En terminos amplios, la endocitosis puede dividirse en dos categorias: la endocitosis por
volumen y la endocitosis mediada por receptor. La endocitosis por volumen (tambien conocida como pinocitosis) es la captacion inespecifi ca de liquidos extracelulares. Cualquier molecula, grande o pequena, que este presente en el liquido abarcado tambien entra a la celula. La endocitosis por volumen puede visualizarse con la adicion de una sustancia al medio de cultivo, como el tinte amarillo lucifer o la enzima peroxidasa del rabano picante que captan las celulas en forma inespecifi ca. La endocitosis por volumen tambien retira porciones de la membrana plasmatica y puede funcionar sobre todo en el reciclaje de membrana entre la superfi cie celular y los compartimientos interiores. En cambio, la endocitosis mediada por receptor se refi ere a la captacion de macromoleculas extracelulares especificas (ligandos) despues de su union con receptores en la superfi cie externa de la membrana plasmatica.
EXOCITOSIS:
La exocitosis es el proceso mediante el cual se secretan diferentes tipos de moléculas
contenidas en una vesícula citoplasmática de una célula al espacio extracelular, expresándose en todas las células eucariotas. La exocitosis implica la fusión de la membrana vesicular a la membrana plasmática, de manera calcio dependiente. La exocitosis se ha especializado grandemente en células secretoras y neuronas, es altamente regulable y se denomina exocitosis regulada. Posterior a la exocitosis la vesícula es recuperada por el mecanismo de endocitosis que también se ha especializado y es regulable en cierto tipo de células. La gemación de vesículas nuevas de diferentes compartimentos de la célula como el aparato de Golgi y el retículo endoplasmático también es un proceso constitutivo expresado en todas las células.
Hay que diferenciar la exocitosis regulada de la exocitosis constitutiva por la cual las
células transportan elementos de membrana y proteínas contínuamente a la membrana plasmática. Sin embargo hay muchos pasos en los cuales estos dos mecanismos se asemejan. RECEPTORES PARA LA ENDOCITOSIS
Las moleculas que capta una celula por endocitosis se mueven en una vía endocítica bien defi nida Antes de describir los fenomenos que ocurren en la via endocitica, vale la pena considerar dos tipos diferentes de receptores que estan sujetos a la endocitosis. Un grupo de receptores, al cual se le denomina “receptores domesticos”, es el encargado de la captacion de materiales que se utilizan en la celula. Los ejemplos mejor estudiados son los receptores para transferrina y lipoproteina de baja densidad (LDL), que median la entrega a las celulas del hierro y el colesterol, respectivamente. El receptor para LDL se describe con detalle al fi nal de esta seccion. El receptor de color rojo de la fi gura 8- 42 representa un receptor doméstico. Es el encargado de unir los ligandos extracelulares que llevan mensajes que cambian las actividades celulares. Estos ligandos, que incluyen hormonas como la insulina y factores de crecimiento como el EGF, se unen con el receptor de la superfi cie y emiten una senal para respuesta fi siologica dentro de la celula). La endocitosis del primer grupo de receptores casi siempre deriva en la entrega de los materiales unidos, como el hierro y el colesterol, a la celula, y el receptor regresa luego a la superfi cie celular para realizar mas rondas de captacion. La endocitosis del segundo grupo de receptores conduce a menudo a la destruccion del receptor, un proceso llamado regulación en descenso del receptor, y que tiene el efecto de reducir la sensibilidad de la celula a la estimulacion posterior por la hormona o factor de crecimiento. La regulacion en descenso del receptor es un mecanismo por el cual las celulas regulan su capacidad para responder a los mensajeros extracelulares. Los “receptores de senalizacion” casi siempre estan marcados para la endocitosis y destruccion ulterior por el enlace covalente con una “etiqueta” en la cola citoplasmica del receptor cuando aun esta en la superfi cie celular. La etiqueta es una pequena proteína llamada ubiquitina que se agrega por medios enzimaticos. Las proteinas de membrana que no se someten en forma usual a la endocitosis se interiorizan si llevan una ubiquitina adicional. VESÍCULAS DE TRANSPORTE VESÍCULAS CON CATRINA:
Proteína cuya función principal es recubrir las vesículas intracelulares. Está formada por tres cadenas pesadas y tres cadenas ligeras, que forman una estructura trirradiada desde un punto central. Median el trasporte selectivo de receptores transmembrana, en vesículas pinocíticas son pequeñas y uniformes, las vesículas de secreción son grandes.
VESÍCULAS CARENTES DE CLATRINA.
Intervienen en el traslado de proteínas desde el RE hasta el AG. El revestimiento de
estas vesículas consiste en parte en un gran complejo proteico llamado coatómero, formado por siete subunidades proteicas de revestimiento (llamadas COP, de coat protein). Por 10 menos una de ellas presenta homología de secuencia con las adaptinas de las vesículas revestidas de clatrina, pero difieren estructuralmente de esta última.
ESTRUCTURA DE LA CUBIERTA DE CLATRINA
La clatrina es un complejo proteico formado por tres cadenas ligeras y tres cadenas pesadas que constituyen una unidad llamada "el triesqueleto" (triskelion) de clatrina. Este complejo es reclutado a la membrana plasmática por proteínas adaptadoras. Una de estas proteínas adaptadoras, es el complejo AP-2, formado por cuatro subunidades (α, β2, µ2 y σ2). El complejo AP- 2 interactúa con clatrina, a través de la subunidad β2, y estimula su polimerización generando una malla de clatrina que cubre la vesícula. Durante el ensamble progresivo de clatrina en la membrana, ésta va adquiriendo curvatura hasta que se forma la vesícula endocítica. La fisión de la vesícula cubierta con clatrina es controlada por la GTPasa dinamina. Se ha propuesto que la dinamina actúa como una mecano-enzima la cual usa la hidrólisis de GTP para generar la fuerza necesaria para estrangular el cuello y escindir las vesículas de la membrana.
Normalmente las vesículas pinocíticas revestidas de clatrina son de tamaño pequeño y
uniforme pero la Catrina Está implicada también en la formación de vesículas mayores por ejemplo en vesículas de secreción que contienen grandes agregados de proteínas PASOS Y COMPONENTES EN LA FORMACIÓN DE VESÍCULAS
Pasol:
El ensamblaje es disparado cuando una proteína que une GTP, una GTPasa monomérica (GTP binding protein) denominada ARF (ADP ribosy1ation factor) u otra relacionada que posee una cola de ácido graso (Ac. mirístico), es activada por unión a GTP. La ARF citosó1ica está unida a GDP y el intercambio por GTP es un proceso catalizado por una proteína denominada GNEF o GNRF( guanine nucleotide exchange/re1easing factor)localizada en la membrana.
Paso2:
El brote se desarrolla y se cierra por la adición de Acy1 CoA (pa1mitoy1 coenzima A)
en las proteínas cap y por la acción de la GTPasa dinamina (se cree que actúa como un anillo que estrangula la zona de unión del brote a la membrana dejando la vesícula libre) en las cubiertas de clatrina.
Paso3:
ARF es inactivada al hidro1izarse el GTP unido, por acción de una GAP (GTPasa activating protein) que libera Pi a partir del nucleótido, produciendo GDP-ARF.
Paso4:
La ARF inactivada se disocia de la membrana dejando una vesícula cubierta. En el caso
de las cubiertas por coatómero (Cap), estas proteínas se disocian inmediatamente después de ARF, ya que las vesículas cubiertas libres de la GTPasa monomérica no son observadas ordinariamente. Los trisquelions de clatrina son subsecuentemente liberados de las vesículas.
Paso 5:
Así, las cubiertas proteicas son rápidamente disociadas, dejando la vesícula preparada para la fusión con la membrana receptora específica. Las proteínas cap persisten en el citoplasma como el ensamble soluble llamado coatómero (combinación estequiométrica de proteínas Cap) hasta un próximo reclutamiento de cubierta.
