Materia: Biología Celular y Molecular Fecha de entrega: 30 de septiembre de

2019
Grupo N: 5B
Integrantes
 Danny Ismael Jiménez Sánchez
 Adrián Marcelo Machicado Martínez
 Luis José Andrés Veizaga Crespo

MICROSCOPIO

1. Introducción. -

Leeuwenhoek era un holandés que ocupaba sus ratos de ocio tallando lentes y
construyendo microscopios de notable calidad. Fue el primero en observar una
gota de agua de estanque y distinguir la abundante cantidad de “animalillos” que
iban y venían ante sus ojos. De esta manera nacía el microscopio, equipo
indispensable en el laboratorio de biología y que a lo largo de los años se ha
vuelto más complejo en pro de distinguir la ultra estructura celular.
Microscopia es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los
objetos de estudio que por su pequeñez están fuera de rango de resolución del
ojo normal.
Ello se consigue mediante un Microscopio con sistema óptico compuesto por
lentes de cristal, que, al ser atravesadas por los rayos de luz reflejados por el
objeto, forman una imagen amplificada de él. Los microscopios se pueden
clasificar desde un punto de vista muy sencillo en: Simples y compuestos. Se le
da el nombre de microscopio simple a todas aquellas lentes con montura o sin
ella, de distintos espesores y diámetros, biconvexas o planoconvexas, que nos
permiten amplificar los objetos, comúnmente conocidas como lupas.
Un microscopio compuesto está constituido por la combinación de dos sistemas
de lentes convergentes. Uno, próximo al ojo del observador, por lo cual se llama
ocular y que actúa como microscopio simple. Otro próximo al objeto denominado
objetivo, el uso del mismo se requiere para producir las imágenes adecuadas,
de todo un conjunto de métodos y técnicas afines pero extrínsecas al aparato.
Algunas de ellas son, técnicas de preparación y manejo de los objetos de
estudio, técnicas de salida, procesamiento, interpretación y registro de
imágenes, etc. (Starr, C; Taggar, R. (2008))
Existen distintos tipos de microscopio como:
 Microscopio Óptico
Es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce
como microscopio de luz, microscopio fotònico o microscopio de
campo claro y el desarrollo de este se asocia a Anton van
Leeuwenhoek.
 Microscopio Electrónico
 Usa lentes magnéticas para doblar y difractar los haces de
electrones que pueden difractarse mediante una lente de vidrio. Los
electrones viajan en longitudes de onda aproximadamente 100.000
veces más cortas que las de la luz visible.
 Microscopio Electrónico De Transmisión
Los electrones atraviesan una superficie del espécimen, al que se
le aplicó un revestimiento metálico, el metal reacciona emitiendo
electrones y rayos x que se transforman después en una imagen
de la superficie.
 Microscopio De Efecto Túnel
Es un poderoso instrumento que permite visualizar superficies a
escala de átomos. (Mijares Z., Johana C. (2010)).

2. Objetivos

Objetivos Generales
 Conocer el microscopio y sus aplicaciones en la Ingeniería
Biomédica.
Objetivos Específicos
 Reconocer los componentes de un microscopio.
 Identificar la función de los componentes en general.
 Explicar las funciones de algunos microscopios según su tipo.

3. Métodos

Para realizar esta Investigación utilizamos el método bibliográfico puesto

que comprende citas y referencias de distintas bibliografías en las cuales
nos basamos para poder llegar a una conclusión coherente y veraz

4. Resultados

1. ¿Qué es microscopio?

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son

demasiado pequeños como para ser vistos por la vista del ser humano. El
término microscopio es la conjunción de dos conceptos, por un lado
“micro” que es equivalente a “pequeño” y “scopio” que significa “observar”,
en suma, se refiere a la observación pequeña, o en menor grado.

El microscopio es un instrumento óptico que aumenta la capacidad de

observación a niveles de acercamiento tal que hasta hace posible el
análisis de partículas. La imagen que se obtiene es realmente una
 investigación sobre la composición de los objetos. Al estudio y análisis de
los objetos pequeños se lo denomina “microscopia”. (Hernández F.
(1987))

2. Partes de un microscopio comúnmente.

Figura 1 Con un sistema de giro, el revólver permite el intercambio de los lentes.

Fuente: https://concepto.de/microscopio/#ixzz60rIfFHXB.

 Lente ocular. Es donde coloca el ojo de la persona observadora. Esta

lente puede aumentar la imagen entre 10 a 15 veces su tamaño.
 Cañón. Se trata básicamente de un tubo alargado de metal cuyo interior
es negro, sirve como sostén al lente ocular y al lente objetivo.
 Lentes objetivos. Es un grupo de 2 o3 lentes ubicados en el revólver.
 Revólver. Es un sistema que en su interior contiene a los lentes
objetivos, puede tener un sistema de giro que permite el intercambio de
estos lentes.
 El tornillo macrométrico. Es una perilla que al girarla actúa acercando
o alejando al objeto que se está observando.
 El tornillo micrométrico. Es lo que permite afinar y enfocar
correctamente la imagen. Haciéndola más clara.
 La platina. Se trata de una plataforma de pinzas, es donde se coloca al
objeto o a la preparación que se desea observar.
 El diafragma. Sirve para regular la cantidad de luz que pasa a través del
objeto en observación.
  El condensador. Sirve para concentra el haz luminoso en la
preparación u objeto.
 Fuente luminosa artificial. dirige luz hacia la platina.

(Hernández F. (1987))

3. Tipos de microscopios

Existen distintos tipos de microscopios y también muchos criterios para

clasificarlos. En esta ocasión presentamos una clasificación básica para
identificar los tipos de microscopía más relevantes que existen.

Microscopios según el sistema de iluminación

 Microscopio óptico
 Microscopio electrónico
 Microscopio de luz ultravioleta
 Microscopio de luz polarizada
 Microscopio de fluorescencia

Microscopios según el número de lentes

 Microscopio simple
 Microscopio compuesto

Microscopios según la transmisión de la luz

 Microscopio de luz transmitida

 Microscopio de luz reflejada

Microscopios según el número de oculares

 Microscopio monocular
 Microscopio binocular
 Microscopio trinocular
Microscopios según la configuración de los elementos
Microscopios digitales
Microscopio estereoscópico

Otros tipos de microscopios

 Microscopio confocal
 Microscopio de campo oscuro
 Microscopio de contraste de fases.

(Mijares Z., Johana C. (2010)).

4. Microscopios según el sistema de iluminación

A un nivel básico podemos diferenciar los microscopios según el medio utilizado

para iluminar la muestra. El sistema más habitual es iluminar la muestra con luz
visible, dando lugar al microscopio óptico. Sin embargo, existen alternativas.

o Microscopio óptico

En el microscopio óptico la muestra es iluminada mediante luz visible. Esto

significa que existe un foco de luz apuntando hacia la muestra. Esa misma luz
es conducida a través del objetivo y del ocular hasta llegar a formar la imagen en
el ojo del observador. Este es el tipo de microscopio más habitual pero su
resolución está limitada por la difracción de la luz. El aumento máximo que se
puede obtener con este tipo de microscopio alcanza alrededor de 1500x. (Mijares
Z., Johana C. (2010)).

Figura 2 Muestra en un microscopio óptico

 Fuente: https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/

o Microscopio electrónico

En el microscopio electrónico la muestra no es iluminada con luz sino que se

utilizan electrones. Los electrones impactan contra la muestra dentro de una
cámara de vacío. Existen diferentes tipos de microscopio electrónico pero su
principio de funcionamiento se basa siempre en capturar los electrones
dispersados u omitidos por la muestra y así poder reconstruir una imagen.

La ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un nivel

de aumento muy superior al del resto de microscopios. Sin embargo, es
necesario preparar la muestra y colocarla en una cámara de vacío de modo que
no es posible observar muestras biológicas vivas. Los dos tipos de microscopio
electrónicos principales son el microscopio electrónico de barrido y el
microscopio electrónico de transmisión. (Hawkes P.(1985))

Figura 3 Muestra observada en un microscopio electrónico

Fuente: https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/

o Microscopio de luz ultravioleta

Los microscopios de luz ultravioleta iluminan la muestra, como el nombre indica,

con luz ultravioleta. Este tipo de luz tiene una longitud de onda más corta que la
luz visible utilizada en los microscopios ópticos. La ventaja principal de utilizar
esta técnica es que puede alcanzarse una resolución mejor que con luz visible.
Además, el contraste obtenido en la muestra es distinto que en los microscopios
ópticos. De este modo, con el microscopio de luz ultravioleta pueden observar
muestras que aparecen transparentes si son observadas con luz visible.
(Hawkes P.(1985))

o Microscopio de luz polarizada

También conocido como microscopio petrográfico. Este microscopio es en

realidad un tipo de microscopio óptico al que se la han añadido dos
polarizadores. Esto significa que la onda de luz utilizada para observar la muestra
tiene una dirección de oscilación concreta. Este tipo de microscopio es muy útil
para observar estructuras cristalinas de rocas y minerales. (Glauert AM. (1991))

o Microscopio de fluorescencia

Los microscopios de fluorescencia son aquellos que utilizan las propiedades de

fluorescencia para generar una imagen de la muestra. Este microscopio permite
observar sustancias que emiten luz propia cuando son iluminadas con una
longitud de onda determinada. Para ello la muestra es habitualmente iluminada
con una lámpara xenón o con una lámpara de vapor de mercurio. Estos
microscopios incorporan además filtros de luz para aislar la luz correspondiente
a la muestra. (Slayter, Slayter. (1992))
 Figura 4 Muestra observada en un microscopio de fluorescencia
Fuente: Zeiss Microscopy

5. Microscopios según el número de lentes

En el caso concreto del microscopio óptico puede hacerse una distinción según
el número de lentes de su sistema óptico.

 Microscopio simple

Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más habitualmente

conocido como lupa. Aún así, con un microscopio simple pueden conseguirse
grandes aumentos. Hay que destacar que durante el siglo XVII, Antonie van
Leeuwenhoek utilizó este tipo de microscopios para conseguir el mayor aumento
alcanzado hasta el momento. A día de hoy, uno de los conceptos basados en la
misma idea es el Foldscope. (Mijares Z., Johana C. (2010)).

 Microscopio compuesto

Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por lo menos dos lentes. Este
es el caso más habitual en todos los microscopios modernos. Normalmente los
microscopios disponen de distintas lentes tanto en el objetivo como en el ocular
para corregir las aberraciones ópticas y alcanzar una imagen con buena calidad.
La invención del microscopio está asociada con la invención del microscopio
compuesto. Este apareció en los Países Bajos a finales del siglo XVI. (Mijares
Z., Johana C. (2010)).

6. Microscopios Electrónicos

o Microscopio electrónico de transmisión

El microscopio electrónico de transmisión (MET), al igual que ocurre en el

microscopio de luz, forma una imagen con el haz de energía que atraviesa la
muestra; que en el caso de MET se trata de electrones acelerados a muy alto
voltaje y en el microscopio de luz se trata de luz visible. Por eso, a este
microscopio electrónico se le denominó de transmisión y siguiendo tal
razonamiento, al microscopio de luz: microscopio de luz transmitida.

Para que los electrones atraviesen la muestra sin destruirla por calentamiento
debe seguirse un procesamiento, que resulta un tanto similar al que se sigue
para obtener los cortes histológicos para microscopio de luz. En resumen, los
tejidos deben fijarse químicamente, deshidratarse e incluirse en un medio de
soporte para hacer los cortes. En el caso de microscopia electrónica, la fijación
se realiza con aldehídos (usualmente glutaraldehído y paraformaldehído) y el
medio de inclusión más corriente son resinas epóxicas de gran dureza. Los
cortes deben tener un grosor máximo de unos 100 nm; recordemos que para luz
se usa parafina como medio de inclusión y los cortes usualmente son de
alrededor de 5 ìm de espesor, o sea unas 50 veces más gruesos que lo requerido
en MET. Luego los cortes deben contrastarse, lo que usualmente se denomina
"tinción", aunque en microscopio electrónica no se maneja el concepto de color,
pues este corresponde a una pequeña porción del espectro electromagnético (de
0,4 a 0, 7 ìm). El contraste en realidad consiste en una impregnación del tejido
con sales de metales pesados, como acetato de uranilo o citrato de plomo, que
aumentan la electro densidad en el sitio de deposición, esto hace que algunas
zonas aparezcan oscuras o negras en la pantalla, lo que contrasta con lo claro
de las zonas no impregnadas con esos metales. La gran diferencia en los
aumentos logrados en el MET estriba en el límite de resolución (d). Tanto en et
microscopio de luz como el MET la resolución obedece ala ecuación de Abbe: d
= 0,62 / 2 AN. Donde ~ se refiere a la longitud de onda empleada para generar
la imagen y AN es la abertura numérica del lente. En el caso del microscopio de
luz, corresponde a 0,55 ìm (promedio del espectro visible humano) y la AN oscila
alrededor de 1,3. El valor 2 se refiere a que suma la AN del objetivo y la del
condensador que deben ser iguales según la ley de Rayleigh. Esto produce un
límite de resolución de aproximadamente 0,22 ìm para el microscopio de luz (1).
La limitante en el poder de resolución del microscopio de luz es la propia longitud
de onda de la luz; lo que fue superado en el ME empleando electrones
acelerados a gran velocidad (alto voltaje) de manera que se mueven en forma
ondulatorio, con una que depende del voltaje de aceleración. A 100 000 v, es de
aproximadamente 0,1; no obstante, debido a las imperfecciones o aberraciones
de los lentes electromagnéticos, la resolución del MET es de 1,4 Å. (Mijares Z.,
Johana C. (2010)).
Se comparan las imágenes obtenidas de secciones de colon de un caso de
balantidiasis, observadas al microscopio de luz (Fig. l), al MER (Fig. 2 y 3) y al
MET (Fig. 4 y 5 ).

o Microscopio electrónico de rastreo o barrido

El haz de electrones que impacta a la muestra interacciona con ella, unos

electrones la atraviesan y son los utilizados en MET, otros emergen de la
superficie; entre éstos están los electrones secundarios, que son arrancados de
los orbitales de átomos de alto número atómico y generan las imágenes con
carácter tridimensional que caracterizan al microscopio electrónico de rastreo
(MER). Para generar estás imágenes el haz de electrones debe desplazarse
sobre la superficie de la muestra de un lado a otro, haciendo un barrido o rastreo
de su superficie, de donde deriva el nombre de este equipo. La figura 1c
corresponde a una muestra de colon del mismo caso ilustrado en las figuras 1a
y 1b, pero en esta ocasión fotografiada al MER.

La resolución del MER depende del diámetro final de la sonda electrónica que
barre la superficie de la muestra, pues la señal generada lleva ese diámetro. La
mayoría de los MER tienen resolución es que oscilan entre 70 y 30 A (7 a 3 nm),
dependiendo entre otras cosas de la distancia de trabajo y el recubrimiento
metálico que se dé a las muestras. (Mijares Z., Johana C. (2010)).

Conclusiones

El avance acelerado de los conocimientos científicos y la tecnología han

permitido al microscopio electrónico tener una gran capacidad de análisis
ultra estructural en organelos, células, tejidos y materiales inorgánicos. Se
ha podido llegar a aumentar imágenes hasta casi un millón de veces con
una resolución de 1.4 A. Esto ha permitido conocer ultra estructuralmente
los materiales y sistemas biológicos ayudando a entender mejor su
funcionamiento.

Debido a que el microscopio electrónico produce un has de electrones que

impacta la muestra que estamos observando y que en este proceso se
liberan rayos X, los cuales son característicos de cada elemento,
podemos entonces determinar qué elementos están presentes en la
imagen que estamos viendo en el microscopio.
Bibliografía
  Starr, C; Taggar, R. (2008). Biología. Estructura y función de la
célula. Thomson Editores, S.A. Undécima Edición (pp. 50-55).
 Mijares Z., Johana C. (2010). El microscopio.
 Hernández F. Historia de la microscopio electrónica. 1 Los
primeros microscopios electrónicos. Rev Costarricenc Cienc Med
1987; 8:199-202.
 Slayter, Slayter. Light and electron microscopy Cambridge
University Press. 1992. Pp 312.
 Glauert AM. Fixation, dehydration and embedding of biological
specimens. Practical methods in Electron microscopy. North
Holland Publishing Co. Amsterdam. 1991, PP 207.
 Hawkes P. The beginnings of electron microscopy. Academic
Press, lnc. Orlando. 1985,pp633.

 https://concepto.de/microscopio/#ixzz60rIfFHXB. (28/09/2019).
 https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/
(28/09/2019)
 https://www.flickr.com/photos/zeissmicro/30614937642/in/photostr
eam/ (28/09/2019)
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