UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA

CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

(PHYSICOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF AMINO ACIDS AND PROTEINS)

María Fernanda Carrillo Plazas- Karen Edith Zúñiga Santos

Licenciatura en Ciencias Naturales y Educación Ambiental UPTC

RESUMEN:

Un aminoácido es una sustancia química orgánica que constituye el componente básico de

las proteínas y una proteína es una sustancia química que forma parte de la estructura de las
membranas celulares y es el constituyente esencial de las células vivas; sus funciones
biológicas principales son la de actuar como biocatalizador del metabolismo y la de actuar
como anticuerpo. Esta práctica de laboratorio tiene como objetivo determinar la polaridad
del grupo R de los aminoácidos mediante cromatografía, reconocer proteínas y aminoácidos
mediante reactivos químicos específicos y comprobar el efecto de algunos factores físicos y
químicos sobre la estructura de las proteínas para ello a las muestras a trabajar se les realizó
las reacciones de: Ninhidrina, Biuret, Sakaguchi, Hopkins-Cole, -SH, Xantoproteica, de las
cuales se obtuvieron los siguientes resultados: para la reacción de Ninhidrina dio positivo
las siguientes muestras Glicina, Acido aspártico, Prolina, Leche, Albumina, Orina, Saliva y
Amonio, para Biuret dio positivo las siguientes muestras (r)Leche,albumina y saliva , para
Sakaguch dio positivo las muestras de (arginina,leche,albumina y saliva), para la reacción
de Hopkins-Cole dio positivo las muestras de (Triptófano,leche,albumina y saliva), para ,
-SH dio positivas (sisteína, leche,albumina y saliva), para Xantoproteica dio positivo
(Triptófano, Fenilalanina, Albumina (diluida), Saliva (diluida) y fenol). Como las proteínas
están conformadas por aminoácidos están dan positivo para reacción de ninhidrina la cual
es positiva para un grupo de amino libre, dan positivo para reacción xantoproteica la cual
identifica aminoácidos con el grupo fenil, da positivo para reacción Hopkins-Cole ya que
identifica aminoácidos con triptófano.

Palabras clave: Ninhidrina, Biuret, Ruhemann, Sakaguchi, Hopkins-Cole, -SH,

Xantoproteica, aminoácido, proteína.

ABSTRACT:
An amino acid is an organic chemical substance that constitutes the basic component of
proteins and a protein is a chemical substance that is part of the structure of cell membranes
and is the essential constituent of living cells; its main biological functions are to act as a
biocatalyst of metabolism and to act as an antibody. The objective of this laboratory
practice is to determine the polarity of the R group of amino acids by chromatography, to
recognize proteins and amino acids by means of specific chemical reagents and to verify
the effect of some physical and chemical factors on the structure of proteins to do so in the
samples to work. The reactions of: Ninhydrin, Biuret, Sakaguchi, Hopkins-Cole, -SH,
Xanthoprotein were performed, from which the following results were obtained: for the
Ninhydrin reaction the following samples were positive: Glycine, Aspartic Acid, Proline,
Milk, Albumin, Urine, Saliva and Ammonium, for Biuret the following samples were
positive (r) Milk, albumin and saliva, for Sakaguch the samples of (arginine, milk, albumin
and saliva) were positive, for the Hopkins-Cole reaction it was positive the samples of
(Tryptophan, milk, albumin and saliva), for, -SH gave positive (systemine, milk, albumin
and saliva), for Xanthoprotein it gave positive (Tryptophan, Phenylalanine, Albumin
(diluted), Saliva (diluted) and phenol). As proteins are made up of amino acids, they are
positive for the ninhydrin reaction which is positive for a free amino group, they are
positive for the xanthoprotein reaction which identifies amino acids with the phenyl group,
they are positive for the Hopkins-Cole reaction as it identifies amino acids with tryptophan.

Keywords: Ninhydrin, Biuret, Ruhemann, Sakaguchi, Hopkins-Cole, -SH, Xanthoprotein,

amino acid, protein.

INTRODUCCIÓN: son el resultado de la reacción del grupo

carboxilo
de un aminoácido con el grupo amino de
otro. Si el
Las proteínas son uno de los péptido está formado por 15 AA
principales componentes de todas se trata de un
nuestras células. oligopéptido. Cuando contiene entre 15 y
Los aminoácidos son la unidad 50 AA se
básica de las trata de un polipéptido y si el número es
proteínas y se agrupan de acuerdo mayor se
con su habla de proteínas. La síntesis de
comportamiento químico. La unión de las proteínas
dos o más ocurren mediante la unión entre si de las
aminoácidos mediante enlaces amida cadenas de
originan los aminoácidos. Se conocen 22 L-α
péptidos. En los péptidos y las aminoácidos que
proteínas estos se clasifican por las propiedades
enlaces reciben el nombre de enlaces químicas de su
peptídicos y
grupo -R o cadena lateral. Las proteínas péptido está formado por 15 AA
deben sus se trata de un
propiedades físicas, químicas, oligopéptido. Cuando contiene entre 15 y
fisicoquímicas y 50 AA se
biológicas, al tipo de aminoácidos que las trata de un polipéptido y si el número es
forman. mayor se
Debido a la presencia de diferentes habla de proteínas. La síntesis de
aminoácidos en las proteínas
las uniones peptídicas las proteínas ocurren mediante la unión entre si de las
reaccionan con cadenas de
una variedad de compuestos aminoácidos. Se conocen 22 L-α
formando productos aminoácidos que
coloreados. Existen reacciones de se clasifican por las propiedades
coloración que químicas de su
son específicas para aminoácidos de esas grupo -R o cadena lateral. Las proteínas
proteínas deben sus
y son importantes tanto para la detección propiedades físicas, químicas,
como para fisicoquímicas y
el dopaje de aminoácidos y biológicas, al tipo de aminoácidos que las
proteínas. Existen forman.
también reacciones generales porque Debido a la presencia de diferentes
sirven para aminoácidos en
caracterizar grupos comunes a todas las las uniones peptídicas las proteínas
proteínas reaccionan con
como grupos amino o uniones peptídicas una variedad de compuestos
como lo formando productos
son las reacciones de ninhidrina y coloreados. Existen reacciones de
biuret coloración que
Las proteínas son uno de los son específicas para aminoácidos de esas
principales componentes de todas proteínas
nuestras células. y son importantes tanto para la detección
Los aminoácidos son la unidad como para
básica de las el dopaje de aminoácidos y
proteínas y se agrupan de acuerdo proteínas. Existen
con su también reacciones generales porque
comportamiento químico. La unión de sirven para
dos o más caracterizar grupos comunes a todas las
aminoácidos mediante enlaces amida proteínas
originan los como grupos amino o uniones peptídicas
péptidos. En los péptidos y las como lo
proteínas estos son las reacciones de ninhidrina y
enlaces reciben el nombre de enlaces biuret
peptídicos y Las proteínas son uno de los
son el resultado de la reacción del grupo principales componentes de todas
carboxilo nuestras células.
de un aminoácido con el grupo amino de Los aminoácidos son la unidad
otro. Si el básica de las
proteínas y se agrupan de acuerdo el dopaje de aminoácidos y
con su proteínas. Existen
comportamiento químico. La unión de también reacciones generales porque
dos o más sirven para
aminoácidos mediante enlaces amida caracterizar grupos comunes a todas las
originan los proteínas
péptidos. En los péptidos y las como grupos amino o uniones peptídicas
proteínas estos como lo
enlaces reciben el nombre de enlaces son las reacciones de ninhidrina y
peptídicos y biuret
son el resultado de la reacción del grupo Las proteínas son uno de los
carboxilo principales componentes de todas
de un aminoácido con el grupo amino de
nuestras células. Los aminoácidos son
otro. Si el
péptido está formado por 15 AA la unidad básica de las proteínas y
se trata de un se agrupan de acuerdo con su
oligopéptido. Cuando contiene entre 15 y comportamiento químico. La unión de
50 AA se
dos o más aminoácidos mediante
trata de un polipéptido y si el número es
mayor se enlaces amida originan los péptidos.
habla de proteínas. La síntesis de En los péptidos y las proteínas
las proteínas estos enlaces reciben el nombre de
ocurren mediante la unión entre si de las
enlaces peptídicos y son el resultado de la
cadenas de
aminoácidos. Se conocen 22 L-α reacción del grupo carboxilo de un
aminoácidos que aminoácido con el grupo amino de otro.
se clasifican por las propiedades Si el péptido está formado por 15
químicas de su
AA se trata de un oligopéptido.
grupo -R o cadena lateral. Las proteínas
deben sus Cuando contiene entre 15 y 50 AA se
propiedades físicas, químicas, trata de un polipéptido y si el número es
fisicoquímicas y mayor se habla de proteínas. La
biológicas, al tipo de aminoácidos que las
síntesis de las proteínas ocurren
forman.
Debido a la presencia de diferentes mediante la unión entre si de las cadenas
aminoácidos en de aminoácidos. Se conocen 22 L-α
las uniones peptídicas las proteínas aminoácidos que se clasifican por las
reaccionan con
propiedades químicas de su grupo -R
una variedad de compuestos
formando productos o cadena lateral. Las proteínas deben sus
coloreados. Existen reacciones de propiedades físicas, químicas,
coloración que fisicoquímicas y biológicas, al tipo de
son específicas para aminoácidos de esas
aminoácidos que las forman. Debido a la
proteínas
y son importantes tanto para la detección presencia de diferentes aminoácidos en
como para las uniones peptídicas las proteínas
reaccionan con una variedad de
compuestos formando productos
coloreados. Existen reacciones de
coloración que son específicas para
aminoácidos de esas proteínas y son
importantes tanto para la detección como
para el dopaje de aminoácidos y
proteínas. Existen también reacciones
generales porque sirven para
caracterizar grupos comunes a todas las
proteínas como grupos amino o uniones
peptídicas como lo son las reacciones
de ninhidrina y biuret. [CITATION
Esc16 \l 3082 ]
La cromatografía es un tipo de técnica
aplicada para la separación de varios
elementos que conjugan a una mezcla,
esta división se fundamenta en las
características físicas y químicas que
posea cada elementos, haciendo énfasis
en la capacidad de interacción de cada
componente de la mezcla o de la solución
con una sustancia.
A grandes rasgos la cromatografía se
logra por medio de la utilización de dos
mismas características con un capilar
colocar una muestra de solución de
leucina, glutamato y alanina (procure que
cada muestra quede lo más separada
posible), esta cromatografía funcionara
como guía para identificar los
aminoácidos de la muestra problema.
Posteriormente se ubica el papel con las
fases: una fase móvil, el cual es una
solución que está compuesta por distintos
elementos; y una fase estacionaria, esta se
caracteriza por ser un material solido que
permanecerá sin cambios antes o después
de la implementación de la técnica, la
mezcla a estudiar permanecerá con el
compuesto que posea más afinidad bien
sea el que se encuentra en fase solida o en
fase móvil, de esta forma se apreciara
las características generales de cada
compuesto estudiado.[ CITATION Adr20 \l
3082 ]
METODOLOGÍA
1.1 Determinación de la polaridad del
grupo R de los aminoácidos
mediante cromatografía.
En un papel de filtro de 8 cm x 5 cm trace
una línea con lápiz en la parte inferior a
0,5 cm. Con un capilar coloca sobre la
línea la muestra problema (mezcla de
aminoácidos). En otro papel con las
muestras en un vaso de precipitado que
tiene aproximadamente 2 mL de fenol y
se tapa con parafilm (figura 1).
Aproximadamente después de 5 minutos
retire el papel del vaso e impregne las
muestras con reactivo de ninhidrina y
lleve a la estufa (horno) por 5 minutos a
80°C.
Figura 1. Sistema básico de una cromatografía en papel

3.2 Reacción de Ninhidrina 3.5 Reacción de Hopkins-Cole

En 9 tubos de ensayo coloque 1 mL de En 5 tubos de ensayo coloque 1 mL de

muestra problema como lo indica la muestra como lo indica la tabla 4, con una
siguiente tabla, con una pipeta pasteur pipeta pasteur adicione aproximadamente
adicione aproximadamente 0,5 mL de 3 mL de reactivo de Hopkins-Cole y 1
reactivo de ninhidrina y lleve los tubos a mL de ácido sulfúrico concentrado
baño serológico por 10 minutos a 80°C. (adicione el ácido en gotas ya que la
Con cuidado retire los tubos y anote las reacción es brusca), anote las
observaciones. observaciones.

3.3 Reacción de Biuret

En 9 tubos de ensayo coloque 1 mL de 3.6 Reacción de SH

muestra como lo indica la tabla 2, con una
Para la determinación de tio-grupos (-SH)
pipeta pasteur adicione aproximadamente
se formará con un compuesto oscuro
1 mL de reactivo de Biuret y anote las
correspondiente al PbS. Se organizan 6
observaciones.
tubos de ensayo como se observa en la
tabla 5, a 1 mL de muestra se hidroliza
3.4 Reacción de Sakaguchi con 1 mL de NaOH al 40%,
posteriormente se adiciona 1 mL de
Para la identificación de arginina adicione
acetato de plomo y se analizan los
los reactivos de acuerdo la siguiente tabla,
resultados.
al final al agregar correctamente los
reactivos agite bien los tubos y analice los
resultados.

3.7Reacción Xantoproteica
En 7 tubos de ensayo se adiciona 1 mL de
muestra a estudiar, posteriormente se
adiciona con mucho cuidado y gota a gota
1 mL de ácido nítrico concentrado,
posteriormente se calienta la a 80°C por 5
minutos y observar.
2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
4.1 Determinación de la polaridad
del grupo R de los aminoácidos
mediante cromatografía.
Para la determinación de la polaridad del
grupo R de los aminoácidos leucina,
glutamato y alanina se hizo con ayuda de
la cromatografía y de esta manera obtener
los Rf de los anteriores aminoácidos y
poder determinar su polaridad, la
distancia recorrida por el solvente fue de
50 mm los resultados fueron:
Rf para el Glutamato:
15 mm
Rf = =0,3
50 mm
Rf para la Alanina:
28 mm
Rf = =0,56
50 mm
Rf para la Leucina:
40 mm
Rf = =0,8
50 mm
A grandes rasgos la cromatografía se
logra por medio de la utilización de dos
fases: una fase móvil, el cual es una
solución que está compuesta por distintos
elementos; y una fase estacionaria, esta se
caracteriza por ser un material solido que
permanecerá sin cambios antes o después
de la implementación de la técnica, la
mezcla a estudiar permanecerá con el
compuesto que posea más afinidad bien
sea el que se encuentra en fase solida o en
fase móvil, de esta forma se apreciara
las características generales de cada
compuesto estudiado.[ CITATION Adr20 \l
3082 ]
De acuerdo con lo anterior en la práctica
que se realizó la fase estacionaria seria el
papel filtro y la fase móvil el solvente, la
sustancia que sube más es compatible con
la fase móvil y la que se queda es más
compatible con la fase estacionaria.
Como se había mencionado en clase el Rf
tiene que ser menor que 1, si los
resultados dan más que 1 significa que el
solvente no sirve para la cromatografía.
El solvente que se usó para la
cromatografía fue el Fenol este es un
compuesto apolar (no soluble en agua)
entonces las sustancias que llegaron más
lejos, es decir, las sustancias que llegaron
cercano a 1, en este caso sería la Leucina
significa que la Leucina es compatible
con la fase móvil, al igual que la Alanina,
lo que quiere decir que estos dos
aminoácidos también son apolares en
cambio el Glutamato al arrojar un Rf
lejano al 1 significa que no es compatible con la fase móvil, más bien con la fase
estacionaria.

4.2 Reacción de Ninhidrina

Tabla 1. Reacción con Ninhidrina

Tubo Muestra (1 mL) Reactivo Ninhidrina Resultado (+/-)

color
1 Etanol (diluido) 0,5 mL (-) Traslucido
2 Glicina 0,5 mL (+)azul-violeta
3 Acido aspártico 0,5 mL (+)azul-violeta
4 Prolina 0,5 mL (+)amarillenta
5 Leche (diluida) 1 mL (+)azul-violeta
6 Albumina (diluida) 1 mL (+)azul-violeta
7 Orina 1 mL (+)azul-violeta
8 Saliva (diluida) 1 mL (+)azul-violeta
9 Amonio (diluido) 0.5 mL (+)azul-violeta

La ninhidrina (hidrato de prolina el grupo amino está sustituido)

tricetohidrindeno) reacciona con y café para la asparagina que tiene
aminoácidos que tengan el grupo amino un grupo amido en la cadena
libre. La ninhidrina es una agente lateral[ CITATION Esc16 \l 3082 ]
oxidante de los grupos alfa-amino,
Al realizar esta práctica se encontró que
liberando amoníaco, CO2 y el
el reactivo ninhidrina reacciono con el
correspondiente aldehído, así como la
grupo alfa-amino libre de los aminoácidos
forma reducida de la ninhidrina
presentes en la leche, la albumina e huevo
(hidrindantina). La hidrindantina
diluida, con la orina y la saliva al ser
reacciona a su vez con el amoniaco y
sometidos a calentamiento, produciendo
otra molécula de ninhidrina para dar
complejos coloreados azul-violeta, la cual
un compuesto de adición doble que
dependiendo de a la concentración del
presenta una coloración azul-purpura, con
aminoácido será la intensidad del color,
la excepción de la prolina e hidroxiprolina
indicando de esta forma la presencia de
que da una coloración amarillenta (en la
aminoácidos.
 4.3 Reacción de Biuret

Tabla 2. Reacción con Biuret

Tubo Muestra (1 mL) Reactivo Biuret Resultado (+/-)

color
1 Etanol (diluido) 1 mL (-) Azul
2 Glicina 1 mL (-) Azul
3 Acido aspártico 1 mL (-) Azul
4 Prolina 1 mL (-) Azul
5 Leche (diluida) 1 mL (+) Violeta
6 Albumina (diluida) 1 mL (+) Violeta
7 Orina 1 mL (-) Azul
8 Saliva (diluida) 1 mL (+) Violeta
9 Amonio (diluido) 1 mL (-) Azul

Esta reacción es característica de los péptidos

(menos de 10 aminoácidos) o proteínas que
tienen unidos dos o más aminoácidos por medio
de los enlaces peptídicos. La reacción de Biuret
se basa en las formaciones, en medio alcalino,
de un compuesto complejo de color violeta entre
el ión cúprico (Cu+2) y 4 átomos de nitrógeno,
provenientes de las cadenas peptídicas. El ión
cúprico actúa como átomo central y recibe el par
de electrones de los nitrógenos de cuatro
aminoácidos
Esta reacción es característica de los De acuerdo con lo anteriormente
péptidos (menos de 10 aminoácidos) mencionado y con la tabla número 2, los
o proteínas que tienen unidos dos o resultados para esta prueba fueron
más aminoácidos por medio de los positivos para las muestras de leche,
enlaces peptídicos. La reacción de Biuret albumina, orina y saliva con una
se basa en las formaciones, en medio coloración violeta, esta prueba es general
alcalino, de un compuesto complejo de para polipéptidos y proteínas
color violeta entre el ión cúprico (Cu+2) y (características que cumplen las muestras
4 átomos de nitrógeno, provenientes de analizadas) esta reconoce las uniones
las cadenas peptídicas. El ión cúprico peptídicas y lo hace mediante la reacción
actúa como átomo central y recibe el par que se da cuando se forma un complejo
de electrones de los nitrógenos de entre los iones Cu+2 y los pares no
cuatro aminoácidos (Giraldo, 2010) compartidos del nitrógeno que forma
parte de los enlaces peptídicos lo que genera el cambio de color.

4.4 Reacción de Sakaguchi

Tabla 3. Reacción con Sakaguchi

Tubo Muestra (2 mL) Hidróxido Naftol NaClO 2% Resultado

de sodio (+/-) color
40%
1 Etanol (diluido) 5 gotas 0,4 mL 0,5 mL Translucido(-)
2 Glicina 5 gotas 0,4 mL 0,5 mL Translucido(-)
3 Arginina 5 gotas 0,4 mL 0,5 mL Rojo(+)
4 Prolina 5 gotas 0,4 mL 0,5 mL Translucido(-)
5 Leche (diluida) 10 gotas 0,4 mL 0,5 mL Rojo(+)
6 Albumina 10 gotas 0,4 mL 0,5 mL Rojo(+)
(diluida)
7 Saliva (diluida) 10 gotas 0,4 mL 0,5 mL Rojo(+)

El grupo guanidinio presente en la cadena del grupo guanidina, que caracteriza la

lateral de la Arginina reacciona con
soluciones de alfanaftol en presencia de
Bromo en medio alcalino formando
complejos coloreados rosados o rojos. La
prueba de Sakaguchi permite identificar
la arginina y las proteínas, ya que casi
todas ellas poseen este aminoácido
(BOHINSKI, J et al. 2019).
La prueba es positiva cuando se produce
una coloración roja debido a la presencia
arginina (BOHINSKI, J et al. 2019).
Los compuestos que reaccionaron
positivamente frente a la prueba de
Sakaguchi, arginina (Arg), fueron la
leche, la albumina y la saliva, ya que en
ellos se detectó la presencia de este
aminoácido de manera libre o formando
péptidos.

4.5 Reacción de Hopkins-Cole

Tabla 4. Reacción con Hopkins-Cole

La reacción
Tubo Muestra de Hopkins-Cole,
(1 mL) también Hopkins-
Reactivo (Reactivo
H2SO4de Hopkins-Cole)
Resultadoaparece(+/-)
color
conocida como reacciónCole de violeta en la interfase
colorsolución H 2SO4,
1 Etanol es
(diluido) 1 mL debido
1 mLa la formación de un colorante
Incoloro(-)
Adamkiewiczs, una prueba estándar
2 Glicina 2 mL similar al
1 mL índigo. Incoloro(-)
para
3 el triptófano y
Triptófanopara las proteínas que
3 mL 1 mL Violeta-rojo(+)
contienen
4 triptófano. La
Leche (diluida) solución
3 mL que se 1 mL
en este caso la lecheVioleta-rojo(+)
y la albumina, estas
5 Albumina
va a examinar se mezcla con ácido 3 mL 1 mL Violeta-rojo(+)
muestras dieron respuesta positiva, es
glioxílico (diluida)
y se agrega ácido decir, se tornaron a color violeta-rojizo
6 Saliva (diluida) 3 mL 1 mL Violeta-rojo(+)
sulfúrico concentrado. Un anillo entre cuando reaccionaron a Hopkins-Cole.
violeta y rojo en la unión de los dos
líquidos indica que la reacción es Esta coloración es debido Según a que los
positiva. derivados Indol dan productos de
condensación cuando se tratan con
Las muestras que tenían triptófano, en aldehídos aromáticos en presencia de
este caso, el etanol y la glicina, dieron ácido sulfúrico o clorhídrico. El
negativo a la prueba. Las muestras de aminoácido triptófano contiene un grupo
etanol y glicina arrojaron un resultado indol y por eso la reacción es específica
negativo, debido a que no son proteínas, para triptófano. Cuando se agrega el
ni contienen triptófano en sus estructuras reactivo a una solución que contenga
moleculares, por lo tanto, arrojaron un triptófano o una proteína con triptófano, y
derivado incoloro. lentamente se añade una capa de ácido
Al realizar la reacción de la muestra de sulfúrico concentrado, se formará un
proteinas  en medio ácido sulfúrico anillo de color violeta en la interfase de
concentrado , frente al ácido glioxilico los líquidos (Rivera, E.(2005)

4.6 Reacción de SH

Tabla 5. Reacción con SH

Tubo Muestra (1 mL) Hidróxido de sodio Acetato de Resultado (+/-)

40% plomo color
1 Etanol (diluido) 1 mL 1 mL Translucido(-)
2 Glicina 1 mL 1 mL Translucido(-)
3 Cisteína 1 mL 1 mL Marron(+)
4 Leche (diluida) 2 mL 1 mL Marron(+)
5 Albumina 2 mL 1 mL Marron(+)
(diluida)
 6 Saliva (diluida) 2 mL
Es una prueba para identificar
aminoácidos azufrados y las proteínas que
los contiene, se reconocen por la
formación de una coloración negra o gris.
Los compuestos que dieron un resultado
positivo (translucido) para la prueba de
SH fueron la cisteína, la leche, la
albumina y la saliva ya que formaron un
precipitado color marrón oscuro.
4.7Reacción Xantoproteica
Tabla 6. Reacción con Xantoproteica
Tubo Muestra (1 mL) HNO3
1 Glicina 1 mL
2 Triptófano 1 mL
3 Fenilalanina 1 mL
4 Leche (diluida) 2 mL
5 Albumina 2 mL
(diluida)
6 Saliva (diluida) 2 mL
7 Fenol 1 mL
Los compuestos que presentan bencenos
sustituidos (con grupos unidos3al anillo
bencénico), al reaccionar con el ácido
nítrico concentrado forman compuestos
nitrados4de color amarillo, el cual se
intensifica en medio alcalino.
La prueba da resultado positivo en
aquellas proteínas con aminoácidos
portadores de grupos aromáticos,
especialmente en presencia de tirosina. Si
1 mL Marron(+)
El precipitado se forma cuando
aminoácidos como la cisteína reaccionan
con acetato de plomo en medio alcalino
(Giraldo, 2010). La Cisteína presenta
grupos azufrados, por lo que es común
que en la prueba de SH el resultado frente
a este aminoácido sea positivo con una
coloración marrón oscura
Resultado (+/-)
color
Incoloro(-)
Amarillo(+)
Amarillo(+)
Amarillo(+)
Amarillo(+)
Amarillo(+)
Amarillo(+)
una vez realizada la prueba se neutraliza
con un álcali, se torna color amarillo
oscuro. La reacción xantoproteica se
puede considerar como una sustitución
electrofílica aromática de los residuos de
tirosina de las proteínas por el ácido
nítrico dando un compuesto coloreado
amarillo a pH ácido. Según las guías
químicas es una reacción cualitativa, mas
no cuantitativa. Por ende determina la
presencia o no de proteínas.
3. CONCLUSIONES Arginina y la Cisteína, los cuales
 Se observó la presencia de son comunes en las muestras de
proteínas en diferentes muestras leche, albumina y saliva.
mediante pruebas cualitativas, del
mismo modo se identificaron REFERENCIAS
algunos aminoácidos presentes en BIBLIOGRAFICAS
ellas por medio de las reacciones
que ocurrieron en cada caso de  Rivera, E. (2005). Prácticas de
acuerdo al radical o al grupo que Bioquímica
caracteriza al aminoácido. Descriptivas.Hermosillo, Sonora:
 Existen diferentes pruebas de Editorial Unison. ISBN 970-689-
identificación de proteínas y  263-X. Recuperado de Google
aminoácidos que permiten Books
establecer un resultado positivo Giraldo, G. (2010). Reconocimiento de
onegativo de acuerdo a las aminoácidos.
características y composición de En Laboratorio de bioquímica: una
visión práctica.
cada una,esto se evidencia en las
(96 - 97). Armenia, Quindio: Elizcom
coloraciones,anillos…  Giraldo, G. (2010).
 indicamos la presencia de proteína Reconocimiento de
s en diferentes muestras de aminoácidos.En Laboratorio de
alimentos mediante bioquímica: una visión práctica.
pruebas cualitativas, del mismo m (96 - 97). Armenia, Quindio:
odo identificamos algunos de los
aminoácidos Elizcom
presentes en ellas por medio de las
reacciones que ocurrieron en cada
caso de
acuerdo al radical o al grupo 1uec
aracteriza al aminoácido.
 Las muestras de leche, albumina y
saliva son positivas para todas las
pruebas debido a la presencia de
aminoácidos proteicos que las
constituyen.
 Las pruebas de Sakaguchi y
grupos azufrados SH, permiten
determinar las soluciones
conformadas por proteínas que
contienen aminoácidos como la
 Escalante, K. (20 de Septiembre de 2016). Academia.edu. Obtenido de Pruebas
generales paraaminoácidos y proteinas.:
https://www.academia.edu/9554305/PRUEBAS_GENERALES_PARA_AMINOA
CIDOS_Y_PROTEINAS

 Yirda, A. (23 de julio de 2020). conceptodefinicio.de. Obtenido de En que consiste

la cromatografia : https://conceptodefinicion.de/cromatografia/