. (1973). Zusammenhänge zwischen Ger-
106. Loi, L., Barton, P. A., and Fincher, G. B. (1987). Survival stenbeschaffenheit, Malz und Bierqualitaet (Correlation
of barley (1→3, 1→4)-β-glucanase isozymes during kilning between quality of barley, malt and beer). Brauwelt 113:3-8.
and mashing. J. Cereal Sci. 5:45-50.
123. Narziss, L. (1993). Beta-glucan and filterability.
107. Luchsinger, W. W., Chen, S.-C., and Richards, A. W. Brauwelt Int. 11:435-442.
(1965). Mechanism of action of malt β-glucanases. 9. The
structure of barley β-glucan and the specificity of A11-endo- 124. Narziss, L., Reicheneder, E., and Edney, M. J. (1989).
beta glucanase. Arch. Biochem. Biophys. 112:531-536. Studying beer filtration with an accurate beta-glucan assay.
Monatsschr. Brauwiss. 42:277-285.
108. Macleod, A. M., and Millar, A. S. (1962). Effects of gib-
berellic acid on barley endosperm. J. Inst. Brew. 68:322- 125. Narziss, L., Reicheneder, E., and Edney, M. J. (1989).
332. Importance of beta-glucan size and concentration in malt-
ing. Monatsschr. Brauwiss. 42:430-437.
109. Malet, C. J.-B., Bernabé, M., Brosa, C., and Planas, A.
(1993). Sterochemical course and structure of the products of 126. Narziss, L., Reicheneder, E., and Edney, M. J. (1990).
the enzymic action of endo-1,3-1,4-β-D-glucan 4-glucanohy- The control of β-glucan in the brewery. Monatsschr.
drolase from Bacillus licheniformis. Biochem. J. 296:753-758. Brauwiss. 43:66-76.

110. Manners, D. J., and Marshall, J. J. (1969). Studies on 127. Navarro, A., Manzanares, P., Carbonell, J. V., and
carbohydrate metabolizing enzymes, XXII. The β-glucanase Sendra, J. M. (1995). Determination of (1→3),(1→4)-β-D-glu-
system of malted barley. J. Inst. Brew. 75:550-561. canase activity by a Calcofluor-flow injection analysis
method. J. Cereal Sci. 22:275-284.
111. Manners, D. J., Palmer, G. H., Wilson, G., and Yel-
lowlees, D. (1971). Effect of gibberellic acid on the develop- 128. Nischwitz, R., Cole, N. W., and MacLeod, L. (1999). Malt-
ment of some cereal carbohydrases. Biochem. J. 125:30-31. ing for brewhouse performance. J. Inst. Brew. 105:219-227.

112. Manzanares, P., Navarro, A., Sendra, J. M., and Car- 129. Oksanen, J., Ahvenainen, J., and Home, S. (1985).
bonell, J. V. (1991). Selective determination of β-glucan of dif- Microbial cellulase for improving filterability of wort and beer.
fering molecular size, using the Calcofluor-fluorimetric flow- In: Proc. Congr. Eur. Brew. Conv. Helsinki 20:419-425. IRL
injection-analysis (FIA) method. J. Inst. Brew. 97:101-104. Press at Oxford University Press, Oxford, U.K.

113. Martin, H. L., and Bamforth, C. W. (1980). The relation- 130. Oonsivilai, R. (2000). The effect of beta-glucan poly-
ship between β-glucan solubilase, barley autolysis and malt- mers on the rheological and filtration properties of wort.
ing potential. J. Inst. Brew. 86:216-221. M.Sc. thesis. Dalhousie University, Halifax, NS, Canada.

114. Martin, H. L., and Bamforth, C. W. (1981). An enzymic 131. Oonsivilai, R., Patelakis, S., Speers, R. A., and Paulson,
method for the measurement of total and water-soluble β- A. T. (1999). Rheological and filtration properties of β-glucan
glucan in barley. J. Inst. Brew. 87:88-91. polymers in the brewing process. In: Food, Health and Sci-
ence. Annu. Conf. Can. Inst. Food Sci. Technol., 41st. p. 40.
115. McCleary, B. V., and Glennie-Holmes, M. (1985). Canadian Institute of Food Science and Technology (CIFST),
Enzymic quantification of (1→3)(1→4)-β-glucan in barley Toronto, ON, Canada.
and malt. J. Inst. Brew. 91:285-295.
132. Palmer, G. H. (1972). Morphology of starch granules in
116. McCleary, B. V., and Mugford, D. C. (1997). Determina- cereal grains and malts. J. Inst. Brew. 84:326-332.
tion of b-glucan in barley and oats by streamlined enzymat-
ic method: Summary of collaborative study. J. Assoc. Off. 133. Palmer, G. H. (1973). Relationships between levels of
Anal. Chem. (AOAC) 80:580-583. gibberellic acid and the production and action of carbohy-
drate of barley. J. Inst. Brew. 79:513-518.
117. McKechnie, M. T., and O’Sullivan, P. (1995). Filter foul-
ing with molecular species: Stirring up the evidence. BRFI 134. Palmer, G. H. (1974). The industrial use of gibberellic
Q. April:29-31. acid and its industrial basis—A review. J. Inst. Brew. 80:13-30.

118. Moll, M. (1987). Colloidal stability of beer. In: Brewing 135. Palmer, G. H. (1975). Influence of endosperm structure
Science, Vol. 3, pp. 2-327. J. R. A. Pollock, Ed. Academic on extract development. Proc. Am. Soc. Brew. Chem.
Press, Inc., New York. 33:174-180.

CERVEZA Y MALTA – 33 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
136. Palmer, G. H. (1989). Cereals in malting and brewing. 154. Smart, J. G., Lukes, B. K., Tie, E., and Ford, A. T.
In: Cereal Science and Technology, pp. 61-242. G. H. (1993). Relationships among wort β-glucan, malting condi-
Palmer, Ed. Aberdeen University Press, Aberdeen, U.K. tions, and malt analysis. J. Am. Soc. Brew. Chem. 51:88-93.

137. Palmer, G. H. (1989). Influence of cell wall structure in 155. Sparrow, D. H. B., and Meredith, W. O. S. (1969). Malt
enzyme breakdown of the endosperm of germinated barley. cytolytic activity of barleys of diverse origins and its relation
J. Inst. Brew. 93:105-107. to maltability. J. Inst. Brew. 75:237-242.

138. Palmer, G. H., and Agu, R. C. (1999). Effect of mashing 156. Stuart, I. M., Loi, L., and Fincher, G. B. (1986). Devel-
temperatures and endo-β-glucanase on β-glucan content of opment of (1→3, 1→4)-β-D-glucan endohydrolase isozymes
malt worts. J. Inst. Brew. 105:233-235. in isolated scutella and aleurone layers of barley (Hordeum
vulgare). Plant Physiol. 80:310-314.
139. Palmer, G. H., and MacKenzie, C. I. (1986). Levels of
alkali-soluble b-D-glucans in cereal grains. J. Inst. Brew. 157. Sudarmana, D. L., Goldsmith, M. R., Hinh, A. H., Pecar,
92:461-474. M. A., Hawthorne, D. B., and Kavanagh, T. E. (1996). Micro-
filtration studies with a modified membrane filterability pro-
140. Palmer, G. H., Gernah, D. I., McKernan, G., Nimmo, D. cedure. Tech. Q. Master Brew. Assoc. Am. 33:63-72.
H., and Laycock, G. (1985). Influence of enzyme distribution
on endosperm breakdown (modification) during malting. J. 158. Szczodrak, J., Czuchajowska, Z., and Pomeranz, Y.
Am. Soc. Brew. Chem. 43:17-28. (1992). Characterization and estimation of barley polysac-
charides by near-infrared spectroscopy. II. Estimation of
141. Parrish, F. W., Perlin, A. S., and Reese, E. T. (1960). total β-D-glucans. Cereal Chem. 69:419-423.
Selective enzymolysis of poly-β-D-glucans and the structure
of the polymers. Can. J. Chem. 38:2094-2104. 159. Takayanagi, S., Amaha, M., Satake, K., Kuroiwa, Y.,
Igarashi, H., and Murata, A. (1969). Frozen beer precipitates.
142. Patelakis, S. J. J. (1999). The effect of beta-glucan I. Formation and general characters. J. Inst. Brew. 75:284-292.
polymers on the rheological and filtration properties of beer.
M.Sc. thesis. DalTech, Dalhousie University, Halifax, NS, 160. Tanaka, M., and Sakuma, S. (1999). Prediction of the
Canada. formation of frozen beer precipitates. J. Am. Soc. Brew.
Chem. 57:104-108.
143. Patelakis, S., Speers, R. A., Paulson, A., and Stewart, R.
J. (1999). O-8. Effect of β-glucan on the rheological and fil- 161. Todo, V., Carbonell, J. V., and Sendra, J. M. (1989).
tration properties of beer. (Abstr.) Am. Soc. Brew. Chem. Kinetics of β-glucan degradation in wort by exogenous β-
Newsl. 59(2):16. glucanases treatment. J. Inst. Brew. 95:419-422.

144. Peat, S., Whelan, W. J., and Roberts, J. G. (1957). The 162. Vårum, K. M., and Smidsrød, O. (1988). Partial chemical
structure of lichenin. J. Chem. Soc. Abstr. 3916-3924. and physical characterisation of (1→3),(1→4)-β-D-glucan from
oat (Avena sativa L.) aleurone. Carbohydr. Polym. 9:103-117.
145. Piglas, J., Coates, K. D., and Armitt, J. D. G. (1988).
Malt inhomogeneity induced by kilning. In: Proc. Conv. Inst. 163. Vårum, K. M., Martinsen, A., and Smidsrød, O. (1991).
Brew. Aust. N.Z. Sect., 20th, Brisbane, pp. 81-85. Institute of Fractionation and viscometric characterization of a
Brewing, London, U.K. (1→3),(1→4)-β-D-glucan from oat, and universal calibration
of a high-performance size-exclusion chromatographic sys-
146. Pool, A. A., and Pollock, R. A. (1971). Wort viscosity tem by use of fractionated β-glucans, alginates and pullu-
control. British patent. Patent specification 1243368. lans. Food Hydrocoll. 5:363-374.

147. Poutanen, K. (1997). Enzymes: An important tool in the 164. Vårum, K. M., Smidsrød, O., and Brant, D. A. (1992).
improvement of the quality of cereal foods. Trends Food Sci. Light scattering reveals micelle-like aggregation in the (1-3),
Technol. 8:300-306. (1-4)-β-D-glucans from oat aleurone. Food Hydrocoll. 5:497-
511.
148. Rees, D. A. (1977). Polysaccharide Shapes. John Wiley
& Sons, New York. 165. Wagner, N. (1999). β-Glucan-differenz—Eine neue
kennzahl zur beurteilung der cytolytischen lösung von malz
149. Schildbach, R. (1998). The contribution of malting bar- (β-Glucan difference—A new characteristic value for evalu-
ley cultivars to rationalization of malting. Brauwelt 138:178- ating the cytolytic modification of malt). Brauwelt 139:204-
181, 184-185. 206.

150. Schur, F., Hug, H., and Pfenninger, H. (1974). Dextrins, 166. Wainwright, T. (1999). Enzymes in brewing. Ferment
β-glucans and pentosans in all-malt worts. In: Wort. Eur. 12:30-34.
Brew. Conv. Monogr. 1, pp. 150-157. Fachverlag Hans Carl,
Nürnberg, Germany 167. Whitear, T. (1997). Dealing with persistent hazes in
freshly filtered beer. Ferment 10:186-190.
151. Scott, R. W. (1972). The viscosity of worts in relation to
their content of β-glucan. J. Inst. Brew. 78:179-186. 168. Whitear, A., Maule, D. R., and Sharpe, F. R. (1983).
Methods of mash separation and their influence on wort
152. Scott, R. W. (1972). Solubilizations of β-glucans during composition and beer quality. In: Proc. Congr. Eur. Brew.
malting. J. Inst. Brew. 78:411-412. Conv. London 19:81-88. IRL Press at Oxford University
Press, Oxford, U.K.
153. Selvendran, R. R. (1983). The chemistry of plant cell
walls. In: Dietary Fibre, pp. 95-147. G. G. Birch and K. J. 169. Wikström, K., Lindahl, L., Andersson, R., and Wester-
Parker, Eds. Applied Science Publishers, London, U.K. lund, E. (1994). Rheological studies of water-soluble (1-

CERVEZA Y MALTA – 34 – XLII (4), 168, 2005, 23-35
3),(1-4)-β-D-glucans from milling fractions of oat. J. Food Sci. 176. Yalpani, M. (1988). Structure/property relationships. In:
5:1077-1080. Polysaccharides, Synthesis, Modifications and Structure Prop-
erty Relations, pp. 405-479. Elsevier Science Ltd., New York.
170. Wood, P. J., Weisz, J., Fedec, P., and Burrows, V. D.
(1989). Large-scale preparation and properties of oat fractions 177. Yamashita, H., Fujino, S., Aoyagi, S., Tsumura, Y.,
enriched in (1→3)(1→4)-β-D-glucan. Cereal Chem. 66:97-103. Hayase, F., and Kato, H. (1989). Characterization and mech-
anisms of formation of frozen beer precipitates. J. Am. Soc.
171. Wood, P. J., Weisz, J., and Blackwell, B. A. (1991). Mol- Brew. Chem. 47:77-81.
ecular characterization of cereal b-D-glucans. Structural 178. Yin, X.-S., and MacGregor, A. W. (1988). An approach
analysis of oat b-D-glucan and rapid structural evaluation of to the identification of a β-glucan solubilase from barley. J.
b-D-glucans from different sources by high-performance liq- Inst. Brew. 94:327-330.
uid chromatography of oligosaccharides released by
lichenase. Cereal Chem. 68:31-39. 179. Yin, X.-S., and MacGregor, A. W. (1989). Substrate
specificity and nature of action of barley β-glucan solubi-
172. Wood, P. J., Weisz, J., and Fedec, P. (1991). Potential lase. J. Inst. Brew. 95:105-109.
for β-glucan enrichment in brans derived from oat (Avena 180. Yomo, H., and Iinuma, H. (1964). The enzymes of the
sativa L.) cultivars of different (1→3),(1→4)-β-D-glucan con- aleurone layer of barley endosperm. Proc. Am. Soc. Brew.
centrations. Cereal Chem. 68:48-51. Chem., pp. 97-102.
173. Wood, P. J., Weisz, J., and Mahn, W. (1991). Molecular
characterization of cereal β-glucans. II. Size-exclusion chro- CURRICULUM VITAE
matography for comparison of molecular weight. Cereal
Chem. 68:530-536. El autor Alex Speers es profesor y director del Departamen-
to de Ciencia y Tecnología Alimentarias en la Universidad
174. Woodward, J. R., Phillips, D. R., and Fincher, G. B. de Dalhousie, Halifax, NS, Canadá, donde imparte las asig-
(1983). Water soluble (1→3), (1→4)-β-D-glucans from barley naturas de Ciencia de la Cervecería, Ciencias de la Alimen-
tación y Reología. El Dr. Speers se interesa actualmente en
(Hordeum vulgare) endosperm. I. Physicochemical proper-
la investigación de la química física del proceso de fabrica-
ties. Carbohydr. Polym.3:143-156.
ción de la cerveza, incluida la floculación de la levadura y
las propiedades de los polímeros de beta-glucano y arabi-
175. Woodward, J. R., Phillips, D. R., and Fincher, G. B. noxylano (y de los problemas creados por ellos). Ha orga-
(1988). Water soluble (1→3,1→4)-β-D-glucans from bar- nización y copresentado talleres sobre fabricación de cer-
ley (Hordeum vulgare) endosperm. IV. Comparison of veza en Changzhou, China (1997) y Toronto (2002).
40°C and 65°C soluble fractions. Carbohydr. Polym. 8:85-
97. E-mail: Alex.Speers@Dal.Ca

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