23 de febrero de 2019 Transporte de proteínas • Ocurre en las células de los 3 dominios de la vida (Bacteria, Archae, Eukarya)
• Un tercio de las proteínas celulares se secreta a través
de las membranas o se inserta en ellas
• En BGP ocurre sólo en MC y en BGN también en ME
• En las bacterias fotótrofas, además ocurre en las
membranas fotosintéticas
• En eucariontes ocurre en membranas de los organelos
• En bacterias patógenas ocurre en la MC de la célula
huésped y las toxinas en su sitio blanco 2 Bacteria Gram Positiva Bacteria Gram Negativa
Citoplasma
3 Terminología del transporte de moléculas al exterior del citoplasma Translocación: Transporte de la proteínas intra o a través de la membrana
Exportación: Translocación de la proteína al periplasma
Secreción: Transporte de la proteína al medio extra
celular, a la superficie celular de otra célula o dentro de ella
Excreción: Transporte extracelular de moléculas que no
son de origen proteico (ej. productos de la fermentación)
4 Tipos de proteínas secretadas • Enzimas hidrolíticas • Lipoproteínas periplásmicas • Toxinas • Apéndices de superficie • Proteínas integrales de membrana, relacionadas con: - Transporte - Producción de energía - División celular - Receptores celulares de señales extracelulares - Biogénesis
Dra. Apolinaria García Cancino 5
Universidad de Concepción Sistemas de transporte de proteínas • Sistema Sec (General Secretory Pathway “GSP”): Sistema de translocación y exportación de proteína no plegadas
• Sistema Tat (Twin arginine translocation):
Sistema de translocación y exportación de proteínas plegadas
• Translocasa YidC: Sistema de translocación de
proteínas de membrana interna 6 (Stuart and Neupert. Cell biology: Making membranes in bacteria. Nature, 406: 575-577, 2000)
7 - Sistema Sec (Vía secretora general): Usa el sistema SecYEG para movilizar proteínas hacia el periplasma, algunas de ellas quedarán ahí, otras serán transportadas ya sea hacia o a través de la ME
- Sistema Tat: Se usa para mover proteínas que tienen unidas
co-factores (componente no proteico, termoestable y de baja masa molecular, necesario para la acción de una enzima), a través de la MI, al periplasma
- YidC: Corresponde a una “translocasa” en la MI bacteriana
Esta puede trabajar independiente o junto con SecYEG, para insertar proteínas en la MI, esto en función de la proteína que 8 está siendo insertada Sistemas de secreción bacterianos
- Al 2015 se describen 9 sistemas de secreción
de proteínas: I , II , III, IV , V o autotransportadores VI, VII, VIII y IX
- En base a la naturaleza molecular de las maquinarias
de transporte de las proteínas o efectores, se dividen:
Vías Sec-dependientes y vías Sec- independientes
9 Vías Sec-dependientes: utilizan el sistema de secreción Sec, las proteínas a exportarse poseen una secuencia señal o un péptido líder en el extremo amino terminal, hidrofóbico
Proteínas secretadas vía Sec dependiente utilizan
una maquinaria común, la translocasa Sec, para el transporte a través de la MI y se diferencian principalmente en bases a sus mecanismos de secreción a través de la ME 10 Vías Sec-independientes: las proteínas se pueden secretar directamente desde el citoplasma hasta el exterior celular sin la presencia de una secuencia señal en el amino terminal, ni un intermediario periplasmático
Vías Sec independiente permiten directa secreción desde
el citoplasma al medio ambiente extracelular en una etapa y no involucran intermediarios periplásmicos
11 Preproteína naciente
Translocasa Sec Membrana Interna
Periplasma
Modelo del mecanismo de translocación a través de la MI por el sistema Sec. En el paso 1) la proteína chaperona SecB se une a una preproteína naciente en el citosol, estabilizando su conformación desplegada (paso 2a). El complejo binario SecB-preproteína es dirigido hacia la translocasa SecYEG unida a SecA (paso 3a), o bien, primero se asocia con SecA (paso 2b) y después se dirige a la MI a reemplazar a SecA unida a SecYEG (paso 3b). En el paso 4 se une la secuencia señal a SecA, lo cual estabiliza la interacción SecB-SecA y la preproteína se transfiere a SecA. La unión de ATP por SecA promueve el inicio de la translocación y la liberación de SecB del complejo ternario. 12 Sistema Sec
Sistema de translocación y exportación de
proteína no plegadas
Componentes:
- Péptido líder (secuencia líder o secuencia señal) (1)
- Proteína chaperona (SecB) (2) - Complejo de proteínas de unión (SecYEG) (3) - ATPasa citoplasmática (SecA) (4) 13 Componentes del Sistema Sec
(3)
?? (4) (2) (1) (1)
14 Componentes del Sistema Sec. Cont. - Complejo SecYEG: Forma un canal conocido como translocón o canal conductor de proteínas (CCP)
- SecYEG más SecA: Translocasa, responsable del
movimiento de la proteína a través de la MI
- SecG: Estimula el transporte
- SecD, SecF y YajC: Proteínas regulatorias
- Péptido líder: La proteína que será translocada es sintetizada
con este péptido y es removido durante la translocación
- Peptidasa del péptido señal (SPase): Libera la proteína
translocada del translocón 15 Componentes del Sistema Sec
(Nature Reviews Microbiology, 5: 839-851, 2007)
16 Sistema Tat (Twin- arginine translocation) ME - Sistema de translocación y exportación Periplasma de proteínas plegadas MI
Citoplasma
- Se usa para mover proteínas que tienen
unidas co-factores, a través de la MI, al periplasma
Se ha encontrado en: - MC de bacterias y arqueas - Membranas tilakoides de los cloroplastos - Posiblemente en MI de mitocondria de plantas
20 Sistemas de secreción de proteínas bacterianas desde el tipo I al tipo IX
Los SS tipo II, V, VIII y IX funcionan en asociación con las vías de exportación Sec o Tat. El T1SS está compuesto de un transportador ABC el cual transporta proteínas desde el citoplasma. El transportador ABC está conectado a una proteína de ME. Los sistemas de secreción tipo III, IV y VI transportan proteínas desde el citoplasma vía estructuras tipo aguja. 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
