Papel de la tecnología de ADN recombinante para mejorar la vida

En el siglo pasado, la tecnología del ADN recombinante era solo una imaginación de que las
características deseables pueden mejorarse en los cuerpos vivos controlando las expresiones
de genes objetivo. Sin embargo, en la era reciente, este campo ha demostrado impactos
únicos. en traer avance en la vida humana. En virtud de esta tecnología, las proteínas cruciales
necesarias para los problemas de salud y dietéticos Los propósitos se pueden producir de
forma segura, asequible y suficiente. Esta tecnología tiene aplicaciones multidisciplinarias y
potencial para lidiar con aspectos importantes de la vida, por ejemplo, mejorar la salud,
mejorar los recursos alimentarios y la resistencia a los efectos adversos divergentes efectos
ambientales. Particularmente en la agricultura, las plantas genéticamente modificadas han
aumentado la resistencia a los agentes nocivos, mejor rendimiento del producto y mayor
adaptabilidad para una mejor supervivencia. Además, los productos farmacéuticos
recombinantes son ahora siendo utilizado con confianza y rápidamente logrando
aprobaciones comerciales. Técnicas de tecnología de ADN recombinante, terapia génica, y
las modificaciones genéticas también se usan ampliamente con el propósito de la
biorremediación y el tratamiento de enfermedades graves. Debido a tremenda avance y
amplia gama de aplicaciones en el campo de la tecnología de ADN recombinante, este
artículo de revisión se centra principalmente en su importancia y las posibles aplicaciones en
la vida diaria.
1. Introducción
La vida humana se ve muy afectada por tres factores: la deficiencia de alimentos, problemas
de salud y problemas ambientales. Comida y la salud son requisitos humanos básicos además
de una limpieza y ambiente seguro. Con el aumento de la población mundial en A mayor
velocidad, los requerimientos humanos de alimentos son rápidamente creciente. Los
humanos requieren alimentos seguros a un precio razonable. Varios problemas de salud
relacionados con humanos en todo el mundo causan Gran cantidad de muertes.
Aproximadamente 36 millones de personas. mueren cada año de no transmisibles y
comunicables enfermedades, como enfermedades cardiovasculares, cáncer, diabetes, SIDA /
VIH, tuberculosis, malaria y muchos otros según http://GlobalIssues.org/. A pesar de los
grandes esfuerzos siendo hecho, la producción mundial actual de alimentos es mucho
menores que los requisitos humanos, y las instalaciones de salud son incluso por debajo del
estándar en los países del tercer mundo. Rápido aumento de la industrialización se ha
disparado el medio ambiente La contaminación y los desechos industriales pueden mezclarse
directamente con agua, que ha afectado a los marines acuáticos e, indirectamente, seres
humanos. Por lo tanto, estos problemas urgen ser abordados a través de tecnologías
modernas.
A diferencia de los enfoques tradicionales para superar la agricultura, problemas de salud y
ambientales a través de la cría, medicinas tradicionales y degradación de contaminantes a
través de técnicas convencionales, respectivamente, la ingeniería genética utiliza
herramientas y enfoques modernos, como el molecular clonación y transformación, que
consumen menos tiempo y producir productos más confiables. Por ejemplo, comparado a la
cría convencional que transfiere una gran cantidad de genes específicos y no específicos para
el receptor, genéticos la ingeniería solo transfiere un pequeño bloque de genes deseados a el
objetivo a través de diversos enfoques, como biolísticos y Transformación mediada por
Agrobacterium [1]. La alteración en los genomas de las plantas es traído ya sea por la
orientación de genes dependientes de recombinación homóloga o por mediación de nucleasa
modificación del genoma específica del sitio. Recombinasa mediada integración genómica
específica del sitio y oligonucleótido dirigido La mutagénesis también se puede utilizar [2].
La tecnología de ADN recombinante desempeña un papel vital en mejorar las condiciones
de salud mediante el desarrollo de nuevas vacunas y productos farmacéuticos También se
mejoran las estrategias de tratamiento mediante el desarrollo de kits de diagnóstico,
dispositivos de monitoreo y nuevos enfoques terapéuticos Síntesis de insulina humana
sintética y eritropoyetina por bacterias genéticamente modificadas [3] y producción de
nuevos tipos de ratones mutantes experimentales para Los propósitos de investigación son
uno de los principales ejemplos de genética ingeniería en salud. Asimismo, se han empleado
estrategias de ingeniería genética para abordar los problemas ambientales. como la
conversión de desechos en biocombustibles y bioetanol [4–7], limpiar los derrames de
petróleo, carbono y otros desechos tóxicos, y Detección de arsénico y otros contaminantes
en el agua potable. Los microbios genéticamente modificados también se usan efectivamente
en biominería y bioremediación.
El advenimiento de la tecnología de ADN recombinante revolucionó el desarrollo en biología
y condujo a una serie de cambios dramáticos. Ofreció nuevas oportunidades para
innovaciones para producir una amplia gama de productos terapéuticos con inmediato efecto
en la genética médica y la biomedicina modificando microorganismos, animales y plantas
para producir médicamente útil sustancias [8, 9]. La mayoría de los productos farmacéuticos
biotecnológicos son recombinante en la naturaleza que juega un papel clave contra los
humanos enfermedades letales Los productos farmacéuticos sintetizados a través de la
tecnología de ADN recombinante, completamente cambiado la vida humana de tal manera
que los alimentos y La Administración de Medicamentos (FDA) aprobó más recombinante
drogas en 1997 que en los años anteriores combinados, que incluye anemia, SIDA, cánceres
(sarcoma de Kaposi, leucemia y cáncer colorrectal, de riñón y de ovario), trastornos
hereditarios (fibrosis quística, hipercolesterolemia familiar, enfermedad de Gaucher,
hemofilia A, combinada grave enfermedad de inmunodeficiencia y síndrome de Turnor),
diabético úlceras del pie, difteria, verrugas genitales, hepatitis B, hepatitis C, deficiencia de
la hormona del crecimiento humano y esclerosis múltiple. Teniendo en cuenta que las plantas
desarrollan transferencia multigénica, integración específica del sitio y expresión génica
específicamente regulada son enfoques avanzados cruciales [10]. Regulación transcripcional
de genes endógenos, su efectividad en el nuevo ubicaciones y el control preciso de la
expresión transgénica son grandes desafíos en biotecnología vegetal que necesitan más
desarrollos para que puedan ser utilizados con éxito [11].
La vida humana está muy amenazada por varios factores, como limitaciones alimentarias que
conducen a la desnutrición, diferentes tipos de enfermedades letales, problemas ambientales
causados por la dramática industrialización y urbanización y muchos otros. La ingeniería
genética ha reemplazado las estrategias convencionales y tiene el mayor potencial para
superar tales desafíos. La revisión actual resume los principales desafíos encontrado por los
humanos y aborda el papel de la tecnología de ADN recombinante para superar los problemas
antes mencionados. En línea con esto, hemos detallado las limitaciones de la genética.
ingeniería y posibles direcciones futuras para investigadores superar tales limitaciones a
través de modificaciones en las estrategias actuales de ingeniería genética.
2. Tecnología de ADN recombinante
La tecnología de ADN recombinante comprende alteraciones genéticas material fuera de un
organismo para obtener mejor y deseado características en organismos vivos o como sus
productos. Esta La tecnología implica la inserción de fragmentos de ADN de una variedad
de fuentes, que tienen una secuencia de genes deseable a través de vector apropiado [12].
Manipulación en el genoma del organismo. se lleva a cabo mediante la introducción de uno
o varios genes nuevos y elementos reguladores o disminuyendo o bloqueando la expresión
de genes endógenos a través de recombinando genes y elementos [13]. La escisión enzimática
es aplicada para obtener diferentes fragmentos de ADN usando restricción endo-nucleasas
para sitios de ADN de secuencia diana específica seguidas de actividad de ADN ligasa para
unir los fragmentos para fijar el gen deseado en el vector. El vector luego se introduce en un
organismo huésped, que se cultiva para producir múltiples copias del fragmento de ADN
incorporado en cultivo, y finalmente Se seleccionan los clones que contienen un fragmento
de ADN relevante y cosechado [11]. El primer ADN recombinante (ADNr) Las moléculas
fueron generadas en 1973 por Paul Berg, Herbert Boyer, Annie Chang y Stanley Cohen de
la Universidad de Stanford y la Universidad de California en San Francisco. En 1975 durante
la regulación de "La Conferencia de Asilomar" y el uso seguro de Se discutió la tecnología
de ADNr. Paradójicamente a la vista de científicos en el momento de Asilomar, el ADN
recombinante métodos para fomentar la agricultura y el desarrollo de drogas tomaron más de
lo previsto debido a dificultades inesperadas y barreras para lograr resultados satisfactorios.
Sin embargo, desde el mediados de la década de 1980, la cantidad de productos como
hormonas, vacunas, Se han desarrollado agentes terapéuticos y herramientas de diagnóstico.
continuamente para mejorar la salud [13].
La tecnología de ADN recombinante ofrece un enfoque rápido para analizar la expresión
genética de las mutaciones que fueron introducidos en genes eucariotas a través de clonados
Inserción de genes de insulina dentro de un fragmento de virus simio [3]. De manera similar,
el crecimiento del tumor fue inhibido por el vector adenoviral que codifica la forma secretora
del endostain humano a través de efectos antiangiogénicos. El efecto antiangiogénico puede
ser mejorado por dl1520 mediante el rescate de la replicación de Ad-Endo [14] La disrupción
genética dirigida se ha utilizado para producir derivados antitumorales en otros anfitriones
que eran estructuralmente similar para las vías de producción [15]. Además, por más tiempo
Se han desarrollado proteínas terapéuticas de acción a través de tecnologías de ADN
recombinante; por ejemplo, secuencias que contienen sitios de glucosilación adicionales son
uno de los más enfoques seguidos Se ha desarrollado un nuevo gen quimérico a través de
esta técnica que contiene el FSH 𝛽-secuencias de codificación de subunidades y el péptido
C-terminal de la Secuencias de codificación de la subunidad C de hCG [16]. Los
investigadores también tienen vectores desarrollados y vectores combinados para terapia
génica y Enfoques de modificación genética. Actualmente, los vectores virales tienen
recibido gran consideración en entornos clínicos, algunos de que también han sido
comercializados. En principio, virus están modificados para ser seguros para fines clínicos.
Tienen varias aplicaciones que incluyen el tratamiento de enfermedades graves que incluyen
cáncer a través de terapia in vivo o génica (ex vivo), vacunación y enfoques de transducción
de proteínas [17]. Los la producción de mejora de vectores virales de grado clínico tiene ser
posible debido a las tecnologías de fabricación avanzadas [18] En la actualidad, debido a los
efectos adversos graves, retrovirales los vectores están perdiendo importancia, aunque las
entidades virales transfieren genes de forma rápida y correcta a varias especies. El sistema
de administración de genes no virales más simple utiliza "desnudo" ADN, cuando se inyecta
directamente en ciertos tejidos, particularmente músculos, produce niveles significativos de
expresión génica con menos efectos secundarios [19]. Más recientemente, un vector P1 ha
sido diseñado para introducir el ADN recombinante en E. coli mediante procedimientos de
electroporación. Este nuevo sistema de clonación se usa para establecer 15,000 bibliotecas
de clones inicialmente en promedio Tamaño de inserción de pares de 130-150 kb. Se
considera el sistema de clonación PAC útil para el análisis del genoma complejo y en el
mapeo [20]. La construcción de vectores de bajo número de copias, por ejemplo, Se llevó a
cabo pWSK29, pWKS30, pWSK129 y pWKS130. utilizando PCR y tecnología de ADN
recombinante. Estos vectores también se pueden usar para generar deleciones
unidireccionales con exonucleasa, análisis de complementación, secuenciación de ADN, y
transcripción de segunda vuelta [21]. Una amplia gama de aplicaciones. de la tecnología de
ADN recombinante se ha resumido en Figura 1.

Figura 1: Ilustración de varias aplicaciones de la tecnología de ADN recombinante.

3. Progreso actual de la investigación
La tecnología de ADN recombinante es un campo de rápido crecimiento y investigadores de
todo el mundo están desarrollando nuevos enfoques, dispositivos y productos de ingeniería
para su aplicación en diferentes sectores como agricultura, salud y medio ambiente. Por
ejemplo, Lispro (Humalog), en comparación con regular insulina humana, es un
recombinante bien efectivo y de acción rápida insulina [3]. De manera similar, la epoetina
alfa es una proteína recombinante novedosa y bien reconocida que se puede usar de manera
efectiva en la curación de la anemia [22]. Se encontró hGH recombinante con una gran
mejora en el tratamiento de niños que carecen de capacidad de producir hGH en una cantidad
requerida. Pruebas clínicas aprobación de la FDA en diciembre de 1997 para un
recombinante La versión del factor inhibidor del progenitor mieloide de citocinas1 (MPIF-
1) fue un logro para reconocer esto tecnología. Con su ayuda, los efectos secundarios del
medicamento contra el cáncer pueden ser mitigado mientras que tiene la capacidad de imitar
la división de células inmunológicamente importantes [23, 24]. El seguimiento La sección
resume los desarrollos más recientes de la tecnología de ADN recombinante.
Agrupadas repeticiones palindrómicas cortas entre espacios regularmente (CRISPR), un
desarrollo más reciente de ADN recombinante tecnología, ha traído soluciones a varios
problemas en diferentes especies Este sistema puede usarse para apuntar destrucción de genes
en células humanas. Activación, supresión, adición y eliminación de genes en células
humanas, ratones, ratas, pez cebra, bacterias, moscas de la fruta, levadura, nematodos y
cultivos demostró que la técnica es prometedora. Los modelos de mouse pueden ser
administrado para estudiar enfermedades humanas con CRISPR, donde el estudio de genes
individuales se vuelve mucho más rápido y el los estudios de interacciones de genes se
vuelven fáciles cambiando múltiples genes en las células [25]. El CRISPR del genoma de H.
hispánica es capaz de adaptarse muy bien a los virus no líticos eficientemente. El operón Cas
asociado codifica la interferencia Cas3 nucleasas y otras proteínas Cas. La ingeniería de cepa
se requiere con cebado CRISPR para cebado Producción de CRRNAs y aceptación de nuevos
separadores. CRISPR-cas el sistema tiene que integrar nuevos espaciadores en su lugar para
adaptarse generación de inmunidad [26]. Reconocimiento de ADN / ARN extraño y su
escisión es un proceso controlado en secuencia específica conducta. Información relacionada
con el material genético del intruso es almacenado por el sistema host con la ayuda de photo-
spacer incorporación al sistema CRISPR [27]. Cas9t (gen herramienta de edición) representa
las endonucleasas de ADN que usan ARN moléculas para reconocer objetivo específico [28].
El sistema CRISPRCas de clase 2 con efectores de proteínas individuales puede emplearse
para procesos de edición del genoma. Dead Cas9 es importante para la histona modificación
del reclutamiento de enzimas, represión transcripcional, localización de etiquetas de
proteínas fluorescentes y transcripcionales activación [29]. Orientación de genes implicados
en homocigotos El proceso de aislamiento de genes inactivados se lleva a cabo mediante
mutaciones inducidas por CRISPR. De esta manera, los genes esenciales pueden ser
analizado, que a su vez se puede utilizar para "potencial antifúngico objetivos "exploración
[30]. Inmunidad natural CRISPR-cas la explotación se ha utilizado para generar cepas que
son resistente a diferentes tipos de virus disruptivos [31].
CRISPR-Cas, el único sistema inmune adaptativo en procariotas, contiene locus genómico
conocido como CRISPR que tiene elementos repetitivos cortos y espaciadores (secuencias
únicas). La matriz CRISPR está precedida por una secuencia líder rica en AT y flanqueado
por genes cas que codifican proteínas Cas [32, 33]. En Escherichia coli, las catalasas cas1 y
cas2 promueven nuevos separadores a través de formaciones complejas. Foto-espaciador
adyacente Se requiere motivo (PAM) para interferencia y adquisición porque la selección de
secuencia objetivo no es aleatoria. Los la memorización de la secuencia del invasor comienza
después de CRISPR transcripción de matriz en precursor largo ARNcr. Durante las etapas
finales del proceso de inmunidad, el objetivo se degrada a través de interferencia con ácidos
nucleicos invadidos. Reconocimiento específico evita que el sistema se apunte a sí mismo
[32, 34]. En diferentes especies de Sulfolobus, los loci CRISPR contienen múltiples
espaciadores cuya secuencia coincide significativamente con los plásmidos conjugativos,
mientras que en algunos casos los plásmidos conjugativos también contienen pequeños loci
CRISPR. La adquisición del espaciador se ve afectada por replicación activa del ADN viral
en especies de Sulfolobus mientras que el ADN rompe la formación en las horquillas de
replicación provoca la proceso para ser estimulado [35]. Según la información anterior, el
sistema CRISPR-Cas ha obtenido una posición única en sistemas biológicos avanzados
debido a su tremendo papel en la estabilidad y mejora de la inmunidad.
Las nucleasas de dedos de zinc (ZFN) y las nucleasas efectoras activadoras de la
transcripción (TALEN) son nucleasas quiméricas compuestas de uniones de ADN
programables y específicas de secuencia módulos vinculados a un dominio de escisión de
ADN inespecífico. El potencial terapéutico de ZFN y TALEN es más específico y dirigido
[25, 36, 37]. Del mismo modo, fibroblastos proteicos recombinantes Se ha desarrollado un
factor de crecimiento (FGF-1) que funciona en induciendo la formación de nuevos vasos
sanguíneos en el miocardio. Su inyección (derivación biológica) en un miocardio humano
causar un aumento del suministro de sangre al corazón. Apligraf, un Producto aprobado por
la FDA, que sirve como piel recombinante El sustituto, especificado para el tratamiento de
la úlcera de pierna y DermaGraft, es eficaz en el tratamiento de las úlceras diabéticas [38-
40]. Después de la producción exitosa de insulina de E. coli a través de tecnología de ADN
recombinante, actualmente varios animales, especialmente ganado y cerdos, han sido
seleccionados como fuente de producción de insulina, lo que, sin embargo, desencadenó
respuestas inmunes. Los la insulina humana recombinante es idéntica a la porcina humana
insulina y comparativamente infrecuentemente provoca inmunogénicas respuestas, Además,
es más asequible y puede satisfacer las necesidades médicas más fácilmente. Hormona del
crecimiento humano fue la primera proteína expresada en plantas de tabaco [41, 42].
Además de la insulina, varios medicamentos nuevos relacionados con recombinantes La
tecnología del ADN ha experimentado mejoras en el desarrollo y se han implementado varios
sistemas de producción de proteínas. desarrollado. Varias cepas microbianas de ingeniería
han sido desarrollado para llevar a cabo la formulación de fármacos [41, 43, 44]. Formación
de medicina molecular que se basa específicamente en las proteínas se enfrentan a problemas
graves, incluidos los métodos y la biología de las células que funcionan para producir
compuestos médicamente importantes a través de técnicas de ADN recombinante. A Superar
estos obstáculos, hay una intensa necesidad de mejorar calidad y cantidad de medicamentos
basados en un molecular fenómeno. Las fábricas de células se consideran importantes en
tecnologías de ADN recombinante, pero estas debían ser explorado con más detalles y en
profundidad como el convencional las fábricas no satisfacen las necesidades [42]. Del mismo
modo, el El factor de crecimiento endotelial y la señalización de Notch se utilizaron para
ingeniero adenovirus oncolítico que actúa como un cáncer de mama agente selectivo para la
expresión del antagonista. Esto además a través de la alteración de la angiogénesis tumoral
actúa como anticancerígeno agente. Esto disminuye el número total de vasos sanguíneos y
provoca un cambio dramático junto con los vasos perfundidos que indica la eficacia mejorada
contra el tumor y efectos vasculares [13]. Se han realizado esfuerzos para modificar el
genoma del virus de la influenza utilizando tecnología de ADN recombinante para el
desarrollo de vacunas. Las modificaciones están basadas sobre ingeniería de vectores para la
expresión de genes extraños. En en la práctica, el gen NS del virus de la influenza fue
reemplazado por gen extraño, comúnmente cloranfenicol acetiltransferasa gen.
Posteriormente, el ARN previamente recombinado se expresa y empaquetado en partículas
de virus después de la transfección con virus de influenza A purificado en presencia de virus
auxiliar. Eso Se ha aclarado que el terminal 5󸀠 y las bases del terminal 3󸀠 son suficientes
del ARN del virus de la influenza A para producir señales para replicación de ARN,
transcripción de ARN y empaquetamiento de ARN en virus de la gripe [15]. Además de la
insulina, varios medicamentos nuevos relacionados con recombinantes La tecnología del
ADN ha experimentado mejoras en el desarrollo y se han implementado varios sistemas de
producción de proteínas. desarrollado. Varias cepas microbianas de ingeniería han sido
desarrollado para llevar a cabo la formulación de fármacos [41, 43, 44]. Formación de
medicina molecular que se basa específicamente en las proteínas se enfrentan a problemas
graves, incluidos los métodos y la biología de las células que funcionan para producir
compuestos médicamente importantes a través de técnicas de ADN recombinante. A Superar
estos obstáculos, hay una intensa necesidad de mejorar calidad y cantidad de medicamentos
basados en un molecular fenómeno. Las fábricas de células se consideran importantes en
tecnologías de ADN recombinante, pero estas debían ser explorado con más detalles y en
profundidad como el convencional las fábricas no satisfacen las necesidades [42]. Del mismo
modo, el factor de crecimiento endotelial y la señalización de Notch se utilizaron para
ingeniero adenovirus oncolítico que actúa como un cáncer de mama agente selectivo para la
expresión del antagonista. Esto además a través de la alteración de la angiogénesis tumoral
actúa como anticancerígeno agente. Esto disminuye el número total de vasos sanguíneos y
provoca un cambio dramático junto con los vasos perfundidos que indica la eficacia mejorada
contra el tumor y efectos vasculares [13]. Se han realizado esfuerzos para modificar el
genoma del virus de la influenza utilizando tecnología de ADN recombinante para el
desarrollo de vacunas. Las modificaciones están basadas sobre ingeniería de vectores para la
expresión de genes extraños. En en la práctica, el gen NS del virus de la influenza fue
reemplazado por gen extraño, comúnmente cloranfenicol acetiltransferasa gen.
Posteriormente, el ARN previamente recombinado se expresa y empaquetado en partículas
de virus después de la transfección con virus de influenza A purificado en presencia de virus
auxiliar. Eso Se ha aclarado que el terminal 5´ y las bases del terminal 3´ son suficientes del
ARN del virus de la influenza A para producir señales para replicación de ARN, transcripción
de ARN y empaquetamiento de ARN en virus de la gripe [15].
Los nuevos sistemas de producción mencionados anteriormente mejoran tuberías para el
desarrollo de varias vacunas y medicamentos Etcétera. La producción de proteínas de alta
calidad depende sobre fisiología de una célula y las condiciones proporcionadas a eso. La
expresión de proteínas se retrasa si una célula pasa bajo condiciones estresantes, lo que
también puede favorecer producción en algunos casos. Por lo tanto, las mejoras adicionales
son requerido para la producción mejor y segura en genética y niveles metabólicos. Los
microorganismos se consideran anfitriones más convenientes para producir medicamentos
moleculares. Estas células permiten la incorporación de genes extraños con Las barreras y la
expresión menos resistentes se controlan fácilmente. En comparación con las células de
plantas y mamíferos para ser tomadas como hosts, los sistemas microbianos proporcionan
maquinaria menos complicada que en última instancia mejora el rendimiento y la calidad de
producción de proteínas El uso de especies microbianas comunes, incluyendo bacterias y
levaduras, es prometedor, pero cuanto menos Las cepas comunes también se han observado
prometedoras como siendo fábricas celulares para producir moléculas moleculares
recombinantes drogas Las crecientes demandas de drogas y las necesidades. de calidad puede
lograrse con mejores resultados si estas fábricas celulares de microorganismos se incorporan
a procesos productivos de productos farmacéuticos (cuadro 1) [41, 45, 46].

Tabla 1: Métodos actuales de ensamblaje de ADN para la síntesis de grandes moléculas de

ADN. La tabla ha sido reproducida de Nature reviews 14: 781–793, con permiso de Nature
Publishing Group
 4. Aplicaciones de recombinante Tecnología de ADN
4.1. Comida y Agricultura. La tecnología de ADN recombinante tiene usos principales que
hicieron la fabricación de nuevas enzimas posibles que son adecuadas en condiciones para el
procesamiento de alimentos especificado. Varias enzimas importantes, incluidas las lipasas
y las amilasas están disponibles para las producciones específicas porque de sus roles y
aplicaciones particulares en las industrias alimentarias. La producción de cepas microbianas
es otro gran logro eso se hizo posible con la ayuda de la tecnología de ADN recombinante.
Se han desarrollado varias cepas microbianas. que producen enzimas mediante ingeniería
específica para la producción de proteasas. Se han modificado ciertas cepas de hongos para
que su capacidad de producir materiales tóxicos pueda ser reducido [47]. Las lisozimas son
los agentes efectivos para deshacerse de bacterias en las industrias alimentarias. Previenen la
colonización de organismos microbianos. Es un agente adecuado para alimentos. incluyendo
frutas, verduras, queso y carne para almacenar como aumenta su vida útil. La inhibición del
deterioro de los alimentos. los microorganismos pueden llevarse a cabo a través de
inmovilizados lisozima en películas de alcohol polivinílico y celulosa. Lisozima La
impregnación de geles de piel de pescado aumenta la vida útil de productos alimenticios e
inhiben diferentes alimentos que echan a perder las bacterias crecimiento [48-50].
Exopolisacáridos de Staphylococcus y E. coli puede hidrolizarse con el uso de DspB que es
Diseñado a partir de T7. Esta habilidad de DspB causa una declinación en la población
bacteriana [50]. Biopelículas relacionadas con alimentos las industrias pueden ser eliminadas
por la actividad combinada de serina proteasas y amilasas [51]. S. aureus, Salmonella
infantis, Clostridium perfringens, B. cereus, Campylobacter jejuni, L. monocytogenes,
Yersinia enterocolitica y algunos otros alimentos La glucosa oxidasa puede inhibir el
deterioro de los microorganismos. También se considera una de las enzimas más importantes
en industria alimentaria para matar una amplia gama de patógenos transmitidos por los
alimentos [50]. La derivación de proteínas recombinantes que se utilizan como productos
farmacéuticos entró en práctica desde la primera planta recientemente y muchos otros se
utilizarán para una mayor producción de proteínas similares médicamente importantes [52].
Se ha expresado una amplia gama de proteínas recombinantes. en diferentes especies de
plantas para ser utilizadas como enzimas en industrias, Algunas proteínas utilizadas
principalmente en la investigación son proteínas presentes en la leche que juegan un papel
en la nutrición, y nuevos polímeros Las proteínas se utilizan en las industrias y el campo
médico. [52] Con la invención de la producción de la vacuna contra el VHB en plantas, el
concepto de vacunación oral con plantas comestibles tiene ganó popularidad. Las plantas se
han utilizado para producir varios Productos proteicos terapéuticos, como la caseína y la
lisozima. para mejorar la salud del niño y los polímeros de proteínas para reemplazo de
tejidos y cirugía. Además, las plantas de tabaco. se puede diseñar genéticamente para
producir colágeno humano. Las proteínas moleculares de alto rendimiento son una de las
principales tareas. bajo consideración en el campo de la tecnología de ADN recombinante
[52] Locus de cría tradicional y comercio cuantitativo (QTL) El análisis ayudó a identificar
una variedad de arroz con proteína quinasa conocida como PSTOL1 (inanición de fósforo
tolerancia1) ayuda a mejorar el crecimiento de las raíces en las primeras etapas y tolera la
deficiencia de fósforo [53]. Sobreexpresión de esta enzima permite que la raíz absorba
nutrientes en una cantidad suficiente en suelos con deficiencia de fósforo que finalmente
mejora el rendimiento de grano [54]. Secuencias del genoma del cloroplasto son importantes
en la evolución de las plantas y la filogenia. Rpl22 es se considera transferido de cloroplasto
a nuclear genoma Este gen contiene un péptido que juega un papel en suministro de proteína
del citosol al cloroplasto. Un numero Se han observado genes importantes eliminados del
cloroplasto para ser transferido al núcleo, excepto ycf1 y ycf2, en orden para evitar
interrupciones en la fotosíntesis y otras necesarias procesos. La transgénesis en cloroplasto
se considera estable como las plantas transgénicas nucleares enfrentan los problemas de baja
expresión y transgen escape a través del polen. Casi diez mil copias de transgenes se han
incorporado a El genoma del cloroplasto [55-57]. La expresión transgénica es dependiente
de secuencias reguladoras heterólogas pero independiente del control celular. T7gene10
ingeniería contra sal el estrés se ha encontrado exitoso pero con menor expresión tasa en
tejidos no verdes. La inserción del gen 𝛾-tmt en el genoma del cloroplasto da como resultado
la formación de múltiples capas del interior Sobre de cloroplasto. Introducción de genes de
licopeno 𝛽-ciclasa en el genoma plástido del tomate mejora el licopeno conversión en
provitamina A [57, 58].
La identificación de genes específicos de órganos o tejidos puede llevarse a través de perfiles
de expresión génica. ADNc con longitudes completas son los principales recursos para la
expresión de perfiles de genes. 44 K El microarray de oligonucleótidos de Agilent se utiliza
para el cultivo en campo. análisis de transcriptoma de arroz. Fluctuación de expresión génica
y la dinámica del transcriptoma se puede predecir mediante transcriptómica datos e
información meteorológica. Estos procesos y Las predicciones son útiles para mejorar la
producción de cultivos y resistencia a tensiones ambientales o microbianas. Se puede mejorar
la resistencia a las infecciones fúngicas y bacterianas. por el gen WRKY45 en arroz que es
inducido por el activador de la planta benzotiadiazol que activa el sistema inmune innato de
planta. El tamaño de grano más grande se puede lograr insertando qSW5 gene. qSH1 provoca
la pérdida de semillas que se rompen al evitar que formación de capas de abscisión. El gen
Kala4 es responsable de color negro del arroz que lo hace resistente al ataque patógenos [59,
60]. La modificación genética es necesaria para facilitar la introducción gen por gen de
caracteres conocidos. Eso permite el acceso a una amplia gama de genes de un organismo.
Papa, frijoles, berenjenas, remolacha azucarera, calabaza y muchos otros las plantas se están
desarrollando con caracteres deseables, para ejemplo, tolerancia del herbicida glifosato,
resistencia a insectos, resistencia a la sequía, enfermedades y tolerancia a la sal. Utilización
de nitrógeno, maduración y versatilidad nutricional como los personajes también se han
mejorado [61].
4.2. Salud y Enfermedades. Tecnologia de ADN recombinante tiene un amplio espectro de
aplicaciones en el tratamiento de enfermedades y mejorando las condiciones de salud. Las
siguientes secciones describen Los avances importantes de la tecnología de ADN
recombinante para la mejora de la salud humana:
4.2.1 Terapia de genes. La terapia génica es una técnica avanzada. con potencial terapéutico
en los servicios de salud. El primer informe exitoso en el campo de la terapia génica para
tratar una enfermedad genética proporcionó una dirección más segura para curar a las más
mortales enfermedades genéticas [62, 63]. Esta estrategia muestra una buena respuesta. en el
tratamiento de la deficiencia de adenosina desaminasa (ADA-SCID), que es una
inmunodeficiencia primaria. En el comienzo de esta tecnología, varios desafíos que incluyen
mantenimiento de pacientes con ADA PEGilada (PEG-ADA) durante la terapia génica y la
focalización de la transferencia génica a Los linfocitos T fueron las razones de los resultados
fallidos [64, 65]. Sin embargo, más tarde se obtuvieron resultados exitosos atacando a las
células madre hematopoyéticas (HSC) usando un protocolo mejorado de transferencia génica
y un mieloablativo régimen de acondicionamiento [66].
Adrenoleucodistrofia (X-ALD) y trastorno ligado a X son posibles mediante la expresión de
genes específicos transferido por vector lentiviral, basado en VIH-1 [67]. La expresión de la
proteína XALD indica que la corrección génica de Los HSC verdaderos se lograron con éxito.
El uso del vector lentiviral tuvo éxito por primera vez para tratar enfermedad genética
humana [68]. Melanoma metastásico fue tratado a través de la inmunoterapia al mejorar las
proteínas específicas expresión durante 2006. Este éxito en el campo de la salud las ciencias
abrieron nuevas puertas para ampliar la investigación para tratar muerte grave que causa
enfermedades a través de la inmunoterapia [69]. Niveles altamente sostenidos de células que
fueron diseñadas para tumor reconocimiento en sangre usando un retrovirus que codifica una
célula T receptor en dos pacientes hasta 1 año después de la infusión resultante en regresión
de lesiones de melanoma metastásico. Esta estrategia luego se usó para tratar pacientes con
células sinoviales metastásicas carcinoma [70]. Las células T autólogas fueron modificadas
genéticamente para expresar un receptor de antígeno quimérico (CAR) con especificidad para
el antígeno de células B CD19 para el tratamiento de la enfermedad crónica leucemia
linfocítica Las células genéticamente modificadas se someten expansión selectiva para
enfermedades como SCID-X1 y ADASCID como consecuencia de la selección in vivo
conferida por la enfermedad fisiopatológica a pesar de la corrección de solo un modesto
número de progenitores. Combinación de gen y droga El potencial de la terapia se destacó
recientemente en un ensayo tratando de conferir quimioprotección a HSC humanos durante
quimioterapia con agentes alquilantes para el glioblastoma [71].
Transferencia génica a un pequeño número de células anatómicamente sitios discretos es una
estrategia específica que tiene el potencial de confieren beneficio terapéutico. Mostró
resultados impresionantes para distrofias autosómicas recesivas incurables tales como
congénitas ceguera y amaurosis congénita de Leber (LCA). Suizo-Ensayo clínico alemán de
terapia génica de fase I / II destinado a tratar enfermedad granulomatosa crónica en abril de
2006 que vino arriba con éxito [72]. Células CD34 + movilizadas aisladas de la sangre
periférica se transdujo e infundió retroviralmente en el paciente donde dos tercios de los
pacientes mostraron clara beneficiarse de este tratamiento. Después del tratamiento
silenciador del transgén como resultado de la metilación del promotor viral causó la gravedad
de la infección que condujo a la muerte de paciente [73].
Muchos cánceres diferentes, incluidos pulmón, ginecología, tumores cutáneos, urológicos,
neurológicos y gastrointestinales, así como neoplasias hematológicas y tumores pediátricos,
han sido atacados mediante terapia génica. Insertar tumor genes supresores de inmunoterapia,
viroterapia oncolítica y la terapia con profármacos enzimáticos dirigidos a genes son
diferentes estrategias que se han utilizado para tratar diferentes tipos de cánceres El p53, un
supresor tumoral comúnmente transferido gen, es un jugador clave en los esfuerzos de
tratamiento del cáncer. En algunos de las estrategias, la transferencia del gen p53 se combina
con quimioterapia o radioterapia. Las estrategias más importantes que han sido hasta ahora
se emplea la vacunación con células tumorales diseñadas para expresar moléculas
inmunoestimulantes, la vacunación con vectores virales recombinantes que codifican
antígenos tumorales y vacunación con células huésped diseñadas para expresar tumor
antígenos [19]. Nuevos adenovirus oncolíticos quiméricos de fibra los vectores (Ad5 / 35-
EGFP) ofrecen un nuevo anticancerígeno afectivo agente para la mejor cura del carcinoma
hepatocelular. UNA demostración de estos vectores a través de ensayos adecuados fue
significativo para la mejora de la transducción y más progenie del virus fueron producidos
en HCC. Se midió un mayor nivel de expresión transgénica y un antitumoral mejorado se
observó efecto en células de HCC in vitro mientras se mantenía las células normales
protegidas contra citotoxicidad. Crecimiento tumoral También fue inhibido al utilizar esta
tecnología [74]. Cáncer la terapia génica se ha vuelto más avanzada y su eficacia ha mejorado
en los últimos años [75].
El tratamiento de enfermedades cardiovasculares mediante terapia génica es una estrategia
importante en ciencias de la salud. En cardiovascular campo, la terapia génica proporcionará
una nueva vía para la terapéutica angiogénesis, protección miocárdica, regeneración y
reparación, prevención de reestenosis después de angioplastia, prevención de omitir la falla
del injerto y el manejo del factor de riesgo. Mutación en gen que codifica WASP, una proteína
que regula el citoesqueleto, causa el síndrome de Wiskott-Aldrich (inmunodeficiencia
hereditaria). Su tratamiento requiere trasplante de células madre; en los donantes no están
disponibles, el tratamiento se lleva a cabo a través de la infusión de HSPC autólogos
modificados ex vivo por terapia génica [76]. El cáncer metastásico puede ser regresivo a
través de inmunoterapia basada en la transferencia adoptiva de células T genéticamente
modificadas. Orientación precisa de antígenos expresado por tumores y la vasculatura
asociada y la Uso exitoso de la ingeniería genética para retargetar las células T antes su
transferencia al paciente se centra principalmente en esta terapia [77]. Las células cancerosas
a menudo se vuelven casi "Invisible" para el sistema inmune y su microambiente suprime la
supervivencia y la migración de las células T, pero la ingeniería genética de las células T es
la solución a estos desafíos. Las células T en pacientes con cáncer pueden modificarse
recombinando genes responsables del reconocimiento de antígenos específicos de cáncer,
resistencia a la inmunosupresión y prolongación de la supervivencia y facilitando la
migración a tumores [78]. Fusión entre los genes equinodermo proteína asociada a
microtúbulos como 4 (EML4) y la linfoma quinasa anaplásica (ALK) se genera por una
inversión en el brazo corto del cromosoma confiere sensibilidad a los inhibidores de ALK.
Entrega mediada por viales del sistema CRISPR / Cas9 para células somáticas de animales
adultos induce reordenamientos cromosómicos específicos [79].
La señalización de Wnt es una de las vías oncogénicas clave en cánceres múltiples Dirigirse
a la vía Wnt en el cáncer es Un enfoque terapéutico atractivo, donde LGK974 potente inhibe
la señalización de Wnt, tiene una gran eficacia en el tumor de roedores modelos, y es bien
tolerado. Célula cancerosa de cabeza y cuello líneas con mutaciones de pérdida de función
en la señalización de Notch vía tienen una alta tasa de respuesta a LGK974 [80]. Gen
codonoptimizado, sobre la base de la secuencia de codificación de gen de la hemaglutinina
del virus de la gripe, se sintetizó y clonado en un virus vaccinia modificado recombinante
Ankara (MVA) Inmunización con el vector viral MVA-H7-Sh2 en los hurones demostraron
ser inmunogénicos como animales sin protección que fueron vacunados simulacros
desarrollaron neumonía intersticial y pérdida de apetito y peso, pero la vacunación con
MVAH7-Sh2 protegió a los animales de enfermedades graves [81]. Viral La terapia génica
es una de las terapias principales e importantes para cáncer de cabeza y cuello. Los genes
asociados a tumores están dirigidos por virus, y la función del gen p53 fue dirigida a través
de tal terapia al principio. Las células cancerosas pueden ser destruidas por virus oncolíticos
a través de la replicación viral y armando con transgenes terapéuticos [82].
Mutación del gen de lipoproteínas de alta densidad ABCA1 en células puede hacer que las
células se diferencien en macrófagos. Gene knockouts en células madre embrionarias
mejoran la capacidad de células para diferenciarse en macrófagos y específicamente apuntar
a los patógenos deseados. Los reemplazos de alelos en este el caso ayudará a estudiar los
cambios de codificación de proteínas y las variantes reguladoras involucradas en la alteración
de la transcripción de ARNm y estabilidad en macrófagos [83].
4.2.2 Producción de anticuerpos y sus derivados. Planta Los sistemas se han utilizado
recientemente para la expresión y desarrollo de diferentes anticuerpos y sus derivados. Lo
más importante, de muchos anticuerpos y anticuerpos derivados, siete han alcanzado las
etapas satisfactorias de requisitos. Se pueden usar plantas de tabaco transgénicas para la
producción de IgA / G secretora quimérica conocida como CaroRx, CaroRx. Patógeno oral
responsable de la descomposición de un diente conocido como Streptococcus mutantes,
puede ser reconocido por este anticuerpo Un anticuerpo monoclonal llamado T84.66 puede
funcionan afectivamente para reconocer el antígeno carcinoembrionario, que todavía se
considera un marcador caracterizado afectivamente en cánceres de epitelios [84, 85]. Un
humanizado de cuerpo entero IgG1 conocida como anti-HSV y anti-RSV, que puede
funcionar como el agente de reconocimiento para el virus del herpes simple (HSV) -2- la
glicoproteína B, se ha expresado en soja transgénica y Células de ovario de hámster chino
(CHO). Anticuerpos de ambos Se ha demostrado que las fuentes previenen la transmisión
vaginal de HSV-2 en ratones después de la aplicación tópica; si trabajó de manera similar en
los humanos se considerarían de bajo costo y afectivos prevención contra enfermedades
transmitidas por interacciones sexuales [86–88]. 38C13 es un anticuerpo scFv basado en el
idiotipo de linfocitos B malignos en el ratón bien caracterizado línea celular de linfoma
38C13. Administración del anticuerpo a ratones resultaron en la producción de anticuerpos
anti-idiotipo que son capaces de reconocer las células 38C13, que ayudan a proteger los
ratones contra con células de linfoma inyectadas, es letal desafío [89, 90]. Marcadores únicos
que reconocen enzimas podría producirse a través de este sistema, más afectivamente los
marcadores de superficie de células B malignas para funcionar como una eficaz terapia para
el linfoma no Hodgkin como enfermedades en humanos [61] Un anticuerpo monoclonal
conocido como PIPP es específico para Reconocimiento de gonadotropina coriónica humana.
La producción de anticuerpos monoclonales de longitud completa y scFv y diacuerpo los
derivados fueron posibles en plantas a través de la transgénesis y agroinfiltración en tabaco
transformado transitoriamente [91]. La producción de testosterona por hCG estimulada
puede inhibirse por cada uno de estos anticuerpos en células cultivadas por LEYDIG y el
aumento de peso uterino podría retrasarse en ratones, a través del cual La actividad de hCG
está marcada. El diagnóstico y la terapia de los tumores pueden llevarse a cabo con la ayuda
de anticuerpos [61].
4.2.3 Investigación del metabolismo de las drogas. Sistema complejo de enzimas
metabolizadoras de fármacos implicados en el fármaco. el metabolismo es crucial para ser
investigado para la eficacia adecuada y efectos de las drogas. Los enfoques de ADN
recombinante tienen contribuyó recientemente su papel a través de la expresión heteróloga,
donde la información genética de la enzima se expresa in vitro o in vivo, a través de la
transferencia del gen [92, 93].
4.2.4 Desarrollo de vacunas y hormonas recombinantes. Las vacunas comparativamente
convencionales tienen menor eficacia y especificidad que la vacuna recombinante. Un miedo
libre e indoloro técnica para transferir vectores de adenovirus que codifican el patógeno
antígeno es a través de la transferencia nasal, que también es un rápido y Método de
protección contra los agentes patógenos de la mucosa. Esto actúa como una vacuna
farmacológica donde un estado anti-influenza puede ser inducido a través de una expresión
transgénica en la vía aérea [74]. La producción in vitro de hormona foliculoestimulante
humana (FSH) ahora es posible a través de la tecnología de ADN recombinante. FSH es
considerablemente una proteína heterodimérica compleja y la línea celular especificada de
eucariotas ha sido seleccionada Por su expresión. Tratamiento de reproducción asistida a
través de El desarrollo folicular estimulante es un logro de tecnologia de ADN recombinante.
Un gran número de pacientes están siendo tratados a través de r-FSH. Lo más interesante es
r-FSH y se realizó la recombinación de la hormona luteinizante (LH) exitoso para mejorar la
ovulación y el embarazo [94, 95].
4.2.5 Medicinas chinas. Como un componente importante de medicina alternativa, las
medicinas tradicionales chines juegan un Papel crucial en el diagnóstico y la terapéutica.
Estos medicamentos asociados con teorías que son congruentes con el gen principio de
terapia hasta cierto punto. Estas drogas pueden ser las fuentes de un transporte de genes
terapéuticos y como Medicamentos coadministrados. El sistema de raíces transgénicas tiene
valioso potencial para la introducción de genes adicionales junto con el Plásmido Ri. Se
transporta principalmente con genes modificados en Sistemas de vectores de A. rhizogenes
para mejorar las características de uso específico Las culturas se convirtieron en una valiosa
herramienta para estudiar Las propiedades bioquímicas y el perfil de expresión génica de vías
metabólicas. Los intermedios y enzimas clave involucrado en la biosíntesis de metabolitos
secundarios puede ser dilucidado por las culturas convertidas [96, 97].
4.2.6. Compuestos médicamente importantes en bayas. La mejora en los valores nutricionales
de las fresas se ha llevado a través del gen rolC. Este gen aumenta el contenido de azúcar y
actividad antioxidante. La glicosilación de antocianinas requiere dos enzimas
glicosiltransferasa y transferasa. Algunos genes relacionados con la nutrición para diferentes
componentes de la fresa, incluyendo proantocianidina, l-ascorbato, flavonoide, los
polifenoles y los flavonoides son importantes para mejorar El componente de interés a través
de la transformación genética. En caso de frambuesa, control de genes bHLH y FRUITE4
los componentes de antocianina mientras que ERubLRSQ072H02 es relacionado con
flavonol. Por transformación específica, estos genes Puede mejorar la producción y mejorar
la calidad. Todos Estos compuestos mencionados tienen valores médicos [98].
4.3. Ambiente. La ingeniería genética tiene amplias aplicaciones. en resolver los problemas
ambientales. La liberación de genéticamente microbios diseñados, por ejemplo,
Pseudomonas fluorescens cepa designada HK44, para fines de biorremediación en el campo
fue practicado por primera vez por la Universidad de Tennessee y Laboratorio nacional de
Oak Ridge trabajando en colaboración [99, 100]. La cepa de ingeniería contenía naftaleno
plásmido catabólico pUTK21 [101] y un transposón basado gen lux productor de
bioluminiscencia fusionado dentro de un promotor que dio como resultado una degradación
de naftaleno mejorada y una respuesta bioluminiscente coincidente [102]. HK44 sirve como
reportero de biodisponibilidad y biodegradación de naftaleno, mientras que su capacidad de
señalización de bioluminiscencia hace Puede utilizarse como una herramienta en línea para
el monitoreo in situ de procesos de biorremediación [102]. La producción de señal
bioluminiscente es detectable utilizando fibra óptica y fotones. módulos de conteo [101].
4.3.1. Fitorremediación y desarrollo de resistencia vegetal. La ingeniería genética ha sido
ampliamente utilizada para la detección. y absorción de contaminantes en el agua potable y
otras muestras, Por ejemplo, la introducción del gen AtPHR1 en plantas de jardín Torenia,
Petunia y Verbena cambiaron su capacidad de absorción de Pi. Las plantas transgénicas
AtPHR1 con la capacidad mejorada de absorción de Pi posiblemente puede facilitar la
efectividad fitorremediación en ambientes acuáticos contaminados [103]. UNA fragmento
del gen AtPHR1 se insertó en el vector binario pBinPLUS, que contiene un mosaico de
coliflor mejorado promotor del virus 35S. Este plásmido se denominó pSPB1898 y se utilizó
para la transformación [104] en Petunia y Verbena utilizando Agrobacterium tumefaciens
[105]. AtPHR1 es efectivo en otras especies de plantas, como Torenia, Petunia y Verbena
[103] pero la modificación postranscripcional de la endógena La contraparte de AtPHR1
podría inhibirse por la sobreexpresión de AtPHR1 [103].
Los procesos del metabolismo de las plantas identifican su importancia para utilizar para
remediar los contaminantes ambientales. Algunos de Los productos químicos no son
propensos a ser degradados o digeridos. TNT solo se digiere parcialmente en el que el
nitrógeno además reacciona con oxígeno para formar superóxido tóxico. A Superado este
problema, el gen responsable de la monodehidroascorbato reductasa es eliminado, lo que
aumenta la tolerancia vegetal contra TNT. El ajuste fino de la actividad enzimática y la
ingeniería eliminatoria en conjunto mejoran la planta respuestas a metales tóxicos.
Fitoquelatina sintasa, un pesado péptido de unión a metales que sintetizan enzima, revelaron
una forma de mejorar la tolerancia contra metales pesados a través de atenuación de la
actividad enzimática [106]. ADN recombinante La tecnología ha demostrado ser efectiva
para deshacerse de partículas de arsénico que se consideran contaminantes graves en suelo.
PvACR3, un antiportador clave de arsenito [As (III)] fue expresado en Arabidopsis que
mostró una mayor tolerancia al arsénico. Semillas de plantas genéticamente modificadas con
PvACR3 puede germinar y crecer en presencia de mayor cantidad normal de arseniato [As
(V)] que generalmente son Letales para las semillas de tipo salvaje. El arsénico (As) se reduce
en As reductasa presente en A. thaliana. Las fitoquelatinas restringen el movimiento de
arsénico en células de raíz y compañero de floema células. OsNramp5 y OsHMA3
representan los transportadores para captar cadmio (Cd) y su retención [107]. En plantas, el
brasinoesteroide (BR) participa en la regulación fisiológica y procesos de desarrollo. Su
actividad se inicia con desencadenando la cascada de fosforilación o desfosforilación [108]
Los enfoques biotecnológicos recientes para la biorremediación incluyen biosorción,
fitoestabilización, hiperacumulación, dendroremediación, bioestimulación,
mycoremediation, cianoremediación y genoremediación, que principalmente dependerá de
mejorar o prevenir actividades específicas de genes. Sin embargo, los desafíos para adoptar
la técnica exitosa no pueden ser ignorado [109].
4.3.2. Aplicaciones Energéticas. Varios microorganismos, específicamente las
cianobacterias, median la producción de hidrógeno, que es fuente de energía amigable con el
medio ambiente. La producción específica se mantiene utilizando las enzimas requeridas
adecuadamente ya que estas enzimas juegan un papel clave en la formación del producto.
Pero enfoques avanzados como ingeniería genética, alteración en condiciones de nutrientes
y crecimiento, cultivo combinado, metabólico ingeniería y tecnología sin células [110-112]
han demostrado resultados positivos para aumentar la producción de hidrógeno en
cianobacterias y otros biocombustibles [3, 4]. La comercialización de esta fuente de energía
mantendrá el medio ambiente. limpia, lo que no es posible utilizando energía convencional
fuentes que liberan CO2 y otras sustancias químicas peligrosas [113]. También se pueden
diseñar cianobacterias para que puedan convertir CO2 en compuestos de combustible
reducidos. Esto hará Las fuentes de energía de carbono son inofensivas para el medio
ambiente. Este enfoque ha sido exitoso para una amplia gama de productos básicos productos
químicos, principalmente portadores de energía, como cadenas cortas y alcoholes de cadena
media [114].
Las biopelículas conductoras de Geobacter sulfurreducens son fuentes potenciales en el
campo en energía renovable, biorremediación y bioelectrónica. Supresión de la codificación
de genes PilZ proteínas en el genoma de G. sulfurreducens hicieron la biopelícula más activo
en comparación con el tipo salvaje. CL-1ln se especifica para la cepa en la que se eliminó el
gen GSU1240. Biopelícula la producción se mejoró junto con la producción de pili y
exopolisacárido. El aceptor de electrones CL-1 producido biopelículas que eran 6 veces más
conductoras que las de tipo salvaje biofilms cuando crecieron con electrodo. Este doblez alto
la conductividad redujo las pérdidas potenciales en combustible microbiano células,
disminuyendo la resistencia de transferencia de carga en la superficie del biofilmanodo y
disminuyendo el potencial formal. Potencial la energía se incrementó por menores pérdidas
[115].
5. Desafíos actuales y perspectivas futuras
El hecho de que las células microbianas se usan principalmente en la producción de productos
farmacéuticos recombinantes indica que se encuentran varios obstáculos que les impiden
producir proteínas funcionales de manera eficiente, pero estas se manejan con alteraciones
en los sistemas celulares. Obstáculos comunes que deben tratarse son modificaciones
postraduccionales, celda activación de respuestas de estrés e inestabilidad proteolítica
actividades, baja solubilidad y resistencia para expresar nuevas genes Mutaciones que
ocurren en humanos a niveles genéticos. causar deficiencias en la producción de proteínas,
que pueden ser alterado / tratado mediante la incorporación de genes externos para llenar el
vacíos y alcanzar los niveles normales. El uso de Escherichia coli en tecnología de ADN
recombinante actúa como un biológico marco que permite a los productores trabajar en forma
controlada formas de producir técnicamente las moléculas requeridas a través de procesos
asequibles [41, 116].
La investigación de ADN recombinante muestra una gran promesa en mayor comprensión
de la biología de la levadura al hacer posible El análisis y la manipulación de genes de
levadura, no solo en el tubo de ensayo, pero también en células de levadura. Lo más
importante, es ahora es posible volver a la levadura mediante transformación con ADN y
clonando los genes usando una variedad de marcadores seleccionables sistemas desarrollados
para este fin. Estos tecnológicos Los avances se han combinado para hacer posible la
manipulación y el análisis genético verdaderamente molecular y clásico en levadura. Los
problemas biológicos que han sido más efectivos. abordado por la tecnología de ADN
recombinante son los que tener la estructura y organización de genes individuales como su
problema central [117, 118]. La tecnología de ADN recombinante está pasando
recientemente por un desarrollo completo que tiene trajo cambios tremendos en las líneas de
investigación y abrió instrucciones para formas avanzadas e interesantes de investigación
para vías biosintéticas a través de la manipulación genética. Los actinomicetos se utilizan
para producciones farmacéuticas, por ejemplo, algunos compuestos útiles en ciencias de la
salud y La manipulación de las vías biosintéticas para una nueva droga. generación.
Contribuyen a la producción de una parte importante de compuestos biosintéticos y por lo
tanto han recibido inmenso consideraciones en el diseño de fármacos recombinantes. Sus
compuestos en ensayos clínicos son más aplicables ya que tienen muestra actividad de alto
nivel contra varios tipos de bacterias y otros microorganismos patógenos. Estos compuestos
también han mostrado actividad antitumoral e inmunosupresor actividad [119].
La tecnología de ADN recombinante como herramienta de terapia génica es una fuente de
prevención y cura contra la genética adquirida trastornos colectivamente. El desarrollo de
vacunas de ADN es un nuev enfoque para proporcionar inmunidad contra varias
enfermedades. En En este proceso, el ADN entregado contiene genes que codifican Proteínas
patogénicas. La terapia génica humana está dirigida principalmente para tratar el cáncer en
ensayos clínicos. La investigación se ha centrado principalmente sobre la alta eficacia de
transfección relacionada con el sistema de administración de genes diseño. Transfección para
la terapia génica del cáncer con un mínimo toxicidad, como en el caso de cáncer cerebral,
cáncer de mama, pulmón El cáncer, y el cáncer de próstata, todavía está bajo investigación.
También trasplante renal, enfermedad de Gaucher, hemofilia, Alport síndrome, fibrosis renal
y algunas otras enfermedades están bajo consideración para la terapia génica [120].
6. Conclusiones
La tecnología de ADN recombinante es un desarrollo importante en ciencia que ha hecho la
vida humana mucho más fácil. En reciente años, cuenta con estrategias avanzadas para
aplicaciones biomédicas como el tratamiento del cáncer, enfermedades genéticas, diabetes y
Varios trastornos de las plantas, especialmente la resistencia viral y fúngica. El papel de la
tecnología de ADN recombinante en la limpieza del medio ambiente (fitorremediación y
remediación microbiana) y mayor resistencia de las plantas a diferentes efectos adversos
factores (sequía, plagas y sal) ha sido ampliamente reconocido. Las mejoras que trajo no solo
en humanos sino también en plantas y microorganismos son muy significativos. Los desafíos
para mejorar los productos a nivel genético a veces enfrentan serias dificultades que deben
ser resueltas El mejoramiento del futuro de la tecnología del ADN recombinante. En
productos farmacéuticos, especialmente, hay problemas serios para Producir productos de
buena calidad como el cambio traído a un gen no es aceptado por el cuerpo. Además, en caso
de aumentar el producto no siempre es positivo porque es diferente Los factores pueden
interferir para evitar que tenga éxito. Teniendo en cuenta los problemas de salud, la
tecnología recombinante es ayudando en el tratamiento de varias enfermedades que no
pueden tratarse en condiciones normales, aunque las respuestas inmunes dificultan logrando
buenos resultados.
Las estrategias de ingeniería genética encuentran varias dificultades que deben ser superadas
por más mejora genética específica de acuerdo con el organismo genoma La integración del
ADN monocatenario entrante en el cromosoma bacteriano se llevaría a cabo por un proceso
dependiente de RecA. Esto requiere una homología de secuencia entre ambas entidades, el
cromosoma bacteriano y ADN entrante. Mantenimiento estable y reconstitución de El
plásmido podría hacerse fácil. La introducción de genética el material de una fuente a otra es
un desastre para seguridad y biodiversidad. Hay varias preocupaciones sobre desarrollo de
plantas genéticamente modificadas y otros productos. Por ejemplo, es obvio que la ingeniería
genética las plantas pueden cruzarse con plantas silvestres, extendiendo así su Genes
"diseñados" en el medio ambiente, contaminando nuestra biodiversidad, Además, existe la
preocupación de que la ingeniería genética tiene implicaciones peligrosas para la salud. Por
lo tanto, más extensa Se requiere investigación en este campo para superar tales problemas y
Resolver las preocupaciones de la gente común.