Procedimiento 1: Aislamiento de Zigomycetes Acuáticos.
Depositamos aproximadamente 15 ml de agua de charco o
acequia en una placa Petri estéril. Con ayuda de una pinza depositamos 2 a 3 carnadas (moscas), previamente cortadas en trozos pequeños y sometidos a una sumersión rápida en agua hirviendo, sobre la superficie del agua. Utilizamos un sólo tipo de carnada por placa. Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente. Para la observación microscópica recogemos con ayuda del asa de siembra y pinzas, la carnada que se encuentra recubierta por hifas y depositamos sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina. Cubrimos con una laminilla.
Procedimiento 2: Aislamiento de Zigomycetes Terrestres.-
Depositamos un pequeño trozo de estiércol sobre una placa de
agar papa dextrosa. Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente. Observamos en el microscopio.
Procedimiento 3: Aislamiento de Ascomycetes - Levaduriformes
Sembramos la bebida alcohólica (vino) en una placa de agar
extracto de lavadura-malta. incubamos a temperatura ambiente por 2 a 3 días. observamos la formación de colonias elevadas, opacas, grandes y bien definidas. Con el asa de siembra, recogimos parte de la colonia y depositarla sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina y cubrir con una laminilla. Observamos en el microscopio.
Procedimiento 4: Aislamiento de Deuteromycetes - Filamentosos
Con ayuda de una asa de siembra, depositamos una pequeña
porción de la muestra sobre un tubo con agar papa dextrosa. Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días. Procedimiento 5: Aislamiento de Deuteromycetes – Levaduriformes
Utilizamos un hisopo estéril, bien lavado y esterilizado en autoclave.
Frotamos la superficie de la piel (de preferencia planta y espacios interdigitales de los pies) enérgicamente en sentido circular. Estriamos el hisopo sobre un placa con agar Sabouraud glucosado más Cloramfenicol. incubamos a temperatura ambiente, sin invertir la placa, durante 48 horas. hicimos el estudio de las levaduras aisladas observadas en el microscopio.
Procedimiento 6: Aislamiento de Basidiomycetes – Levaduriformes
Identificamos los soros cerrados en plantas infectadas.
Abrimos el soro, con asa de siembra estéril, tomamos una muestra de las esporas y sembramos en una placa con agar extracto de malta. Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días. Observamos el desarrollo de colonias y resembrar el micelio en tubos con agar extracto de malta.