COMPOSICIÓN MEDIO INDUCCIÓN CALLO

Evaluación de reguladores de crecimiento para la inducción de callo en

Aloe vera L.

La zábila (Aloe vera L.) posee innumerables aplicaciones en la industria cosmética y medicinal,
debido a los metabolitos secundarios que ella produce. Considerando que el crecimiento de
esta planta es lento y que deben esperarse hasta 3 (tres) años para alcanzar grandes
rendimientos, en este trabajo se evaluaron diferentes combinaciones de reguladores de
crecimiento para inducir callo en explantes de hojas jóvenes de plantas silvestres, con el fin de
lograr altos porcentajes de formación de callos que serán utilizados en futuros estudios para la
producción de metabolitos secundarios. Los explantes se cultivaron en medio Murashige y
Skoog (MS) suplementado con auxinas y citoquininas. Se observó que la adición de sustancias
reguladoras del crecimiento es necesaria para la obtención de mejores porcentajes de
formación de callos. Por ejemplo, cuando los explantes se cultivaron enMSsin hormonas
(control), la formación de callos fue del 3%. Cuando se añadieron auxinas (AIA y ANA) y
citoquininas (BA y kinetina) solas al medioMSlos mejores resultados se obtuvieron con 2mgL–1
de AIA observándose un 40% de formación de callos. Con citoquininas solas, los mejores
resultados se obtuvieron con BA, observándose un17%de formación de callo con una
concentración de 1mgL–1.Al combinar auxinas con citoquininas, los resultados dependieron de
la concentración y tipo de combinación auxina/citoquinina empleada, obteniéndose 95% de
formación de callos con la combinación de 1 mgL–1 de AIA y 0,1 mgL–1 de BA.

Efecto de Biobras-6 y el MH-5 en la induccion de callos y brotes en

lechuga
Con el objetivo de evaluar el efecto que dos análogos

espirostánicos de brasinoesteroides denominados comercialmente

Biobras-6 y MH-5, ejercen en la formación de

callos y regeneración de plantas de lechuga (Lactuca sativa)

var. Brasil 221, se ejecutaron dos experimentos de laboratorio.

En el primero, se adicionaron ambos análogos, en dos concentraciones

(0.001 y 0.01 mg.L-1), al medio de cultivo basal MS

que contenía 6-BAP 0.1 mg.L-1, mientras que en el segundo

experimento, se adicionaron los productos en ambas concentraciones,

pero la concentración de citoquinina se redujo a la

mitad. En ambos casos, se utilizó como tratamiento control el

medio de cultivo MS en presencia de 6-BAP 0.1 mg.L-1. Los

resultados demostraron que el Biobras-6 y el MH-5 estimularon

la formación de callos y brotes a partir de cotiledones solamente

cuando se añadieron, a determinadas concentraciones, al

medio de cultivo con la presencia de 6-BAP 0.1 mg.L-1.

La adición del BB-6 ó el MH-5 al medio de cultivo en presencia

de 6-BAP 0.1 mg.L-1 estimuló la inducción de callos. el tratamiento de 0.01 mg.L-1

de BB-6 alcanzó, en ese momento, el 100 % de formación

de callos.

los resultados de este primer experimento

revelaron que la presencia de 0.001 mg.L-1 de BB-6 ó 0.01

mg.L-1 de MH-5 en combinación con 0.1 mg.L-1 de 6-BAP en

el medio de cultivo, no solo estimuló la formación de callos

sino además favoreció la regeneración de plantas en lechuga,

sin afectar la masa fresca de los callos ni el número de

brotes por callo

Inducción in vitro de callogénesis y organogénesis indirecta a partir de explantes de

cotiledón, hipocótilo y hoja en Ugni molinae

El objetivo de este estudio fue estimular la producción de callos, observar su tipología y

respuesta organogénica bajo diferentes medios de inducción y de diferenciación en explantes
de cotiledón, hipocótilo y hoja de Ugni molinae. Los mayores porcentajes de callos se lograron
con cotiledones en un medio Murashige y Skoog (MS) suplementado con 0,5 mg L-1 de ácido
naftalenacético (ANA), como también en explantes de hipocótilo con 1,0 y 5,0 mg L-1 de ANA,
además del testigo (62, 62, 74 y 64 %, respectivamente). El mayor tamaño de callos se observó
en cotiledones y el menor en hojas. Posteriormente, los callos fueron transferidos a un
subcultivo sin reguladores de crecimiento, donde se observaron callos verdes, friables,
compactos y fenólicos, obteniendo la mayor sobrevivencia en callos inducidos con 0,5 mg L-1
de ANA para cotiledón e hipocótilo y 1,0 mg L-1 de ANA en hoja. Finalmente, los callos
derivados de estos tratamientos fueron cultivados en un medio de diferenciación con distintas
concentraciones de ANA más 6-bencilaminopurina (BAP). La mayor respuesta caulogénica se
logró en callos de cotiledones en un medio sin reguladores de crecimiento y la rizogénica en
callos de hojas con 0,1 mg L-1 de ANA + 1,0 mg L-1 de BAP. Estos resultados indican que es
posible estimular distintos tipos de callos y obtener raíces o brotes en U. molinae, lo que
posibilita su uso potencial para la conservación, micropropagación y mejoramiento vegetal de
una especie endémica.
Formación de callos e inducción de brotes a partir de tejido intercalar
de ramas de plantas adultas de Guadua angustifolia Kunth
Los bambúes tienen importancia para los programas de construcción y de fabricación de muebles, entre otras
aplicaciones. Guadua angustifolia Kunth es un bambú originario de Ecuador y Colombia con ciertas características
particulares, lo cual es de interés para los programas de reforestación. Las vías de propagación vegetativas son
limitadas, aún más cuando se desea introducir la especie a la producción. El objetivo del presente trabajo fue
lograr la formación de callos a partir de tejido intercalar de ramas de plantas adultas de Guadua. Se realizó un
proceso de desinfección con bicloruro de mercurio al 0.2% durante 10 minutos. Los segmentos de tejido intercalar
se establecieron en el medio de cultivo enriquecido con picloram. Se logró la formación de callos a partir de estos
explantes y la inducción de pequeños brotes en presencia de 6-BAP.

Para este
estudio se empleó el medio de cultivo propuesto
por Murashige y Skoog (1962) (MS) al que se le
adicionaron varias concentraciones de Picloram (0,
3, 6, 9 mg.l-1).

Se logró la formación de formación de callos en G.

angustifolia Kunth. con 6 mg.l-1 de picloram en el

medio de cultivo MS a partir de segmentos de tejido

intercalar (80% formación de callos). Los mismos fueron nodulares y se logró

la inducción de pequeños brotes en medio de cultivo

enriquecido con 3 mg.l-1 de 6-BAP (cercano al 100% formación de brotes)

Efecto de la iluminación en la inducción de callos

morfogénicos en
Boniato
Explantes de limbos foliares obtenidos a partir de brotes de raíces engrosadas en
condiciones semicontroladas

de laboratorio, pertenecientes a los clones Cemsa 78-354, Inivit B 90-1, Inivit B 93-1,
Yabú-8 y Jewel, fueron

sembrados con la superficie adaxial en contacto con el medio de cultivo compuesto

por las sales de Murashige y

Skoog (1962), sacarosa (3%), agar-agar (0.6%), mioinositol (100 mg.l-1), 2,4-D (0.1
mg.l-1) y regulado el pH a 5.8.

Colocados en las condiciones de iluminación: luz solar, oscuridad permanente y

fotoperíodo (16 horas luz artificial),

para evaluar la capacidad de inducción de callos morfogénicos. Se logró desde el

punto de vista cuantitativo y

cualitativo la inducción de los callos morfogénicos de color crema amarillentos,

nodulares y friables, siendo el
crecimiento de los mismos fue superior en presencia de luz solar, en comparación con
las restantes condiciones

evaluadas.

Al colocar los explantes en la luz solar el porcentaje de callos fue del 92.0-
100%, presentando características morfogénicas favorables, dadas por
coloraciones crema-amarillentas, friables y de consistencia nodular y, En la
oscuridad permanente durante cuatro semanas, se logró entre 84.0-96.0% de callos con
características morfológicas similares.

COMPOSICIÓN MEDIO INDUCCIÓN BROTES

Efecto de diferentes reguladores de crecimiento en la inducción de brotes múltiples y

enraizamiento de Atropa baetica (Rafael Zárate, Manuel Cantos y Antonio Troncoso)

Zárate, R., Cantos, M., & Troncoso, A. (1997). Efecto De Diferentes Reguladores De
Crecimiento En La Inducción De Brotes Múltiples Y Enraizamiento De Atropa Baetica.
Csic, Irnas Sevilla, 464-471.

Se estudió el efecto de distintos reguladores de crecimiento en la inducción de brotes

adventicios y el enraizamiento de.4. baetica empleándose yemas axilares.

La inducción y multiplicación de brotes, compuestos de las sales de Murashige y Skoog con 3%

de sacarosa, y 0;75 o 1,25 mg / L de BAP produjeron los resultados más óptimos, 5,6 brotes por
explanto después de 3 I d. Se obtuvieron resultados similares con medios suplementados con
mayores cantidades de BAP (1,75 y 2,0 mg / L) ; sin embargo estos medios mostraron un efecto
negativo en el posterior enraizamiento debido a un efecto residual de la BAP. El número más
bajo de brotes se obtuvo en el medio con menor cantidad de BAP (0,25 mg / L).

la existencia de una cantidad critica de BAP de ca. 0,75 mg 1- 1 que provoca la respuesta más
alta en la fom¡ación de brotes de A. haelica

Inducción de brotes y raíces en hipocotilos y cotiledones de physalis peruviana l.

utilizando
6-bencilaminopurina y 2,4-diclorofenoxiacético

Por lo expuesto, el objetivo de este trabajo fue

inducir brotes y raíces en hipocótilos y cotiledones de P. peruviana L. utilizando auxinas

y citoquininas. Se realizaron nueve combinaciones entre las concentraciones de 2,4-D

(0.25, 0.5 y 1.0 mg/l) y BAP (0.1, 0.25 y 1.0 mg/l), en la cual se introdujeron explantes

de 20 días de edad. El medio basal fue el de Murashige & Skoog complementado con

sacarosa al 3%, fitagel (0.5%) y pH 6. Después de 70 días, luego de estar expuestos a

fotoperiodo 16:8, se logró inducir la formación de callos en todos los tratamientos y en

ambos tipos de explantes.

Los reguladores del crecimiento utilizados

influenciaron en la regeneración in vitro,

siendo la combinación adecuada 1,0mg/L de

2,4-D+ 1,0 mg/L de BAP para los cotiledones

INDUCCIÓN DE RIZOGÉNESIS Y

CRECIMIENTO FOLIAR EN ESTACAS DE

NACEDERO (Trichanthera gigantea)1

Las ramas se dividieron en tres secciones: basal, medial y apical, y de cada sección

se extrajeron estacas de 40 cm de largo, con al menos tres nudos. Posteriormente, se trataron

con cuatro concentraciones de ácido indol butírico (AIB) (0, 2500, 5000, 7500 ppm). Las estacas
extraídas de la parte basal de la rama mostraron un 20,4 % más de brote total (rizogénesis y
crecimiento vegetativo) en comparación con las estacas provenientes de la sección medial, y
un 32,6 % más que las ubicadas en la parte apical.

La estimulación con AIB sobre la brotación total de yemas y raíces mostró que la dosis aplicada
con 2500 ppm, fue 10 % mayor en comparación con las estacas no tratadas con AIB en la
generación de brotes tanto foliares como radiculares

De las cuatro dosis utilizadas en el presente estudio, se obtuvo el mayor porcentaje de brotes

radiculares y foliares a una concentración de 2500 ppm, en comparación de las demás dosis
aplicadas, sin embargo, no se observaron diferencias significativas (p≥0,05) con el control. Las
dosis de AIB no presentaron diferencias significativas en la brotación foliar ni en el radicular.
No obstante, las diferencias observadas pueden ser atribuibles a que una acumulación
excesiva de auxinas que inhiben la rizogénesis, por efecto tóxico para la

estaca.

Efecto de Biobras-6 y el MH-5 en la induccion de callos y brotes en

lechuga
los tratamientos de BB-6
0.001 mg.L-1 y MH-5 0.01 mg.L-1 mostraron porcentajes

de regeneración de brotes significativamente superiores

al resto de los tratamientos, lo que indica que estos tratamientos

estimularon la diferenciación celular. Por otra parte, los tratamientos de 0.01 mg.L-1 de

BB-6 y 0.001 mg.L-1 de MH-5 inhibieron significativamente

el porcentaje de formación de brotes a partir de los callos

en comparación con el tratamiento control

Formación de callos e inducción de brotes a partir de tejido intercalar

de ramas de plantas adultas de Guadua angustifolia Kunth
Los bambúes tienen importancia para los programas de construcción y de fabricación de muebles, entre otras
aplicaciones. Guadua angustifolia Kunth es un bambú originario de Ecuador y Colombia con ciertas características
particulares, lo cual es de interés para los programas de reforestación. Las vías de propagación vegetativas son
limitadas, aún más cuando se desea introducir la especie a la producción. El objetivo del presente trabajo fue
lograr la formación de callos a partir de tejido intercalar de ramas de plantas adultas de Guadua. Se realizó un
proceso de desinfección con bicloruro de mercurio al 0.2% durante 10 minutos. Los segmentos de tejido intercalar
se establecieron en el medio de cultivo enriquecido con picloram. Se logró la formación de callos a partir de estos
explantes y la inducción de pequeños brotes en presencia de 6-BAP.

Para este
estudio se empleó el medio de cultivo propuesto
por Murashige y Skoog (1962) (MS) al que se le
adicionaron varias concentraciones de Picloram (0,
3, 6, 9 mg.l-1).

Se logró la formación de formación de callos en G.

angustifolia Kunth. con 6 mg.l-1 de picloram en el

medio de cultivo MS a partir de segmentos de tejido

intercalar (80% formación de callos). Los mismos fueron nodulares y se logró

la inducción de pequeños brotes en medio de cultivo

enriquecido con 3 mg.l-1 de 6-BAP (cercano al 100% formación de brotes)

COMPOSICIÓN MEDIO INDUCCIÓN RAÍCES

Efecto de diferentes reguladores de crecimiento en la inducción de brotes múltiples y

enraizamiento de Atropa baetica Zárate, R., Cantos, M., & Troncoso, A. (1997). Efecto De
Diferentes Reguladores De Crecimiento En La Inducción De Brotes Múltiples Y
Enraizamiento De Atropa Baetica. Csic, Irnas Sevilla, 464-471.

Se estudió el efecto de distintos reguladores de crecimiento en la inducción de brotes

adventicios y el enraizamiento de.4. baetica empleándose yemas axilares.
la inducción de raíces ocurrió en medios MS con 0,125 y 0,250 mg / L de ANA, que produjeron
una respuesta mas prominente y con mayor número de raíces. No obstante en estadíos más
avanzados del cultivo, la inducción de raíces fue similar en los tres medios usados. La
aclimatación de las plántulas enraizadas fue elevada (95.52%); sin embargo todas las plántulas
que perecieron durante esta fase habían sido previamente enraizadas en el medio
conteniendo 0,250 mg / L de ANA, sugiriéndose un efecto negativo de este medio,
independientemente del tratamiento con BAP inicial.

AGROBACTERIUM RHIZOGENES VS INDUCCIÓN

AUXÍNICA PARA LA RIZOGÉNESIS IN VITRO DE
PROSOPIS CHILENSIS (MOL.) STUNTZ
Se evaluó la efectividad de Agrobacterium rhizogenes (Ar), cepa LBA 9402, para inducir y
eventualmente mejorar la formación in vitro de raíces de Prosopis chilensis, en presencia o
ausencia de ácido indol-3-butírico (AIB).

Es importante destacar que si bien los tratamientos con Ar tuvieron una mejor calidad de enraizamiento,
el tratamiento con IBA en el medio de cultivo sin Ar (T3) produjo un buen porcentaje de microvástagos
con raíz (86%), con más de dos raíces por microvástago y con buena biomasa (2,6 mg de peso seco
promedio). Lo anterior recomendaría la elección de este camino si lo que se pretende es la
micropropagación.

T3: MB + AIB 3 ppm

....................... subcultivo MB
Broadleaved
Tree Medium (Chalupa, 1983) con los
macronutrientes reducidos a la mitad de
su concentración original (BTMm)

En T3 y T6 se añadió 3 ppm de AIB al

medio basal BTMm

Inducción de brotes y raíces en hipocotilos y cotiledones de physalis peruviana l.

utilizando
6-bencilaminopurina y 2,4-diclorofenoxiacético

Además, en los hipocótilos hubo inducción de raíces con la

combinación 0.1 mg/l de 2,4-D + 1.0 mg/l de BAP y en los cotiledones se indujeron raíces
con la combinación 0.5 mg/L de 2,4-D + 1.0 mg/L de BAP, y también raíces y brotes
en la combinación 1 mg/l de 2,4-D + 1.0 mg/l de BAP. Se concluye que los cotiledones
favorecen el proceso de regeneración de raíces/brotes mejor que los hipocotilos

T8 (1,0
de 2,4-D + 1,0 de BAP), se tuvieron las mejores
respuestas en la inducción de raíces, sea en
número y longitud de las mismas por explante

INDUCCIÓN DE RIZOGÉNESIS Y
CRECIMIENTO FOLIAR EN ESTACAS DE
NACEDERO (Trichanthera gigantea)1
Las ramas se dividieron en tres secciones: basal, medial y apical, y de cada sección
se extrajeron estacas de 40 cm de largo, con al menos tres nudos. Posteriormente, se trataron
con cuatro concentraciones de ácido indol butírico (AIB) (0, 2500, 5000, 7500 ppm). Las estacas
extraídas de la parte basal de la rama mostraron un 20,4 % más de brote total (rizogénesis y
crecimiento vegetativo) en comparación con las estacas provenientes de la sección medial, y
un 32,6 % más que las ubicadas en la parte apical.
La estimulación con AIB sobre la brotación total de yemas y raíces mostró que la dosis aplicada
con 2500 ppm, fue 10 % mayor en comparación con las estacas no tratadas con AIB en la
generación de brotes tanto foliares como radiculares

De las cuatro dosis utilizadas en el presente estudio, se obtuvo el mayor porcentaje de brotes
radiculares y foliares a una concentración de 2500 ppm, en comparación de las demás dosis
aplicadas, sin embargo, no se observaron diferencias significativas (p≥0,05) con el control. Las
dosis de AIB no presentaron diferencias significativas en la brotación foliar ni en el radicular.
No obstante, las diferencias observadas pueden ser atribuibles a que una acumulación
excesiva de auxinas que inhiben la rizogénesis, por efecto tóxico para la
estaca.

Inducción de enraizamiento en estacas de Berberidopsis corallina

con ácido indolbutírico
Berberidopsis corallina es una especie endémica de Chile que debido a su estado de
conservación ha sido catalogada como especie
“en peligro de extinción”. Su persistente disminución ha estado asociada a tala y competencia
con Eucalyptus spp. y Pinus radiata.
El objetivo del presente trabajo fue contribuir en la gestión de recuperación de esta especie a
través de la evaluación de su capacidad
reproductiva mediante propagación por estacas. Para la propagación vegetativa se colectaron
estacas semileñosas durante marzo de
2007 en el sector Villa Las Araucarias, Región de La Araucanía. Las estacas cosechadas se
trataron con ácido indolbutírico (AIB) en
distintas concentraciones (0, 500, 1.000 y 1.500 mg L–1) como factor de enraizamiento.
Después de cinco meses de mantenidas las
estacas en cama caliente se obtuvo un 87% de enraizamiento total. La concentración de AIB de
1.000 mg L–1 mostró los mejores
resultados respecto al proceso de rizogénesis con un 90% de enraizamiento. Además se
encontró el mayor promedio de longitud de
raíces en este mismo tratamiento con un promedio de 13,64 cm. El mayor número de raíces se
obtuvo en el tratamiento 1.500 mg L–1
con un valor promedio de 38,11 raíces por estaca. Se concluye que B. corallina puede ser
reproducido vegetativamente a través de la
rizogénesis de estacas tratadas con AIB, como una práctica para contribuir a la recuperación de
esta especie.