Imtitutode

Sn'.ud Pública ESTABLECE GUIA TECNICA PARA LA REALIZACIÓN

DE LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS DE ENSAYO.

RESOLUCIÓN EXENTA N"2 Q, FlììT ¿$ ) 5 *

ASESORÍA JURÍDICA.

SANTIAGO,

VISTOS: Providencia Interna N° 2325 de la Jefa de

la Asesoría Jurídica; y TENIENDO PRESENTE: lo dispuesto en la Ley Orgánica Constitucional N°
18.575 de "Bases Generales de la Administración del Estado"; en la Ley N ' 19.880 de "Base de los
Procedimientos Administrativos que rigen los Actos de los Órganos de la Administración dei
Estado"; Código Sanitario; Decreto Supremo N° 3 de 2010, del Ministerio de Salud, que aprueba el
"Reglamento del Sistema Nacional de Control de Productos Farmacéuticos de Uso Humano"; en
los artículos 59 letra a} y b), 60 y 61 letra b) del Decreto con Fuerza de Ley N° 1 de 2005, que fija el
texto refundido, coordinado y sistematizado del Decreto Ley N° 2763 de 1979 y de las Leyes N°
18.933 y N° 18.469"; Resolución Exenta N° 607 del 2014 del Ministerio de Salud; así como lo
establecido en la Resolución N° 1.600 de 2008, de la Contraloría General de la República; Decreto
Exento 27 de 2012 del Ministerio de Salud "Norma Técnica N° 131 que define los criterios
destinados a establecer la equivalencia terapéutica en productos farmacéuticos en Chile", Decreto
Exento IMe 28 de 2012 Ministerio de Salud "Norma Técnica N° 127 sobre Buenas Prácticas de
Manufactura (BPM)" y Decreto Exento N- 543 de 2013 Ministerio de Salud, "Norma Técnica N°
139 sobre Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)" ; dicto la siguiente:

CONSIDERANDO:

1. - La importancia de la validación de los métodos

de ensayo, es que a través de ésta, es posible establecer el procedimiento y las condiciones en las
que deben realizarse, confiando así, que los datos obtenidos cumplen con la calidad deseada,
brindando seguridad y respaldo.
2. - De acuerdo a las Buenas Prácticas de
Manufactura (BPM) y de Laboratorio (BPL), la validación debe aplicarse en todas las etapas de
fabricación y control de un producto farmacéutico, esto es: manufactura, control de procesos
control y aseguramiento de la calidad.

RESOLUCIÓN

1.- APRUÉBESE como "GUÍA TÉCNICA PARA

REALIZACIÓN DE LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS DE ENSAYO" el siguiente documento que se
reproduce íntegramente.

"GUÍA TÉCNICA PARA REALIZACIÓN DE LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS DE ENSAYO"

1) INTRODUCCION:
La validación de los métodos de ensayo se entiende como una acción o un procedimiento
destinado a establecer pruebas documentales que demuestren científicamente que un método
analítico tiene las características de desempeño adecuadas para cumplir los requerimientos de las
aplicaciones analíticas pretendidas, esencialmente en términos de su exactitud y precisión.
 2) REQUISITOS
Validación de la Metodología Analítica de los ensayos realizados a los medicamentos
(materias primas y productos terminados) se encuentra exigido según lo establecido en:

1. Reglamento del Sistema Nacional de Control de Productos Farmacéuticos, Decreto Supremo

MINSAL N3 03 del año 2010:

Título II del Registro Sanitario de las Especialidades Farmacéuticas y otros productos

farmacéuticos:
Art. 32° y 40° Párrafo segundo: De los requisitos del Registro Sanitario,

Título VI Laboratorios Farmacéuticos:

Art. 145° Párrafo quinto: los procedimientos y registros;
Art. 155- Párrafo sexto: del personal y las responsabilidades;
Art. 1879
Párrafo cuarto: de la exención de control de calidad y del control de serie

2. Norma Técnica N° 131, nominada "Norma que define los criterios destinados a establecer la
equivalencia terapéutica en productos farmacéuticos en Chile (EOJ)" - Decreto Exento MINSAL
N- 27 de 2012.

3. Norma Técnica N" 127 de Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) - Decreto Exento MINSAL N3
28 de 2012.

4. Norma Técnica N° 139 de Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) - Decreto Exento MINSAL N?
543 de 2013.
3) ALCANCE
Los conceptos y términos utilizados en esta guía son de aplicación general y están dirigidos
principalmente para ser aplicados sobre los métodos analíticos para el adecuado control de
calidad en:
Materias primas
Materiales de envase
Productos en estadios de producción intermedios o terminados
Estudios de estabilidad
Estudios de investigación y desarrollo galénico.
Estudios de Equivalencia Terapéutica In Vitro.

Los Métodos Analíticos (MA) o Método de Ensayo (ME) para estudios de metabolismo,
farmacocinética, biodisponibilidad, valoraciones microbiológicas y biológicas pueden requerir
otras exigencias no contempladas en esta Guía.

4) CONCEPTOS GENERALES:
Analito Principio activo o componente medido por el ME.
Blanco Matriz en la cual se mide el analito sin éste.
Buenas Prácticas de Conjunto de reglas, procedimientos operativos y prácticas que
Laboratorio (BPL) garantizan que los datos generados por un sistema de control de
calidad son reproducibles y representativos, asegurando la
validez y contabilidad de los resultados.
Buenas Prácticas de Normas técnicas mínimas establecidas para todos los
Manufactura (BPM) procedimientos destinados a garantizar la calidad uniforme y
satisfactoria de los productos farmacéuticos, dentro de los límites
aceptados y vigentes para cada uno de ellos.
Calificación del diseño (DQ, Colección documentada de actividades que definen las
por sus siglas en inglés) especificaciones operacionales y funcionales del instrumento y
criterios para la selección del vendedor, basándose en el uso
previsto del instrumento.
Calificación de instalación (IQ, La ejecución de pruebas para asegurar que los equipos analíticos
por sus siglas en inglés) usados en un laboratorio están instalados correctamente y
operan de acuerdo con las especificaciones establecidas.
Cantidad declarada o nominal Concentración teórica declarada.
Material de referencia Material de referencia, caracterizado por un procedimiento
certificado válido desde el punto de vista metrológico para una o más de las
propiedades especificadas, acompañado por un certificado que
proporciona el valor de la propiedad especificada, su
incertidumbre asociada y una declaración de la trazabilidad
metrológica.
Sustancia o estándar de Una sustancia que es ampliamente reconocida por poseer las
referencia primaria (patrón cualidades apropiadas dentro de un contexto especificado y cuyo
primario) contenido asignado es aceptado sin requerir comparación con
otra sustancia química; es decir corresponde a un producto
homogéneo con propiedades especificas (identidad, pureza y
riqueza) que ha sido analizado y certificado por un organismo
calificado y homologado (reconocido oficialmente}.
Nota: Las sustancias químicas de referencia farmacopeica son
consideradas como sustancias de referencia primaria. En ausencia
de una sustancia de referencia farmacopeica, un fabricante debe
establecer una sustancia de referencia primaria.
Estándar o patrón de trabajo Sustancia cuyas características son asignadas y/o calibradas por
(patrón secundario) comparación con una sustancia de referencia primaria. El grado
de caracterización y análisis de una sustancia de referencia
secundaria puede ser menor que para una sustancia de
referencia primaria.
Estándar interno Sustancia no presente en la muestra a analizar y de composición
diferente a la del analito la cual se añade en cantidad conocida a
la muestra o al patrón, con la finalidad de corregir la inexactitud
de los resultados.
Incertidumbre de la medición Parámetro no negativo que caracteriza la dispersión de valores
cuantitativos que se atribuyen a un mensurando (analito),
basándose en la información usada.
Trazabilidad metrológica Propiedad del resultado de una medición en que el resultado
puede estar relacionado con una referencia a través de una
cadena continua y documentada de calibraciones, contribuyendo
cada una a la incertidumbre de la medición.
Método Ensayo (ME) Documento que explica detalladamente el conjunto de
operaciones necesarias para efectuar un análisis determinado.
ME Normalizado ME publicados por organismos de normalización u organizaciones
(Farmacopéico y/o internacionales reconocidas en la normativa. Se considera un ME
Compendiado) robusto.
ME Normalizado - Modificado ME que ha sido adaptado en el laboratorio a partir de un método
normalizado.
ME No Normalizado ME que no se encuentra en normas u otras colecciones de
métodos, correspondería a un nuevo método desarrollado por el
propio laboratorio o adaptado de la bibliografía.
Validación de un Proceso documentado por el cual un procedimiento analítico (o
procedimiento o método método) demuestra ser adecuado para el uso al que está
analítico destinado.
Validación Acción documentada, efectuada en concordancia con los
principios de las Buenas Prácticas de Manufactura y de
Laboratorio, que demuestran que los procedimientos, procesos,
actividades o sistemas empleados en la producción y en el control
de calidad, son conducentes a los resultados dispuestos, dentro
de los límites establecidos.
 5) PARÁMETROS DE DESEMPEÑO ANALÍTICO:
Especificidad; Selectividad Capacidad de evaluar, medir e identificar simultánea o
separadamente, de manera inequívoca el o los analitos de
interés sin interferencias de impurezas, productos de
degradación, compuestos relacionados, excipientes u otras
sustancias previsibles presentes en la matriz de la muestra o
insumos.
Exactitud; veracidad Corresponde al grado de concordancia de los resultados del
ensayo con el valor real o la proximidad al valor real de los
resultados obtenidos por el procedimiento, es decir evalúa la
diferencia entre el valor experimental y el valor verdadero.
Matemáticamente se expresa en forma de error determinado,
sistemático o sesgo, mientras menor es el sesgo mayor es la
exactitud de un resultado.
La exactitud de un método de ensayo debe establecerse en todo
su intervalo. No confundir exactitud con precisión.
Límite de Detección Es la menor concentración de anaiito en una muestra que puede
ser detectada por una única medición, bajo las condiciones
experimentales establecidas.
Límite de Cuantificación Corresponde a la menor concentración o cantidad de analito de
una muestra que puede ser determinada con aceptable precisión
y exactitud bajo las condiciones experimentales establecidas.
Parámetro que sólo será incluido en la determinación de
impurezas y/ o productos de degradación.
Linealidad La linealidad de un método de ensayo es su capacidad para
obtener resultados de prueba que sean proporcionales ya sea
directamente, o por medio de una transformación matemática
bien definida, a la concentración de analito en muestras en un
intervalo dado.
Se deben considerar los siguientes rangos específicos mínimos
para la linealidad según su aplicación:
I. Para la valoración de un Producto Farmacéutico: de 80% a
120% de la concentración de trabajo (si se declara entre 90
a 110 %};
II. Para impureza declarada: desde el nivel declarado 20%;
III. Para impurezas declaradas pero que no establecen límites:
desde 0,1 - 2,5 %;
Precisión Es el grado de concordancia entre los valores de una serie
repetida de ensayos efectuados sobre una muestra homogénea
0, expresado en otra forma, la distribución de los valores
analíticos alrededor de la media.
Dentro del término precisión del método se pueden distinguir
tres tipos de estudios:
1. Repetibilidad:
La repetibilidad expresa la precisión bajo las mismas
condiciones de operación en un periodo corto de tiempo
(misma muestra, mismo analista, mismo laboratorio, mismo
equipo, mismo día, etc.).
II. Reproducibilidad:
Se entiende la reproducibilidad como el desarrollo del
procedimiento o método analítico en diferentes laboratorios,
como por ejemplo en un estudio en colaboración. Se expresa
con los mismos parámetros matemáticos que la repetibilidad.
III. Precisión Intermedia:
La precisión intermedia expresa la variación dentro de un
 laboratorio por ejemplo en diferentes días, con diferentes
analistas o con equipo diferente dentro del mismo
laboratorio, con la misma muestra homogénea.
Robustez La robustez de un método de ensayo está definida como la
medida de su capacidad para permanecer inalterado ante
pequeñas pero deliberadas variaciones en ciertos parámetros,
proporcionando una idea de su fiabilidad durante su empleo en
rutina.

6) PARÁMETROS ESTADÍSTICOS:
Análisis de Varianza Varianzas entre datos del grupo, varíanzas entre grupos y
(ANOVA) varianza total.

Coeficiente de variación o
Es la relación entre la desviación estándar (s) y la media (x).
desviación estándar relativa
Normalmente se expresa en porcentaje.
(CV; RSD)
Desviación estándar (a; s) Estadístico básico, indicativo de la dispersión o variabilidad de
los resultados.
Error sistemático o Desviación entre la media de una serie de observaciones y su
determinado (systematic error valor verdadero (error determinado, sistemático o sesgo). Se
of results) cuantifica determinando la exactitud del método (porcentaje de
recuperación).
Error aleatorio o Desviación entre cada una de las observaciones y su valor medio,
indeterminado (random error error indeterminado o aleatorio {debido al azar). La dispersión
of results) de estos datos se mide a través de la Desviación Estándar.
Grados de libertad (gl) Numero de categorías independientes que definen una muestra
o una población de datos. En el cálculo de la Desviación Estándar
representa el número de desviaciones independientes respecto
a la media y se representa como "n - 1" (número de datos
menos 1). En el cálculo de la desviación estándar de una recta de
regresión, con dos variables, el número de grados de libertad es
"n - 2" (número de datos menos 2).
Incertidumbre de medida Parámetro asociado al resultado de una medición, que
caracteriza la dispersión de los valores que podrían ser
razonablemente atribuidos al mensurando.
Intervalo de trabajo, rango, El intervalo comprendido entre las concentraciones superior e
amplitud inferior (ambas incluidas), en el cual el analito puede
cuantificarse con un nivel satisfactorio de precisión, exactitud y
linealidad según el método de ensayo documentado.
Desde un punto de vista estadístico, el rango es una medida de
dispersión, menos utilizada que la desviación estándar. En una
serie de resultados el intervalo es la diferencia entre el mayor y
el menor de ellos.
Intervalo de confianza o Intervalo en torno al valor estimado que contiene el valor real
límites de confianza con una probabilidad determinada.
Media [X) Media aritmética o promedio, es la cantidad total de la variable
(muestra o medida) distribuida a partes iguales entre cada
observación. En términos matemáticos, es igual a la suma de
todos sus valores dividida entre el número de sumandos.
Muestra aleatoria Una muestra es aleatoria o randomizada si todos los miembros
de la población tienen igual probabilidad de estar incluidos en la
misma.
Nivel de significancia (Alfa, a) Es el nivel de significación utilizado para calcular el nivel de
confianza. El nivel de confianza es igual a 100% (1 - a), es decir,
un alfa (a) de 0,05 indica un nivel de confianza de 95%.
Pruebas de Significancia: Durante el proceso de validación de los métodos de ensayo es
 frecuente utilizar pruebas de significancia estadísticas, las más
comunes son:
1. Prueba t-Student para identificar errores sistemáticos (sesgo).
2. Prueba F-Fisher para identificar errores aleatorios
(precisiones).
Al hacer una prueba de significancia se comprueba la veracidad
de una hipótesis experimental, llamada "hipótesis alternativa"
(Hi, si hay diferencia,) con respecto a la hipótesis nula (H , no
0

hay diferencia).
Es la Hi la que determina el número de colas. Si la H, contiene la
frase "mayor que" o "menor que", la prueba es de una-cola. Si la
H contiene la frase "no es igual que", la prueba es de dos-colas.
1

Resultado Aberrante: Corresponde a cualquier valor extremo que ocurra durante la

ejecución de una prueba. En situaciones normales estos
resultados tienen una frecuencia aleatoria menor al 1 %.
Varianza (S) Se define como el cuadrado de la desviación estándar y su
utilidad es que facilita el cálculo de la propagación de errores.

7) DESARROLLO DE LOS MÉTODOS ENSAYO:

Un método analítico se desarrolla para probar o ensayar una característica definida de un
principio activo o la de un producto farmacéutico frente a los criterios de aceptación establecidos
para esa característica. Inicialmente en el desarrollo de un nuevo método analítico, la elección de
la instrumentación y metodología analítica deberá seleccionarse con base a la finalidad prevista y
el alcance del método analitico. Los parámetros que pueden ser evaluados durante el desarrollo
del método de análisis son: Especificidad, Linealidad, Límite de detección (LD) y Límite de
cuantificación (LC), Exactitud y Precisión.
Durante las etapas iniciales de! desarrollo de él o los métodos de análisis, se recomienda la
evaluación de la robustez o solidez de estos porque esta característica puede ayudar a decidir qué
método va a seleccionar de manera definitiva.

8) DOCUMENTAR MÉTODOS DE ENSAYO:

Los métodos de ensayos deben estar documentados y deben incluir la descripción de los
métodos analíticos con el suficiente detalle como para permitir que un analista competente pueda
reproducir las condiciones necesarias y obtener resultados dentro de los criterios de aceptación
establecidos. También debe incluir en la descripción los aspectos de los métodos analíticos que
requieren una atención especial.
Un Método de Ensayo o Metodología Analítica, puede ser referenciado a Métodos
Normalizados o compendiados de fuentes reconocidas por el DS N 03/10, en su artículo 33°
9

(Farmacopeas oficiales), solo si el método de ensayo que se hace referencia no se modifica más
allá de lo permitido en el método publicado.
Cuando el método de ensayo utilizado sea un método "Normalizado-Modificado" o uno
"No Normalizado" debe proporcionar en detalle el o los procedimientos para llevarlo a cabo.
La siguiente tabla contiene información esencial que debe incluir un Método de Ensayo
Documentado:
A. Principio / Alcance Una descripción de los principios básicos del
ensayo analítico/ tecnología (separación,
detección, etc.); analito objetivo (s) y tipo de
muestra (s) ej., materia prima, producto
terminado, impurezas o compuestos
relacionados).
B. Aparatos / Equipos Todos los equipos y componentes necesarios y
calificados (ej., tipo de instrumento, detector,
tipo de columna, dimensiones, columna
alternativa, tipo de filtro, etc.).
C. Parámetros de funcionamiento Ajustes óptimos calificados y rangos (ajustes

D. Reactivos / Estándares de referencia
E. Preparación de la muestra
F. Preparación Solución de referencia
G. Procedimiento
H. Idoneidad del Sistema/ Adecuabilidad
1. Fórmulas de Cálculo
permitidos) críticos para el análisis ej., el
velocidad de flujo, temperatura de los
componentes, tiempo de corrida, la
configuración del detector, gradiente,
muestreador "Head space"). Se puede utilizar un
esquema o gráfico con la configuración
experimental y parámetros de integración.
• Grado químico ej.: análisis, HPLC, GC, etc.).
• Fuente (ej. el estándar de referencia USP o
material de referencia secundario).
• Estado (ej. seco, sin secar, etc.) y la
concentración.
• Potencia estándar {factores de corrección de la
pureza).
• Condiciones de almacenamiento.
• Vida útil utilizable.
Debe incluir en detalle la forma de preparación
de muestras por ensayos individuales por
ejemplo; método de extracción, dilución o de
concentración, los procedimientos de mezcla
mediante ultrasonidos, agitación o sonicación de
tiempo, etc. para una preparación única para
ensayos cuantitativos describiendo las unidades
apropiadas de concentraciones de soluciones
trabajo (por ejemplo: g/ ml_ o mg/ mL) y la
información de la estabilidad de las soluciones y
sus condiciones de almacenamiento.
Incluir el o los procedimientos para la
preparación y el uso de las soluciones de
estándar de referencia, con las unidades de
concentración y la información sobre la
estabilidad y las condiciones de almacenamiento.
Una descripción paso a paso del método (ej.
tiempos de equilibrio, inyección de secuencia con
espacios en blanco, blancos, las muestras, los
controles, las normas de solución de sensibilidad
(para el método de impurezas) y para mantener
la validez de la idoneidad del sistema durante el
lapso de análisis) y rangos admisibles de
funcionamiento y ajustes en cada caso.
Procedimientos y parámetros de confirmación de
prueba para asegurar que el sistema (equipo, la
electrónica y las operaciones analíticas y
controles para ser analizados) funcionará
correctamente como un sistema integrado en el
momento de su uso. Incluir los criterios de
aceptación de idoneidad del sistema aplicado a
las normas y controles, como los criterios de
pico, precisión y resolución de aceptación,
pueden ser necesarios según el caso.
El método de integración y fórmulas de cálculo
representativos para el análisis de datos (normas,
controles, muestras) para pruebas basadas en
demanda del rótulo y las especificaciones (ej.
ensayo, impurezas especificadas y no
especificadas y factores de respuesta relativos).
 Esto incluye una descripción de las
transformaciones o las fórmulas matemáticas
utilizadas en el análisis de datos
{transformaciones o análisis estadístico), junto
con una justificación científica para cualquier
factor de corrección utilizado.
J. Reporte de datos Una presentación de datos numéricos que sean
consistentes con las capacidades instrumentales
y criterios de aceptación.
Debe indicar qué formato utilizar para informar
de los resultados por ejemplo: % de lo rotulado,
peso / peso, y peso/ volumen, etc. con el número
específico de cifras significativas necesarias.
Para los métodos cromatográficos, debe incluir
los tiempos de retención (RT) para la
identificación con base de comparación estándar
de referencia, tiempos relativos de retención
(RRT) (conocidos y desconocidos impurezas)
rangos aceptables y resultados de la muestra de
informes criterios.
Debe incluir siempre los valores para los criterios
de aceptación, tolerancia, exclusión y rechazo.

9) MATERIAL Y ESTÁNDARES DE REFERENCIA:

Para efectos de aplicar las indicaciones contenidas en esta guía, se entenderá que los
Estándares de Referencia corresponden a un material altamente caracterizado que se utiliza para
garantizar la identidad, la potencia, la calidad y la pureza de los analttos que se medirán, tales
como; principios activos, impurezas relacionadas, disolventes residuales, excipientes, entre otros.
Para asegurar el mantenimiento de las características y homogeneidad de este material se
debe procurar mantener de manera estricta las condiciones de almacenamiento, condiciones de
uso, y las instrucciones de manejo para evitar generación de impurezas o análisis incorrectos. Se
debe mantener un control estricto con los respectivos registros de este material para así
garantizar la exactitud y ajustarse a un sistema válido de medidas.
10) ENSAYOS DE APTITUD, VERIFICACIÓN Y VALIDACIÓN DE MÉTODOS ENSAYO:
A. Ensayos de Aptitud de ME:
El ensayo de aptitud del sistema es una parte integral de muchos métodos analíticos
instrumentales. Los ensayos están basados en el hecho que el equipo, la parte electrónica, las
operaciones analíticas y las muestras a ser analizadas contribuyen al sistema. El ensayo de aptitud
del sistema que va a ser aplicado depende del tipo de procedimiento a usar.
Los ensayos de aptitud se emplean para la verificación de métodos normalizados o
procedimientos analíticos validados y deben ser realizados antes de cada uno de los análisis.
Siempre que los criterios de aptitud del sistema se cumplan, el método o procedimiento se
considera adecuado para el propósito previsto.
Para los métodos cromatográficos instrumentales ningún análisis de muestras es
considerado aceptable a menos que se haya demostrado la aptitud del sistema.

B. Verificación de ME Normalizados:
Se considera que los ME Normalizados están validados para el uso previsto como se
establece en la(s) monograffa(s). Sin embargo, en el laboratorio donde se utilicen se debe
confirmar, por ejemplo, que para un producto farmacéutico terminado que se analiza por primera
vez, no surgen interferencias a partir de los excipientes presentes, o que para un principio activo,
las impurezas que aparecen a partir de una nueva ruta de síntesis estén diferenciadas
adecuadamente. Si el método normalizado se adapta para otro uso, debe validarse para tal uso y
así demostrar que es apto para el mismo.
En la verificación se deben evaluar diversos elementos, tales como el efecto de la matriz
sobro la recuperación de impurezas y fármacos desde la matriz de producto farmacéutico, la
aptitud de tas columnas y condiciones cromatográficas, y la adecuada respuesta de la señal del
detector, entre otros.
Para el proceso de verificación se pueden usar algunas de las características de
desempeño analítico que se enumeran en el punto C. La Verificación puede requerir o no la
ejecución, en condiciones reales, del método para cada una de los parámetros de desempeño,
siendo la evaluación de especificidad un parámetro clave en la verificación de que un método
farmacopéico es apto para usar en la valoración de principio activo. El grado y extensión del
proceso de verificación puede depender del tipo de método (pasos específicos y matrices) y los
equipos o instrumentos asociados.
No se requiere verificaciones ni validación para métodos normalizados básicos tales como
(pero no limitados a): apariencia, cenizas sulfatadas, densidad, dureza, friabilidad, índice
refracción, masa, métodos de química húmeda, pérdida por secado, pH, tiempo de desintegración,
viscosidad y volumen.

C. Validación de métodos de ensayo "Normalizados-Modificados" y "No Normalizados"

Validación del método analítico es el proceso para demostrar que un procedimiento

analítico es adecuado para los fines previstos. La metodología y el objetivo de los procedimientos
analíticos deben estar claramente definidos y entendidos antes de iniciar los estudios de
validación. La validación de datos deben generarse en virtud de un protocolo aprobado se debe
contar con la descripción del método de ensayo de cada prueba característica incluyendo ios
criterios de aceptación debidamente justificados, todo esto se debe operar siguiendo las BPL y/o
BPM.

D. Parámetros de desempeño analítico (Validación Método de Ensayo):

Los parámetros de validación son:
Parámetro ¿Qué hacer? ¿Cómo se evalúa?
Especificidad/ Análisis simultáneo de:
Se debe garantizar el buen
Selectividad • Un blanco de reactivos;
funcionamiento del método, y
• Una matriz natural o sintética libre de analito;
que éste distingue los efectos
• Analito en un solvente adecuado;
de las impurezas o
• La misma matriz con el agregado de una interferentes, las sustancias
cantidad conocida de analito o una muestra que reaccionan entre sí, etc.,
real; y que podrían estar presentes
• Potenciales interferencias en presencia de en la matriz
analito.
Linealidad Evaluación visual para definir
tipo curva (lineal, exponencial,
logaritmo etc.)
Cantidad de puntos: > 5 concentraciones,
Evaluación estadística de la
Igualmente espaciadas.
curva (ej. cuadrados mínimos)
Cantidad de replicados por concentración: de 3
Gráfico de los residuos
a 5 réplicas independientes
Coeficiente de correlación (R )2

Usando analito puro o analito en matriz

>0,99
Medidos aleatoriamente
Pendiente y ordenada al
origen (dependiente de la
concentración de trabajo)
Precisión 1) Repetibilidad: Repetibilidad: La precisión de
Preparar 3 niveles de concentraciones un método se expresa
independientes (alto-medio-bajo) analizar en cuantitativamente como
sextuplicado. "imprecisión" a través del
2) Precisión intermedia cálculo de la desviación
Preparar 3 niveles de concentraciones estándar (s) o coeficiente de
independientes (alto-medio-bajo) analizar en variación (%) de una serie de
sextuplicado. resultados.
Modificando: día o instrumento o analista o Precisión intermedia: Calcular
 una combinación de elios, seleccionado lo i coeficiente de variación de c/u
más crítico para el resultado. de los niveles y comparar los
3) Reproducibilidad (para transferencia de resultados de los resultados de
Método) la P! con los de la Repetibilidad
Sí el rango del método es amplio deberá a través de un método
evaluarse la precisión para distintos valores estadístico adecuado
dentro del rango. (Comparación de medias,
ANOVA, etc.)
Exactitud Tres maneras de determinar:
1} Preparación de matriz con adición de A través de la medición del
estándar (Dispone de los excipientes) sesgo (bias), el cual se puede
2) Preparación de muestra enriquecida con expresar como:
estándar (No se dispone excipientes) Diferencia: 6 = X - x
ot)S ref

3} Curva de Calibración con muestra

comparada con curva de calibración de Recuperación: % R =x /x x obs fef

estándar 100
Se debe realizar en 3 niveles de concentración x = valor de referencia
fef

(bajo - medio -alto) respecto a la x = valor medio observado

ob5

concentración de trabajo, y en triplicado.

Intervalo Establecer el rango de concentraciones del El rango más estrecho donde
Rango analito en la muestra para el cual el método el intervalo cumple con los
está validado. criterios de linealídad,
precisión y exactitud.
Límite de Se determina en el caso de impurezas y cuando LD = 3 x s ó LC= 3 x
detección la respuesta de la concentración del principio Y /m b

activo es cercana a la sensibilidad del

instrumento. s = desviación estándar de un
1} Realizar una curva con 3 puntos de blanco o de una muestra
principio activo en concentraciones cercanas fortificada a baja
al límite de cuantificación del equipo. concentración.
2) Calcular la señal ruido del equipo. Y = intercepto de la ecuación
b

de la curva
m- pendiente de la curva.
Límite de Se determina en el caso de impurezas y cuando LD - 10 x s ó LC= 10 x
cuantificación la respuesta de la concentración del principio Y
b /m
activo es cercana a la sensibilidad del
instrumento. s = desviación estándar de un
1) Realizar una curva con 3 puntos de blanco o de una muestra
principio activo en concentraciones cercanas fortificada a baja
ai límite de cuantificación del equipo. concentración.
2) Calcular la señal ruido del equipo. Y = intercepto de la ecuación
b

de la curva
m= pendiente de la curva.
Robustez Se desafía al método realizando variaciones Con los datos se realiza un
tanto en la preparación de la muestra como en análisis de cuadrado latino.
la determinación analítica.
Se estudia el efecto de tales variaciones sobre Se establecen los rangos
los parámetros previamente validados, en permitidos de modificaciones
particular sobre la precisión y exactitud del del método sin que se afecte
método. el desempeño de éste.
Gran parte de esta información proviene del
desarrollo del método

Se debe tener en consideración que no todos los parámetros de validación son aplicables
para todos los tipos de ensayos y que los datos generados en el proceso de validación deben
mantenerse disponibles durante todo el período de uso y validez del método de ensayo.
Tipo de Análisis de impurezas Valoración
procedimiento Identificación Ensayos Ensayos de disolución (sólo
analítico cuantitativos límite medición)
contenido/potencis
_b
Exactitud - + +
Precisión:
1. Repetibilidad + +
2. Precisión
Intermedia a - + - +

Especificidad + + + +
Límite de detección - _b + -
Límite de
- + - -
cuantificación
Linealidad - + - +
_b
Intervalo - Rango - + +
+ La característica debe ser evaluada normalmente.
- La característica no se evalúa normalmente;
3
La precisión intermedia no es necesaria en casos donde se ha realizado un estudio de
reproducibilidad.
b
Puede necesitarse en algunos casos.
E. CICLO DE VIDA DE LOS MÉTODOS DE ENSAYO:
Una vez que un método de ensayo (incluyendo los métodos normalizados) es validado e
implementado con éxito, el método se mantendrá durante el ciclo de vida del producto.
A lo largo del ciclo de vida se recomienda realizar un análisis de tendencias (gráficas
control) en forma periódica para evaluar el rendimiento del ME o una revisión cada 5 años y de
esta manera definir ta necesidad de optimizarlo o revalidar la totalidad o una parte de este. Si un
ME para cumplir con los requisitos de idoneidad o adecuabilidad del sistema necesita ajustes
repetidos a las condiciones de funcionamiento, este debe ser: reevaluado, revalidado o
modificado, según proceda.
A lo largo del ciclo de vida del producto, los avances tecnológicos y los nuevos
conocimientos científicos podrían justificar el desarrollo y validación de un ME nuevo o
alternativo.

F.REVALIDACIÓN
Cuando se realizan cambios en un ME o sustitución por uno nuevo o cambios en el
proceso de fabricación (ej.: cambio en una pieza de equipo, cambio en el proceso de fabricación o
formulación, cambios de reactivos o instrumento) se debe considerar la revalidación de todo o
parte del método de ensayo.
Es necesario revalidar para garantizar que el método de ensayo mantiene sus
características críticas de rendimiento (por ejemplo: especificidad, precisión, exactitud, etc.). El
grado de revalidación depende de la naturaleza del cambio.

G. TRANSFERENCIA DE MÉTODOS DE ENSAYO:

Corresponde a un proceso documentado que califica a un laboratorio (el que recibe el
método) para utilizar el ME que se originó en otro laboratorio (laboratorio origen).
La transferencia de métodos analíticos se puede realizar de las siguientes formas:
1) Análisis comparativo utilizando lotes homogéneos,
2) Co-validación entre laboratorios,
3) Re-validación
Debe existir un protocolo bien diseñado antes de implementar una transferencia, debe
incluir: consenso entre ambas partes, estrategia de ejecución, requisitos y responsabilidades de
cada una de las partes. Este protocolo debe contener los siguientes puntos: Objetivos, Alcance,
Responsabilidades, Materiales y equipos, Método analítico, Diseño experimental (Análisis
comparativo, Co-validación, Re-validación); Criterios de aceptación, Evaluación de resultados.
 H. REPORTE DE VERIFICACIÓN o VALIDACIÓN o RE-VALIDACIÓN o TRANSFERENCIA:

Finalmente para documentar todos los resultados obtenidos se debe emitir un Reporte o
Informe de Verificación o Validación o Re-Validación o Transferencia según sea el caso, este
documento se considera la finalización del proceso y debe estar en concordancia con el protocolo
respectivo así como firmado por el personal técnico responsable. Este documento debe contener
claramente la conclusión final si el método está calificado para el propósito propuesto.

La siguiente tabla contiene información esencial que debe incluir un Reporte o Informe de
Verificación o Validación o Re-Validación o Transferencia Documentado:

A. Objetivo Declarar el objetivo de la validación

B. Alcance Declaración del alcance del método de ensayo
C. Principio activo / matriz Identificar analito y matriz
D. Método ensayo Identificar ME con nombre y código
E. Equipos y Especificaciones Nombre, marca, modelo, número de
identificación, tipo de columnas, tipo de
detectores, etc.
F, Estándares de Referencia Nombre, marca, procedencia, código de
identificación, valores asignadas, unidades, etc.
G. Resultados {de cada uno de los Incluir una tabla con los resultados, tolerancias
parámetros) y análisis estadísticos. y calificación. "
H. Registros derivados de la validación Citar los registros o reportes entregados por el
(trazabilidad a datos crudos) equipo y copia de las planillas de cálculos
generadas en el proceso analítico.
L Conclusiones Declaración del campo de aplicación del
método: analito, rango de trabajo, unidades,
matrices y advertencias acerca de la
interferencia conocida en las cuales se ha
demostrado la validación.
J. Responsables Identificar personal que realizó la validación.
K. Revisión y V^B Superior
9
Identificar superior jerárquico que valida y
califica los resultados informados.
L. Fecha Inicio / Fecha de Término Registrar las fechas de inicio y fin del proceso.
validación

11) REFERENCIAS:
Farmacopea de Estados Unidos / Formulario Nacional
Capítulo General <621> Cromatografía;
Capítulo General <1010> Datos analíticos - Interpretación y Tratamiento;
Capítulo General <1224> Transferencia de los procedimientos analíticos;
Capítulo General <1225> Validación de los procedimientos compendiados;
Capítulo General <1226> Verificación de Procedimientos compendiados;
Advertencias y requisitos generales; y
7. Resultados de ensayo

Guía para la industria: Conferencia Internacional sobre Armonización (ICH)

Q2 (Rl) Validación de los procedimientos analíticos: Texto y Metodología {marzo de 1995, mayo
de 1997)
Q.3A (R2) Impurezas en nuevas sustancias de drogas (junio de 2008)
Q3B (R2) Las impurezas en Nuevos Productos Farmacéuticos (agosto de 2006)
Q3C (R5) impurezas: Solventes Residuales (Febrero de 2011)

Guidance for Industry (FDA)

Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics (Draft February 2014)
Serie de Informes Técnicos de la OMS, No. 957, 2010
Anexo 1 Buenas prácticas de la OMS para laboratorios de control de calidad de productos
farmacéuticos

Serie de Informes Técnicos de la OMS, No. 823,1992

Comité de Expertos de la OMS en Especificaciones para las Preparaciones Farmacéuticas 32°
Informe

ANÓTESE, COMUNIQUESE Y PUBLIQUÉSE

Resol. Al/N'86
22/01/15
Distribución:
Dirección
Asesoria Jurídica
Departamento ANAMED
Subdepto. Registro v Autorizaciones Sanitarias Transcrito fielmente
Subdepto Laboratorio Nacional de Control
Subdepto Inspección
Subdepto Biofarmacia
Gestión deTrámites Ministro de fe

Avda. Marathón 1000. Ñuñoa • Casilla 48 • Fono S75510O- Fax 56-2-S7SS684 - Santiago, Chile.