● Las ​tinciones hematológicas​ se pueden definir como el conjunto de técnicas necesarias

para teñir y diferenciar ​los distintos componentes celulares de la sangre​. Estos componentes
conforman la ​fracción forme de la sangre​, y gracias a las tinciones se pueden diferenciar en
un ​microscopio óptico​.
Las técnicas en que se basan las tinciones hematológicas hacen uso de colorantes. Éstos
interactúan con los componentes celulares dispuestos en un ​frotis sanguíneo​ sobre un
portaobjetos.
● Los colorantes son sustancias capaces de fijarse selectivamente según su afinidad química.
Los colorantes básicos se fijan en las estructuras ácidas formando sales insolubles coloreadas. Del
mismo modo, los colorantes ácidos hacen lo mismo con las estructuras básicas.
● Los colorantes se pueden clasificar según su origen o según su naturaleza química. Si
atendemos a su origen tenemos la siguiente clasificación:
● Naturales​: Los colorantes naturales se subdividen, a su vez, en orgánicos e
inorgánicos. Los orgánicos se subdividen, también, según su naturaleza animal o
vegetal.
● Artificiales​: También denominados colorantes sintéticos. Adquieren la clasificación
que se le atribuye a los colorantes tradicionales, conformados por colorantes ácidos,
básicos, neutros e indifirentes.
Según su naturaleza química tenemos los siguientes colorantes, que serán definidos en el siguiente
apartado:
● Ácidos​.
● Básicos​.
● Neutros​.

● Las tinciones tradicionales se realizan mediante el uso de colorantes que, con frecuencia,
derivan de la ​anilina​. Estos colorantes se clasifican en cuatro grupos:
● Colorantes ácidos​: Tienen especial afinidad por las estructuras básicas de las
células, como por ejemplo la hemoglobina. Algunos ejemplos son la ​eosina​ y el á ​ cido
pícrico​.
● Colorantes básicos​: Tienen especial afinidad por las estructuras ácidas de las
células, como por ejemplo los ácidos nucleicos. Algunos ejemplos son el ​azul de
metileno​, el ​azul de toluidina​ o la ​hematoxilina.​
● Colorantes neutros​: Están compuestos por sales de un ácido y de una base
coloreados. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Un ejemplo es el
eosinato de azul de metileno​.
● Colorantes indiferentes​: No tienen especial afinidad por estructuras ácidas o
básicas. Además, presentan insolubilidad al agua. Un ejemplo es el ​Sudán III​.
Las tinciones hematológicas se pueden clasificar según la vitalidad de las células que se quieren
teñir:
● Vitales​: Las tinciones vitales son tinciones hematológicas que se realizan sobre
células vivas, manteniéndolas en dicho estado. La técnica se basa en la introducción
de un colorante en la circulación de un organismo vivo. El verde Jano, las sales de
tetrazolio o el azul de metileno son ejemplos de colorantes vitales.
● Supravitales​: Las tinciones supravitales son idénticas a las vitales, con la diferencia
de que la técnica se realiza sobre células o tejidos vivos que están aislados del
organismo del que proceden. Los colorantes vitales se usan tanto para técnicas
vitales como para supravitales.
● No vitales​: Las tinciones no vitales son tinciones hematológicas que se realizan
sobre células muertas. Estas técnicas requieren un paso previo, que es la fijación de
dichas células al portaobjetos haciendo uso de calor, etanol o metanol, con la
particularidad de mantener inalteradas las estructuras de los diferentes componentes
celulares.
También se pueden clasificar según la finalidad de uso:
● Tinciones tradicionales​: Hacen uso de colorantes para determinar la naturaleza de
la célula teñida y su identificación. Son las llamadas tinciones panópticas que hacen
uso de colorantes tipo Romanowsky.
● Un ​colorante tipo Romanowsky​ está basado en el uso de una mezcla formada por un
colorante ácido (eosina) y uno o varios colorantes básicos (azul de metileno, azur A, azur B y
 azur C). Las tinciones que se realizan con este tipo de colorante se denominan ​tinciones
panópticas​ o ​tinciones tipo Romanowsky​.
● Tinción de Giemsa​.
● Tinción de May-Grünwald-Giemsa​. También llamado ​Panóptico de Pappenheim​.
● Tinción de May-Grünwald​.
● Tinción de Wright​.

● Tinciones especiales​: Hacen uso de colorantes para determinar la existencia y

localización de diversas sustancias químicas en los componentes celulares
sanguíneos. Un tipo de estas técnicas son las denominadas ​tinciones citoquímicas​.
Otra técnica especial, con la misma finalidad que las tinciones citoquímicas, son las
tinciones fluorescentes,​ cuyos colorantes son fluorocromos. Estas técnicas especiales
serán abordadas en futuras entradas.
● Panóptico rápido​.
Todas estas tinciones se pueden realizar con técnicas de ​inundación-decantación​ o por i​ nmersión​.
En las primeras los reactivos se echan directamente sobre la preparación. Posteriormente se
decantan los reactivos inclinando el portaobjetos para que los líquidos caigan.
En cambio, en las técnicas de inmersión, las preparaciones se sumergen en recipientes donde se
encuentran los reactivos. Los portaobjetos, con sus extensiones sanguíneas, se sumergen en
cubetas haciendo uso de cestillos especialmente preparados para albergar las preparaciones.
La ​tinción de Romanowsky​ es una mezcla que contiene azul de metileno y eosina y que se utiliza
para preparar frotis para análisis sanguíneos como base de diversos colorantes, como los de Wright,
Giemsa o Leishman.
La tinción de la muestra permite distinguir la forma, tamaño y contorno de los hematíes, ​leucocitos​ y
plaquetas​ y el núcleo, ​citoplasma​ y granulaciones de las distintas células ya que adquieren diferentes
colores: azul, púrpura, rosa o salmón.
Esta separación por colores es el llamado ​efecto Romanowsky​, que tiñe de púrpura a los núcleos y
gránulos neutrofílicos y de color rosa a los eritrocitos. Los ácidos nucleicos, las ​proteínas​ y el
citoplasma​ se tiñen de azul, delatando a los posibles ​parásitos​.
Defectos en las tinciones hematológicas
La calidad de una tinción depende de una serie de cuestiones:
● Tipo de colorante empleado.
● Calidad del colorante.
● Características del colorante.
● Método de tinción empleado.
Los defectos más frecuentes que nos podemos encontrar en las tinciones hematológicas, y sus
posibles causas, son:
● Colores muy rosados/coloración muy acidófila.
○ pH del colorante muy ácido.
○ Tiempo de exposición del colorante insuficiente.
○ Lavado excesivo de la preparación después de la tinción.
● Colores muy azules/coloración muy basófila.
○ pH del colorante muy básico.
○ Frotis sanguíneo grueso.
○ Tiempo de exposición del colorante excesiva.
○ Lavado insuficiente de la preparación después de la tinción.
○ Puede ocurrir cuando la tinción se realiza sobre un frotis con una
antigüedad superior a 24 horas.
● Aparición de artefactos y precipitados.
○ Uso de portaobjetos sucios.
○ Uso de colorantes sin filtrar.
○ Secado del colorante durante la tinción, antes del lavado.
○ Tinción excesivamente prolongada en el tiempo.
○ Lavado insuficiente de la preparación después de la tinción.