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ESTAFILOCOCOS

Que es un Forúnculo? Porque salen?

Que es un Forúnculo? Porque salen?


Tengo un amigo, que le salen repetitivas veces, ya lo operaron 2 veces, y le siguen saliendo.
Como puede hacer para terminar con ese problema?
Y por que le salen, o debido a que?

Aquí está la respuesta a lo que solicitas.

► Tu amigo necesita ayuda médica, es probable que por la recurrencia necesite exámenes
específicos y quizás tratamiento que incluya antibióticos, pero eso es a criterio del
facultativo del cual sea paciente, los forúnculos pueden ser individuales o múltiples y
algunas personas tienen episodios recurrentes con abscesos y poco éxito en su prevención.
Los forúnculos que se presentan en áreas como el conducto auditivo externo o la nariz
pueden ser muy dolorosos; un médico debe tratar estos últimos. Los forúnculos que se
desarrollan muy juntos pueden expandirse y agruparse, causando una afección denominada
carbúnculosis.

Los forúnculos generalmente son ocasionados por el Staphylococcus aureus, aunque


también pueden ser provocados por otras bacterias y hongos. Los forúnculos pueden
empezar en forma de un nódulo rojo y sensible, pero en última instancia se siente como un
globo lleno de agua. Un forúnculo puede drenar espontáneamente, produciendo pus, y con
mucha frecuencia es el paciente o alguien más quien lo abre.

Síntomas
Los primeros síntomas son las lesiones mismas:

Nódulo cutáneo, pequeño, rojo, firme y sensibles (inicialmente)


Nódulo fluctuante (posteriormente)
Localizado en los folículos pilosos
Sensible, con dolor que fluctúa entre leve y moderado
Pueden ser múltiples o individuales
Generalmente del tamaño de una arveja, pero pueden ocasionalmente alcanzar el tamaño de
una bola de golf
Inflamación
Coloración rosada o roja
Puede crecer rápidamente
Puede desarrollar núcleos blancos o amarillos (pústulas)
Puede exudar, supurar o formar costra
Pueden permanecer agrupados en un sólo lugar o diseminarse a otras áreas de la piel
El dolor aumenta a medida que el pus y el tejido muerto van llenando el área
El dolor empieza a disminuir a medida que el área se drena
Enrojecimiento o inflamación cutánea alrededor de la lesión

Algunos síntomas menos comunes son:


Fiebre
Fatiga
Molestia general, inquietud o malestar
Nota: antes de desarrollarse la lesión, se puede presentar un escozor (prurito) cutáneo

¿Que son las proteínas?


Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos. El nombre
proteína proviene de la palabra griega πρώτα ("prota"), que significa "lo primero" o del dios
Proteo, por la cantidad de formas que pueden tomar.

Las proteínas desempeñan un papel fundamental en los seres vivos y son las biomoléculas más
versátiles y más diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que
destacan:

estructural (colágeno y queratina),


reguladora (insulina y hormona del crecimiento),
transportadora (hemoglobina),
defensiva (anticuerpos),
enzimática,
contráctil (actina y miosina).
Las proteínas de todo ser vivo están determinadas mayoritariamente por su genética (con
excepción de algunos péptidos antimicrobianos de síntesis no ribosomal), es decir, la información
genética determina en gran medida qué proteínas tiene una célula, un tejido y un organismo.

Las proteínas se sintetizan dependiendo de cómo se encuentren regulados los genes que las
codifican. Por lo tanto, son suceptibles a señales o factores externos. El conjunto de las proteínas
expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma

Proteína A
La proteína A es una proteína de superficie que se encuentra en la pared celular de
Staphylococcus aureus y que es capaz de reconocer moléculas de la matriz extracelular. []
Es ampliamente usada en bioquímica por su capacidad de reconocimiento de anticuerpos,
especialmente IgG. Interacciona con la cadena pesada y se une a la región Fc. Su función
biológica sería que, en el suero sanguíneo, une los anticuerpos en el sentido opuesto al
esperado, lo cual dificultaría la opsonización y la fagocitosis.

Inmunoglobulina G
La inmunoglobulina G (IgG) es una de las cinco clases de anticuerpos humorales
producidos por el organismo. Se trata de la inmunoglobulina predominante en los fluidos
internos del cuerpo, como son la sangre, el líquido cefalorraquídeo y el líquido peritoneal
(líquido presente en la cavidad abdominal). Esta proteína especializada es sintetizada por el
organismo en respuesta a la invasión de bacterias, hongos y virus. Es la inmunoglobulina
más abundante del suero, con una concentración de 600-1.800 mg por 100 mL.[1] La IgG
constituye el 80% de las inmunoglobulinas totales.

La IgG es la única clase de inmunoglobulinas que atraviesa la placenta, transmitiendo la


inmunidad de la madre al feto. Es la inmunoglobulina más pequeña, con un peso molecular
de 150.000 Daltons,[1] así puede pasar fácilmente del sistema circulatorio del cuerpo a los
tejidos. La síntesis de IgG se controla principalmente por el estímulo de los antígenos. En el
caso de animales axénicos (sin microbios), con niveles de IgG muy bajos, el nivel de IgG se
eleva en cuanto se les traslada a un ambiente normal.

Hay veces que estas inmunoglobulinas no responden adecuadamente. Especialmente en


casos de Anaplasmosis simple.

Las cadenas H de la IgG son del isotipo γ, contiene un 2-3% en peso de glúcidos

Staphylococcus aureus?????
Staphylococcus aureus es una bacteria que se encuentra en la piel y fosas nasales de las personas
sanas, que causa gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (forúnculos,
ampollas, vejigas) y abscesos cutáneos hasta enfermedades que pueden poner en peligro la vida
como neumonía, meningitis, endocarditis, síndrome del shock toxico (SST) y sepsis.

Es un coco que crece agrupado en racimos (de ahí su raíz "Staphylo"), que responde positivamente
a la tinción de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una
atmósfera con oxígeno y también sin el mismo, no presenta movilidad ni forma cápsula. Es capaz
de crecer hasta con un 10 % de sal común. Por esto puede crecer en el agua del mar. Produce la
fermentación láctica. Es catalasa positivo y coagulasa positivo.
[Editar] Infección
Infección de piel y partes blandas. Neumonía. Sepsis con o sin metástasis (osteítis, artritis,
endocarditis, abscesos localizados). Enfermedades por toxinas (síndrome de la piel escaldada,
síndrome del shock tóxico y gastroenteritis
Catalasa y Coagulasa?
PRUEBA DE LA COAGULASA
Objetivo: Permite separar Staphilococcus aureus, que produce la enzima coagulasa, de las otras
especies de estafilococos que se denominan coagulasa negativos.

Fundamento: Staphilococcus aureus posee dos tipos de coagulasa:


* Una endocoagulasa o coagulasa ligada o
"clumping factor" que está unida a la pared celular. Esta
actúa directamente sobre el fibrinógeno provocando la
formación de coágulos cuando se mezcla una
suspensión bacteriana con plasma citratado u oxalatado, la velocidad de coagulacion es
directamente proporcional a la concentración enzimatica.

Técnica: varía según la coagulasa investigada.


- coagulasa ligada (en portaobjetos)
en una gota de solución fisiológica emulcionar una suspensión de Staphilococcus y agregarle una
ansada de plasma citratato mezclando suavemente. leer.

- colagulasa ligada y libre: (en tubo)


colocar volumenes iguales de plasma citratado y de cultivo de caldo de staphilococccus (o
ansa,una buena cantidad de colonia pura) mezclar suavemente e incubar durante 4hs a 37ºC
controlando cada 30min, si se produce la coagulacion.

**Resultados: positivo: EN PORTA.Positivo: aglutinacion entre 20.30 seg (cepa staph.aureus


virulenta);Dudoso: aglutinacion e/20 seg a 1 min(cepa staph.aureus virulenta).negativo:suspencion
homogenea.EN TUBO. positivo:coagulo total.parcial:cualquier grado de
coagulacion.negativo:suspencion homogenea(staph epidermidis u otro organismo.

PRUEBA DE LA CATALASA:
Fundamento: la enzima catalasa se encuentra en la mayor parte de las bacterias aerobias y
anaerobias facultativas que contienen citocromo (exepto el streptococcus) generalmente las bact
que carecen de citocomo tambien carecen de catalasa, lo que les impide descomponer el peroxido
de hidrogeno.
La catalasa descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la fórmula 2
H2O2-->2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es
un producto final del metabolismo aerobio de los azúcares.
Tenica: Se coloca una gota de H2O2 al 30% sobre
un portaobjetos y luego se transfiere una porción de
colonia sobre el H2O2 realizándose una emulsión. En lo
posible debe tomarse la colonia a partir de un medio sin
sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa
y pueden falsear los resultados.(falso positivo)
Esta prueba también puede realizarse en un aislamiento
en tubo, simplemente colocando unas gotas de H2O2
dentro del mismo.
REsultados: positivo:produccion de burbujas (por liberacion de oxigeno) Negativo: no se
prod.burbujas

Catalasa
La catalasa EC 1.11.1.6 es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la
descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua.

2 H2O2 2 H2O + O2

El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos


vivos y tiene entre otras una función protectora contra microorganismos patógenos,
principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en
compuestos menos peligrosos. Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su
descomposición en agua y oxígeno. Además la catalasa se usa en la industria textil para la
eliminación del peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la
limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de
hidrógeno. La ausencia congénita de catalasa es causante de una acatalasemia (o
acatalasia), la enfermedad de Takahara que se manifiesta por la ausencia de actividad de la
catalasa en los glóbulos rojos y con severas infecciones gangrenosas de la boca, pudiendo
producir la pérdida de los dientes y graves destrucciones de los maxilares y regiones
blandas que los cubre. Enfermedad congénita del Japón (2 de 100.00 habitantes sufren de
este trastorno).

Reacción positiva de la prueba de la catalasa


El mecanismo completo de la catalasa no se conoce, aun así la reacción química se produce
en dos etapas:

H2O2 + Fe(III)-E → H2O + O=Fe(IV)-E

H2O2 + O=Fe(IV)-E → H2O + Fe(III)-E + O2

donde Fe-E representa el núcleo de hierro del grupo hemo unido a la enzima que actuán
como cofactores.

La enzima se presenta en forma de homotetrámero y se localiza en los peroxisomas.

Esta enzima puede actuar como una peroxidasa para mucha sustancias orgánicas,
especialmente para el etanol que actúa como donante de hidrógeno. Las enzimas de muchos
microorganismos, como el Penicillium simplicissimum, que exhiben actividad de catalasa y
peroxidasa, son frecuentemente llamadas catalasas-peroxidasas.

Coagulasa

G X50 000 (MET technique par cryofracture)


S. aureus forma una cápsula de fibrina que le protege del sistema inmunológico de una vaca
La coagulasa es una proteína producida por varios microorganismos que permite la
conversión del fibrinógeno en fibrina. En el laboratorio, se usa para distingir entre
diferentes tipos de Staphylococcus. Un resultado de coagulasa positivo indica que la
muestra contiene S. aureus.Esta proteína también es producida por Yersinia pestis.[1]

La coagulasa reacciona con la protrombina en la sangre. El complejo resultante se llama


staphylothrombina, y permite que la enzima proteasa convierta el fibrinógeno en fibrina.
Esto hace que se coagule la sangre. La coagulasa esta estrechamente relacionada con la
superficie de la bacteria S. aureus y puede revestir su superficie con fibrina al entrar en
contacto con la sangre. Se cree que esta cubierta de fibrina del Staphylococcus es capaz de
resistir la fagocitosis haciendo esta bacteria tenga un factor de virulencia mayor . La
coagulasa Bound es parte de una familia más grande de MSCRAMM

Prueba de la coagulasa
Prueba de la Coagulasa se usa para diferenciar el Staphylococcus aureus del coagulase-
negative staphylococci. S.aureus produce 2 formas de coagualasa (por ejemplo, coagulasa
ligada y coagulasa libre). La coagulasa ligada también conocida como "factor de Clumping
" se puede detectar mediante la realización de una prueba de portaobjetos y la coagulasa
libre con una prueba de coagulasa de tubo.

[editar] Prueba de portaobjetos

Prueba del portaobjetos se hace conjuntamente con un control negativo para descartar auto
aglutinación. Se ponen 2 gotas de solución salina en el portaobjetos microescópico rotulado
con un número de muestra, Test (T) y control (C). Las 2 gotas son emulsionadas con la
prueba de organismo mediante el uso de un cable de lazo, cable recto, o un palo de madera.
Se pone una gota de plasma (plasma de conejo con anticoagulante (EDTA)[1] ) en la gota de
solución salina inoculada correspondiente a la prueba y se mezcla bien con un una varilla
de madera. Agitar el portaobjeto con cuidado unos 10 segundos.

 Si es positivo: Se podrá observar aglutinacion macroescopica en el plasma en los 10


segundos mientras que no se observara aglutinamiento en la gota de solucion salina.
 Si es negativo: No se observara aglutinamiento.

NOTA: Si la prueba de la coagulasa de portaobjetos fuera negativa, deberia hacerse una


prueba de tubo como confirmación. El aglutinamiento en las dos gotas es un indicativo de
auto aglutinación y por lo tanto debemos descartar la prueba de tubo.
Prueba del tubo de ensayo

coágulos formados por la reacción de la coagulasa en un tubo de ensayo

La prueba se utiliza plasma que ha sido incoculado con una colonia de staphylococcal (por
ejemplo, con un coco gram positivo catalasa positivo). Luego el tubo se incuba a 37 grados
Celsius en 1½ horas. Si es negativo entonces continuamos la incubacion por unas 18 horas.

 Si sale positivo (por ejemplo, la colonia problema es S. aureus), el suero coagulará,[2] dando
como resultado un coágulo (a veces el coágulo esta tan desarrollado que el liquido se
solidifica completamente).
 Si sale negativo, el plasma permanece liquido. Un resultado negativo podria indicar que se
podría tratar de S. epidermidis pero solo con unas pruebas mas precisas se puede
confirmar este hecho, como por ejemplo el API o métodos de BBL CRYSTAL.

 Lista de staphylococci coagulasa positivo : Staphylococcus aureus subsp. anaerobius,


Staphylococcus aureus subsp. aureus, Staphylococcus delphini, Staphylococcus hyicus,
Staphylococcus intermedius, Staphylococcus lutrae, Staphylococcus schleiferi subsp.
coagulans.

 Lista de' 'staphylococci coagulasa negativo de relevancia clinica: S.saprophyticus, S.cohnii


subsp. cohnii, S.cohnii subsp. urealyticum, S.captitus subsp. captitus, S.warneri,
Plasma citratado (P.cit): Es en general la manera de obtener plasma citratado, para todas las
pruebas de coagulación, entre otras: T.de Prot., KPTT, etc.
Realizar la punción venosa en forma habitual. Inmediatamente colocar 9 partes de sangre con una
parte de citrato de sodio 0,11 mol/l y sin demora invertir varias veces. Evitar la formación de
espuma tanto en la extracción como en la mezcla. Centrifugar durante 10 min. a 3000 rpm. Separar
el plasma. El tubo debe ser aforado, NO SE DEBE medir el volumen con la jeringa. El citrato debe
ser medido previamente en el tubo con pipeta, NO SE DEBE contar o poner un número
determinado de gotas.

¿Cuál es la función de matraz aforado la


necesito para horita 5 estrellas?
Es un utensilio de medida de volúmenes de mucha precisión. Están formados por un recipiente de
vidrio con un tubo estrecho en la parte superior en el que hay una muesca indicando con exactitud
la capacidad del aforado. El tubo superior es estrecho para que el error que se pueda cometer sea
lo más pequeño posible. A la hora de enrasar hay que tener en cuenta que los líquidos suelen
forman meniscos, por lo que, para una medición correcta, la parte central del menisco debe ser la
que marque el enrase. También sabemos que el vidrio es un material que se dilata y se contrae en
función de la temperatura, por lo cual, en el mismo vidrio, está indicado el rango de validez de
temperatura del matraz aforado en cuestión. Se utilizan para preparar disoluciones de
concentración perfectamente conocida

¿Diferencia entre material volumétrico


graduado y aforado?
La diferencia radica en que un material volumétrico graduado tiene un cierto error en las medidas,
no son volúmenes completamente exactos. Si te fijas por ejemplo en una probeta graduada o en
una bureta graduada te marcan el volumen junto a un + o - indicándote que hay una pequeña
variación. Por lo contrario, el material aforado tiene el volumen indicado en el recipiente y es ese
exactamente, siempre y cuando lo tengas bien enrasado, lógicamente. Además este material no te
marca, como en el caso del graduado, la variación de volumen, que aunque es muy pequeña,
existe.

Ácido teicoico
Los ácidos teicoicos son polímeros de glicerol o ribitol unidos mediante enlaces
fosfodiéster. Estos ácidos se encuentran en la pared celular de las bacterias Gram-positivas,
tales como Staphylococci, Streptococci, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium y Listeria,
extendiéndose sobre la superficie de la capa de peptidoglicano. Los ácidos teicoicos son
polímeros de un polialcohol (glicerol o ribitol).
Características
Los ácidos teicoicos no se presentan entre las bacterias Gram-negativas. Se pueden enlazar
bien covalentemente al ácido N-acetilmurámico de la capa de peptidoglicano o bien unirse
a los lípidos presentes en la membrana citoplasmática. Las unidades combinadas
compuestas de ácidos teicoicos y lípidos se denominan ácidos lipoteicoicos. Los ácidos
teicoicos están cargados negativamente y por lo tanto contribuyen a la carga negativa
de la pared celular Gram-positiva. También pueden proporcionar soporte estructural
a la pared celular.

Propiedades funcionales de los ácidos teicoicos


1. Da factor de antigenidad.

2. Controla el tránsito de algunos cationes como el Mg++.

3. Regula la actividad de los auto lisosomas, por lo que controlan la autolisis.

4. Fomenta la adherencia bacteriana a epitelios

Definición de Leucotoxina
Toxina capaz de inhibir o destruir leucocitos

Definición de Enterotoxina
Toxina secretada por microorganismos (exotoxina), que actúa sobre la mucosa intestinal
produciendo la secreción masiva de líquidos a la luz del intestino y la consiguiente diarrea.
Estos efectos se producen, bien por la ingestión de enterotoxina preexistente en un alimento,
bien por la del organismo productor de la misma. La mayoría de las enterotoxinas están
compuestas de dos tipos de subunidades: la subunidad A (enzimáticamente activa) es
responsable de la toxicidad, y la subunidad B facilita la unión a la célula diana. Entre las
exotoxinas mejor conocidas destacan la del cólera y las producidas por los organismos
responsables de la intoxicación alimentaria, como Staphylococcus aureus, Bacillus cereus,
Clostridium perfringens, y algunas cepas (denominadas por ello enterotoxigénicas o ETEC) de
Escherichia coli. Muchas enterotoxinas están codificadas por plásmidos o bacteriófagos
residentes en la célula bacteriana

Enterotoxina
Las enterotoxinas son el producto del metabolismo de ciertas cepas de células o bacilos
que posee un grado de tóxico para el organismo humano. Las enterotoxinas son proteínas
de cadena simple no ramificada, generalmente compuestas por cantidades relativamente
grandes de lisina, tirosina, ácido glutámico y ácido aspártico. Suele no ser termolábil, es
decir resistente al calor, esto hace que muchas de las medidas higiénicas habituales no sean
efectivas. Por regla general son causantes, en algunas ocasiones, de intoxicación
alimentarias.[1] Ejemplos de enterotoxinas son las denominadas enterotoxinas
estafilocócicas (segregada por el Staphylococcus aureus), la enerotoxina colérica,
enterotoxina de Clostridium perfringens, toxina botulínica. Su contaminación generalmente
está asociada a ciertas partes del tracto gastrointestinal causando cólicos, gastroenteritis,
diarreas, etc

Angina de Ludwig

Angina de Ludwig

Hinchazón en el área submaxilar en un paciente con angina de Ludwig.

Sinónimos

 Flemón difuso hiper séptico y gangrenoso de piso


de boca
 Flemón de Gensoul

Aviso médico

La denominada angina de Ludwig, también denominada Flemón difuso hiper séptico y


gangrenoso de piso de boca, es una infección severa y mortal de origen dental, en la que el
pus invade gravemente cara, cuello, vías respiratorias y pulmones.
Historia
El nombre fue utilizado por vez primera por Camener en 1837, para designar un caso
clínico similar a otros descritos por Wilhelm Frederick von Ludwig en el año anterior. Se
trata de una de las infecciones más graves que una persona puede adquirir, pues produce
paro cardiorespiratorio y, cuando no es atendida debidamente, septicemia, es decir,
proliferación excesiva de bacterias en la sangre. En Francia se le denomina Flemón de
Gensoul, ya que según los franceses tienen documentos fechados 6 años antes de Ludwig,
donde el Dr. Gensoul describe el mismo cuadro clínico.

Características
Clínicamente, existe induración, sin fluctuación ni dolor inicialmente, de los tejidos
situados debajo de la lengua, desplazándose ésta hacia arriba y atrás. La movilidad
mandibular, deglución y habla se ven dificultadas. Todo ello se acompaña de una grave
afectación del estado general, con temperaturas normalmente superiores a 40 ºC. A través
de la comunicación con los espacios pterigomandibular y perifaríngeos, la infección puede
propagarse a territorios vecinos cervicales, e incluso al mediastino.La mortalidad de la
angina de Ludwig se ha reducido del 54% en los años cuarenta al casi 0% de la actualidad
con el tratamiento idóneo.

Etiología
Aunque la etiología de la infección es de origen dental en el 90% de los casos, existen otros
factores causales como sialoadenitis de la glándula submaxilar, fractura mandibular
abiertas, laceraciones de tejidos blandos orales, heridas en piso de boca e infecciones orales
secundarias. Cuando la etiología no es infecciosa se ha llegado a denominar el fenómeno
como pseudo-angina de Ludwig.

Tratamiento
El tratamiento consiste en antibioterapia parenteral, siendo necesario el drenaje quirúrgico
del abceso (a cargo del otorrinolaringólogo o del cirujano maxilofacial si la evolución no es
satisfactoria. Se requieren altas dosis de penicilina y cefalosporinas por vía intravenosa). El
paciente con angina de Ludwing requiere de hospitalización, sitio donde será vigilada la
evolución de la enfermedad

Queilitis angular
Queilitis angular

área afectada rodeada del círculo

La queilitis angular (también llamada perleche, queilosis o estomatitis[1] es una lesión


inflamatoria en la comisura labial, o un rincón de la boca, y con frecuencia es bilateral. En
casos severos, las divisiones pueden sangrar cuando la boca se abre y poco profundas
úlceras o una corteza puede formarse.[2]

Causas
A pesar de que las llagas de la queilitis angular puede llegar a ser infectados por el hongo
Candida albicans (candidiasis), u otros agentes patógenos , los estudios han relacionado la
aparición inicial de la queilitis angular con deficiencias nutricionales, a saber, la riboflavina
(vitamina B 2)[3] [4] y la anemia por deficiencia de hierro, 4 que a su vez puede ser evidencia
de la mala alimentación o la malnutrición (por ejemplo, la enfermedad celíaca ). La
deficiencia de zinc también se ha asociado con queilitis angular.

Queilosis también puede ser parte de un grupo de síntomas (web esofágico superior, la
anemia por deficiencia de hierro , glositis y queilosis) la definición de la condición llamada
síndrome de Plummer-Vinson (alias de Paterson-Brown-el síndrome de Kelly). También
encontramos un tipo de queilitis causada por exposición crónica al sol, es la llamada
queilitis actinica o solar, un bajo porcentaje evoluciona a carcinoma espino celular.

La queilitis angular se presenta con frecuencia en la población de adultos mayores que


sufren una pérdida de la dimensión vertical debido a la pérdida de los dientes, lo que
permite el exceso de cierre de la boca.
Los casos menos graves se producen cuando es muy frío (por ejemplo, en el horario de
invierno), y es ampliamente conocida por tener los labios agrietados.[5] Los niños pueden
lamer sus labios en un intento de proporcionar un momento de alivio temporal, sólo sirve
para empeorar la condición.

La queilitis angular puede ser causada por bacterias, pero es más comúnmente una
infección por hongos. También puede ser causada por medicamentos que se secan la piel,
inclusive la isotretinoína (Accutane), un análogo de la vitamina A. Con menos frecuencia,
se asocia con primaria hipervitaminosis A[6]

Tratamiento
El tratamiento de la queilitis angular varía dependiendo de la causa.

Para los casos leves causadas por una infección bacteriana, la aplicación de una crema
antiséptica tópica a la zona durante varios días es suficiente para tratar la infección y curar
las lesiones. Casos de menor importancia causada por una infección por hongos pueden ser
tratadas por el contador de cremas antimicóticas.[7] Los casos más graves de la infección
pueden requerir la intervención de un médico.

Algunos casos son causados por el síndrome de malabsorción. Esto es mejorado por
inyecciones de vitamina B-12, o sobre todo por inyecciones de todo el complejo B. El
importe determinado y la frecuencia de las inyecciones se determina por la gravedad de las
lesiones y la historia de la respuesta de curación se logra una vez

Intoxicación estafilocócica

La intoxicación alimentaria por estafilococo (estafiloenterotoxicosis; estafiloenterotoxemia) es el nombre de la enfermedad causada por
las enterotoxinas que producen algunas cepas de Staphylococcus aureus.
La presentación de los síntomas en esta enfermedad es usualmente rápida (de 1 a 7 horas después de la ingestión) y en la mayoría de
los casos aguda, dependiendo de la susceptibilidad individual a la toxina, la cantidad de alimento contaminado ingerido y el estado de
salud de la persona afectada. Los síntomas más comunes son náuseas, vómitos, dolor abdominal y postración. Algunos individuos
pueden no mostrar todos los síntomas asociados con la enfermedad. En los casos más severos puede haber dolor de cabeza, calambres
musculares y cambios transitorios en la presión sanguínea y en la frecuencia cardíaca. Por lo general el paciente se restablece en un par
de días, sin embargo, en los casos severos esto puede llevar tres y a veces más días. La muerte por intoxicación estafilocócica es muy
rara, aunque algunos casos han ocurrido en ancianos, niños y personas severamente debilitadas.

Los alimentos más frecuentemente


implicados en la intoxicación
estafilocócica son principalmente los
proteicos (carne, pollo, pescado,
lácteos, cremas y natas de
pastelería) y en particular: alimentos
cocinados que se recontaminan
posteriormente (se ha eliminado la
flora competitiva y se produce
contaminación post-cocinado),
alimentos de Aw reducida por
adición de azúcar o sal (cremas y
natas), productos cárnicos curados
tratados térmicamente (jamón
cocido) y embutidos crudos
fermentados.

S. aureus está presente en el aire, polvo, agua, leche, superficies y utensilios de trabajo de industrias alimentarias y cocinas, hombre y
animales. El hombre y los animales son el reservorio primario de este microorganismo. Los estafilococos están presentes en las fosas
nasales, garganta, piel y pelo del 50% o más de los individuos sanos. Esta incidencia es aún mayor en aquellas personas que están en
contacto con individuos enfermos o con ambientes hospitalarios. La principal fuente de contaminación de los alimentos son los
manipuladores aunque en algunos casos también se produce contaminación a partir del equipo.
No todas las cepas de S. aureus son capaces de producir la intoxicación estafilocócica. Solo las cepas que producen una enterotoxina y
que se conocen como S. aureus enterotoxigénico.
La intoxicación se produce por el consumo de alimentos en los que se ha multiplicado S. aureus enterotoxigénico y ha producido
toxinas en el propio alimento. Es necesario que S. aureus enterotoxigénico se encuentre en niveles de al menos 106 /g para que se
produzca suficiente cantidad de toxina para provocar síntomas en el consumidor.
Estas cifras de 106 /g se alcanzan con facilidad si los alimentos una vez elaborados no se mantienen a temperaturas adecuadas (o
refrigeración o por encima de 60ºC) o bien si se almacenan durante demasiado tiempo.

Enterotoxinas estafilocócicas
Staphylococcus aureus es una bacteria esférica (coco) que cuando se la observa en el
microscopio aparece en pares, cadenas cortas y en racimos. Estos microorganismos son Gram-
positivos. Algunas cepas son capaces de producir unas toxinas termoestables capaces de
causar la intoxicación estafilocócica. Cuando estas enterotoxinas estafilocócicas son ingeridas
por el hombre, aparecen bruscamente náuseas, vómitos, malestar general, diarreas y en casos
graves postración, calambres y shock por caída brusca de la presión arterial. Los sitios
receptores eméticos para las toxinas que provocan esta intoxicación son las vísceras
abdominales, donde el estímulo sensorial llega al centro del vómito por las vías aferentes
parasimpáticas (vagales) y simpáticas.

Las intoxicaciones alimentarias producidas por las enterotoxinas


estafilocócicas constituyen un problema mundial y guardan estrecha
relación con los hábitos alimentarios regionales. La ingestión de una dosis
de menos de 1.0 microgramo de enterotoxina en un alimento contaminado
produce los síntomas de la enfermedad.

Las enterotoxinas son proteínas de cadena simple no ramificada


compuestas por cantidades relativamente grandes de lisina, tirosina, ácido
aspártico y ácido glutámico. Los pesos moleculares oscilan entre 28 000 y
35 000 daltons, son solubles en agua y presentan una alta termoestabilidad.

Las enterotoxinas estafilocócicas son producidas por cepas muy específicas;


sin embargo, una de ellas es capaz de sintetizar más de un serotipo de
enterotoxinas. Actualmente se diferencian por su actividad serológica no
menos de 7 enterotoxinas que se designan A, B, C1, C2, C3, D y E. La
enterotoxina del serotipo A es la que con más frecuencia aparece en los
brotes de intoxicación alimentaria y le siguen en orden decreciente las de
los serotipos C1, B, D y E.

Detección de enterotoxinas estafilocócicas


Los alimentos contaminados suelen tener altos niveles de estafilococos enterotoxigénicos (10 6
UFC/g). Los alimentos involucrados deben ser análizados para ver si el estafilococo está presente. La
presencia de un número importante de estafilococos en el alimento permite sospechar que la toxina
está presente.

La prueba más concluyente es la detección de la toxina en las muestras de los alimentos


sospechosos. Se han desarrollado y utilizado con éxito en el diagnóstico de la enfermedad varios
métodos serológicos para determinar la entero-toxigenicidad de S. aureus aislado de los alimentos,
así como métodos para separar y detectar la toxina. Para detectar residuos de la enterotoxina
estafilocócica en los alimentos supuestamente implicados en un brote de la enfermedad, la toxina
debe ser separada y concentrada antes de procederse a la identificación con el antisuero (anti-
enterotoxina). Se han desarrollado métodos rápidos basados en anticuerpos monoclonales (i.e.,
ELISA, Reverse Passive Latex Agglutination), que permiten detectar detectar aproximadamente 1.0
nanogramo de toxina por gramo de alimento.

Uno de estos métodos es el 'Transia Plate SET'. Es un kit para la detección de enterotoxinas totales
(SETs) de Staphylococcus aureus en alimentos y sobrenadantes de cultivos de la casa comercial
Diffchamb S.A, validado por AENOR. Está basado en un enzimoinmunoensayo (ELISA) tipo sandwich
en microplaca. Es un test cualitativo y el limite de detección de enterotoxinas totales (A, B, C1, C2,
C3, D y E) es de 0.25 a 1.0 ng/g en función del tipo de alimento.

Supuesto práctico (basado en un caso real)

Durante la tarde del mismo día, 1.364 niños de 16 escuelas de Texas presentaron infección
estafilocócica (sobre un total de 5.824 que habían comido en esas 16 escuelas). Los
alimentos habían sido preparados en una cocina central y transportados en camiones. Los
estudios revelaron que el 95% de los niños que enfermaron habían comido una ensalada de
pollo. El día previo al almuerzo los pollos congelados habían sido hervidos durante 3 horas.
Después de cocidos los pollos se deshuesaron, se enfriaron a temperatura ambiente con aire
forzado, se cortaron en pequeños trozos, se colocaron en bandejas de aluminio de 30 cm de
profundidad y se almacenaron durante la noche en un "túnel de refrigeración" entre 5ºC y
7ºC. A la mañana siguiente se agregaron y mezclaron los demás ingredientes de la ensalada .
La comida se colocó en contenedores térmicos y se transportó a las distintas escuelas entre
las 9:30 AM y las 10:30 AM, donde se mantuvo a temperatura ambiente hasta el momento de
ser servidos entre las 11:30 AM y el mediodía. El examen microbiológico de la ensalada
reveló la presencia de gran número de Staphylococcus aureus.

La contaminación de los pollos ocurrió probablemente durante el deshuesado. El pollo no se


enfrió lo suficientemente rápido debido a que estaba en bandejas de 30 cm de profundidad.
La multiplicación de los estafilococos probablemente ocurrió tambien cuando estuvo a
temperatura ambiente previo al consumo. La prevención de este incidente hubiera implicado
la separación de los portadores del estafilococo en la fase de deshuesado, un enfriado más
rápido del pollo y una adecuada cadena de frío entre el momento de la preparación y el
consumo.
Se recogieron muestras de todos los tipos de alimentos servidos en aquella comida para la
extracción acuosa de las posibles enterotoxinas y se efectuaron cultivos en busca de colonias
de Staphylococcus aureus

Apartados del ejercicio

1 Análisis realizados
Recuento de estafilococos: Método y Resultados
2
obtenidos
Determinación de Enterotoxina en colonias y
3
alimentos: Preparación de las muestras
4 Preparación de los sobrenadantes
5 Determinación Enterotoxina: ELISA
6 Resultados ELISA
Interpretación de resultados y contestación a las
7
preguntas
8 Envío de resultados

1.-Análisis realizados

De cada uno de los alimentos se hicieron dos tipos de


análisis

a) Recuento de S.aureus . Prueba de enterotoxina a colonias


sopechosas

a.1) Recuento de S.aureus y asislamiento de colonias.

a.2)Prueba de la enterotoxina a las colonias sospechosas


aisladas (sirve para comprobar si estas colonias son
capaces de producir enterotoxina)

b) Prueba de la enterotoxina a cada uno de los alimentos.


Sirve para comprobar si cada uno de los alimentos contiene
enterotoxina

2.- Recuento de estafilococos: Método y resultados obtenidos


a.1) Recuento de S.aureus: Se hizo por el procedimiento más habitual que consiste en hacer
diluciones decimales del alimento en agua de peptona y sembrar alícuotas de estas diluciones en
placas de agar Baird Parker. Estas placas se incuban a 37ºC durante 24-48 horas. Pasado el tiempo
de incubación se contaron y asilaron las colonias sospechosas (negras, convexas, con brillo metálico
y dos halos) .

Los recuentos dieron los siguientes resultados

Recuento
Tipo de
estafiloco
alimento
cos / g
Ensalada
1,7 * 106
de pollo
Macarrone
2,6 * 107
s
Hamburgu
2 * 102
esa
Tarta de
7,3 * 102
chocolate
Negativo
Helado
<100/g

3.- Determinación de Enterotoxinas en colonias y alimentos: Preparación de las muestras (Ver


Película -requiere QuickTime-) (Esta película es más larga, en esta demo solo podrá ver 20
segundos)

a.2)Prueba de la enterotoxina a las colonias sospechosas


aisladas

Las colonias de S. aureus aisladas en Baird Parker se


subcultivaron en 10ml de caldo de cultivo 24h a 37ºC,
posteriormente se centrifugaron a 3000g * 10min y el
sobrenadante se recogió para detectar la posible presencia de
enterotoxinas.

b) Prueba de la enterotoxina a cada uno de los alimentos.

Las muestras de los alimentos se mezclaron con tampón de


extracción. La mezcla se centrifugó a 3000g * 10min y el
sobrenadante se recogió para detectar la posible presencia de
enterotoxinas.

Los sobrenadantes tanto de los extractos de los alimentos


como los sobrenadantes de los cultivos de las colonias
seleccionadas fueron denominados de manera abreviada de la
siguiente manera :

Sobrenadantes
Sobrenadantes
cultivos
Tipo de homogeneizados Colonias de S. aureus
alimento Extractos acuosos
seleccionadas
A-1, A-2, A-3, A-4,
Ensalada de
Ext-1 A-5, A-6, A-7, A-8,
pollo
A-9
Macarrones Ext-2 B-1, B-2, B-3, B-4
Hamburguesa Ext-3 C-1, C-2
Tarta de
Ext-4 D-1, D-2, D-3
chocolate
Helado Ext-5

4.- Preparación de los sobrenadantes

1) Tomar una alicuota del sobrenadante y filtrarla a través de una


membrana de 0.2 mm de poro.

2) El sobrenadante filtrado se diluye y de le añade suero


descomplementado de conejo.

5.- Determinación de Enterotoxina: ELISA

A. Material y reactivos
 Microplaca de 96 pocillos rompibles (12
tiras x 8 pocillos ) recubiertos con
anticuerpos anti-enterotoxinas.
 Tampón de lavado
 Mezcla de congugados anti-
enterotoxinas-peroxidasa
 Sustrato: peróxido de urea
 Cromógeno: trimetilbenzidina
 Solución Stop: ácido sulfúrico.
 Control positivo: enterotoxinas totales
(tóxico)
 2 Controles negativos: medio de cultivo
+ suero descomplementado de conejo.

B. Preparación de las placas

1) Cargar la microplaca (recubierta de anticuerpos específicos


contra las enterotoxinas totales de S. aureus) con 100 µl de :

 Pocillos A1 a A9 con sobrenadantes de las colonias de


Ensalada de pollo
 Pocillos B1 a B4 con sobrenadantes de las colonias de
Macarrones
 Pocillos C1 y C2 con sobrenadantes de las colonias de
Hamburguesa
 Pocillos D1 a D3 con sobrenadantes de las colonias de
Tarta chocolate

 Pocillo F1, G1 y H1 con sobrenadante de homogeneizado


de Ensalada de pollo
 Pocillo F2, G2 y H2 con sobrenadante de homogeneizado
de Macarrones
 Pocillo F3, G3 y H3 con sobrenadante de homogeneizado
de Hamburgesa
 Pocillo F4, G4 y H4 con sobrenadante de homogeneizado
de Tarta de chocolate
 Pocillo F5, G5 y H5 con sobrenadante de homogeneizado
de Helado

 Pocillo H10 con Control positivo 1


 Pocillo H11 con Control negativo
 Pocillo H12 con Control positivo2

.
2) Cubrir la microplaca con la placa
C. Incubación

1) Primera incubación. Incubar la placa a 18-25ºC durante 30'


con agitación (600 rpm) para permitir la unión de las
enteroxinas a los anticuerpos fijados en los pocillos

2) Lavado. Situar la placa en la lavadora de placas y lavar los


pocillos 5 veces con solución tampón de lavado

3) Adición de Ac marcados. Añadir 100 µl de los anticuerpos


anti-enterotoxinas conjugados con la enzima peroxidasa en
todos los pocillos

4) Segunda incubación. Incubar la placa a 18-25ºC durante 30'


en cámara húmeda para permitir la unión del conjugado a las
enterotoxinas previamente fijadas a los anticuerpos de los
pocillos.

5) Enzima y tercera incubación. Lavar la placa como antes


(etapa 2). Añadir a todos los pocillos 100 µl del substrato
(peróxido de urea) / cromógeno (trimetilbenzidina). Incubar la
placa a 18-25ºC durante otros 30 minutos para permitir que el
enzima actue sobre el sustrato originando un compuesto
coloreado.

6) Parar la reacción añadiendo 50 µl de la solución stop (ácido


sulfúrico).

D. Lectura en Lector de Placas

12) Ponga las placas en el lector para su lectura.

(espere hasta que el lector haya leído todos los pocillos, haya
medido las densidades ópticas de las reacciones en cada
pocillo y haya imprimido estas cifras en la impresora
incorporada)

6.- Resultados ELISA

 Medir la absorbancia de los pocillos. Debe cumplirse que las absorbancias de los controles positivo y negativo entén
dentro de los rangos siguientes:

 Absorbancia Control NEGATIVO < 0.30


 Absorbancia Control POSITIVO > 0.50

 Si las validaciones se cumplen comparar la absorbancia de las muestras (AbsX) con la del control positivo:

 Si AbsX > Abs control negativo + 0.10 LA MUESTRA ES POSITIVA


Los resultados positivos (mayores que los controles negativos
con un margen de ~0.1) se muestran en rojo.

7.- Interpretación de resultados y contestación preguntas

1º. Para interpretar los resultados conteste a las siguientes preguntas haciendo clic en los
radiobotones de la opción correcta

1.- No se ha detectado la presencia de enterotoxinas en:

a) En las colonias de los 4 alimentos estudiados

b) Ni en los extractos ni en las colonias de los macarrones, tarta de chocolate y hamburguesas

c) En los extractos de los 5 alimentos estudiados

2.- Se ha detectado la presencia de enterotoxinas en:


a) En los extractos de las hamburguesas

b) En los extractos y en las colonias de la ensalada de pollo

c) En todos los extractos de los 5 alimentos estudiados

3.- La presencia de una colonia de Staphylococcus aureus no productora de enterotoxinas en 4 de


los alimentos investigados significa:

a) un fallo en la lectura e interpretación del test ELISA ya que todos los S.aureus que
contaminan los alimentos suelen ser enterotoxigénicos

b) que producen enterotoxinas pero en cantidades muy elevadas que escapan al límite de
detección de este método

c) Una contaminación de estos alimentos por cepas de S.aureus no enterotoxigénicas

4.- El recuento en placas de Baird Parker de 2,6x107 UFC/g en la muestra de macarrones y el


resultado negativo en la prueba de la enterotoxina para estas cepas indica:

a) que este alimento es sin duda causante del brote puesto que es el que tiene un recuento más
alto

b) que hubo una contaminación y posterior multiplicación de estafilococos enterotoxigénicos

c) que hubo una contaminación y posterior multiplicación de estafilococos no enterotoxigénicos

5.- Se identifica como alimento causante de la epidemia:

a) Tanto a la ensalada de pollo como a las hamburguesas por contener cepas productoras de
enterotoxina

b) Solamente a las hamburguesas por contener cepas productoras de enterotoxinas y recuentos


de estafilococos bajos
c) Solamente a la ensalada de pollo por contener cepas productoras de enterotoxinas y
recuentos de estafilococos altos (superiores a 106)